出血性膀胱炎患者尿中BK病毒的陽(yáng)性率調(diào)查分析

周佳子 董萍5006江蘇省蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院4300江蘇省鹽城市射陽(yáng)縣中醫(yī)院

出血性膀胱炎患者尿中BK病毒的陽(yáng)性率調(diào)查分析

周佳子1董萍2
215006江蘇省蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院1
224300江蘇省鹽城市射陽(yáng)縣中醫(yī)院2

目的：探討造血干細(xì)胞移植術(shù)后并發(fā)出血性膀胱炎患者中BK病毒的陽(yáng)性率。方法：造血干細(xì)胞移植術(shù)后并發(fā)出血性膀胱炎患者30例作為觀察組，30例健康成人為對(duì)照組，運(yùn)用PCR檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)尿中的BK病毒DNA。結(jié)果：觀察組26例檢測(cè)出BK病毒DNA，病毒尿持續(xù)陽(yáng)性中位時(shí)間7周（2～14周），對(duì)照組均未檢出BK病毒。結(jié)論：造血干細(xì)胞移植術(shù)后出血性膀胱炎是常見(jiàn)的并發(fā)癥之一，在這些患者中病毒尿的發(fā)生率明顯增高，BK病毒可能參與出血性膀胱炎的發(fā)病過(guò)程。

BK病毒；出血性膀胱炎；造血干細(xì)胞移植

BK病毒是多瘤病毒家族亞成員之一，系DNA病毒，BK病毒廣泛感染人群，最新統(tǒng)計(jì)發(fā)病率7％～68％［1］。出現(xiàn)臨床癥狀的患者常限于免疫功能缺陷的個(gè)體，當(dāng)機(jī)體免疫功能受抑制時(shí)復(fù)活，大量復(fù)制而致?。?］。出血性膀胱炎是造血干細(xì)胞移植后常見(jiàn)的并發(fā)癥之一［3］，嚴(yán)重影響移植后的生存率，導(dǎo)致多臟器的衰竭。除藥物和排異因素外，病毒感染尤其是BK病毒所引起的作用也越來(lái)越引起人們的重視。

資料與方法

2011-2012年收治接受造血干細(xì)胞移植后合并出血性膀胱炎患者30例，作為觀察組，同時(shí)選擇正常健康人30例作為對(duì)照組。收集兩組的尿液進(jìn)行檢測(cè)。出血性膀胱炎按臨床檢驗(yàn)結(jié)果分四個(gè)等級(jí)［4］：①Ⅰ級(jí)：鏡下血尿；②Ⅱ級(jí)：肉眼血尿；③Ⅲ級(jí)：肉眼血尿伴隨血凝塊；④Ⅲ-Ⅳ級(jí)伴有尿道梗塞導(dǎo)致腎功能損傷的表現(xiàn)。30例出血性膀胱炎患者中鏡下血尿9例、肉眼血尿18例、肉眼血尿伴隨血凝塊3例。

尿液DNA的PCR檢測(cè)：高速離心（8 000r/min，3min）取尿液上清200μL，用病毒基因組DNA提取試劑盒（北京康為世紀(jì)產(chǎn)品）提取病毒DNA。PCR檢測(cè)：正向引物：5'AGTCTTTAGGGTCTTCTACC3'，反向引物：5'GGTGCCAACCTATGCAACAG3'［5］；反應(yīng)體系：總體積25μL，其中PCR-mixture 12.5μL（含0.1 U Taq酶，500μmol/L dNTP，3mmol/LMgCl2等），正向、反向引物各0.5μL，DNA模板5μL，滅菌雙蒸水6.5μL。反應(yīng)條件：94℃5min，94℃45 s，57℃30 s，72℃30 s，共40個(gè)循環(huán)，72℃10min。BK病毒PCR產(chǎn)物176bp大小，用2％瓊脂糖凝膠電泳觀察。每次擴(kuò)增均以雙蒸水為模板作為為陰性參照，BK病毒DNA為模板作為陽(yáng)性參照。

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用χ2檢驗(yàn)，t檢驗(yàn)及方差分析等方法分析。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

觀察組26例檢測(cè)出BK病毒DNA，病毒尿持續(xù)陽(yáng)性中位時(shí)間7周（2～14周），對(duì)照組均未檢出BK病毒。

討論

雖然造血干細(xì)胞移植后BK病毒在患者尿中的檢出率顯著增高，但經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，病毒濃度與病毒尿的出現(xiàn)可能與年齡、供/受者CMV感染血清學(xué)狀態(tài)、性別、基礎(chǔ)疾病、預(yù)處理方案、供者來(lái)源、干細(xì)胞來(lái)源（骨髓/外周血）、移植后血液學(xué)重建速度、GVHD嚴(yán)重程度、GVHD預(yù)處理方案等臨床因素不存在顯著相關(guān)［6］。免疫功能低下的患者體內(nèi)人類多瘤病毒被激活，近年來(lái)引發(fā)的相關(guān)疾病逐漸受到關(guān)注，如艾滋病合并JCV相關(guān)的進(jìn)行性多灶性白質(zhì)腦病（PML）。腎移植后患者并發(fā)BKV相關(guān)性腎病，導(dǎo)致暫時(shí)甚至永久性腎功能不全，是腎移植失敗的原因之一［7-8］。BK病毒感染、巨細(xì)胞病毒感染等因素可共同促進(jìn)出血性膀胱炎的發(fā)生。

本研究結(jié)果顯示，觀察組26例檢測(cè)出BK病毒DNA，病毒尿持續(xù)陽(yáng)性中位時(shí)間7周（2～14周），對(duì)照組均未檢出BK病毒。因此，造血干細(xì)胞移植術(shù)后出血性膀胱炎是常見(jiàn)的并發(fā)癥之一，在這些患者中病毒尿的發(fā)生率明顯增高，BK病毒可能參與出血性膀胱炎的發(fā)病過(guò)程。

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Investigation and analysis of BK virus positive in the urine of patients with hem orrhagic cystitis

Zhou Jiazi1，Dong Ping2
The First Hospital Affiliated to Suzhou University，Jiangsu Province 2150061
The Traditional Chinese Medicine Hospital of Sheyang County in Yancheng City，Jiangsu Province 2243002

Objective：To explore the BK virus positive in the urine of patientswith hemorrhagic cystitis after hematopoietic stem cell transplantation.Methods：30 cases of hemorrhagic cystitis patients after hematopoietic stem cell transplantation were as the observation group，and 30 cases of healthy adults were as the controlgroup.The BK virus DNA in urinewere detected using PCR detection technology.Results：26 cases of the observation group had BK virus DNA detected.Themedian duration of positive virus urine was 7（2～14）weeks.The control group had no BK virus detected.Conclusion：Hemorrhagic cystitis is one of common complications after hematopoietic stem cell transplantation，in which the virus in the urine has significantly higher incidence，and BK virusmaybe involved in the pathogenesis of hemorrhagic cystitisprocess.

BK virus；Hemorrhagic cystitis；Hematopoietic stem cell transplantation

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.1.82