類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清C?X?C配體10與疾病的相關(guān)性

教婷，張寧

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院第二風(fēng)濕免疫科，沈陽 110004）

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清C?X?C配體10與疾病的相關(guān)性

教婷，張寧

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院第二風(fēng)濕免疫科，沈陽 110004）

目的檢測并分析類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）患者血清中C-X-C配體10（CXCL10）水平與RA疾病活動度的相關(guān)性，探討CXCL10對于RA的臨床意義。方法采用ELISA方法測定50例RA患者和35例健康對照者血清CXCL10水平。結(jié)果RA組血清CXCL10水平［（23.53±8.92）ng/mL］高于健康對照組［（10.43±4.34）ng/mL，P＜0.01］。高疾病活動度組血清CXCL10水平［（27.13±7.50）ng/mL］高于中低疾病活動度組［（17.12±7.67）ng/mL，P＜0.01］。RA患者血清CXCL10水平與疾病活動度評分28（DAS28）呈正相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論CXCL10參與了RA的炎癥過程，CXCL10升高可能提示RA高疾病活動。

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；趨化因子C-X-C配體10；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以侵蝕性、對稱性多關(guān)節(jié)炎為主要臨床表現(xiàn)的慢性自身免疫性疾病，基本病理改變?yōu)榛ぱ缀脱荇栊纬伞Ｄ壳癛A的確切發(fā)病機(jī)制尚不明確。大量研究表明，趨化因子在炎性細(xì)胞向滑膜遷移及活化過程中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。C-X-C配體10（C-X-C ligands 10，CXCL10）是趨化因子家族中的一員，研究發(fā)現(xiàn)，CXCL10在Ⅱ型膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎（collageninduced arthritis，CIA）鼠的滑膜、關(guān)節(jié)液和血清中表達(dá)增加，腹膜內(nèi)注射中和抗CXCL10抗體可以抑制CIA鼠關(guān)節(jié)炎的臨床進(jìn)展［1］。本研究擬檢測RA患者外周血清中CXCL10的表達(dá)水平，旨在探討其表達(dá)水平與RA的發(fā)病機(jī)制和疾病活動的相關(guān)性及其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選擇2011年于中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院住院的RA患者50例作為RA組。其中，女41例，男9例；年齡24～76歲，平均年齡（53.98±11.11）歲。所有患者均符合1987年美國風(fēng)濕病學(xué)會（American College of Rheumatology，ACR）制定的RA診斷標(biāo)準(zhǔn)。所有入選病例均除外其他風(fēng)濕性疾病、感染、腫瘤、心腦血管疾病等。選擇健康志愿者35例作為健康對照組。其中，女29例，男6例；年齡28～75歲，平均年齡（54.03±12.22）歲；既往無RA及自身免疫病史。2組年齡及性別無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

收集所有RA組患者的相關(guān)臨床資料，包括：病程［（19.27±11.44）個(gè)月］，關(guān)節(jié)腫脹數(shù)［（14.05±3.77）個(gè)］，關(guān)節(jié)壓痛數(shù)［（9.95±2.96）個(gè)］，血沉［（42.49± 19.40）mm/h］，C反應(yīng)蛋白［（49.94±39.37）mg/L］，類風(fēng)濕因子［（284.71±443.54）IU/mL］，以及既往用藥情況等。采用疾病活動度評分28（disease activity score 28，DAS28）對RA組進(jìn)行疾病活動度評分，根據(jù)評分結(jié)果將RA組分為2組：DAS28評分＞5.1者為高疾病活動組（n=32），DAS28評分≤5.1者為中低疾病活動組（n=18）。本研究獲得所有研究對象知情同意。

1.2 方法

采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測血清CXCL10。抽取RA組及健康對照組清晨空腹肘前靜脈血5 mL，3 000 r/min離心5 min，取上層血清置于-80℃冰箱保存。嚴(yán)格按照ELISA試劑盒（美國R＆D公司）說明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 血清CXCL10的表達(dá)

RA組及健康對照組血清中均存在CXCL10的表達(dá)，RA患者血清CXCL10水平高于健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［（23.53±8.92）ng/mL vs（10.43± 4.34）ng/mL，P＜0.01］。見圖1。

圖1 RA組與健康對照組血清CXCL10水平的比較Fig.1 Levels of CXCL10 in RA patients and healthy controls

2.2 不同疾病活動度RA患者血清CXCL10的表達(dá)

RA患者中，高疾病活動組血清CXCL10水平較中低疾病活動組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［（27.13± 7.50）ng/mL vs（17.12±7.67）ng/mL，P＜0.01］。見圖2。

圖2 高疾病活動度組與中低疾病活動組血清CXCL10水平的比較Fig.2 Levels of CXCL10 in high disease activity group and moderate and low disease activiy group

2.3 RA患者DAS28評分與血清CXCL10水平的相關(guān)性

Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示：RA組患者血清CXCL10水平與DAS28評分呈正相關(guān)（P＜0.05），見圖3。

圖3 RA組血清CXCL10水平與DAS28評分的相關(guān)性Fig.3 Correlation between RA serum concentration of CXCL10 and DAS28

3 討論

CXCL10于1985年由Luster等［2］發(fā)現(xiàn)，由干擾素γ（interferon-γ，IFN-γ）、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）誘導(dǎo)并受其影響［3］，可由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、間充質(zhì)細(xì)胞、樹突細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞等多種類型細(xì)胞分泌［1］。滑膜炎為RA的基本病理改變，CXCL10可選擇性招募、活化單核細(xì)胞及淋巴細(xì)胞至滑膜組織中，介導(dǎo)炎性反應(yīng)［3］。

研究表明，Th1/Th2細(xì)胞的失衡參與了RA發(fā)病機(jī)制，Th1細(xì)胞的優(yōu)勢表達(dá)在RA的發(fā)生發(fā)展中占重要地位［4］。RA的病變滑膜以Th1細(xì)胞浸潤為主，而趨化和激活Th1細(xì)胞的趨化因子主要為CXCL10［5］，組織中受招募的Th1細(xì)胞又可增強(qiáng)IFN-γ和TNF-α的產(chǎn)生，反過來進(jìn)一步刺激CXCL10的分泌，由此產(chǎn)生一個(gè)放大的反饋回路和永存的自身免疫過程［6］。其次，破骨細(xì)胞在RA的骨侵蝕中起重要作用。破骨細(xì)胞大量形成和激活與RA關(guān)節(jié)和骨破壞密切相關(guān)，核因子κB受體活化因子配體（receptor activator of NF-κB ligand，RANKL）與受體結(jié)合后，啟動一系列細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)通路，引起破骨細(xì)胞激活與分化［7］。動物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，CXCL10可以上調(diào)RANKL在RA病變滑膜CD4+T細(xì)胞中的表達(dá)，同時(shí)，RANKL可以介導(dǎo)CXCL10在破骨細(xì)胞前體的表達(dá)，兩者相互作用，進(jìn)而加重骨破壞［1，6］。此外，成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞（fibroblast-like synoviocytes，F(xiàn)LS）在RA的滑膜血管翳形成和關(guān)節(jié)破壞中起核心作用［8］。研究表明，CXCL10可以增加RA患者的FLS侵襲性［9］。以上研究結(jié)果提示CXCL10可能是RA發(fā)病過程中的一個(gè)正相關(guān)因子。

本研究采用ELISA方法檢測了RA患者血清中的CXCL10水平，分析了其與RA疾病活動度的相關(guān)性。結(jié)果表明，RA組血清CXCL10水平顯著高于健康對照組，且高疾病活動度組RA患者血清CXCL10水平高于中低疾病活動度組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說明CXCL10在RA患者血清中呈高表達(dá)水平。結(jié)果還顯示，RA組血清CXCL10水平與DAS28評分呈正相關(guān)，而DAS28評分可反映疾病的活動程度，因此，血清CXCL10高水平可能提示RA病情較重，預(yù)后不良。

綜上所述，CXCL10參與了RA的發(fā)病機(jī)制，且在一定程度上與疾病活動度呈正相關(guān)。本研究結(jié)果為今后將血清CXCL10檢測作為RA的一種輔助診斷、鑒別診斷及疾病評估手段提供了初步的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。同時(shí)，也提示了針對CXCL10藥物的研究在RA治療方面存在潛在價(jià)值。

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（編輯 王又冬）

Serum LevelofC-X-CLigands10 in Patients with Rheumatoid Arthritis and Its Clinical Significance

JIAOTing，ZHANGNing

（The Second Department of Rheumatology and Immunology，Shengjing Hospital，China Medical University，Shenyang 110004，China）

Objective To investigate the serum level of C-X-C ligands 10（CXCL10）in patients with rheumatoid arthritis（RA）and analyze its correlation with diseas activity.MethodsFifty patients with RA were recruited forthe study，and 35 healthy controls were selected as controls.The serum CXCL10 levelsof the two groups were determined by enzyme-linked immunosorbentassay（ELISA）.ResultsThe serum levelofCXCL10 in RA patients（23.53±8.92 pg/mL）was significantly higher than that of the healthy controls（10.43±4.34 pg/mL，P＜0.01），the serum level of CXCL10 in high disease activity group（27.13±7.50 pg/mL）was significantly higher than that of moderate and low disease activity group（17.12±7.67 pg/mL，P＜0.01）.The serum level of CXCL10 was correlated with the disease activity score 28（DAS28）（P＜0.05）.ConclusionCXCL10 is involved in the inflammatory process of RA，and CXCL10 could be used to predictthe disease activity for RApatients.

rheumatoid arthritis；C-X-C ligands 10；enzyme-linked immunosorbent assay

R593.22；R392.114

A

0258-4646（2015）11-0992-03

遼寧省自然科學(xué)基金（2014021081）

教婷（1987-），女，助教，碩士.

張寧，E-mail：zhangning@sj-hospital.org

2015-04-03

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