大鼠應(yīng)激性潰瘍模型復(fù)制及埃索美拉唑的干預(yù)效果

楊麗娟　陳立松　李　冰　段大航　鄒春旭　謬欣格　劉艷波

(北華大學基礎(chǔ)醫(yī)學院機能實驗部，吉林　吉林　132013)

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大鼠應(yīng)激性潰瘍模型復(fù)制及埃索美拉唑的干預(yù)效果

楊麗娟陳立松李冰段大航鄒春旭1謬欣格1劉艷波

(北華大學基礎(chǔ)醫(yī)學院機能實驗部，吉林吉林132013)

〔摘要〕目的復(fù)制大鼠應(yīng)激性潰瘍動物模型并進行預(yù)防性治療。方法24只大鼠隨機分成3組，每組8只。實驗前埃索美拉唑組灌胃埃索美拉唑2.4 mg/kg，模型組灌胃生理鹽水1 ml/d，共3 d，正常對照組不做任何處理。采用冷藏法制作應(yīng)激性胃潰瘍大鼠模型。對比3組胃黏膜的潰瘍程度并測定胃內(nèi)pH值變化。結(jié)果正常對照組胃黏膜表面光滑，呈粉白色，無任何潰瘍面。其他兩組均有不同程度胃潰瘍，以模型組潰瘍程度最嚴重，沿著胃黏膜褶皺凸起的部位有多發(fā)的條索狀出血帶及點狀出血，呈咖啡色，黏膜水腫、糜爛、潰瘍嚴重；與模型組比較，埃索美拉唑組胃潰瘍程度明顯減輕(P<0.05)。與正常對照組比較，模型組胃內(nèi)pH值降低(P<0.05)；與模型組比較，埃索美拉唑組胃內(nèi)pH值有一定程度增加。結(jié)論冷應(yīng)激可用來復(fù)制大鼠胃潰瘍模型，埃索美拉唑?qū)ξ笣兙哂蓄A(yù)防作用。

〔關(guān)鍵詞〕應(yīng)激性胃潰瘍；埃索美拉唑

1北華大學第一臨床學院

第一作者：楊麗娟(1980-)，女，實驗師，碩士，主要從事機能實驗學研究。

當機體內(nèi)外環(huán)境發(fā)生改變或者受到社會、心理因素刺激時，可引起一系列全身性非特異性適應(yīng)反應(yīng)，稱為應(yīng)激或應(yīng)激反應(yīng)。在遭受各類重傷(包括大手術(shù))、重病和其他應(yīng)激情況下，機體出現(xiàn)胃、十二指腸黏膜的急性病變稱應(yīng)激性潰瘍，其主要表現(xiàn)為黏膜糜爛、淺潰瘍、滲血等，少數(shù)潰瘍可較深或穿孔，當潰瘍侵蝕大血管時，可引起大出血?；颊咭坏┎l(fā)應(yīng)激性潰瘍大出血，其病死率可達50%以上〔1〕。老年人常見的疾病中，如腦出血、腦梗死、心肌梗死等原發(fā)病的基礎(chǔ)上可誘發(fā)應(yīng)激性潰瘍，是嚴重的并發(fā)癥之一，而且較非老年組預(yù)后差〔2〕。本實驗旨在復(fù)制應(yīng)激性胃潰瘍大鼠模型及探討埃索美拉唑?qū)ξ笣兊姆乐螜C制。

1材料與方法

1.1實驗動物Wistar大鼠24只，雌雄不拘，體重180～250 g，由吉林大學白求恩醫(yī)學院實驗動物中心提供。隨機分為正常對照組、模型組和埃索美拉唑組，每組8只。

1.2藥品與器材海爾冰箱、大鼠固定器(成都泰盟)、pH計(上海雷磁)、哺乳動物手術(shù)器械一套、大鼠灌胃器、玻璃板、放大鏡、埃索美拉唑、10%甲醛，0.9%生理鹽水等。

1.3實驗前準備實驗前以2.4 mg/kg埃索美拉唑灌胃，模型組給予1 ml生理鹽水灌胃，共3 d。最后一次給藥后所有大鼠均禁食24 h，自由飲水。正常對照組不做特殊處理。

1.4應(yīng)激性胃潰瘍模型復(fù)制除正常對照組外，其他兩組固定在大鼠固定器內(nèi)，倒置放入冰箱4℃冷藏室2 h后取出。

1.5胃內(nèi)pH測定模型復(fù)制完畢，取下大鼠，用25%烏拉坦腹腔麻醉，4 ml/kg。沿腹部中線縱行打開腹腔，找到胃，分別結(jié)扎賁門和幽門下方一段十二指腸后剪斷胃與食管及十二指腸連接處，取出胃。為避免針頭造成的創(chuàng)傷被誤認為潰瘍，所以要從十二指腸段打入生理鹽水2 ml，輕輕震蕩后取出胃液，離心，1 000 r/min,5 min，用上清液進行胃內(nèi)批pH值測定。

1.6胃潰瘍觀察從十二指腸處向胃內(nèi)注射10%甲醛溶液約10 ml(根據(jù)胃的大小掌握劑量，充盈即可，向胃內(nèi)注射甲醛時注意要緩慢推注，避免用力過猛使甲醛迸出造成不必要的傷害或?qū)⑽笓纹?，再將胃放入10%甲醛溶液中浸泡15 min固定；取出胃，沿著胃大彎剖開，用生理鹽水將胃內(nèi)食糜輕輕沖洗干凈，將胃平放于玻璃板上，用放大鏡觀察潰瘍大小及數(shù)量，判定潰瘍指數(shù)。

1.7結(jié)果判定潰瘍的嚴重程度根據(jù)文獻〔3〕標準來判定：斑點糜爛計1分；糜爛長度<1 mm 2分；1～2 mm 3分；2～3 mm 4分；>4 mm 5分；如果寬度>1 mm則加倍，并累計得分?！?分為較大、較深的潰瘍，3～4分為中度潰瘍，1～2分為輕度潰瘍。

1.8統(tǒng)計學方法利用SPSS13.0 統(tǒng)計軟件進行t檢驗。

2結(jié)果

2.1各組胃黏膜潰瘍程度的變化正常對照組胃黏膜表面光滑，呈粉白色，無水腫、無潰瘍。模型組和埃索美拉唑組胃打開后，可以看到沿著胃黏膜褶皺凸起的部位有多發(fā)的條索狀出血帶及點狀出血，主要集中在有腺區(qū)，呈咖啡色，黏膜水腫、糜爛、潰瘍明顯，以模型組最為嚴重；與模型組比較，埃索美拉唑組潰瘍程度明顯減輕(P<0.05)，見圖1。

圖1各組胃大體形態(tài)改變

2.2各組胃潰瘍嚴重程度比較正常對照組后胃腺部光滑，無斑點糜爛；模型組1～2分的潰瘍共有21個，3～4分30個，≥5分23個，埃索美拉唑組1～2分的潰瘍共有28個，3～4分19個，≥5分2個，各組間胃潰瘍嚴重程度差異顯著(P<0.05)，見表1。

表1　各組胃潰瘍嚴重程度比較±s,n=8，個)

與正常對照組比較:1)P<0.05，與模型組比較:2)P<0.05；下表同

2.3各組胃內(nèi)pH值變化及最終胃黏膜潰瘍指數(shù)判定與正常對照組比較，模型組胃內(nèi)pH值降低(P<0.05)，與模型組比較，埃索美拉唑組胃內(nèi)pH值有一定程度增加(P<0.05)。模型組潰瘍指數(shù)與正常組有明顯差異(P<0.05)，埃索美拉唑組與正常對照組和模型組潰瘍指數(shù)均差異明顯(P<0.05)。見表2。

表2　各組胃液pH值變化及胃黏膜潰瘍

3討論

重傷重病時應(yīng)激性潰瘍發(fā)病率可達75%～100%，是重癥監(jiān)護室常見的并發(fā)癥之一，對疾病的發(fā)展、預(yù)后具有重要的影響〔4〕。應(yīng)激性潰瘍的發(fā)生機制主要與以下因素有關(guān)：①胃黏膜缺血：應(yīng)激時交感-腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)的強烈興奮，釋放大量縮血管物質(zhì)，腹腔內(nèi)臟血管收縮，胃黏膜缺血缺氧，局部產(chǎn)生微循環(huán)障礙，造成胃腸黏膜的損害。胃黏膜缺血后，其上皮細胞生成的HCO3-和黏液減少，使得胃黏膜防御功能下降。此時，反流入胃黏膜內(nèi)的H+增加，加之胃黏膜缺血，不能及時運走H+，導致潰瘍形成。另一方面，當胃黏膜缺血時，細胞能量代謝障礙，局部三磷酸腺苷(ATP)生成受到抑制，黏膜表面上皮細胞更新緩慢，再生和修復(fù)能力降低，也是應(yīng)激性潰瘍形成的基本原因之一。②應(yīng)激時，下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)(HPA)興奮，導致糖皮質(zhì)激素分泌增加。目前有兩種觀點，一種認為糖皮質(zhì)激素增加，使胃酸和胃蛋白酶分泌增多，加重了胃黏膜損傷，對機體有害。另一種觀點則通過實驗證實了糖皮質(zhì)激素是保護激素，利用糖皮質(zhì)激素受體阻斷劑米非司酮，使糖皮質(zhì)激素產(chǎn)生減少，應(yīng)激后胃黏膜損傷加重〔5～7〕。③神經(jīng)內(nèi)分泌功能失調(diào)〔8、9〕，當應(yīng)激發(fā)生時，血中促腎上腺皮質(zhì)激素增加，前列腺素減少〔10〕，大量的氧自由基也參與了應(yīng)激性潰瘍形成〔11〕等。

本實驗采用的是倒置冷應(yīng)激刺激，一方面冷應(yīng)激時交感腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)強烈興奮，胃黏膜供血相對減少；另一方面鹽酸產(chǎn)生增加，同時由于倒置，鹽酸進入到腸道減少，使得胃內(nèi)鹽酸進一步聚集，加重胃黏膜損傷。再者，倒置時膽汁、胰液會逆流入胃，在胃內(nèi)積存，損傷胃黏膜表面細胞。已有報道〔12〕，膽汁中的膽鹽可降低胃黏膜的電位差，增加胃黏的通透性，使H+更容易通過胃黏膜；并且膽鹽對黏膜上皮細胞膜的脂質(zhì)有溶解作用，導致胃黏膜損傷。除阿司匹林和酒精外，膽鹽是造成胃黏膜損害排行第三位的物質(zhì)〔13〕。

埃索美拉唑呈弱堿性，是奧美拉唑的S-異構(gòu)體。為壁細胞中質(zhì)子泵的特異性抑制劑，在壁細胞泌酸微管的高酸環(huán)境中濃縮并轉(zhuǎn)化為活性形式——次磺酸酰胺，從而抑制該部位的H+/K+-ATP酶，對基礎(chǔ)胃酸分泌和刺激的胃酸分泌均產(chǎn)生抑制作用。本實驗說明埃索美拉唑?qū)深A(yù)見的應(yīng)激性潰瘍(如臨床大手術(shù)前)到來之前可以預(yù)防性使用，達到預(yù)防或減輕潰瘍程度的效果。

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〔2014-11-17修回〕

(編輯苑云杰)

通訊作者：劉艷波(1974-)，女，博士，副教授，碩士生導師，主要從事病理生理學及醫(yī)學機能實驗學研究。

基金項目：北華大學健峰教研基金資助項目(2014062504)

〔中圖分類號〕R573.1

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2015)22-6364-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2015.22.021