消霉栓的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

消霉栓的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

鮑悅，吳海燕，王越，孫佳明，張輝*

(長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥與生物工程研發(fā)中心，長(zhǎng)春 130117)

摘要:目的建立消霉栓的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法對(duì)處方中的苦參、蛇床子、地膚子3味藥材采用TLC進(jìn)行定性鑒別。采用HPLC對(duì)處方中的蛇床子所含有效成分(蛇床子素)的含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果在相應(yīng)的色譜條帶中各藥材斑點(diǎn)清晰可辨，陰性對(duì)照品無(wú)干擾；蛇床子素在0.2 ~ 1 μg范圍內(nèi)，濃度與峰面積的線性關(guān)系較好，通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)整理得到其標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=348.08X+13.240，r=1，平均回收率=97.96%，RSD值為1.05%。結(jié)論所建的消霉栓質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)具有分析方法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確且重現(xiàn)性較強(qiáng)等特點(diǎn)，可作為消霉栓的質(zhì)量控制方法。

關(guān)鍵詞：消霉栓；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；蛇床子素

DOI:10.13463/j.cnki.cczyy.2015.06.008

中圖分類號(hào)：R284.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：2095-6258(2015)06-1121-02

基金項(xiàng)目：全國(guó)第四次中藥資源普查——中醫(yī)藥行業(yè)科研專項(xiàng)“我國(guó)代表性區(qū)域特色中藥資源保護(hù)利用”吉林省代表區(qū)域中藥資源保護(hù)利用(201207002-05)。

作者簡(jiǎn)介：鮑悅(1990-)，女，碩士研究生，主要從事中藥學(xué)研究。

收稿日期:(2015-06-23)

*通信作者：張輝,電話-(0431)86172080,電子信箱 zhanghui_8080@163.com

Quality standard of Xiaomei suppository

BAO Yue, WU Haiyan, WANG Yue, SUN Jiaming, ZHANG Hui*

(Traditional Chinese Medicine and Biological Engineering Research and Development Center;

Changchun University of Chinese Medicine, Changchun 130117, China)

Abstract：ObjectiveTo establish the quality standard of Xiaomei suppository. Methodsophorae Flavescentis Radix, Cnidii Fructus and Kochiae Fructus which in prescriptions are checked by TLC. The content of the active components in Cnidii Fructus is determinated by using HPLC. ResultsThe qualitative discrimination is highly peculiar and the blank test showed no interference ; In the range of 0.2-1 μg linear relationship is well , through the experimental data obtainedY=348.08X+13.240，r=1. The average recovery rate is 97.96%. The value of RSD is 1.05%. ConclusionThe analysis methods of Xiaomei suppository are simple, feasible, accurate which can be used as the quality control methods of Xiaomei suppository.

Keywords：Xiaomei suppository; quality standard; Osthole

消霉栓是根據(jù)民間多年驗(yàn)方所自主開(kāi)發(fā)而成的醫(yī)院復(fù)方制劑，本方主要由苦參、蛇床子、地膚子等7味藥材構(gòu)成，具有清熱利濕、解毒止癢等作用。其主要用于霉菌性、滴蟲(chóng)性等各種陰道炎[1]。本實(shí)驗(yàn)在前期對(duì)方中苦參、蛇床子、地膚子分別進(jìn)行薄層鑒別[2-7]的基礎(chǔ)上，為了使該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)一步的規(guī)劃化和全面化，針對(duì)處方中的蛇床子所含有效成分(蛇床子素)進(jìn)行含量測(cè)定[8-10]。通過(guò)對(duì)所提供的3批樣品分別進(jìn)行定性及定量檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)所建立的方法簡(jiǎn)便可行，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，具有良好的重現(xiàn)性，因此可將其作為該制劑的質(zhì)量控制方法。

1儀器與試藥

1．1儀器Agilent 1100 Series高效液相色譜儀(安捷倫科技公司)，紫外檢測(cè)器(安捷倫，LC-20AT，SPD-20A)，C18，T-5型電子分析天平(常熟雙杰測(cè)試儀器廠)，BSA124S-CW型電子天平，硅膠G板(青島海洋化工廠)，微量定量點(diǎn)樣管(美國(guó))。1．2試劑與藥材地膚子藥材由吉林敖東世航藥業(yè)股份有效公司提供，經(jīng)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)張輝教授鑒定均為正品。3批消霉栓樣品均由醫(yī)院制劑室提供(批號(hào)：20141201，20141202，20141203)。

2方法與結(jié)果

2．1色譜條件色譜柱：Agilent Eclipse Plus C18(4．6 mm×250 mm,5 μm)；流動(dòng)相:甲醇-水(75∶25)；檢測(cè)波長(zhǎng)：320 nm；柱溫：25 ℃，進(jìn)樣量：5 μL；流速：1．0 mL/min。2．2對(duì)照品溶液的制備[8]精密稱取干燥至恒重的蛇床子素對(duì)照品5 mg，置于10 mL容量瓶中，用乙醇溶解稀釋至刻度，并搖勻，再精密吸取上述溶液2 mL置于10 mL容量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，并搖勻，作為對(duì)照品溶液。2．3供試品溶液的制備[8]取同1批次的消霉栓6枚，剪碎，混勻，取出平均一枚的量，精密稱定其重量，放置于錐形瓶中，加入甲醇100 mL，于水浴中加熱10 min，溫度設(shè)定為(40 ± 1)℃。取出放涼后再超聲30 min，室溫下放置過(guò)夜，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液1 mL，置于25 mL的容量瓶中，加甲醇將其稀釋到刻度，搖勻后作為供試品溶液。2．4陰性樣品溶液的制備取上述所用缺蛇床子陰性栓6枚，按照“2．3”項(xiàng)下所述方法同法處理樣品，作為缺蛇床子陰性樣品溶液。2．5標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍分別精密吸取“2．2”項(xiàng)下的蛇床子素對(duì)照品溶液2、4、6、8、10 μL，并按照“2．1”項(xiàng)下的色譜條件分別進(jìn)樣，記錄其峰面積。以所得的蛇床子素的峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，相應(yīng)的蛇床子素進(jìn)樣量(μL)為橫坐標(biāo)，作線性回歸從而繪制出關(guān)于蛇床子素的標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線發(fā)現(xiàn)，蛇床子素在0．2 ~ 1 μg范圍內(nèi)，峰面積與濃度之間線性關(guān)系良好。2．6精密度試驗(yàn)分別精密吸取“2．2”項(xiàng)下的蛇床子素對(duì)照品溶液5 μL，按照“2．1”色譜條件分別進(jìn)樣5次并記錄其相應(yīng)的峰面積，得出RSD值為1．28%。2．7穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取“2．2”項(xiàng)下的蛇床子素對(duì)照品溶液5 μL，分別于0、8、16、24、36 h進(jìn)行測(cè)定，記錄其相應(yīng)的峰面積，經(jīng)計(jì)算得到RSD值為1．14%，結(jié)果表明對(duì)照品溶液在36 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。2．8加樣回收率試驗(yàn)經(jīng)計(jì)算得出消霉栓樣品中蛇床子素的含量為0．827 mg/g，精密稱取同一批次樣品5分，分別加入一定量蛇床子素對(duì)照品，按文中所列“2．2”項(xiàng)下所述含量測(cè)定方法分別進(jìn)行操作，測(cè)定并記錄其相應(yīng)的峰面積。根據(jù)5分樣品的稱樣量，其中蛇床子素的含量以及蛇床子素對(duì)照品的加入量，從而計(jì)算出回收率。=97．96% RSD =1．05%(n=5)2．9樣品測(cè)定依據(jù)“2．3”項(xiàng)下的條件對(duì)制劑室所提供的3批樣品進(jìn)行處理，并按照“2．2”項(xiàng)下的方法對(duì)樣品中的蛇床子素含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果3批樣品的含量分別為0．816、0．805、0．796 mg/g。RSD為1.24%。根據(jù)2010版《中國(guó)藥典》，暫定本品消霉栓每枚中的蛇床子藥材以蛇床子素(C15H16O3)計(jì)，不得少于0．636 8 mg。

3小結(jié)

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法無(wú)論在分離度上、精密度以及重現(xiàn)性上都有著較好的表征，且回收率在規(guī)定范圍內(nèi)。最終確定了專屬于消霉栓該制劑的含量限度，故每1枚消霉栓中蛇床子以蛇床子素(C15H16O3)計(jì)，不得少于0．636 8 mg。本實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可為控制該制劑的質(zhì)量提供重要的參考依據(jù)。

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