高效液相色譜法對(duì)飲用水中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)分析研究

【摘要】目的　建立一種固相膜萃取-高效液相色譜法，測(cè)定飲用水中12種氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘余量。方法　采用高效液相色譜測(cè)定法：將濾水樣真空后，使用乙酸乙酯洗脫濾膜，最后甲醇溶解和氮?dú)獯蹈上疵撘?。結(jié)果 6次重復(fù)性試驗(yàn)后，結(jié)果表明濃度0.05～12.5 mg/L甲萘威，以及濃度0.1～25 mg/L其他幾種物質(zhì)，其線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r均≥0.999。最低檢測(cè)濃度：S/N＝11時(shí)對(duì)應(yīng)的樣品濃度，檢出限：S/N＝4。平均回收率在56.3%～96.4%，精密度＜7.6%。結(jié)論 根據(jù)本文所提出的方法，分離效果好，樣品前處理便捷，檢測(cè)靈敏度較高，并且能減少有機(jī)試劑的用量。

doi：10.3969/j.issn.1674-9316.2015.24.009

作者單位：154007 佳木斯疾病預(yù)防控制中心

Determination of Pesticide Residues in Drinking Water by High Performance Liquid Chromatography

SONG Yanjia Disease Prevention and Control Center of Jiamusi City，Jiamusi 154007，China

【Abstract】

Objective To establish a Solid Phase Extraction-High Performance Liquid Chromatography to test drinking water 12 carbamate pesticide for residualamount. Methods HPLC methods: the sample after vacuum filtration using ethyl acetate membrane，and finally dissolved in methanol and nitrogen blow eluent. Results After 6 repeated tests，it showed that the concentration of 0.05 mg / L～12.5 mg / L carbaryl，and the concentration of 0.1 mg / L～25 mg / L several other substances，a good linear correlation coefficient，r≥0.999. Minimum detectable concentration: S / N=11 corresponding sample concentration，detection limit: S / N=4. The average recovery rate was 56.3% ～96.4%，and accuracy＜7.6%. Conclusion According to the proposed method，it has good separation，sample pretreatment convenient，high sensitivity，and can reduce the amount of organic reagents.

【Key words】　HPLC，Solid phase extraction，Water，Carbamate

化學(xué)農(nóng)藥是保障農(nóng)業(yè)的重要手段，全世界每年應(yīng)用農(nóng)藥挽回的損失占全部收成的15%以上，如果不使用農(nóng)藥，農(nóng)作物會(huì)減產(chǎn)30%，而產(chǎn)品的價(jià)格會(huì)上漲70%。根據(jù)農(nóng)藥組成原料的來(lái)源分為：有機(jī)農(nóng)藥、無(wú)機(jī)農(nóng)藥、微生物農(nóng)藥和植物性農(nóng)藥。氨基甲酸酯是具有NH（CO）O-官能團(tuán)的有機(jī)化合物，由于其具有光譜、高效、分解快、對(duì)人畜低毒等優(yōu)點(diǎn)，成為應(yīng)用較廣的新開(kāi)發(fā)農(nóng)藥。而該類(lèi)農(nóng)藥的廣泛應(yīng)用，造成了地下水和其他飲用水源的污染，導(dǎo)致飲水安全隱患，因此對(duì)飲用水中氨基酸甲酯殘留檢測(cè)非常必要。 固相膜萃取技術(shù)（SPE）是在液相色譜分離基礎(chǔ)上產(chǎn)生的新型樣品檢測(cè)方法 ［1］，本研究應(yīng)用固相膜萃取法處理生活飲用水樣后，對(duì)飲用水中氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的殘留進(jìn)行高效液相色譜法檢測(cè)。

1　試驗(yàn)材料與方法

1.1　儀器及試劑

所采用的儀器有：（1）渦旋混勻器：IKAvortexgenius 3型，德國(guó)生產(chǎn)；（2）固相萃取膜：ENVI-18DSK 47 mm型，美國(guó)supelco公司生產(chǎn)；（3）氮吹儀：N-EVAP 111型，美國(guó)Organomation Associates公司生產(chǎn)；（4）高效液相色譜儀：Agilent 1200，美國(guó)生產(chǎn)（配DAD檢測(cè)器）；（5）超純水系統(tǒng)：美國(guó)MillIPore 公司生產(chǎn)。

制備標(biāo)準(zhǔn)的儲(chǔ)備液：稱取250 mg標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用甲醇溶解，將容量固定至25 ml，得到濃度為1 000 mg/L的貯備液，放置在4℃條件下保存。試驗(yàn)所用的甲醇為HPLC級(jí)別，水樣為超純水，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)指的是氨基酸甲酯類(lèi)物質(zhì)，包括速滅威、滅多威、抗芽威、殺蟲(chóng)威、異丙威、涕滅威、殘滅威、甲萘威、呋喃丹等，純度均大于99.5%。

1.2　試驗(yàn)方法

1.2.1　樣品前處理 將C 18固相萃取膜裝入過(guò)濾器中，分別用10 ml乙酸乙酯、15 ml pH3及5 ml甲醇進(jìn)行水活化，應(yīng)用真空泵抽濾，液面恰好覆蓋薄膜表面為佳。 最后用15 ml乙酸乙酯分成三次洗脫，用20 ml離心管收集洗脫液，瓶壁殘留物質(zhì)用5 ml乙酸乙酯清洗。

1.2.2　測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線 提取50 ml/L的氨基甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用7：3甲醇-水對(duì)其加以稀釋， 配成濃度不等的標(biāo)準(zhǔn)系列（0.1～25 mg/L），采用0.45μm針頭進(jìn)行過(guò)濾，結(jié)果表明12種氨基甲酸酯在該區(qū)間內(nèi)具備良好的線性關(guān)系，其中相關(guān)系數(shù)r≥0.999。

2　結(jié)果與分析

2.1　色譜條件的優(yōu)化

色譜柱的確定。結(jié)果表明，分離12種氨基甲酸酯的效果，AgilentHC-C8較AgilentHC-C18優(yōu)秀；洗脫程序 ：經(jīng)過(guò)預(yù)先的試驗(yàn)，流動(dòng)相只需要使用甲醇-水即可獲得良好的色譜波峰； 確定DAD檢測(cè)波長(zhǎng)： 對(duì)氨基甲酸酯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液在不同范圍波長(zhǎng)下進(jìn)行光譜監(jiān)測(cè)分析，發(fā)現(xiàn)最優(yōu)響應(yīng)效果的波長(zhǎng)為210 nm；柱溫：我們分別采用40℃、35℃和30℃的不同柱溫進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明不同柱溫的波峰面積和出現(xiàn)波峰的時(shí)間無(wú)明顯差異，考慮到使用壽命的問(wèn)題，本文采取30℃的柱溫。

2.2　樣品前處理?xiàng)l件優(yōu)化

洗脫劑：采用0.1 mg/L的樣品，分別對(duì)乙酸乙酯、二氯甲烷、乙酸乙酯–二氯甲烷的洗脫效果進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果顯示乙酸乙酯的效果最佳。 洗脫劑劑量：加標(biāo)樣品的加標(biāo)濃度為0.1 mg/L， 分別選取20 ml、15 ml和10 ml乙酸乙酯進(jìn)行洗脫效果對(duì)比，結(jié)果表明15 ml乙酸乙酯時(shí)即可達(dá)到效果。

2.3　方法評(píng)價(jià)

最低檢測(cè)濃度、線性范圍及檢出限：6次重復(fù)性試驗(yàn)后，結(jié)果表明濃度0.05～12.5 mg/L甲萘威，以及濃度0.1～25 mg/L的其他幾種物質(zhì)，其線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r≥0.999。最低檢測(cè)濃度：S/N＝11時(shí)對(duì)應(yīng)的樣品濃度，檢出限：S/N＝4。

2.4　精密度試驗(yàn)、回收率試驗(yàn)

精密度試驗(yàn)：分別將濃度為0.1 mg/L、0.05 mg/L、0.01 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液加入水樣中，6次重復(fù)性測(cè)定結(jié)果表明：待測(cè)物質(zhì)對(duì)應(yīng)的上下限分別為7.6%、0.7%。回收率試驗(yàn)：取體積為200 ml的4份水樣，一份作空白樣，余三份試樣中加入濃度分別為0.1 mg/L、0.05 mg/L、0.01 mg/L混標(biāo)溶液，結(jié)果表明12種組分回收率為56.3%～96.4%。

2.5　測(cè)定實(shí)際樣品

采用本文的試驗(yàn)方法，對(duì)自來(lái)水末梢水進(jìn)行氨基酸脂類(lèi)農(nóng)藥殘留測(cè)定，結(jié)果表明每份水樣中農(nóng)藥殘余量均＜0.005 mg/L。

3　討論

多數(shù)的農(nóng)藥殘留均屬于有毒有害的物質(zhì)，它們廣泛存在水體、土壤、植物、大氣等我們的日常生活環(huán)境中，這種有害物質(zhì)通過(guò)不同的途徑進(jìn)入人體中，對(duì)我們的身體健康產(chǎn)生極大的危害 ［2-3］。本研究采用高效液相色譜法檢測(cè)生活飲用水中殘留的農(nóng)藥，具有堵塞少、有機(jī)溶劑用量低、富集程度高以及萃取速度快等特點(diǎn)，能夠測(cè)定飲用水中氨基甲酸酯類(lèi)的農(nóng)藥殘留量，同時(shí)因?yàn)樗軌驖M足水中氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的常規(guī)性檢測(cè)，是一種較新的檢測(cè)方法，能夠?yàn)轱嬘盟修r(nóng)藥殘留的檢測(cè)提供理論依據(jù)，簡(jiǎn)單可行。