地塞米松對急性肺損傷患者血漿和支氣管肺泡灌洗液APN、TNF-α、IL-10水平的影響

王剛，李來傳，史有奎，王國君，陳京霞

(1濰坊醫(yī)學院附屬醫(yī)院，山東濰坊261031;2昌樂縣人民醫(yī)院)

急性肺損傷(ALI)是由非心源性的多種肺內(nèi)外因素所導致的急性進行性缺血性呼吸衰竭［1］，病死率達35%～40%［2］。脂連素(APN)是由脂肪細胞分泌的一種蛋白質(zhì)激素，最近的研究發(fā)現(xiàn)其具有多效性抗炎和血管保護作用［3，4］。國外文獻報道，低APN血癥可增加ALI發(fā)生的風險［5］。Summer等［6］的研究表明，APN有助于維持肺的免疫穩(wěn)態(tài)。地塞米松是臨床最常用且療效可靠的糖皮質(zhì)激素(GC)，能降低肺毛細血管的通透性、減輕肺間質(zhì)水腫、增加肺表面活性物質(zhì)。因此，我們觀察了地塞米松對ALI患者血漿和支氣管肺泡灌洗液(BALF)中APN、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細胞介素10(IL-10)水平的影響?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2011年10月～2013年10月濰坊醫(yī)學院附屬醫(yī)院就診的ALI患者48例，均符合1994年歐美ARDS聯(lián)席會議提出ALI的診斷標準。其中男36例，女12例;年齡23～72(40.5±9.2)歲;將患者隨機分為ALI組和干預(yù)組各24例。選取同期健康體檢者24例作為對照組，其中男19例，女5例;年齡28～78(43.0±12.6)歲。各組性別、年齡均具有可比性(P均＞0.05)。各組均排除各種慢性阻塞性肺疾病、肺動脈高壓、各種心臟病、高血壓及惡性腫瘤，患者及家屬均知情同意。

1.2 治療方法 ALI患者均給予抗炎、機械通氣等常規(guī)治療。干預(yù)組常規(guī)治療的基礎(chǔ)上靜滴地塞米松10 mg/d，療程3 d。

1.3 BALF的采集與處理 應(yīng)用纖支鏡Olympus-BFP40將其前端楔入右肺中葉內(nèi)外側(cè)段支氣管開口處，注入37℃的生理鹽水30～50 mL，以25～100 mmHg負壓吸引。灌洗共2次，總量60～100mL，回收35%～60%。取10 mL的BALF以3 000 r/min離心10 min，取上清于-20℃冰箱中保存。

1.4 血漿和BALF中APN、IL-10及TNF-α檢測采集3組空腹靜脈血，采用酶聯(lián)免疫吸附法分別檢測血漿和BALF中的APN、IL-10及TNF-α，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。計量資料以±s表示，組間比較采用單因素方差分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

3組血漿和BALF中APN、TNF-α、IL-10水平比較，見表1。

3 討論

多數(shù)學者認為，ALI是多種炎癥介質(zhì)反應(yīng)及相互作用的結(jié)果，且細胞因子之間并非各自孤立而是相互聯(lián)系、相互影響并形成復雜的“細胞網(wǎng)絡(luò)”和“細胞因子網(wǎng)絡(luò)”。一旦這些細胞因子之間的動態(tài)平衡被打破，則會發(fā)生炎癥介質(zhì)失控性釋放，導致肺組織甚至全身靶器官組織損傷。近年有文獻指出，APN可能通過調(diào)節(jié)細胞內(nèi)鈣離子濃度、增強脂質(zhì)氧化反應(yīng)、變構(gòu)激活腺苷酸激酶、調(diào)節(jié)AMP/ATP比值等起到保護內(nèi)皮、抗炎、抗氧化作用，降低ALI的嚴重程度［7，8］。此外，在ALI發(fā)生、發(fā)展過程中，APN作用于巨噬細胞，一方面能調(diào)節(jié)某些激酶和p38的磷酸化，使瘦素引起的TNF-α生成減少，起到抗炎作用;另一方面，APN結(jié)構(gòu)與TNF-α類似，兩者可以互為受體拮抗劑，在脂肪組織中相互抑制各自的基因表達產(chǎn)物，在肌肉組織中互相抑制對方的功能。佘其美等［9］研究提示，TNF-α是通過降低PPARγ2 mRNA表達使APN表達下降。研究表明，IL-10能抑制前炎癥細胞因子相應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄，并影響前炎癥細胞因子mRNA的穩(wěn)定性，從而導致細胞因子水平下降［9］。

表1 3組血漿和BALF中APN、TNF-α、IL-10水平比較(n=24，±s)

表1 3組血漿和BALF中APN、TNF-α、IL-10水平比較(n=24，±s)

注:與對照組同標本比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與ALI組同標本比較，#P＜0.05，##P＜0.01。

組別 APN(ng/mL) TNF-α(ng/L) IL-10(ng/L) ALI 組血漿 8.20±1.20* 447.43±29.40＊＊ 36.16±7.29＊＊BALF 1.40±0.20 273.66±39.07＊＊ 37.32±3.94＊＊干預(yù)組血漿 13.10±1.80*# 336.14±67.44＊＊# 25.17±5.34＊＊# BALF 1.50±0.20 181.40±42.77＊＊# 24.31±2.19＊＊#對照組血漿 16.70±2.00 218.20±20.94 13.12±2.00 BALF 1.70±0.10 122.67±59.37 14.55±2.22

GC為多途徑抗炎藥物，其作用機制在于抑制核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)與炎癥反應(yīng)控制基因上的κB位點結(jié)合，抑制炎癥細胞因子mRNA的轉(zhuǎn)錄，減少炎癥細胞因子的生成。有研究表明，應(yīng)用GC治療可明顯抑制ALI鼠NF-κB的激活，降低血漿IL-1β、TNF-α水平，對肺組織有明顯的保護作用［10］。本研究中，與對照組比較，ALI組和干預(yù)組血漿APN均降低，血漿和BALF中TNF-α、IL-10均升高，但是ALI組變化更明顯(P均＜0.05)。分析原因，可能與ALI發(fā)生、發(fā)展中復雜的炎癥反應(yīng)機制及地塞米松治療ALI過程中的劑量—效應(yīng)關(guān)系有關(guān)［11］。地塞米松能直接抑制TNF-α的產(chǎn)生，增加IL-10分泌，而TNF-α的降低可減弱對PPARYZ mRNA表達的抑制作用，則APN表達增加。

綜上所述，ALI患者血漿 APN降低，血漿和BALF TNF-α、IL-10均升高，地塞米松可降低患者上述指標的變化。同時本研究干預(yù)組應(yīng)用的是小劑量地塞米松，與最近證實的小劑量GC即可發(fā)揮抗炎作用［12，13］這一理論一致。而關(guān)于不同劑量的地塞米松對APN表達的影響則需進一步研究探討。

［1］錢桂生.急性肺損傷和急性呼吸窘迫綜合征研究現(xiàn)狀與進展［J］.解放軍醫(yī)學雜志，2003，28(2):97-101.

［2］Bernard GR.Acute respiratory distress syndrome:a historical perspective［J］.Am JRespir Crit Care Med，2005，172(7):798-806.

［3］Tilg H，Moschen AR.Role of adiponectin and PBEF/visfatin as regulators of inflammation:involvement in obesity-associated diseases［J］.Clin Sci(Lond)，2008，114(4):275-288.

［4］Holland WL，Miller RA，Wang ZV，etal.Receptor-mediated activation of ceramidase activity initiates the pleiotropic actions of adiponectin［J］.Nat Med，2011，17(1):55-63.

［5］Konter JM，Parker JL，Baez E.Adiponectin attenuates LPS-induced acute lung injury throughsuppression of endothelial cell activation［J］.J lmmunol，2012，188(2):854-863.

［6］Summer R，Little FF，OuchiN，etal.Alveolarmacrophage activation and an emphysema-like phenotype in adiponectin-deficient mice［J］.Am JPhysiol Lung Cell Mol Physiol，2008，294(6): 101035-101042.

［7］任海濤，姚蓉，曹鈺.脂連素在急性肺損傷中的機制探討［J］.實用醫(yī)院臨床雜志，2012，9(1):37-39.

［8］杜厚偉，劉楠，王杰華，等.脂肪來源的干細胞移植對腦缺血大鼠腦組織IL-10及TNF-γ表達的影響［J］.細胞與分子免疫學雜志，2009，25(11):998-1001.

［9］佘其美，石獻忠，王長江，等.腫瘤壞死因子α對人脂連素3T3-L1細胞PPARγ2 mRNA表達的影響［J］.中國糖尿病雜志，2008，3(3):156-158.

［10］李志剛，馬康華，等.腫瘤壞死因子-α對脂肪細胞中脂連素表達的影響［J］.臨床心血管病雜志，2007，23(5):361-364.

［11］胡小波，張育堅，陳霞，等.胰島素、地塞米松、腫瘤壞死因子α能調(diào)節(jié)脂連素的表達和分泌［J］.醫(yī)學分子生物學雜志，2005，2(2):90-93.

［12］宋志芳，郭曉紅，王樹云，等.糖皮質(zhì)激素在急性呼吸窘迫綜合征救治中的價值探討［J］.中國危重病急救醫(yī)學，2003，15(6): 343-353.

［13］宋志芳，郭曉紅，王樹云，等.糖皮質(zhì)激素在重癥社區(qū)獲得性肺炎致急性呼吸窘迫綜合征救治中的價值探討［J］.中國危重病急救醫(yī)學，2003，15(11):669-674.