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    滴定緩沖機理研究

    2015-02-07 10:40:56貴州師范大學(xué)物理與電子科學(xué)學(xué)院戎小鳳程桂仙周鳳雛
    電子世界 2015年16期
    關(guān)鍵詞:箭頭機理紙質(zhì)

    貴州師范大學(xué)物理與電子科學(xué)學(xué)院 戎小鳳 陳 葡 程桂仙 周鳳雛

    滴定緩沖機理研究

    貴州師范大學(xué)物理與電子科學(xué)學(xué)院 戎小鳳 陳 葡 程桂仙 周鳳雛

    本論文采用噴墨打印法設(shè)計一款帶有緩沖區(qū)域的紙質(zhì)傳感器,通過對緩沖機理的深入研究,確定其緩沖長度。并基于酶催化葡萄糖實驗,比較不同圖案反應(yīng)區(qū)中顏色分布的詳細情況來確認反應(yīng)物質(zhì)的均勻性改善程度,從而使裸眼或計算機軟件分析低濃度試劑時變得準確。

    傳感器;緩沖機理;長度;低濃度

    1 引言

    目前紙質(zhì)微流控已成為當(dāng)代傳感器技術(shù)的一種重要方法[1]。其目的是為貧困、邊遠地區(qū)提供一種非常便利,快捷,比較容易操作的檢測平臺。紙質(zhì)微流控技術(shù)的基本原理是運用疏水聚合物來限定親水區(qū)域,從而人為操控流體的空間分布[2]。絕大部分的比色紙質(zhì)微流控設(shè)備在做試驗分析的時候,普遍需要重復(fù)十多次來獲得準確的檢測結(jié)論。而造成這種誤差的本質(zhì)原因是傳感物質(zhì)在反應(yīng)區(qū)中造成的非均勻堆疊,從而影響了化學(xué)反應(yīng)的充分進行。另外傳感物質(zhì)都只能直接滴定在某個反應(yīng)的區(qū)域中,而液體的快速流動會將反應(yīng)物質(zhì)沖擊到遠離滴定點的其他地區(qū),從而造成所謂的不均勻分布。

    基于以上原因,本文將設(shè)計一種較復(fù)雜圖案的紙質(zhì)生物傳感器,使得緩沖區(qū)域內(nèi)流體流速降低,進而提高反應(yīng)物質(zhì)均勻分布。并通過對這種緩沖機理的研究,確定其緩沖長度,從而使之應(yīng)用于紙質(zhì)傳感器的設(shè)計中。從實驗結(jié)果看出,試劑如果通過一定的緩沖區(qū)域再進入反應(yīng)區(qū)進行色變反應(yīng),顏色分布的均勻性有巨大的改善。

    2 實驗部分

    2.1 實驗儀器及試劑

    烷基烯酮二聚體(AKD);正庚烷;EPSON V370掃描儀;中速定量濾紙;D-葡萄糖(超純級);葡萄糖氧化酶(>180U/mg);辣根過氧化酶(>300unit/mg);碘化鉀(>99.99%);烘干箱;噴墨打印機。

    2.2 制備紙質(zhì)傳感器

    首先配置體積比為2%的AKD-正庚烷混合試劑,加入噴墨打印機墨盒中。并使用計算機設(shè)計規(guī)則的圖樣,打印圖案再濾紙,將制備好的濾紙圖樣放置于溫度為100C°的烘干箱中,烘烤10分鐘后使之固化AKD,固化的AKD起到限制流體流動的作用。沒有AKD的部分為親水區(qū)域,用于流體流動和和化學(xué)反應(yīng)。比色反應(yīng)參考文獻[3]中的葡萄糖檢測模型。葡萄糖與氧氣在葡萄糖氧化酶(GOD)催化下反應(yīng)生成葡萄糖酸和H2O2,H2O2與碘離子在辣根過氧化酶(HRP)催化下反應(yīng)生成褐色碘,反應(yīng)區(qū)表面由微黃變?yōu)楹稚?。色變信息被成像設(shè)備捕獲,可以通過計算機軟件分析色差來獲得樣品濃度信息。

    3 結(jié)果和討論

    3.1 緩沖機理

    圖1 流體壓強變化圖

    流體進入紙質(zhì)介質(zhì),接觸角的變化造成流體前端壓強的變化,直接改變了流體流速的大小。但是,通過設(shè)置一條流道,讓反應(yīng)物質(zhì)經(jīng)過流道,再進入有效區(qū)域的方法,能很大地改善流體進入紙質(zhì)介質(zhì)的流速情況[4]。其流道的長度由著名的Lucas-Washburn方程決定:

    實際物理過程為液體接觸紙基前的那一刻,液體以近似球形的方式被吸附在移液器槍頭上。當(dāng)液體接觸紙質(zhì)介質(zhì)后,紙質(zhì)介質(zhì)將槍頭上的液體吸取至紙質(zhì)介質(zhì)中。這一過程耗時極短,液體的形狀快速變化,液體受力不平衡方向被確定為箭頭所指方向。當(dāng)穩(wěn)定時,已經(jīng)被紙質(zhì)介質(zhì)吸取部分體積的液體形成拱形,接觸角被假設(shè)為直角。這時液體前進面所受壓強被決定,是箭頭末端橫截面所受大氣壓強與毛細吸力壓強的差值。當(dāng)干燥紙質(zhì)介質(zhì)不停吸取拱形水珠時,造成接觸角不停減小,降低。當(dāng)接觸角為零時,將固定在[5]。因此,接觸角變化期間,液體傳輸?shù)穆烦桃矊簧羁痰难芯?,其機理如圖1所示。

    球形液體從移液器到紙質(zhì)界面上時,存在形變和需要穩(wěn)定形態(tài)的時間,這一時間極短,在建模分析時被忽略。因此可以用一個簡單的線性方程描述了過程中接觸角與時間的關(guān)系。

    為方便手工操作,箭頭長方形區(qū)域?qū)挾仍O(shè)定為3mm,滴定液體體積為5.5uL,接觸角變化過程持續(xù)約1.5s。水表面張力=72.8mN/m;平均孔半徑=4.5μm;水粘度在25°時為=8.9×10-4Pa·sec[6],最終計算得到L=8.9mm。為了降低試劑的耗量,流道長度被設(shè)計成8mm,三角形邊長也設(shè)計為8mm。圖2是時間與緩沖距離關(guān)系曲線關(guān)系圖。

    圖2 時間與緩沖距離關(guān)系曲線

    3.2 不同圖案對均勻度的改善效果

    圖3制作兩種圖案的紙質(zhì)器件,一種為簡單正正方形,邊長8mm。一種為箭頭型,長方形區(qū)域3x10mm。分別使用兩種紙質(zhì)平臺制作葡萄糖傳感器。傳感器在中心處滴定葡萄糖試劑,箭頭形狀的傳感器在箭頭末端滴定葡萄糖試劑,葡萄糖濃度分別為7mM和9mM。常溫反應(yīng)25分鐘后,分析正方形區(qū)域的顏色標(biāo)準偏差。結(jié)果如圖,實心正方形數(shù)據(jù)點為1傳感器的標(biāo)準偏差值,空心正方形為箭頭形傳感器標(biāo)準偏差值。通過一段路程的緩沖,反應(yīng)區(qū)均勻性有20個灰度的提升。實心正方形傳感器的顏色分布較為明顯,褐色較多分布在三角形邊緣。試劑進入箭頭圖案的傳感器,顏色在反應(yīng)區(qū)中較為均勻。

    圖3 均勻性改善圖

    4 結(jié)論

    綜上所述,通過對緩沖效果的機理研究,確定其緩沖長度,設(shè)計一種帶有緩沖效果的紙質(zhì)器件。這種緩沖器件,可以改善其物質(zhì)均勻性,從而降低紙質(zhì)傳感器在檢測分析中的重復(fù)次數(shù)。

    [1]P.vonLode,Clin.Biochem.2005,38,591-606.

    [2]D.Mabey,R.W.Peeling,A.Ustianowski,M.D.Perkins,Nat.Rev.Microbiol.2004,2,231-240.

    [3]A.S.Daar,H.Thorsteinsdottir,D.K.Martin,A.C.Smith,S.Nast,P.A.Singer,Nat.Genet.2002,32,229-232.

    [4]R.C.Willis,Anal.Chem.2006,78,5261-5265.

    [5]Fenton,E.M.;Mascarenas,M.R.;L_opez,G.P.;Sibbett,S.S.ACSAppl.Mater,Interfaces2009,1,124.

    [6]Martinez,A.W.;Phillips,S.T.;Butte,M.J.;Whitesides,G.M.Angew.Chem.,Int.Ed.2007,14,1364.

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