新城疫病毒的分類(lèi)及治療膠質(zhì)瘤研究的進(jìn)展

李俊卿，申漢威(綜述)，楊孔賓(審校)

(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科，哈爾濱 150001)

新城疫病毒的分類(lèi)及治療膠質(zhì)瘤研究的進(jìn)展

李俊卿△，申漢威△(綜述)，楊孔賓※(審校)

(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科，哈爾濱 150001)

腫瘤是人類(lèi)死亡的主要原因之一，其中腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見(jiàn)的、預(yù)后較差的原發(fā)惡性腫瘤，占顱內(nèi)腫瘤的50%～60%，據(jù)美國(guó)腦瘤登記中心計(jì)算膠質(zhì)瘤的年發(fā)病率約為5/10萬(wàn),每年新發(fā)病例超過(guò)14 000例，65歲以上人群中發(fā)病率顯著增高[1]。傳統(tǒng)治療效果差強(qiáng)人意，尋找新的治療途徑迫在眉睫。溶瘤病毒的發(fā)現(xiàn)為腫瘤的治療提供了新途徑。目前的溶瘤病毒有呼腸孤病毒、腺病毒、單純皰疹病毒、新城疫病毒(newcastle disease virus，NDV)、水皰性口炎病毒、自主微小病毒、EB病毒、麻疹病毒和脊髓灰質(zhì)炎病毒等十余種。具有溶瘤作用的NDV是其中的一種。在禽類(lèi)中有較高的致病性而對(duì)人類(lèi)幾乎不致病。而選擇性在人類(lèi)腫瘤細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，及直接溶瘤和免疫刺激效應(yīng)，使其成為一種極具潛力的抗瘤生物產(chǎn)品?，F(xiàn)就NDV的分類(lèi)及治療膠質(zhì)瘤研究的進(jìn)展予以綜述。

1NDV溶瘤作用的發(fā)現(xiàn)

新城疫是一種病毒感染禽類(lèi)的烈性傳染病，該病于1926年首先爆發(fā)于印度尼西亞的爪哇，之后波及整個(gè)東印度島，同年秋季傳播到英國(guó)新城[1]。1927年Doyle首次分離到該治病原并命名為NDV[2]。NDV主要通過(guò)呼吸道及黏膜等途徑傳播。1970年Webb發(fā)現(xiàn),患有胃癌的農(nóng)場(chǎng)主意外感染了NDV而胃癌自愈的現(xiàn)象，從而發(fā)現(xiàn)了NDV具有抗癌的作用[3]。后來(lái)相繼發(fā)現(xiàn)NDV的不同毒株對(duì)不同腫瘤有特異的殺傷作用。

2NDV溶瘤的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)

NDV屬于副黏病毒科副黏病毒亞科的禽Ⅰ型副黏病毒屬[4],有包膜的不分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA[(-)ssRNA]病毒,其基因組長(zhǎng)度大約15 kb。NDV的基因組的基因按3′Leader-NP-P-M-F-HN-L-5′Trailer結(jié)構(gòu)排列[5],編碼2種非結(jié)構(gòu)蛋白和6種結(jié)構(gòu)蛋白[6]。NDV的通過(guò)P基因編碼兩種非結(jié)構(gòu)蛋白V和W[7]。而NDV編碼的6種結(jié)構(gòu)蛋白分別為核衣殼蛋白(NP)、磷蛋白(P)、基質(zhì)蛋白(M)、融合蛋白(F)、血凝素-神經(jīng)氨酸酶蛋白(HN)及RNA依賴(lài)的大分子RNA聚合酶蛋白(L)。M、F和HN蛋白用于構(gòu)成NDV的包膜，F(xiàn)和HN蛋白位于包膜的外表面介導(dǎo)病毒的侵入和釋放，F(xiàn)蛋白可使自身包膜與宿主包膜融合，也可介導(dǎo)受感染細(xì)胞與鄰近細(xì)胞融合，同時(shí)也是決定病毒毒力的關(guān)鍵蛋白，HN蛋白通過(guò)血凝素識(shí)別并結(jié)合細(xì)胞膜上唾液酸受體。F蛋白與HN蛋白協(xié)同作用使病毒進(jìn)入宿主內(nèi)，并通過(guò)神經(jīng)氨酸酶破壞唾液酸受體利于新生病毒粒子釋放。M蛋白位于包膜的內(nèi)表面,主要參與病毒的組裝和釋放。NDV包膜內(nèi)部為NP、P和L蛋白，能與RNA結(jié)合成核衣殼,其中NP蛋白用于包裹RNA使其殼體化,P與L蛋白共同構(gòu)成RNA聚合酶,用于參與病毒的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制。V蛋白則為干擾素的拮抗劑,而W蛋白的含量極低，目前相關(guān)研究較少[8]。

3NDV的分類(lèi)及溶瘤作用

3.1NDV的分類(lèi)雖然NDV只有一個(gè)血清型，但是根據(jù)F基因或全基因的遺傳分型可將NDV分為兩大類(lèi)：由基因 Ⅰ～Ⅸ型組成的Ⅰ型和由基因Ⅰ～Ⅺ組成的Ⅱ型[9]。根據(jù)致病性不同將其分為強(qiáng)毒株、中毒株、弱毒株。根據(jù)NDV殺死腫瘤細(xì)胞的途徑不同將其分為細(xì)胞溶解型溶瘤毒株和非細(xì)胞溶解型溶瘤毒株。前者常見(jiàn)毒株包括NDV-73T、NDV-HUJ、MTH-68、NDV-PV701、NDV-FMVV、NDV-D90、Italian株、Hickman 株等；后者常見(jiàn)毒株包括Ulster株等。

3.2NDV的溶瘤效應(yīng)1996年潘李珍等[10]報(bào)道，球體細(xì)胞克隆率分析進(jìn)一步證明NDV-Losota-4株弱病毒對(duì)BT-325球體細(xì)胞具有殺傷作用,經(jīng)克隆率分析證明此種弱病毒可有效抑制BT-325細(xì)胞生長(zhǎng)(P<0.01)。2003年，徐葛林等[11]在NDV-CN對(duì)幾種人腫瘤的殺傷作用及機(jī)制分析的研究中發(fā)現(xiàn)，CN株對(duì)不同腫瘤細(xì)胞的敏感性存在差異，在作用U87 5 d后細(xì)胞全部死亡，對(duì)肺癌細(xì)胞A549的研究發(fā)現(xiàn)感染滴度與細(xì)胞活性的下降關(guān)系不大，隨著感染時(shí)間的延長(zhǎng)細(xì)胞活性逐日下降。2004年,邱吉慶等[12]關(guān)于新城疫治療膠質(zhì)瘤的報(bào)道中成功將pVHN(HN質(zhì)粒)質(zhì)粒注入瘤體內(nèi)，觀察到腫瘤細(xì)胞明顯凋亡，并收集大鼠血清測(cè)得血清中唾液酸水平降低，表明NDV的HN基因?qū)δz質(zhì)瘤有抑制作用。

NDV除了直接用于溶瘤外，人類(lèi)自體腫瘤疫苗也正在興起。腫瘤疫苗是取患者自身腫瘤細(xì)胞經(jīng)放射線處理后感染溶瘤病毒而成的，可在液氮中保存[13]。Schild等[14]描述了使用NDV-Ulster修飾的腫瘤細(xì)胞能增強(qiáng)T細(xì)胞免疫活性。同時(shí)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生白細(xì)胞介素(interleukin,IL)2和干擾素α/β等細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子增加腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞活性。選用Ulster是因?yàn)槠錇镽NA病毒，不能整合到宿主基因中，只選擇性在腫瘤細(xì)胞內(nèi)復(fù)制而且其具有多向性的免疫調(diào)節(jié)能力。2004年一項(xiàng)關(guān)于NDV修飾的自體腫瘤細(xì)胞疫苗(ATV-NDV)治療膠質(zhì)瘤的研究中[15]，采用非隨機(jī)研究選取了23例患者作為試驗(yàn)組，87例患者作為對(duì)照組，試驗(yàn)組給予8次ATV-NDV治療，而對(duì)照組沒(méi)有。結(jié)果顯示，大約有90%接受疫苗治療的患者有效而沒(méi)有嚴(yán)重并發(fā)癥。試驗(yàn)組患者的中位無(wú)進(jìn)展生存期為40周(對(duì)照組為26周)，中位總生存期為100周(對(duì)照組為49周)。生存期為1年的對(duì)照組為45%，試驗(yàn)組為91%，生存期為2年的對(duì)照組為11%，試驗(yàn)組為39%，生存期為3年以上的對(duì)照組沒(méi)有，試驗(yàn)組為4%。試驗(yàn)組中觀察到遲發(fā)型超敏反應(yīng)增強(qiáng)，復(fù)發(fā)腫瘤中CD8+依賴(lài)性T細(xì)胞增加。結(jié)果證明ATV-NDV治療膠質(zhì)瘤似乎是有效而且安全的，而且機(jī)體的免疫反應(yīng)也證明了這一點(diǎn)。

MTH-68/H是中間毒力型的NDV病毒，1933年分離的NDV命名為Herts′33，Csatary等[16]首次應(yīng)用Herts′33于抗癌治療，后來(lái)將其命名為MTH-68/H，用于不同惡性腫瘤的治療。MTH-68/H用于感染6株細(xì)胞系(鼠的嗜鉻細(xì)胞瘤PC12、鼠的黑色素細(xì)胞瘤B16、猴的腎癌細(xì)胞 Cos-7、HeLa的宮頸癌細(xì)胞、人的乳腺癌細(xì)胞MCF-7和改造的人的腎癌細(xì)胞293T)，在不同細(xì)胞系間表現(xiàn)不同的細(xì)胞殺傷作用，證明其除了具有潛在的免疫刺激性作用,還可直接發(fā)揮其抗癌作用并選擇性地攻擊并殺死腫瘤細(xì)胞，并將其應(yīng)用于高級(jí)別膠質(zhì)瘤的治療。1999年曾報(bào)道14歲高級(jí)別膠質(zhì)瘤患者在傳統(tǒng)治療后接受MTH-68/H疫苗治療的同時(shí)接受泰莫西芬治療，腫瘤縮小了95%而且沒(méi)有任何神經(jīng)毒作用，表明NDV疫苗可能是有效的抗瘤產(chǎn)品。2004年Csatary等[16]報(bào)道了14例膠質(zhì)瘤患者接受MTN-68/H治療，結(jié)果顯示，5例死于腫瘤進(jìn)展，2例死于其他原因，7例尚存活，其中3例治療4～18個(gè)月還不能作出療效評(píng)估，4單例純接受MTH-68/H治療4～7年，患者存活了5～9年，并且生活質(zhì)量較好。

NDV-HUJ為高度純化的自然減毒B1-NDV毒株，F(xiàn)reeman 等[17]在大鼠惡性膠質(zhì)瘤C6和RG2模型中發(fā)現(xiàn)，NDV-HUJ選擇性感染腫瘤并阻斷宿主細(xì)胞的代謝并誘導(dǎo)其凋亡，子代病毒粒子不具有傳染性，除了具有直接細(xì)胞毒性作用外，還能誘導(dǎo)細(xì)胞因子介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。2006年Freeman等[17]報(bào)道，14例膠質(zhì)瘤患者采用NDV-HUJ靜脈注射的方法進(jìn)行臨床Ⅰ/Ⅱ期試驗(yàn)，該試驗(yàn)從0.1～11 BIU逐漸增加劑量，最后循環(huán)給予55 BIU 3次。最終有11例患者接受了病毒治療，僅有5例患者有輕微發(fā)熱癥狀，能在患者血液、唾液、尿液及活檢腫瘤組織中檢測(cè)到NDV-HUJ?？筃DV-HUJ抗體在5～29 d可被檢測(cè)到。接受治療的患者中有1例腫瘤最終完全消失，3例腫瘤有所增大但發(fā)現(xiàn)腫瘤血管周?chē)辛馨图?xì)胞浸潤(rùn)1例患者腫瘤體積無(wú)進(jìn)展，對(duì)NDV-HUJ具有良好的耐受性。

2009年Zulkifli等[18]報(bào)道,NDV-V4UPM是V4病毒株經(jīng)改造而來(lái)的。在鼠的皮下種瘤(DBTRG.05MG和U-87MG)模型中研究發(fā)現(xiàn)NDV-V4UPM能抑制該腫瘤細(xì)胞增殖。IC80在520 HAU/mL,NDV-V4UPM能有效誘導(dǎo)腫瘤消退和凋亡。

NDV-D90已經(jīng)被證實(shí)在多種腫瘤細(xì)胞系中有效,相關(guān)文獻(xiàn)證實(shí)對(duì)A549效果良好，并已證明NDV-D90對(duì)U87效果顯著[19]。

4NDV的溶瘤機(jī)制

4.1NDV直接溶瘤作用NDV選擇性在腫瘤細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，而對(duì)機(jī)體正常細(xì)胞影響較小[4]。NDV感染宿主細(xì)胞依靠鑲嵌在脂質(zhì)分子層中的HN和F蛋白。NDV通過(guò)其表面的HN蛋白和宿主細(xì)胞表面含唾液酸的受體結(jié)合從而吸附到宿主細(xì)胞表面,NDV發(fā)生構(gòu)象變化,反過(guò)來(lái)觸發(fā)F蛋白構(gòu)象變化和釋放融合肽融合病毒和宿主的細(xì)胞膜，完成內(nèi)吞過(guò)程,融合過(guò)程通常在pH較低的條件下進(jìn)行[20]。腫瘤細(xì)胞干擾素信號(hào)系統(tǒng)缺陷使NDV在腫瘤細(xì)胞中高效復(fù)制[21]。Fiola等[22]已闡明了NDV在腫瘤細(xì)胞中選擇性復(fù)制的機(jī)制。最新研究認(rèn)為，腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗凋亡蛋白也是NDV選擇在其中復(fù)制的原因之一[23]。Wilden等[24]研究發(fā)現(xiàn)，NDV對(duì)宿主的敏感性同宿主細(xì)胞抗病毒基因視黃酸誘導(dǎo)基因蛋白-干擾素調(diào)節(jié)因子7、干擾素調(diào)節(jié)因子3和干擾素β的表達(dá)吳負(fù)相關(guān)，這些基因在正常細(xì)胞中的表達(dá)水平遠(yuǎn)高于腫瘤細(xì)胞。細(xì)胞溶解型溶瘤病毒在腫瘤細(xì)胞內(nèi)生成HN和F基因處于活化狀態(tài)的子代病毒粒子，該病毒粒子具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性可繼續(xù)感染鄰近細(xì)胞。該過(guò)程干擾了腫瘤細(xì)胞的代謝過(guò)程，同時(shí)介導(dǎo)細(xì)胞之間發(fā)生融合而產(chǎn)生合胞體，進(jìn)而引起腫瘤細(xì)胞的死亡。非細(xì)胞溶解型溶瘤株產(chǎn)生的病毒粒子無(wú)感染性只能進(jìn)行單次復(fù)制，主要通過(guò)干擾腫瘤細(xì)胞的代謝而導(dǎo)致緩慢細(xì)胞死亡[25-26]。

細(xì)胞死亡方式包括凋亡、細(xì)胞自噬、死亡3種途徑。文獻(xiàn)報(bào)道，NDV抗腫瘤的機(jī)制依賴(lài)于啟動(dòng)凋亡途徑[25,27-28]。文獻(xiàn)報(bào)道，NDV引起細(xì)胞凋亡是通過(guò)激活胱天蛋白酶家族成員實(shí)現(xiàn)的[29]。參與細(xì)胞凋亡的重要分子有凋亡促進(jìn)分子胱天蛋白酶(caspases)家族、Bax/Bak、細(xì)胞色素C等；凋亡抑制分子 Bcl-2 家族分子等[30-31]。NDV直接誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞內(nèi)源性凋亡途徑，增加線粒體膜通透性，釋放細(xì)胞色素C及其他膜間隙蛋白，同時(shí)激活caspase-9、3、12而直接導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。另一研究發(fā)現(xiàn),凋亡因子的過(guò)表達(dá)也增加了NDV的溶瘤作用[32]。在某些腫瘤也會(huì)誘導(dǎo)外源性凋亡途徑(Fas/FasL、腫瘤壞死因子/腫瘤壞死因子受體等)加速細(xì)胞凋亡過(guò)程。

4.2NDV免疫調(diào)節(jié)機(jī)制病毒在腫瘤細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的同時(shí)，增加了腫瘤表面病毒抗原的表達(dá)。凋亡小體增加了巨噬細(xì)胞吞噬能力，趨化因子(RANTES和IP-10)募集單核細(xì)胞及T細(xì)胞，病毒粒子激活單核細(xì)胞誘導(dǎo)合成：核因子κB、一氧化氮、TRAIL及增強(qiáng)細(xì)胞毒效應(yīng)。機(jī)體通過(guò)獲得性免疫增加主要組織相容性復(fù)合體類(lèi)分子表達(dá)，增強(qiáng)抗原呈遞，增加細(xì)胞黏附分子表達(dá)(細(xì)胞間黏附分子1和淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3)，病毒的HN分子表達(dá)增加干擾素α和腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體。雙鏈RNA可誘導(dǎo)Toll樣受體3、干擾素α及熱激蛋白的表達(dá)。誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞因子，如干擾素、腫瘤壞死因子、IL、熱激蛋白、腎上腺皮質(zhì)激素及金屬蛋白酶等。并誘發(fā)多效免疫反應(yīng)，如增加Th細(xì)胞、細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞及巨噬細(xì)胞等殺細(xì)胞效應(yīng)。NDV同單純皰疹病毒Ⅰ型及腺病毒相比對(duì)人類(lèi)的不良反應(yīng)少，因此NDV是一種極具潛力的腫瘤治療疫苗[32]。自體瘤疫苗可能通過(guò)激活患者自身的主動(dòng)特異性免疫發(fā)揮治療作用：①直接誘導(dǎo)腫瘤抑制因子產(chǎn)生，如干擾素、腫瘤壞死因子、IL、巨噬細(xì)胞集落刺激因子；②激活機(jī)體特應(yīng)性免疫細(xì)胞，如特異T細(xì)胞；③非特異性細(xì)胞毒作用[33]。

5反轉(zhuǎn)錄在溶瘤中的應(yīng)用

反轉(zhuǎn)錄技術(shù)是一直被探索用于提高NDV溶瘤效果的途徑[34]。利用反向遺傳技術(shù)首次成功拯救了NDV-LaSota株，1999年Oberdoerfer等[35]成功回收了NDV-Clone 30株，相繼NDV的許多毒株都拯救成功，標(biāo)志著反向遺傳技術(shù)在NDV研究領(lǐng)域相對(duì)成熟，為優(yōu)化NDV的溶瘤作用奠定了良好的基礎(chǔ)。

2007年Vigil等[36]首次報(bào)道了應(yīng)用重組NDV治療癌癥，在NDV基因中插入外源性基因，使其能表達(dá)粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子、干擾素γ、IL-2及腫瘤壞死因子α，在荷瘤小鼠中評(píng)價(jià)可知IL-2效果確切，多數(shù)未見(jiàn)復(fù)發(fā)。2008年P(guān)ühler等[37]重組了MTH-68，能刺激腫瘤細(xì)胞特異表達(dá)IgG，與腫瘤表面抗原特異結(jié)合。在抗黑色素瘤研究中將流感病毒的NS1基因插入NDV基因組中，NS1表現(xiàn)出干擾素拮抗和抗凋亡作用，因而通過(guò)抑制宿主細(xì)胞的干擾素對(duì)病毒的殺傷作用提高溶瘤效應(yīng)。類(lèi)似的研究正在廣泛開(kāi)展，然而其安全及有效地用于人類(lèi)的抗腫瘤治療仍需進(jìn)一步評(píng)估。

6小結(jié)

目前的實(shí)驗(yàn)研究部分證明了NDV病毒對(duì)膠質(zhì)瘤的治療有效。并且它可用于臨床傳統(tǒng)治療無(wú)效的膠質(zhì)瘤，關(guān)鍵是臨床試驗(yàn)中未發(fā)現(xiàn)任何嚴(yán)重的不良反應(yīng)，NDV的選擇性在腫瘤細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，具有直接溶瘤效應(yīng)及誘發(fā)機(jī)體的固有免疫及獲得性免疫系統(tǒng)，ATV-NDV自體疫苗的應(yīng)用也為膠質(zhì)瘤的治療提供了新的治療思路。NDV的溶瘤機(jī)制被廣泛研究，不同NDV毒株針對(duì)不同的腫瘤細(xì)胞有不同的溶瘤機(jī)制。對(duì)于膠質(zhì)瘤的溶瘤機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。反轉(zhuǎn)錄技術(shù)增強(qiáng)了NDV的溶瘤效果，為膠質(zhì)瘤的治療開(kāi)辟了新的途徑。隨著對(duì)NDV研究的深入及反轉(zhuǎn)錄技術(shù)的更加成熟，NDV的溶瘤作用會(huì)進(jìn)一步增強(qiáng)，對(duì)正常機(jī)體的不良反應(yīng)進(jìn)一步減少，NDV也必將成為臨床工作中治療腫瘤的有效生物產(chǎn)品。

參考文獻(xiàn)

[1]Morgan HJ.Newcastle disease of poultry[J].Iowa State Univ Vet，1946,9(1):17-20.

[2]Calnek BW.禽病學(xué)[M].高福，蘇敬良，譯.10版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1999:61-726.

[3]蔣泓,劉芳,嚴(yán)愛(ài)芬,等.溶瘤病毒的腫瘤治療作用研究[J].佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2013，31(2)：1-6.

[4]Krishnamurthy S,Takimoto T,Scroggs RA,etal.Differentially regulated interferon response determines the outcome of newcastle disease virus infection in normal and tumor cell lines[J].J Virol,2006,80(11):5145-5155.

[5]Schirrmacher V,Griesbach A,Ahlert T.Anti-tumour effects of Newcastle Disease Virus in vivo:local versus systemic effects[J].Int J Oncol,2001,18(5):945-952.

[6]尹儉儉，李秀景，陳娜娜,等.新城疫病毒及其應(yīng)用研究進(jìn)展[J].廣東醫(yī)學(xué)，2011,32(18):2470-2472.

[7]Steward M,Vipond IB,Millar NS,etal.RNA editing in Newcastle disease virus[J].J Gen Virol,1993,74(Pt 12):2539-2547.

[8]Ravindra PV,Tiwari AK,Sharma B,etal.Newcastle disease virus as an oncolytic agent[J].Indian J Med Res，2009,130(5):507-513.

[9]劉海金.兩株新城疫病毒的致病性研究、全基因序列測(cè)定及全長(zhǎng)cDNA的構(gòu)建[D].西安：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2013.

[10]潘李珍,高明庚,李?lèi)?ài)華,等.多細(xì)胞腫瘤球體的培養(yǎng)及應(yīng)用[J].首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1996,17(1):4.

[11]徐葛林，解付磊，全家嫵，等.NDVCN株對(duì)幾種人腫瘤細(xì)胞的殺傷作用及其機(jī)理的分析[J].中國(guó)病毒學(xué)，2003,18(3)：227-231.

[12]邱吉慶，金寧一，連海，等.新城疫病毒HN基因?qū)蒀6膠質(zhì)瘤Wistar大鼠的治療[J].世界腫瘤雜志,2004,3(1):33-36.

[13]Lam HY,Yeap SK,Rasoli M,etal.Safety and clinical usage of newcastle disease virus in cancer therapy[J].J Biomed Biotechnol,2011,2011:718710.

[14]Schild H,von Hoegen P,Schirrmacher V.Modification of tumor cells by a low dose of Newcastle disease virus.Ⅱ.Augmented tumor-specific T cell response as a result of CD4+and CD8+immune T cell cooperation[J].Cancer Immunol Immunother，1989,28(1):22-28.

[15]Steiner HH,Bonsanto MM,Beckhove P,etal.Antitumor vaccination of patients with glioblastoma multiforme:a pilot study to assess feasibility,safety,and clinical benefit[J].J Clin Oncol，2004,22(21):4272-4281.

[16]Csatary LK,Gosztonyi G,Szeberenyi J.MTH-68/H oncolytic viral treatment in human high-grade gliomas[J].J Neurooncol，2004,67:83-93.

[17]Freeman AI,Zakay-Rones Z,Gomori JM,etal.Phase Ⅰ/Ⅱ trial of intravenous NDV-HUJ oncolytic virus in recurrent glioblastoma multiforme[J].Mol Ther， 2006，13(1):221-228.

[18]Zulkifli MM,Ibrahim R,Ali AM,etal.Newcastle diseases virus strain V4UPM displayed oncolytic ability against experimental human malignant glioma[J].Neuro Res，2009,31(1):3-10.

[19]Chai Z,Zhang P,Fu F，etal.Oncolytic therapy of a recombinant Newcastle disease virus D90 strain for lung cancer[J].Virol J，2014,11:84.

[20]Cantin C,Holguera J,Ferreira L,etal.Newcastle disease virus may enter cells bycaveolae-mediated endocytosis[J].J Gen Virol，2007,88(Pt 2):559-569.

[21]Elankumaran S,Chavan V,Qiao D,etal.Type Ⅰinterferon-sensitive recombinant newcastle disease virus for oncolytic virotherapy[J].J Virol，2010,84(8):3835-3844.

[22]Fiola C,Peeters B,Fournier P,etal.Tumor selective replication of Newcastle disease virus:Association with defects of tumor cells in antiviral defence[J].Int J Cancer， 2006,119(2):328-338.

[23]Mansour M,Palese P,Zamarin D.Oncolytic specificity of Newcastle disease virus is mediated by selectivity for apoptosis resistence cells[J].J Virol,2011,85(12):6015-6023.

[24]Wilden H,Fournier P,Zawatzky R,etal.Expression of RIG-I,IRF3,IFN-beta and IRF7 determines resistance or susceptibility of cells to infection by Newcastle Disease Virus[J].Int J Oncol，2009，34(4):971-982.

[25]Meng G,Xia M,Wang D,etal.Mitophagy promotes replication of oncolytic Newcastle disease virus by blocking intrinsic apoptosis in lung cancer cells[J].Oncotarget，2014，5(15):6365-6374.

[26]Fournier P,Bian H,Szeberenyi J,etal.Analysis of three properties of newcastled disease virus for fighting cancer tumor-selective replication antitumor cytotoxicity and immunostimulation [J].Methods Mol Biol，2012,797:177-204.

[27]Lazar I,Yaacov B,Shiloach T,etal.The oncolytic activity of Newcastle disease virus NDV-HUJ on chemoresistant primary melanoma cells is dependent on the proapoptotic activity of the inhibitor of apoptosis protein Livin[J].J Virol，2010,84(1):639-646.

[28]Elankumaran S,Rockemann D,Samal SK.Newcastle disease virus exerts oncolysis by both intrinsic and extrinsic caspase-dependent pathways of cell death[J].J Virol,2006,80(15):7522-7534.

[29]Ravindra PV,Tiwari AK,Ratta B,etal.Newcastle disease virus-induced cytopathic effect in infected cells is caused by apoptosis[J].Virus Res,2009,141(1):13-20.

[30]Schmitz I,Kirchhoff S,Krammer PH.Regulation of death receptor mediated apoptosis pathways[J].Int J Biochem Cell Biol,2000,32(11/12):1123-1136.

[31]Adams JM.Ways of dying:multiple pathways to apoptosis[J].Genes Dev,2003,17(20):2481-2495.

[32]Wu Y,Zhang X,Wang X,etal.Apoptinv enhance stheonco-lytic properties of newcastle disease virus[J].Inter Viro,2012,55(4):276-286.

[33]Li P,Chen CH,Li S,etal.Therapeutic effects of a fusogenic newcastle disease virus in treating head and neck cancer[J].Head Neck,2011,33(10):1394-1399.

[34]Zamarin D,Palese P.Oncolytic Newcastle disease virus for cancer therapy:old challenges and new directions[J].Future Microbiol,2012,7(3):347-367.

[35]Oberdoerfer AR,Mundt E,Mebatsion T,etal.Generation of recombinant lentogenic Newcastle disease virus from cDNA[J].J Gen Virol,1999,80(11):2987-2995.

[36]Vigil A,Park MS,García-Sastre A,etal.Use of reverse genetics to enhance the oncolytic properties of Newcastle disease virus[J].Cancer Res,2007,67(17):8285-8292.

[37]Pühler F,Willuda J,Beier R,etal.Generation of a recombinant oncolytic Newcastle disease virus and expression of a full IgG antibody from two transgenes[J].Gene Ther,2008,15(5):371-383.

摘要：腦膠質(zhì)瘤是人類(lèi)中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最常見(jiàn)的原發(fā)惡性腫瘤，因其致殘率、致死率高而被國(guó)內(nèi)外學(xué)者廣泛研究。傳統(tǒng)的手術(shù)、放療及化療等治療手段并不能達(dá)到滿意的治療效果。近些年各種生物基因治療不斷涌現(xiàn)，其中溶瘤病毒的抗腫瘤作用正在引起學(xué)者的廣泛關(guān)注和研究，新城疫病毒(NDV)的膠質(zhì)瘤治療更是研究的熱點(diǎn)?，F(xiàn)就NDV的發(fā)現(xiàn)、溶瘤的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)、分類(lèi)及關(guān)于治療膠質(zhì)瘤的研究及反向遺傳技術(shù)的應(yīng)用等進(jìn)行總結(jié)。

關(guān)鍵詞：新城疫病毒；溶瘤病毒；膠質(zhì)瘤

Classification of Newcastle Disease Virus and Advances in the Treatment of Glioma StudyLIJun-qing，SHENHan-wei，YANGKong-bin.(DepartmentofNeurosurgery,theFirstAffiliatedClinicalHospitalofHarbinMedicalUniversity,Harbin150001,China)

Abstract：Glioma is the most common primary malignant tumor in central nervous system.Due to its high disability and mortality,it is being researched extensively in the world,but the traditional treatments such as surgery,radiotherapy and chemotherapy,can′t achieve satisfactory therapeutic effect.However various biological gene therapies are springing up constantly,among which the oncolytic virus is drawing wide attention of the scholars,and the study of glioma therapy newcastle disease virus(NDV) is even a hotter spot.Here is to make a brief description of the discovery,the oncolytic structure and classification of NDV,the research on treatment of glioma,and the application of reverse genetics technology.

Key words:Newcastle disease virus; Oncolytic virus; Glioma

收稿日期：2014-09-29修回日期：2014-12-23編輯：伊姍

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.16.019

中圖分類(lèi)號(hào):R739.41； Q939.47

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-2084(2015)16-2932-04