影響生化自動(dòng)分析的因素及對(duì)策

劉樹(shù)生

山東省青州市婦幼保健院，山東青州 262500

比色分析是生化自動(dòng)分析的主要原理，利用不同價(jià)態(tài)元素特定的顏色對(duì)溶液粒子濃度進(jìn)行分析，從而判斷反應(yīng)物及生成物的增加或減少。催化物、反應(yīng)物等測(cè)定物質(zhì)的濃度同離子顏色成正比關(guān)系，可以通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)精準(zhǔn)含量物質(zhì)相對(duì)比的方式，分析樣品的物質(zhì)含量。在化學(xué)平衡條件下，依據(jù)公式，參考將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)同樣品吸光度的值，即可測(cè)定樣品的含量。

1 分析過(guò)程外對(duì)生化自動(dòng)分析結(jié)果的影響因素及對(duì)策

1.1 生理因素

生理因素是影響生化自動(dòng)分析結(jié)果的一個(gè)重要因素，可以分為不可控因素、可控因素，具體包括季節(jié)變化、體位變化、生理性波動(dòng)、妊娠、運(yùn)動(dòng)、海拔、性別、生活方式、情緒和年齡等多方面內(nèi)容。

性腺激素含量會(huì)因性別的不同存在差異，女性血清水平普遍低于男性，女性不同生理周期內(nèi)性腺激素也會(huì)不斷變化。針對(duì)這一問(wèn)題應(yīng)針對(duì)性別的不同，合理設(shè)置檢測(cè)項(xiàng)目和參考范圍，降低對(duì)生化自動(dòng)分析檢測(cè)結(jié)果的影響；同成年人相比，新生兒和生長(zhǎng)期兒童的血清總膽紅素、堿性磷酸酶水平各不相同，生化檢測(cè)結(jié)果會(huì)因年齡的不同而改變，應(yīng)在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中要針對(duì)年齡階段的不同而制定準(zhǔn)確的參考范圍[1]；受運(yùn)動(dòng)因素的影響，機(jī)體代謝速度加快，生化檢測(cè)結(jié)果也會(huì)不同，在對(duì)患者進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，應(yīng)盡量選擇清晨或起床前對(duì)住院病人進(jìn)行抽血檢測(cè)，門(mén)診患者應(yīng)在休息15 min后進(jìn)行。

1.2 飲食因素

人體多種血液成分都會(huì)受飲食的影響，不飽和脂肪酸食物、高蛋白食品、咖啡因等多種食物分別會(huì)使膽固醇降低、BUN、UA升高和游離脂肪酸、腎上腺素含量增加[2]。進(jìn)食后進(jìn)行生化分析，還會(huì)因血脂質(zhì)的增多使血漿、血清呈現(xiàn)乳白渾濁狀態(tài)，影響生化自動(dòng)分析等操作，干擾比色和檢測(cè)的精確程度。為了避免飲食對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果帶來(lái)的影響，應(yīng)采取空腹采血的方式，保證患者空腹時(shí)間在16 h內(nèi)，從而提高分析的準(zhǔn)確性。

1.3 標(biāo)本采集因素

患者進(jìn)行標(biāo)本采集工作時(shí)間的不同，會(huì)導(dǎo)致血液化學(xué)成分發(fā)生較大的變化，在波動(dòng)的狀況下很難保證生化檢測(cè)結(jié)果的精確程度。在臨床樣本采集時(shí)盡量選取統(tǒng)一的時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)，在進(jìn)食12 h后或清晨空腹時(shí)進(jìn)行采集，確保檢驗(yàn)條件相符，使檢測(cè)結(jié)果可以反應(yīng)患者的真實(shí)狀況。此外，血液標(biāo)本采集部位也是影響生化檢測(cè)結(jié)果的因素之一，應(yīng)將血清標(biāo)準(zhǔn)作為主要的臨床生化分析樣本，排除標(biāo)本采集部位的干擾。

1.4 藥物因素

化學(xué)、物理干擾是藥物影響生化自動(dòng)分析結(jié)果的兩個(gè)關(guān)鍵因素，其中前者主要是因?yàn)樗幬锘瘜W(xué)性質(zhì)干擾患者的物質(zhì)測(cè)定，而后者為患者血清物理性質(zhì)因藥物分解而產(chǎn)生的影響。如果長(zhǎng)期服用藥物，患者肝腎功能也會(huì)受藥物副作用的影響，從而干擾生化檢測(cè)結(jié)果。住院患者在給予點(diǎn)滴輸注治療后，導(dǎo)致部分項(xiàng)目檢測(cè)因留取標(biāo)本稀釋而低于正常值，使檢測(cè)結(jié)果不夠準(zhǔn)確。在排除藥物干擾因素時(shí)，工作人員要在停藥后對(duì)患者進(jìn)行采取樣本，避開(kāi)服藥4 h或靜點(diǎn)時(shí)間段。

1.5 標(biāo)本處理及儲(chǔ)存因素

臨床檢驗(yàn)工作人員在接收檢測(cè)樣本后，應(yīng)先對(duì)樣本進(jìn)行10 min的水?。?5℃），利用離心機(jī)處理5 min，離心轉(zhuǎn)速為3000 rpm，將血清分離開(kāi)來(lái)。標(biāo)本處理后，如果放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)使樣本發(fā)生溶血現(xiàn)象，還會(huì)因?yàn)槠咸烟堑睦眉敖徒舛档脱鍢颖局衅咸烟堑暮?，不同元素的含量及部分酶的活性也?huì)發(fā)生的變化，造成生化檢測(cè)結(jié)果高于實(shí)際測(cè)定值[3]。所以應(yīng)在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)盡早進(jìn)行檢測(cè)分析，如需儲(chǔ)存時(shí)，要在密封條件下，在冰箱（4℃）中保存。

2 化學(xué)反應(yīng)條件對(duì)生化自動(dòng)分析結(jié)果的影響因素及對(duì)策

2.1 濕度因素

化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中，濕度對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果的影響主要體現(xiàn)在以下兩個(gè)方面：在0～4℃的條件下，酶參與的反應(yīng)不會(huì)發(fā)生改變，但酶活性會(huì)因濕度的增大而降低，從而降低了反應(yīng)速度；無(wú)酶參與的反應(yīng)中，反應(yīng)速度會(huì)隨濕度的增大而加快。最佳濕度的選擇是保障生化檢測(cè)準(zhǔn)確性的前提，要參考試劑規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，合理調(diào)節(jié)濕度范圍。

2.2 反應(yīng)物濃度因素

反應(yīng)速度同反應(yīng)物濃度有直接的關(guān)系，反應(yīng)物濃度越大反應(yīng)速度越快，試劑穩(wěn)定較差、樣本過(guò)早消耗都會(huì)使底物濃度發(fā)生變化，致使?jié)舛鹊陀趯?shí)際標(biāo)準(zhǔn)，生化檢測(cè)結(jié)果偏低。而在生化自動(dòng)分析過(guò)程中，采用比色方法進(jìn)行操作時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格的控制相應(yīng)的范圍，超出范圍會(huì)導(dǎo)致生化檢測(cè)結(jié)果過(guò)高。通過(guò)機(jī)械設(shè)定極限值的方法，可以更好的限制反應(yīng)物濃度值，超出標(biāo)準(zhǔn)后會(huì)自動(dòng)啟動(dòng)警報(bào)器，需要進(jìn)行調(diào)節(jié)后在進(jìn)行檢測(cè)。在確定參考范圍時(shí)，可以取線性范圍的極限值，還采用生化自動(dòng)分析儀檢測(cè)吸光度，若反應(yīng)物吸光度不符合標(biāo)準(zhǔn)數(shù)值時(shí)，要重新進(jìn)行配置。

2.3 催化劑因素

激活劑、抑制劑和酶濃度是催化劑因素對(duì)生化自動(dòng)分析結(jié)果的主要體現(xiàn)，其中抑制劑對(duì)反應(yīng)的進(jìn)行起到阻礙的作用，而激活劑可以加快反應(yīng)速度，在試劑中添加這兩種催化劑后，很容易發(fā)生試劑交叉感染、反應(yīng)盤(pán)感染等問(wèn)題。除此之外，比色皿透光性、光徑，生化自動(dòng)分析儀掃描寬度、中心波長(zhǎng)，介質(zhì)成分和稀釋程度等因素都會(huì)影響計(jì)算結(jié)果。實(shí)際分析檢測(cè)時(shí)，要詳細(xì)的確定各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件，如果外界反應(yīng)條件出現(xiàn)變化，應(yīng)重新進(jìn)行分析檢測(cè)。要想使酶濃度與酶反應(yīng)速度呈線性關(guān)系，應(yīng)確保反應(yīng)物的濃度，當(dāng)分析檢測(cè)物質(zhì)屬于酶的情況，要避免濃度過(guò)大，一旦超出標(biāo)準(zhǔn)，要及時(shí)進(jìn)行稀釋處理，重新測(cè)定。

2.4 pH值因素

酶分子的解離狀態(tài)會(huì)因pH值的變化而發(fā)生改變，不同PH值條件下，反應(yīng)物與酶相互結(jié)合的過(guò)程受到干擾，最終導(dǎo)致化學(xué)反應(yīng)速度減慢，加樣針污染、反應(yīng)盤(pán)污染是pH值影響生化檢測(cè)結(jié)果的兩個(gè)主要方面。檢測(cè)試劑在進(jìn)行自動(dòng)分析的過(guò)程中，由于樣品量較少，所以酸堿程度的差異會(huì)嚴(yán)重影響試劑檢測(cè)結(jié)果，酸堿緩沖物質(zhì)無(wú)法發(fā)揮較大的作用[4]。在生化自動(dòng)分析時(shí)，一定要將反應(yīng)盤(pán)進(jìn)行徹底的清洗，分別用清水、含氯消毒劑、蒸餾水進(jìn)行沖洗和浸泡消毒，晾干后即可應(yīng)用于臨床分析檢測(cè)。此外，在加樣前，要利用蒸餾水對(duì)加樣針進(jìn)行熏蒸，降低樣本感染情況的發(fā)生機(jī)率，就是更換蒸餾水清洗液，杜絕一切感染源。

3 生化自動(dòng)分析儀的使用影響因素及對(duì)策

除分析過(guò)程外干擾因素、化學(xué)反應(yīng)條件干擾因素外，生化自動(dòng)分析儀是否正常使用也會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生一定程度的影響。如果操作使用不規(guī)范，就會(huì)增大重復(fù)檢測(cè)的次數(shù)。因此一定要加強(qiáng)對(duì)工作人員的約束，做好反應(yīng)試劑、定標(biāo)物質(zhì)選取等工作，參照使用說(shuō)明，提高測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

臨床測(cè)量工作人員在使用生化自動(dòng)分析儀時(shí)，一定要根據(jù)操作規(guī)范進(jìn)行測(cè)量，并定期對(duì)儀器進(jìn)行保養(yǎng)，做好日、周、月的維護(hù)工作。遇到檢測(cè)項(xiàng)目轉(zhuǎn)移的情況，應(yīng)徹底清洗比色皿，對(duì)剩余試劑進(jìn)行合理的處理，以免影響后期分析檢測(cè)工作的順利進(jìn)行。在試劑使用前，一定要查看是否在使用期限內(nèi)，并依據(jù)具體說(shuō)明對(duì)相關(guān)參數(shù)進(jìn)行合理的設(shè)置，儲(chǔ)存試劑的環(huán)境溫度要控制在2℃～8℃的范圍內(nèi)。如果試劑發(fā)生污染的情況，要適當(dāng)使吸液量增大，通常將項(xiàng)目檢測(cè)試劑的吸液量標(biāo)準(zhǔn)設(shè)為400～700 uL，通常選取500 uL，提升生化測(cè)定精確度，將交叉感染限制在1%的范圍[5]。

在對(duì)樣品進(jìn)行處理的過(guò)程中，要做到以下幾點(diǎn)：避免樣品在不封閉的狀況下放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；依據(jù)規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)，合理儲(chǔ)存、處理樣品；測(cè)定時(shí)要降低樣品中防腐劑、藥物和抗凝劑等物質(zhì)的影響；確保樣品無(wú)渾濁、凝塊的現(xiàn)象；作樣本空白，降低乳糜微粒和溶血對(duì)生化測(cè)定結(jié)果的干擾。在選擇延遲時(shí)間設(shè)定方法、測(cè)試方法時(shí)，盡量選取兩點(diǎn)法、速率法及終點(diǎn)法等。在應(yīng)用兩點(diǎn)法時(shí)，應(yīng)作樣本空白；而采取速率法時(shí)，在37℃、30℃和25℃的環(huán)境下，要分別確保15 s、12 s和10 s以上的延時(shí)；使終點(diǎn)法的延時(shí)時(shí)間在10 s以上。

[1]王瑞麗,孫中立,劉好.影響臨床生化自動(dòng)化分析前質(zhì)量的因素[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志，2008(35):8633-8634.

[2]李熙建.臨床生化檢驗(yàn)前過(guò)程對(duì)檢驗(yàn)質(zhì)量的影響分析[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志，2008(16):3807-3808.

[3]王興寧,李靜.臨床生化自動(dòng)化分析后的質(zhì)量控制[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2005(2):223.

[4]朱國(guó)朝,袁紅萍.臨床生化定量測(cè)定室內(nèi)質(zhì)量控制方法的設(shè)計(jì)和應(yīng)用[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2003(3):39-40.

[5]高佩增,張健,楊清溪.全自動(dòng)生化分析儀應(yīng)用的質(zhì)量保證[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志，2002(3):463.