從革蘭氏染色教學(xué)中培養(yǎng)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的學(xué)習(xí)能力

雷世鑫　楊　亮　甘肅醫(yī)學(xué)院，甘肅省平?jīng)鍪小?44000

?

從革蘭氏染色教學(xué)中培養(yǎng)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的學(xué)習(xí)能力

雷世鑫楊亮甘肅醫(yī)學(xué)院，甘肅省平?jīng)鍪?44000

摘要革蘭氏染色是醫(yī)學(xué)微生物學(xué)細(xì)菌學(xué)中最經(jīng)典、最常用的染色方法，染色的各個(gè)步驟對(duì)染色結(jié)果都有影響，染色涉及微生物學(xué)的多個(gè)知識(shí)點(diǎn)，染色也有非常重要的臨床意義。筆者通過(guò)革蘭氏染色的教學(xué)，不但要培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐操作能力，更重要的是要培養(yǎng)學(xué)生學(xué)習(xí)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的學(xué)習(xí)興趣和思維模式，提高學(xué)習(xí)效果和學(xué)習(xí)能力。

關(guān)鍵詞革蘭氏染色醫(yī)學(xué)微生物學(xué)學(xué)習(xí)能力

醫(yī)學(xué)微生物學(xué)是一門重要的基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)課程，學(xué)好這門課程關(guān)系到醫(yī)學(xué)生專業(yè)課的學(xué)習(xí)和今后職業(yè)的發(fā)展[1~3]。但是醫(yī)學(xué)微生物內(nèi)容龐雜、枯燥抽象、難以記憶，學(xué)生對(duì)該課程積極性不高，主動(dòng)性不夠，學(xué)習(xí)效果不佳。教師在講授時(shí)要充分認(rèn)識(shí)該課程的特點(diǎn)，在教學(xué)中要不斷改變教學(xué)思路，創(chuàng)新教學(xué)方法，運(yùn)用多種教學(xué)方式，充分激發(fā)學(xué)生興趣，培養(yǎng)學(xué)生專業(yè)學(xué)習(xí)思維，提高課堂教學(xué)效果。革蘭氏染色是各細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用而不可缺少的細(xì)菌染色方法和檢驗(yàn)技術(shù)之一，通過(guò)革蘭氏染色可將細(xì)菌分為革蘭氏染色陽(yáng)性和陰性兩種，不僅為分類鑒定提供依據(jù)， 而且能指導(dǎo)臨床用藥。因此，在微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中革蘭氏染色法是每個(gè)學(xué)生必須掌握的實(shí)驗(yàn)技能[4,5]。而該項(xiàng)技能涉及到微生物的多個(gè)知識(shí)點(diǎn)，在教學(xué)過(guò)程中，教師可以通過(guò)啟發(fā)學(xué)生的發(fā)散思維，前后聯(lián)系教學(xué)內(nèi)容，既溫故而知新，又可以培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)方法和思維能力，達(dá)到兩全其美的目的。具體教學(xué)過(guò)程中要達(dá)到以下目的。

1認(rèn)識(shí)革蘭氏染色的重要性

革蘭氏染色是認(rèn)識(shí)微生物和微生物檢驗(yàn)最常用、最基本的方法，也是初步鑒別微生物的方法，還是最經(jīng)典的微生物染色方法；是醫(yī)學(xué)生學(xué)習(xí)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)課程時(shí)必須掌握的教學(xué)內(nèi)容和基本技能，要讓學(xué)生充分認(rèn)識(shí)到其重要性。

2培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐操作能力

革蘭氏染色的整個(gè)過(guò)程涉及涂片、固定、 初染、 媒染、 脫色、復(fù)染、鏡檢等步驟，實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響因素較多，作為醫(yī)學(xué)生在初次染色時(shí)由于各種原因，往往染色效果不佳，與理想結(jié)果有一定的偏差，在染色過(guò)程中要求每個(gè)學(xué)生注意染色細(xì)節(jié)，并分析每個(gè)步驟成功和失敗的原因，不斷提高自己的實(shí)踐操作能力。經(jīng)總結(jié)、歸類，在平時(shí)教學(xué)中容易出現(xiàn)以下問(wèn)題：

2.1涂片不理想初學(xué)者容易出現(xiàn)涂片不足或過(guò)量，如果采用配制好的菌液直接涂片，在涂片前需要將菌液充分震蕩混勻，再用接種環(huán)取適量菌液進(jìn)行涂片，效果較好。如果用菌落直接進(jìn)行涂片，要把握好菌量，否則取菌過(guò)多，細(xì)菌沒(méi)有完全涂開(kāi)，都會(huì)影響染色后細(xì)菌的觀察。

2.2固定不成功固定操作欠規(guī)范，固定是為了將活的細(xì)菌滅活，既降低了污染的可能和危險(xiǎn)性，也使細(xì)菌菌體容易著色，但如果固定不到位，鏡檢時(shí)個(gè)別學(xué)生可能會(huì)觀察到活菌，或者固定溫度過(guò)高，將會(huì)影響細(xì)菌形態(tài)、染色的觀察。

2.3媒染不到位媒染時(shí)間要控制在1min為宜，過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短都不利于染色結(jié)果的判斷，容易出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。

2.4脫色不徹底脫色是革蘭氏染色中非常關(guān)鍵的步驟，要注意脫色的時(shí)間和脫色的程度，在實(shí)際操作中如果脫色不徹底，將會(huì)出現(xiàn)染色結(jié)果的偏差。

3思考革蘭氏染色的原理

革蘭氏染色理想的結(jié)果是革蘭氏陽(yáng)性菌染成紫色, 革蘭氏陰性菌染成紅色。 二者對(duì)比鮮明, 結(jié)果準(zhǔn)確可靠。要結(jié)合細(xì)菌結(jié)構(gòu)和生理的內(nèi)容，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，前后聯(lián)系，縱橫交錯(cuò)，提高學(xué)習(xí)本門課程的能力。

3.1與細(xì)菌的結(jié)構(gòu)有關(guān)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)不論構(gòu)成成分還是致密程度、空間結(jié)構(gòu)上都存在的很大的差別，與染色結(jié)果有很大的關(guān)系，授課時(shí)應(yīng)引導(dǎo)學(xué)生復(fù)習(xí)細(xì)菌細(xì)胞壁的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)。

3.2與細(xì)菌的等電點(diǎn)有關(guān)革蘭氏染色所用的染料是帶正電的堿性染料，而革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌的等電點(diǎn)是不同的，在帶正電的堿性染料中與染料的結(jié)合力也是不同的，脫色的結(jié)果是不同的，是決定染色結(jié)果的原因之一。授課時(shí)應(yīng)引導(dǎo)學(xué)生復(fù)習(xí)細(xì)菌生理部分知識(shí)內(nèi)容。

4了解革蘭氏染色的意義

作為醫(yī)學(xué)生，今后主要是從事臨床工作，而細(xì)菌感染臨床疾病占的比例是相當(dāng)大的，通過(guò)革蘭氏染色可以初步鑒別細(xì)菌是革蘭氏陽(yáng)性菌，還是革蘭氏陰性菌，從而進(jìn)一步了解細(xì)菌的致病性和致病特點(diǎn)，幫助進(jìn)行初步的臨床用藥，有非常重要的意義。

5聯(lián)系其他細(xì)菌的知識(shí)點(diǎn)

5.1細(xì)菌的生長(zhǎng)增殖菌齡對(duì)革蘭氏染色的結(jié)果有較大的影響[5~9], 且與活躍生長(zhǎng)期的時(shí)間差距越大, 影響也越大。聯(lián)系細(xì)菌的增殖特點(diǎn)中生長(zhǎng)曲線的四個(gè)期，對(duì)細(xì)菌的培養(yǎng)、增殖、菌種保存知識(shí)進(jìn)行宏觀把握。

5.2細(xì)菌的遺傳變異通常所講細(xì)菌的生物學(xué)特性是活躍生長(zhǎng)期的性狀，但細(xì)菌的生長(zhǎng)、增殖及其生物學(xué)特性也受外界環(huán)境因素的影響，既能遺傳，也可變異，應(yīng)啟發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)細(xì)菌遺傳變異部分知識(shí)的興趣。

總之，教學(xué)是教和學(xué)的結(jié)合[3]，教學(xué)的最終目的是教會(huì)學(xué)生學(xué)習(xí)的方法，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，要充分發(fā)揮教師主導(dǎo)，學(xué)生主體的教學(xué)思想，培養(yǎng)學(xué)生達(dá)到“要學(xué)習(xí)，會(huì)學(xué)習(xí)，學(xué)習(xí)好”的結(jié)果，這樣將會(huì)起到事半功倍的目的。

參考文獻(xiàn)

[1]徐維禎,王燕,李迪.激發(fā)成教學(xué)生醫(yī)學(xué)微生物學(xué)學(xué)習(xí)興趣的體會(huì)〔J〕.山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育版,2010,12(11):1052-1053.

[2]李娜,李波清.關(guān)于醫(yī)學(xué)微生物學(xué)緒論課教學(xué)的幾點(diǎn)體會(huì)〔J〕.中國(guó)病原生物學(xué)雜志,2013,8(4):4.

[3]王莉莉,譚宇蓉,陳利玉.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)中的教與學(xué)探討〔J〕.基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育,2015,17(2):95-97.

[4]王芳,宋瑛琳,田明.革蘭氏染色結(jié)果的影響因素及結(jié)果分析〔J〕.實(shí)驗(yàn)室科學(xué),2009,2(1):104-106.

[5]石鵬.菌齡和脫色時(shí)間的改變對(duì)細(xì)菌革蘭氏染色結(jié)果的影響〔J〕.湖北師范學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2002,22(1)：93-94.

[6]田廣文,陳德育,樣祥.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中革蘭氏染色三步法應(yīng)用試驗(yàn)〔J〕.安徽農(nóng)學(xué)通報(bào),2008,14(15)：58-59.

[7]甘曉玲,主編.微生物學(xué)檢驗(yàn) 〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社,2010：63.

[8]Tanksley SD,Ganal MW,Prince JP,etal.High densitymolecular linkage maps of thepotato and tomato genomes〔J〕.Genetics,1992,132:1141-1160.

[9]Rouppe van der Voort NAM,van Eck HJ,Draaistra J,etal.An online catalogue of AFLP markers covering the potato genome〔J〕.Molecular Breeding,1998,4(1):73-77.

(本文通訊作者：楊亮)

(編輯落落)

收稿日期2015-05-12

中圖分類號(hào)：G420

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1001-7585(2015)21-3021-02