三七“生打熟補”物質(zhì)基礎(chǔ)及藥理作用研究進展

武 雙，崔秀明，郭從亮，楊 野，楊曉艷*

(1.昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，云南昆明 650500；2.中藥質(zhì)量與資源開發(fā)滇澳聯(lián)合實驗室，云南昆明 650500)

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三七“生打熟補”物質(zhì)基礎(chǔ)及藥理作用研究進展

武 雙1，2，崔秀明1，2，郭從亮1，2，楊 野1，2，楊曉艷1，2*

(1.昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，云南昆明 650500；2.中藥質(zhì)量與資源開發(fā)滇澳聯(lián)合實驗室，云南昆明 650500)

三七是一種生熟兩用的藥物，由于其生熟功效不同，臨床上一直以生三七和熟三七2種形式來應(yīng)用。在此將對三七“生打熟補”物質(zhì)基礎(chǔ)及藥理作用展開全面、系統(tǒng)的闡述，為三七的研究、開發(fā)及應(yīng)用提供參考。

三七；“生打熟補”；物質(zhì)基礎(chǔ)；藥理研究

三七為五加科人參屬植物三七PanaxNotoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根，亦稱“田七”、 “滇七”、“參三七”、 “山漆”等，是我國傳統(tǒng)的名貴中藥材。它始載于《本草綱目》，具有止血、活血散淤、消腫定痛的功效，被譽為傷科圣藥，素有“金不換”、“南國神草”等盛名，又被現(xiàn)代中藥學(xué)家稱為“參中之王”[1]。目前，在藥品、保健品、化妝品等行業(yè)應(yīng)用越來越廣泛，三七產(chǎn)業(yè)展現(xiàn)出巨大的發(fā)展前景和商業(yè)價值。

傳統(tǒng)中醫(yī)醫(yī)藥在遣藥組方時非常講究“藥之生熟”，生熟用法不同且功效各異。如生地黃味甘苦性寒，能清熱涼血，熟地黃則味甘性微溫，能滋陰補血；甘草味甘性平，能清熱解毒，而蜜炙甘草則味甘性溫，能補中益氣[2]。三七“生打熟補”之說在傳統(tǒng)中醫(yī)及民間流傳已久，在臨床使用時需考慮生品與炮制品的區(qū)別。筆者在此就三七“生打熟補”物質(zhì)基礎(chǔ)及藥理作用研究進展進行綜述，為三七生熟兩用提供依據(jù)，也為下一步進行三七“生打熟補”作用機理的研究奠定相關(guān)理論基礎(chǔ)。

1 三七“生打熟補”物質(zhì)基礎(chǔ)研究

炮制對藥物的氣味和功能有很大影響，能改變或緩和藥性，消除或降低毒副作用等?，F(xiàn)代研究表明，三七在炮制過程中化學(xué)成分和藥理作用均發(fā)生了明顯的改變，生用與熟用功效各異，引起了中藥研究者的廣泛關(guān)注。

1.1 皂苷類成分的變化張穗對三七生品及蒸制品、油炸品進行了總皂苷以及醇、水浸出物的含量測定，結(jié)果表明，生品與2種炮制品成分相似，而總皂苷及醇、水浸出物含量相差較大；相較于三七生品，蒸制品中總皂苷及醇、水浸出物含量明顯增加，而油炸品中總皂苷及醇、水浸出物含量明顯降低[3]。柯金虎等采用比色法測定生熟三七粉中的總皂苷含量，并用HPLC法測定了二者中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、Rb1的含量，結(jié)果表明，生三七粉經(jīng)炮制后總皂苷及3種單體皂苷含量均呈現(xiàn)出不同程度的降低[4]。覃潔萍等對三七不同炮制品中皂苷類的含量進行測定，結(jié)果顯示，經(jīng)不同方法炮制后三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、Rb1的量均有不同程度降低，這與三七炮制后補益功能增強具有一定的相關(guān)性；另外，通過藥效學(xué)試驗篩選出了具有最佳補血強身作用的三七炮制工藝為105 ℃高溫、高壓蒸制1.5 h[5]。萬曉青等采用HPLC法測定了不同炮制品中4種單體皂苷三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、Rb1、Re的含量，結(jié)果表明，炮制方法影響三七中皂苷成分的含量變化，蒸制法可增加三七中人參皂苷類的含量，而油炸法可能對該類成分有破壞作用[6]，這與覃潔萍等的研究結(jié)果有所不同，可能是由于炮制條件的影響 。楊崇仁等對生三七粉和熟三七粉中的皂苷成分進行了提取和分離，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，生熟三七的皂苷成分大體相同，但熟三七的粗皂苷得率比生三七低[7]。Wang 等采用HPLC 法分析三七蒸制過程中皂苷成分量的變化，并鑒定出了8個新轉(zhuǎn)化的皂苷，結(jié)果表明，隨著蒸制時間的延長、溫度的升高，人參皂苷Rg1、Rb1、Rd、Re 和三七皂苷R1這5種主要皂苷類成分的量逐漸減少，降解轉(zhuǎn)化成新的皂苷成分；且炮制過程中濕度、溫度和水分對皂苷的轉(zhuǎn)化有一定的影響[8]。Sun等研究了不同蒸制時間和溫度對三七中的皂苷成分及其抗腫瘤活性的影響，發(fā)現(xiàn)蒸制后三七皂苷R1和人參皂苷Rg1、Rb1、Rc、Rd、Rb3、R2、Re 含量減少，而人參皂苷Rh1、Rg2、Rg3、20R-Rg2和Rh2含量增加；蒸制三七抑制SW-480增殖的活性比生三七高；與人參皂苷Rg1、Rb1相比，人參皂苷Rg3具有顯著抑制腫瘤細胞增殖作用，但該研究組未對炮制后三七的補益作用進行探討[9]。Lau等通過采用HPLC法對生三七和蒸三七中6種皂苷進行分析，研究發(fā)現(xiàn)蒸制后三七皂苷R1、人參皂苷 Rg1、Re、Rb1、Rc、Rd的含量均有不同程度的降低[10]。 研究發(fā)現(xiàn)，三七炮制過程中化學(xué)成分結(jié)構(gòu)的變化來自于糖苷鍵的裂解反應(yīng)和側(cè)鏈的脫水反應(yīng)，同時可能伴隨著C-20的構(gòu)型變化[11]。部分原人參三醇型(PPT)和原人參二醇型(PPD)皂苷成分轉(zhuǎn)化的可能途徑如圖1～2所示[8]。

圖1 三七炮制過程中部分PPT型皂苷成分轉(zhuǎn)化的可能途徑

圖2 三七炮制過程中部分PPD型皂苷成分轉(zhuǎn)化的可能途徑

1.2 其他類成分的變化秦宇芬采用分光光度法測定生三七、蒸三七、油三七的總黃酮含量，探討蒸制法與油炸法對三七中總黃酮含量的影響，結(jié)果表明，生三七經(jīng)炮制后總黃酮含量降低，且炮制方法不同降低程度也不同[12]。王先友等采用比色法測定生熟三七中多糖的含量，發(fā)現(xiàn)熟三七中的多糖含量高于生三七，原因可能與一些配糖體在高溫高壓作用下發(fā)生降解有關(guān)[13]。

2 三七“生打熟補”藥理作用研究

2.1 三七“生打”藥理作用研究傳統(tǒng)中醫(yī)認為，三七的功效有“生打熟補”之分。其中，“打”是指生三七能止血活血、消腫散瘀、強心定痛，“補”是指熟三七能補血理血、補益健身和提高人體免疫力等。研究學(xué)者認為三七中所含的化學(xué)物質(zhì)經(jīng)炮制后含量、相對比例甚至結(jié)構(gòu)均可能發(fā)生變化，從而發(fā)揮不同的功效[14]。

三七中活血成分主要是三七總皂苷?，F(xiàn)已從三七不同部位分離得到70余種單體皂苷成分，包括原人參二醇型和原人參三醇型。三七中所含皂苷成分與人參大體相同，其中尤以人參皂苷Rg1和Rb1含量最高，也有其特有的皂苷成分，如三七皂苷R1、R2等。據(jù)報道，三七總皂苷(PNS)具有改善血管內(nèi)皮功能、抑制血小板聚集從而具有抗血栓形成的作用[15]。三七根總皂苷中主要有效成分為三七皂苷Rg1及其他原人參三醇型皂苷，可能通過提高血小板cAMP含量而抑制其聚集功能[16]。蘇雅等通過觀察三七三醇皂苷對動物血小板功能和血栓形成的影響，發(fā)現(xiàn)三七三醇苷能明顯抑制膠原、花生四烯酸(AA)、二磷酸腺苷(ADP)誘導(dǎo)的大鼠及家兔血小板聚集，抑制大鼠試驗性血栓形成[17]。以上這些研究均為三七應(yīng)用于抗心絞痛、治療血栓提供了有力依據(jù)。

三七中止血活性成分主要為三七素，是一種水溶性非蛋白氨基酸。趙國強等發(fā)現(xiàn)三七素能顯著增加血小板數(shù)量[18]。劉賀之等在對三七素止血作用機制的探討中發(fā)現(xiàn)，10%三七注射液能誘導(dǎo)血小板釋放腺苷二磷酸(ADP)、血小板因子III和鈣離子等止血活性物質(zhì)而發(fā)揮止血的功效[19]。張玉萍等進行了三七素的神經(jīng)毒性試驗及其止血作用的研究，發(fā)現(xiàn)三七素能明顯縮短凝血時間、凝血酶原時間和凝血酶時間，提高血小板數(shù)和聚集率，具有較好的止血作用，且在安全劑量下不會出現(xiàn)神經(jīng)毒性作用[20]。近年來三七因其止血和心血管性能被廣泛應(yīng)用于外傷出血、胸腹刺痛、跌打腫痛及心腦血管系統(tǒng)疾病的臨床預(yù)防和治療，在藥膳、保健食品、化妝品等行業(yè)將被更廣泛的應(yīng)用。

2.2 三七“熟補”藥理作用研究熟三七中皂苷化學(xué)成分的含量及組成與生三七有顯著的差異，三七經(jīng)炮制后，皂苷、多糖、總黃酮等成分容易被破壞，尤其是皂苷，易發(fā)生水解或降解，導(dǎo)致消腫、活血化瘀功效減弱，而補血功效增強。龍桂寧等采用尾部失血法制備小鼠血虛模型，比較熟三七破壁粉粒與常規(guī)飲片對血虛小鼠的影響，結(jié)果顯示，二者均能增加紅細胞數(shù)、血紅蛋白含量以及血虛小鼠的胸腺和脾臟指數(shù)，能增強血虛小鼠的造血功能，具有一定的補血功效[21]。也有研究表明，三七總皂苷(PNS)顯示出類似造血生長因子活性或協(xié)同效應(yīng)，從而促進了人類祖細胞增殖，具有上調(diào)造血的作用，很可能與增加糖皮質(zhì)激素受體核轉(zhuǎn)錄因子的合成及其DNA結(jié)合活性有關(guān)[22]。Liu等研究發(fā)現(xiàn)三七總皂苷(PNS)對X線照射所致大鼠外周血細胞和血小板減少亦有保護效應(yīng)。另外，三七中人參皂苷Rb1可以增加人紅細胞膜蛋白A螺旋的比例，從而改善紅細胞膜功能[23]。黎光南等研究油炸熟三七皂苷對家兔失血性貧血的治療作用，并進行了急性毒性試驗及對紅細胞的影響，結(jié)果表明，熟三七皂苷對失血性貧血家兔有一定治療作用，臨床用于治療營養(yǎng)不良型貧血癥，療效較好[24]。以上藥理學(xué)試驗證實了生三七經(jīng)炮制后，其活血功能減弱，補血、生血功能增強。但熟三七補血的機理并沒有具體闡明，是因為補血成分的含量變化，或新產(chǎn)生了其他補血成分，亦或是補血成分的含量改變與新產(chǎn)生的有效成分共同作用的結(jié)果，還是其他原因，目前還不清楚。

據(jù)報道，熟三七中含有的多糖、蛋白質(zhì)、生物堿、甾體、揮發(fā)油、胡蘿卜素及微量元素鈉、鎂、鐵、鈣等成分，可補益健身、提高機體免疫功能，在增強體質(zhì)、保健養(yǎng)生和預(yù)防疾病等方面具有較好的效果。王順官研究熟三七破壁粉粒及其常規(guī)飲片對免疫功能低下小鼠免疫功能的影響，發(fā)現(xiàn)二者對小鼠非特異性免疫功能具有一定的增強作用[25]。

以上這些研究與前人得出的經(jīng)驗“人參補氣第一，三七補血第一”相吻合。目前，缺乏對熟三七補血作用系統(tǒng)而全面的研究。

2.3 生、熟三七功效異同研究對于三七，中醫(yī)和民間均有“生打熟補”之說，雖然在生三七的功效、藥理活性及化學(xué)成分定性定量方面的研究較多，但在生、熟三七功效變化方面的研究報道較少，有待進一步完善。陳國珍等通過藥理學(xué)試驗研究了生三七與熟三七對血脂的影響，發(fā)現(xiàn)三七經(jīng)炮制后的藥理成分與生三七粉有所差異，至于引起生熟三七藥理作用不同的機理有待進一步探討[26]。張寶恒等研究了生、熟三七總皂苷對蛋白質(zhì)合成的影響，通過藥理學(xué)試驗證實了在適當劑量下生三七總皂苷與熟三七總皂苷均能促進肝、腎和血清蛋白質(zhì)的合成，且兩者對蛋白質(zhì)合成的影響隨劑量的改變而不同[27]。 劉環(huán)香等對生三七及在不同溫度和時間條件下處理的三七制品進行了止血、抗炎、扶正固本等藥理作用比較，結(jié)果表明熱處理的溫度和時間影響三七的藥理作用，經(jīng)110 ℃ 1 h熟處理后的三七與生三七比較，其止血、抗炎作用明顯減弱，而扶正固本作用增強[28]。崔秀明等采用藥理學(xué)試驗對三七粗粉、超細粉以及三七配方顆粒劑的藥效學(xué)進行比較，結(jié)果顯示這3種飲片制劑均具有明顯的抗血栓、抗凝血和抗血小板聚集作用，且劑量不同，作用強度不同[29]。Aik等研究發(fā)現(xiàn)生三七和蒸三七均能顯著抑制血小板聚集和血漿凝血，蒸三七比原提取物有更顯著的抗血小板和抗凝作用，且抗血小板和抗凝效果隨著蒸制時間的延長而增強，提示三七很可能是新型抗血小板和抗凝治療先導(dǎo)化合物的良好來源[30]。萬曉青等通過觀察生三七及其不同炮制品的水、醇提取物對小鼠抓力、力竭游泳時間、懸尾活動時間、耐缺氧能力及游泳持續(xù)時間的影響來考察三七及其不同炮制品在補益方面的作用，結(jié)果顯示生三七及其不同炮制品均具有增強小鼠體質(zhì)、抗抑郁、改善記憶功能及提高耐缺氧能力的作用[31]。Ding等采用超高壓液相色譜/質(zhì)譜分析法對原料藥和蒸制樣品的提取物進行化學(xué)分析，采用WST-1比色法評估其對3種人肝癌細胞(SNU449、SNU182和HepG2)的抗增殖作用，結(jié)果表明，蒸三七對肝癌細胞的抗增殖作用比生三七更大；蒸制增加了人參皂苷Rh2、Rk1、Rk3和20S-Rg3的濃度，且增強了對肝癌細胞的生長抑制作用[32]。 以上這些研究采用了較為簡單的藥理學(xué)試驗對生、熟三七藥理作用進行了研究和比較，發(fā)現(xiàn)在止血、抗炎、抗血栓、扶正固本、蛋白質(zhì)合成、調(diào)血脂、抗腫瘤等方面，生、熟三七表現(xiàn)出不同的功效。但未進行有關(guān)熟三七補血作用以及導(dǎo)致生熟三七功效變化的作用機制方面的探討和研究。

3 討論

隨著中藥在國際上的影響力不斷增強，三七、人參、天麻等名貴中藥材及其炮制品受到越來越多的關(guān)注，應(yīng)用范圍也在不斷擴大。知名的“云南白藥”、“片仔黃”、“復(fù)方丹參滴丸”等中藥制劑，就是以三七為主要原料制成。在遵循中醫(yī)辨證施治用藥和遣藥組方的思維原則的基礎(chǔ)上，為促進三七產(chǎn)業(yè)進一步發(fā)展、擴大其應(yīng)用范圍，闡明三七炮制機制及“生打熟補”作用機理具有重要意義，有助于制定更嚴格規(guī)范的生、熟三七質(zhì)量標準和使用規(guī)范，有利于實現(xiàn)中藥現(xiàn)代化和國際化。同時也會減少因無法辨識生、熟三七或不清楚生熟功效異同而誤用導(dǎo)致不良后果這類現(xiàn)象的發(fā)生，保障消費者的安全[33]。

近年來，關(guān)于三七的研究日益增多，在醫(yī)藥方面已顯示出廣闊的開發(fā)應(yīng)用前景和市場潛力，三七產(chǎn)業(yè)也在迅猛發(fā)展。三七生熟功用俱佳但存在顯著差異，目前圍繞生三七藥理作用、化學(xué)成分分析的研究很多，但對三七炮制品的研究較少，尤其在三七炮制成熟三七后具體哪些成分發(fā)生了變化或轉(zhuǎn)化、哪些成分在發(fā)揮“補氣補血”的功效等方面的研究相對欠缺，也不全面，有待進一步探索和研究。

總之，就目前的研究進展來說，有關(guān)探索三七“生打熟補”的作用機理以及熟三七補血功效的物質(zhì)基礎(chǔ)方面的研究還不夠完善、全面，三七“生打熟補”的炮制機制尚未能得到合理的解釋，有待進一步的研究。將來隨著研究的深入及技術(shù)的進步，可以從分子水平或采用微生物制藥技術(shù)、基因手段開展這方面的研究。

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Research Advances in Material Base and Pharmacological Effects of the “Shengdashubu” ofPanaxnotoginseng

WU Shuang1,2, CUI Xiu-ming1,2, GUO Cong-liang1,2, YANG Xiao-yan1,2*et al

(1.Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming, Yunnan 650500; 2.Yunnan and Macau Joint Laboratory of Traditional Chinese Medicine Quality and Resources Development, Kunming, Yunnan 650500)

Panaxnotoginseng(Burk.) F.H.Chen is a dual-use medicine for raw and processed forms.It has been clinically used in raw and processed forms due to their different therapeutic functions.This article would perform a comprehensive, systematic explanation aboutP.notoginsengmaterial base and pharmacological studies, and provide reference for the research, development and application ofP.notoginseng.

Panaxnotoginseng; Shengdashubu; Material base; Pharmacological studies

云南省教育廳重點項目(KKJD201426016)；昆明理工大學(xué)自然科學(xué)研究基金項目(KKSY201426015)。

武雙(1990- )，女，湖南衡東人，碩士研究生，研究方向：中藥炮制與化學(xué)成分。*通訊作者，副教授，博士，碩士生導(dǎo)師，從事中藥有效成分的含量測定、分離和結(jié)構(gòu)鑒定研究。

2015-01-27

S 567；R 283.1

A

0517-6611(2015)08-050-04