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    HPLC法測定咽炎含片中橙皮苷的含量

    2015-02-18 05:43:32朱建明
    西部中醫(yī)藥 2015年6期
    關(guān)鍵詞:含片橙皮咽炎

    朱建明

    甘肅省中醫(yī)院,甘肅 蘭州 730050

    咽炎含片由金銀花、菊花、陳皮等12味中藥組成,具有解毒、消炎、止痛等功效[1]。陳皮為其主要化痰藥物,為了控制其化痰作用,筆者采用HPLC對陳皮中的主要成分橙皮苷進行含量測定?,F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

    1 儀器與試藥

    1.1 儀器 LC-9A高效液相色譜儀(日本島津公司);641旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士BüCHI公司);HS-6150D超聲波清洗儀(上海珂淮儀器有限公司);SK-M2サンプルミル粉碎器(日本松下公司);AE-260 AE-240電子天平(瑞士科恩公司);HHS21-8電熱恒溫水浴鍋(上海科升公司);CS101-30型電熱鼓風(fēng)干燥箱(重慶四達試驗設(shè)備有限公司),TGL-16G高速臺式離心機(上海滬粵明科學(xué)儀器有限公司)。

    1.2 試藥 咽炎含片(四川華星藥業(yè)有限公司),橙皮苷對照品(中國藥品生物制品檢定所提供,供含量測定用,批號:721-9102);甲醇為色譜純,水為重蒸餾水,并經(jīng)0.45μm濾膜過濾,其他試劑均為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 方法[2-4]

    2.1.1 色譜條件 色譜柱:Shim-pack C18(150mm×6.0 mm,5μm);流動相:甲醇 -0.1%磷酸水溶液(40∶60);流速:1.0mL/min;進樣體積:10μL;檢測波長:283 nm;柱溫:30℃。

    2.1.2 對照品溶液的制備 取橙皮苷化學(xué)對照品適量,精密稱定。用甲醇定容于25mL容量瓶中,制成177μg/mL的對照品溶液備用。

    2.1.3 供試品溶液的制備 取咽炎含片,研細,混勻,取粉末約1.0 g,精密稱定,加甲醇15mL,回流40分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇溶解并定容到25mL容量瓶中,作為供試品溶液。

    2.1.4 陰性溶液的制備 在去除陳皮的條件下,按供試品溶液的制備方法制成陰性對照品溶液。

    2.2 結(jié)果

    2.2.1 線性關(guān)系考察 取橙皮苷對照品約4.44 mg,精密稱定,用甲醇定容到25 mL容量瓶中,超聲使其充分溶解,作為貯備液。精密吸取對照品儲備液0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、2.0 mL,置 10 mL容量瓶中,用甲醇定容,搖勻,按“2.1”項色譜條件操作,以濃度為橫坐標,峰面積為縱坐標,處理得到直線回歸方程:Y=6 999.6X+1 921.6,r=0.999 9,線性范圍為 14.21~35.52μg/mL。

    2.2.2 精密度實驗 精密吸取橙皮苷對照品溶液,連續(xù)進樣5次,5μL/次,以“2.1”項下色譜條件測定,記錄色譜圖,峰面積的RSD=0.44%。

    2.2.3 專屬性實驗 分別取對照品溶液、樣品溶液、陰性對照品溶液,按“2.1”項色譜條件操作,記錄色譜圖。結(jié)果供試品與對照品溶液均在相同保留時間出現(xiàn)吸收峰,空白溶液在此處無吸收峰。見圖1。

    圖1 咽炎含片中橙皮苷專屬性考察

    2.2.4 重現(xiàn)性實驗 取同批咽炎含片,研細、混勻,取粉末6份,按“2.1”項下方法制備供試品溶液,測定,記錄色譜圖,其RSD為0.42%,表明方法重現(xiàn)性良好。

    2.2.5 回收率實驗 采用加樣回收法,取已知含量的同批咽炎含片,研細,混勻,取粉末適量,精密稱定,精密加入17.76μg/mL的橙皮苷對照品溶液 1、2、3mL,每個比例制備 3份樣品。按“2.1”項下相應(yīng)方法制備供試品溶液,測定,記錄色譜圖,計算回收率,平均方法回收率分別為99.75%、RSD為1.13%,符合相關(guān)規(guī)定。結(jié)果見表1。

    2.2.6 樣品測定 取10批咽炎含片,研細,混勻,取粉末適量,精密稱定,按“2.1”項方法制備供試品溶液,測定,計算十批樣品中橙皮苷的平均含量為5.99 mg/g,RSD=1.72%。結(jié)果見表2。

    表1 咽炎含片中橙皮苷的回收率測定(n=3)

    表2 咽炎含片中橙皮苷的含量測定(n=3)

    3 討論

    HPLC是一種常用的分離分析色譜,較普通的液相色譜有以下優(yōu)點:速度快、靈敏度高、分辨率高、柱子可反復(fù)使用[5-8]。本實驗通過對HPLC色譜條件的考察,得到橙皮苷色譜條件及標準曲線,通過測定樣品中橙皮苷的含量,可得到咽炎含片的質(zhì)量控制標準。該方法簡單、快速、重現(xiàn)性好,適應(yīng)性廣泛,具有良好的實用價值。

    [1] 中華人民共和國國家藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準中藥成方制劑[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1998:130.

    [2] 胡志軍,陳建秋.HPLC測定不同基原陳皮藥材中陳皮苷的含量[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2012,18(10):95-98.

    [3] 王福霞,彭柳,王曉瓊.高效液相色譜法測定健胃消食口服液陳皮苷含量[J].醫(yī)學(xué)導(dǎo)報,2009,28(2):236-237.

    [4] 楊天鳴,劉娜,趙興紅.高效液相色譜法測定乳消膠囊中橙皮苷含量[J].西北國防醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(4):282-283.

    [5] 郭敏,王曉琳,黃聰琳,等.鐮形棘豆總黃酮提取工藝的比較研究[J].西部中醫(yī)藥,2014,27(2):34-35.

    [6] 聶舸,萬輝.HPLC法測定保和丸中橙皮苷含量[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報.2002,14(4):33-35.

    [7] 賀云,張尊聽,鄧雙.薄層掃描法測定木香順氣丸中橙皮苷的含量[J].西北藥學(xué)雜志,1999,15(6):246-248.

    [8] 郭敏,肖正國,姜華.高效液相色譜法同時測定三黃中空栓中黃芩苷、鹽酸小檗堿的含量[J].西部中醫(yī)藥,2014,27(9):19-21.

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