豬口蹄疫的疫情現(xiàn)狀及防控措施的最新研究進(jìn)展

豬口蹄疫的疫情現(xiàn)狀及防控措施的最新研究進(jìn)展

項(xiàng)科順1，2，張娟1，孫紅祥1

( 1.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，浙江杭州310058;2.浙江省牧工商聯(lián)合公司)

中圖分類號(hào):S858.28文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A

收稿日期:2015-01-06

口蹄疫( FMD)是由口蹄疫病毒( FMDV)引起的一種急性、熱性和高度接觸性傳染病。易感群體為豬、牛、羊、駱駝等為主的偶蹄動(dòng)物?？谔阋甙l(fā)病率高，傳播速度快，且可遠(yuǎn)距離傳播，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織( World Organisation for Animal Health，OIE)列為動(dòng)物A類傳染病之首。該病自1514年首次被報(bào)道以來，F(xiàn)MD已蔓延至除北美和大洋洲外的世界各地，對(duì)全球畜牧業(yè)發(fā)展和世界貿(mào)易的危害性極大，每年用于預(yù)防和損失賠償耗資約60～210億美元［1］?？谔阋哂蠴型、A型、C型、亞洲Ⅰ型、南非Ⅰ型、南非Ⅱ型和南非Ⅲ型等7個(gè)血清型，每個(gè)血清型又有多種亞型;各血清型或亞型之間沒有或鮮有交叉保護(hù)，且病原體易變，給疫情的防控工作增加了一定難度［2］。

自20世紀(jì)初以來，部分發(fā)達(dá)國家，如美國、英國、加拿大和日本等國通過努力已經(jīng)消除了口蹄疫疫情。但近年來已宣布消滅口蹄疫的國家，如英國又再次爆發(fā)疫情，故再次提高了對(duì)口蹄疫的重視?？谔阋邔?duì)全球的負(fù)面影響激發(fā)了人類消除口蹄疫的愿望。消除口蹄疫不僅需要解決技術(shù)層面上的問題，而且必須克服來自社會(huì)和政治上的制約，同時(shí)還要考慮大環(huán)境等因素［3］。

本文主要就有關(guān)口蹄疫病原體、流行病學(xué)、病理特征與臨床診斷、世界疫情現(xiàn)狀與危害、防控措施及疫苗等研究進(jìn)展作一綜述，并對(duì)控制和消除口蹄疫的可能途徑提出自己的見解和觀點(diǎn)，供參考。

1　病原體

FMDV隸屬于小RNA科口蹄疫病毒屬，病毒粒子呈球形，為正二十面體結(jié)構(gòu)，分子量為6.9×106，沉降系數(shù)為146 S，直徑為24～30 nm，由病毒衣殼(占70%)和其內(nèi)的單股正鏈RNA(占30%)構(gòu)成。衣殼由60個(gè)不對(duì)稱的亞單位組成，每個(gè)亞單位均含有一份子的VP1、VP2、VP3和VP4。

VP1和VP3是主要的免疫性抗原，其中VP1含有病毒主要的抗原決定簇和中和抗體表位，是口蹄疫病毒最重要的抗原蛋白，VP3的重要性則僅次于VP1;而VP2和VP4是對(duì)免疫有一定作用的酶結(jié)構(gòu)蛋白［4］。除主要結(jié)構(gòu)蛋白外，F(xiàn)MDV衣殼還含有部分非結(jié)構(gòu)蛋白( Lab、Lb 2A、2B、2C、3A、3B、3C和3D)。

FMDV基因組RNA全長約8500個(gè)核苷酸，主要由5’非翻譯區(qū)( 5’-UTR)、開放閱讀框( ORF)、3’非翻譯區(qū)( 3’-UTR)和一個(gè)Ploy A尾組成。5’-UTR 和3’-UTR具有復(fù)雜的二級(jí)結(jié)構(gòu)，含有與病毒復(fù)制和基因表達(dá)相關(guān)的順式作用原件( CRE)，參與調(diào)控病毒蛋白翻譯和RNA復(fù)制。ORF位于基因組的中部，可分為L、P1、P2和P3四個(gè)區(qū)，編碼一個(gè)多聚蛋白，其中5’端的L區(qū)編碼L非結(jié)構(gòu)蛋白，P1區(qū)編碼VP1、VP2、VP3和VP4四種結(jié)構(gòu)蛋白，P2區(qū)編碼2A、2B和2C三種非結(jié)構(gòu)蛋白，P3編碼3A、3B、3C 和3D四種非結(jié)構(gòu)蛋白，其中3B蛋白是由編碼區(qū)三個(gè)重復(fù)的非等同基因編碼，因而可以產(chǎn)生三種不同的3B蛋白( VPg) : 3B1 ( VPg1)、3B2 ( VPg2)和3B3 ( VPg3)。VPg基因的拷貝數(shù)與RNA病毒的感染力有關(guān)［5］。

FMDV是粒子最小的RNA病毒，正是這一特性決定了病毒的易變性。FMDV具有型多易變的特點(diǎn)，目前已知有7個(gè)血清型，分別為A型、O型、C型、亞洲1型及南非Ⅰ型、南非Ⅱ型、南非Ⅲ型，其中以O(shè)型最多，A型和亞洲1型次之。每個(gè)血清型又包括多個(gè)亞型，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，迄今發(fā)現(xiàn)的亞型已達(dá)80余種。且各血清型之間沒有交叉保護(hù)力，同血清型的各亞型之間也僅有較小的交叉保護(hù)力，這是口蹄疫難以防控的主要原因之一。

2　流行病學(xué)

口蹄疫為急性、高度接觸性傳染病。FMDV生存能力很強(qiáng)，傳染性極強(qiáng)，潛伏期較短，易感動(dòng)物分布較廣，傳染源類型和傳播途徑較多，持續(xù)性感染，

傳播速度較快，并可遠(yuǎn)距離傳播，這些綜合因素造成了口蹄疫的肆虐與危害。

口蹄疫的傳染源主要是患病和帶毒動(dòng)物，尤其是水皰液、排泄物、分泌物、呼出氣體、精液等。污染的肉品、內(nèi)臟、血液、毛皮、泔水、脫落的痂皮和牧區(qū)的污水、飼料、土壤、工具和人員都是可能的傳染源。不同動(dòng)物在傳染中扮演不同的角色，綿羊是“儲(chǔ)存器”，保存病毒但不表現(xiàn)癥狀;豬是“放大器”，將致病力弱的毒株增強(qiáng)為致病力強(qiáng)的毒株;牛是“指示器”，對(duì)口蹄疫最為敏感。此外，非易感動(dòng)物也是重要的可疑傳染源。目前，F(xiàn)MDV通過跨物種傳染的概率在增加，特別是在畜牧農(nóng)業(yè)人口密集區(qū)［6］。據(jù)資料報(bào)道，人類在運(yùn)輸動(dòng)物過程中，充當(dāng)了口蹄疫傳播的主要媒介。據(jù)報(bào)道，已有研究人員從與病豬接觸后28 h的人鼻黏膜中分離出FMDV［5］。FMDV雖然對(duì)人很少感染，但由于其可在鼻咽處存活，在無生命的物體表面(包括衣物中)可存活較長時(shí)間，在病毒傳播過程中作為機(jī)械傳播的人體充當(dāng)了積極的傳播者。牧場的飼養(yǎng)人員、人工授精技術(shù)人員、獸醫(yī)、以及參觀訪問人員等與病畜接觸后，均可將病毒攜帶到任何距離的安全畜群。處于FMD潛伏期的動(dòng)物，其所有的組織、器官以及分泌物、排泄物均含有FMDV。病毒隨同感染動(dòng)物的乳汁、唾液、精液和呼出的氣體等一起排放至外部環(huán)境。肉和副產(chǎn)品均可帶毒，康復(fù)期動(dòng)物可帶毒2～3個(gè)月而造成嚴(yán)重的污染。

口蹄疫主要經(jīng)消化道、傷口，甚至完整的皮膚黏膜、呼吸道、精液等途徑感染。傳播方式主要有接觸傳播和空氣傳播兩種。接觸傳播又分為直接接觸和間接接觸。直接接觸主要是同群動(dòng)物之間，包括圈舍、牧場、集貿(mào)市場、展銷會(huì)和運(yùn)輸車輛中動(dòng)物的直接接觸，通過發(fā)病動(dòng)物和易感動(dòng)物直接接觸而傳播。間接接觸主要指媒介物機(jī)械性帶毒所造成的傳播，包括無生命的媒介物和有生命的媒介物，如場地、水源和設(shè)備、食物、器具、糞便、飼養(yǎng)員的衣物等，畜產(chǎn)品包括病畜的肉、骨、乳汁及乳制品、臟器、血、皮毛等。

據(jù)資料報(bào)道，英國在1939～1950年爆發(fā)的355次疫情中，三分之二的傳染源來自凍肉中的病毒。導(dǎo)致2001年英國疫情爆發(fā)的源頭就是當(dāng)?shù)氐募倚筮M(jìn)食了受污染的進(jìn)口食物殘?jiān)?。FMDV的氣源傳播方式對(duì)遠(yuǎn)距離傳播更具流行病學(xué)意義。最常見的方式是吸入具有傳染性的氣溶膠使動(dòng)物感染，或是易感動(dòng)物采食了被氣溶膠污染的飼草或飼料等途徑而發(fā)生感染?？諝獗徽J(rèn)為是最重要的傳播媒介，可引起超遠(yuǎn)距離跳躍式傳播。感染豬呼出的口蹄疫病毒形成很小的氣溶膠離子后，可以由風(fēng)傳播至數(shù)十到數(shù)百公里之外。另外某些昆蟲、鳥類在傳播中也起到了一定的促進(jìn)作用。病愈動(dòng)物可長期帶毒，這是口蹄疫反復(fù)爆發(fā)的一個(gè)重要原因。空氣中的病毒來源主要是病畜呼出的氣體、圈舍糞尿?yàn)R灑、含毒污物塵屑被風(fēng)吹等形成的含毒氣溶膠。不同因素對(duì)病毒氣溶膠的影響不同，如果相對(duì)濕度較大，缺少或沒有太陽輻射，病毒在氣溶膠中可以繼續(xù)生存數(shù)小時(shí)，并且依賴對(duì)流和下風(fēng)向?qū)⒉《緮y帶到很遠(yuǎn)的距離。

FMDV可在宿主體內(nèi)長時(shí)間存活，在受感染12 d內(nèi)，病毒傳播能力最強(qiáng)。由于多種多樣的傳播途徑加上傳染源的多樣性，為口蹄疫的蔓延提供了無限的可能。

3　臨床癥狀及病理特征

口蹄疫感染分為潛伏期、前驅(qū)期和臨床期，最終康復(fù)或死亡。臨床癥狀因物種及其生理情況、動(dòng)物的易感性和病毒的致病力而異。

口蹄疫潛伏期較短，一般為2～4 d，病毒侵入動(dòng)物機(jī)體并開始復(fù)制，但并不表現(xiàn)任何癥狀且開始向外界排毒。前驅(qū)期患病動(dòng)物開始出現(xiàn)食欲減退、體溫升高、泌乳量下降等癥狀。臨床期患畜出現(xiàn)典型臨床癥狀:體溫升高，口腔黏膜、唇舌、鼻鏡、蹄部和乳房等處皮膚出現(xiàn)大量水皰，進(jìn)一步發(fā)展為皮膚潰爛、蹄殼脫落，動(dòng)物流涎、跛行，精神萎靡等;還有某些并發(fā)癥，如組織損傷部位細(xì)菌性化膿壞死、乳腺炎、肺炎和腸胃炎等。良性經(jīng)過的動(dòng)物耐過此期后很快轉(zhuǎn)入康復(fù)期，動(dòng)物獲得免疫力，體溫和食欲恢復(fù)正常，潰爛部位重新長出新組織，病毒由機(jī)體排出。然而，惡性口蹄疫則可使抵抗能力較弱的動(dòng)物心肌衰竭，最終導(dǎo)致死亡。

口蹄疫病死豬尸體消瘦，主要病變位于蹄部、口腔、鼻鏡和乳房等部位，可見圓形水泡和潰瘍灶。重癥病豬心包膜有彌散性及點(diǎn)狀出血，心肌切面有灰白色或淡黃色斑點(diǎn)或條紋，俗稱“虎斑心”，該病理變化臨床上具有重要的診斷學(xué)意義。鏡檢可見神經(jīng)細(xì)胞變性，神經(jīng)細(xì)胞周圍水腫，血管四周有淋巴細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞增生圍繞而具“血管套”現(xiàn)象。

口蹄疫臨床癥狀與其他水皰類傳染病相似。因此，除了臨床癥候診斷之外，還需借助實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法進(jìn)行鑒別診斷?？谔阋邔?shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)經(jīng)歷了動(dòng)物交叉感染實(shí)驗(yàn)到血清學(xué)實(shí)驗(yàn)，再到分子生物學(xué)診斷三個(gè)階段。OIE推薦血清學(xué)的兩個(gè)方法為酶聯(lián)吸附試驗(yàn)( ELISA)和病毒中和試驗(yàn)( VNT)。另外，正向間接血凝試驗(yàn)( IHA)也是常用的血清學(xué)診斷方法。分子生物學(xué)技術(shù)主要是PCR，樣品可以是除血清之外的其他組織，使疾病的診斷更為方便、準(zhǔn)確。

4　疫情現(xiàn)狀及危害

目前，口蹄疫在世界范圍分布很廣，幾乎所有國家都有流行記載。根據(jù)OIE 2012年統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，全世界已經(jīng)有69個(gè)國家消滅了口蹄疫。迄今為止，只有新西蘭是歷史上唯一未發(fā)生過口蹄疫的國家。澳大利亞、美國、加拿大、日本等國相繼在20世紀(jì)初宣布消滅了口蹄疫，但日本在2000年又再度爆發(fā)該病，韓國和朝鮮長期保持無口蹄疫，但2000年也已爆發(fā)流行該病。當(dāng)今國際貿(mào)易日益繁榮，物資交流更加頻繁快捷，病毒傳播流通的方式更加無法掌控。目前在歐洲和南美流行最多的是A型，其次為O型和C型FMD。

我國是世界上口蹄疫多發(fā)國家之一，且疫情復(fù)雜，這與我國的地理環(huán)境密切相關(guān)，鄰國如越南、緬甸、泰國等國大都有口蹄疫流行。據(jù)有關(guān)資料報(bào)道，我國已先后爆發(fā)過六次較大規(guī)模的口蹄疫，其中最近一次爆發(fā)于2005～2010年，波及時(shí)間較長，分布范圍較廣，此次爆發(fā)的口蹄疫屬O型，代替了A型和亞洲1型，成為我國的主要類型，其中緬甸98株是主要亞型。

口蹄疫的危害是世界性的，尤其在部分發(fā)展中國家，嚴(yán)重阻礙著各方面的發(fā)展。首先是對(duì)畜牧業(yè)的重創(chuàng)。疫情爆發(fā)時(shí)，密集養(yǎng)殖的牛和豬發(fā)病率高達(dá)90%～100%，成年牛致死率為3%～5%，犢牛的死亡率則高達(dá)50%～70%;成年豬的死亡率為5% ～10%，哺乳仔豬可100%感染發(fā)病，死亡率高達(dá)80%～100%。發(fā)病率和致死率并不是造成經(jīng)濟(jì)損失的主要原因，發(fā)病時(shí)疫區(qū)的動(dòng)物制品，如肉、奶等產(chǎn)品均可失去利用價(jià)值，交易禁止，幾乎完全喪失收入來源。此外，還需投入大量人力物力封鎖疫區(qū)，對(duì)患病動(dòng)物進(jìn)行撲殺，焚燒滅毒，以徹底消滅傳染源，嚴(yán)重干擾了地區(qū)和國家的社會(huì)經(jīng)濟(jì)秩序，可能引發(fā)政治危機(jī)和國際貿(mào)易摩擦。

口蹄疫是人畜共患疾病，對(duì)公共衛(wèi)生有一定影響。雖然只有部分免疫力較弱的人群可能感染，但仍然不容忽視?？谔阋弑l(fā)時(shí)，要嚴(yán)禁幼兒、老人和孕婦接觸疫區(qū)和和染疫動(dòng)物。此外還值得關(guān)注的一點(diǎn)是口蹄疫病毒本身易變，很有可能變異出一個(gè)適合人體的新毒株。因此，一定要盡力避免人與傳染源接觸，以免造成病毒在人體內(nèi)繁殖變異。

5　防控措施

鑒于口蹄疫的嚴(yán)重危害，OIE對(duì)口蹄疫高度關(guān)注，將其列為18種A類動(dòng)物傳染病之首。近年又被列為重大跨國動(dòng)物疫病的全球消滅計(jì)劃及生物武器安全公約組織重點(diǎn)檢查對(duì)象。我國《動(dòng)物病原微生物分類明錄》中將FMDV列為10種一類動(dòng)物病原微生物之一，1999年2月農(nóng)業(yè)部公告，將其列為一類動(dòng)物疫病。

口蹄疫在國際上不提倡治療，各國應(yīng)采取積極的預(yù)防和應(yīng)對(duì)措施。防治政策包括撲滅根除政策、免疫控制政策和預(yù)防政策。防治的基本措施是撲殺病畜，免疫接種，嚴(yán)禁動(dòng)物流通，禁止動(dòng)物產(chǎn)品交易以及其它染毒物傳播，對(duì)染毒區(qū)實(shí)施徹底消毒，進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查與監(jiān)控，預(yù)報(bào)預(yù)測風(fēng)險(xiǎn)分析。

我國口蹄疫防控采用“預(yù)防為主、防治結(jié)合、防重于治”的一般原則，貫徹“早快嚴(yán)小、重優(yōu)實(shí)恒”八字方針，實(shí)施“消毒隔離、加強(qiáng)管理、疫苗接種和藥物防治”四大法寶。

6　口蹄疫疫苗

疫苗免疫接種是有效預(yù)防口蹄疫的可靠手段之一。絕大多數(shù)的歐洲和美洲國家通過疫苗免疫接種，完成了對(duì)口蹄疫的控制，收到了顯著成效。高效安全的疫苗是成功預(yù)防、控制，直至最終消滅口蹄疫的必要條件。

傳統(tǒng)的口蹄疫疫苗包括弱毒疫苗和滅活疫苗兩種。弱毒疫苗是將強(qiáng)毒株致弱后進(jìn)行培養(yǎng)收集制成的疫苗，具有成本低廉、免疫原性好，抗體效價(jià)持續(xù)時(shí)間長等優(yōu)點(diǎn)，但因可引起免疫動(dòng)物的毒血癥，長期帶毒，排毒及病毒反強(qiáng)等缺點(diǎn)，迄今尚未獲得滿足要求的口蹄疫弱毒疫苗株。滅活疫苗是最先研制用于防控口蹄疫的疫苗，也是當(dāng)今使用最多、較為安全有效的疫苗［7，8］。第一個(gè)FMD滅活疫苗系1938年由Waldmann從感染FMDV動(dòng)物組織中分離到的病毒經(jīng)甲醛滅活制成。該種疫苗免疫動(dòng)物僅可獲得部分保護(hù)，但不能進(jìn)行批量生產(chǎn)。1947－1954年，

Frenkel用FMDV感染健康牛舌上皮細(xì)胞的方法獲得大量病毒，并經(jīng)甲醛滅活，制成第二代口蹄疫疫苗，實(shí)現(xiàn)了疫苗的批量生產(chǎn)。之后的研究者使用各種細(xì)胞系傳代培養(yǎng)FMDV，特別是1962年的乳倉鼠腎21( BHK-21)細(xì)胞，目前仍是疫苗制備中廣泛使用的培養(yǎng)病毒細(xì)胞。滅活病毒的手段改用二乙烯亞胺( BEI)，BEI滅活病毒較甲醛更完全［9，10］。

目前，F(xiàn)MD滅活疫苗不僅要保證具有嚴(yán)格生物安全標(biāo)準(zhǔn)，避免生產(chǎn)過程中病毒的污染或滅活不足的風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)必須十分關(guān)注FMDV復(fù)制中抗原性的變異問題。實(shí)際生產(chǎn)使用的疫苗有時(shí)并不能完全保護(hù)某些病毒毒株，有限的交叉型和交叉型保護(hù)，需要單獨(dú)的疫苗對(duì)每個(gè)亞型才起有效保護(hù)。傳統(tǒng)的口蹄疫疫苗需要在1～2年有效期內(nèi)進(jìn)行更替，液氮的集中存儲(chǔ)可以提高其有效期。

生產(chǎn)實(shí)踐表明，疫苗的管理和免疫程序，如適當(dāng)?shù)奶幚?、正確的劑量、以及疫苗接種的最佳時(shí)間等均會(huì)明顯影響疫苗的免疫效果。高劑量接種免疫，通常會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物保護(hù)數(shù)量的增加和保護(hù)時(shí)間的減少。OIE推薦接種6倍50%保護(hù)劑量，可用作緊急預(yù)防［11，12］。

近年來，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，為了避免傳統(tǒng)滅活疫苗的風(fēng)險(xiǎn)，降低生產(chǎn)成本，相繼研制了更加安全、有效的新型口蹄疫疫苗，包括基因工程亞單位疫苗、基因缺失疫苗、合成肽疫苗、病毒載體活疫苗、DNA疫苗和全衣殼基因工程疫苗等。

基因工程亞單位疫苗利用基因工程技術(shù)制備病毒抗原性亞單位成分，得到無毒力的病原體的一部分，安全不散毒，但其穩(wěn)定性和免疫效果有待進(jìn)一步研究。

基因缺失疫苗是在DNA或RNA水平上使與致病性有關(guān)但與復(fù)制無關(guān)的基因缺失，使病毒毒力喪失或明顯減弱，而保存病毒的復(fù)制能力和免疫原性，從而構(gòu)建基因缺失疫苗。

合成肽疫苗是根據(jù)病毒主要抗原的氨基酸序列，利用化學(xué)方法人工合成的肽段作為抗原［13，14］。目前，由雙抗原多肽2570和7309組成的合成肽疫苗已由上海申聯(lián)生物有限公司生產(chǎn)并投入使用。接種合成肽疫苗的動(dòng)物應(yīng)激減少，VP1特異性抗體水平高于滅活疫苗;不含非結(jié)構(gòu)蛋白，能精確區(qū)分免疫動(dòng)物和自然感染動(dòng)物，完全杜絕滅活疫苗中攜帶的痕量非結(jié)構(gòu)蛋白可能造成的假陽性現(xiàn)象。

重組病毒載體口蹄疫活疫苗不含基因組RNA，故無感染性，抗原基因的表達(dá)產(chǎn)物可產(chǎn)生抗原性，如復(fù)制缺陷型的包含A24克魯塞羅血清型的口蹄疫病毒衣殼蛋白編碼區(qū)人類腺病毒載體。這種疫苗已經(jīng)美國中心獸醫(yī)生物制品、動(dòng)物和植物衛(wèi)生檢驗(yàn)局、美國農(nóng)業(yè)部授予有條件許可，被列入美國國家獸醫(yī)疫苗儲(chǔ)備。另一種疫苗是直接利用含有重組桿狀病毒顆粒的大腸桿菌直接轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。

DNA疫苗是指將病毒的主要保護(hù)性抗原基因克隆出來，再插入帶有強(qiáng)啟動(dòng)子的質(zhì)粒載體，注入動(dòng)物體內(nèi)后，構(gòu)建的基因表達(dá)抗原蛋白，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生持續(xù)的免疫應(yīng)答。DNA疫苗有很多優(yōu)點(diǎn)，如可誘導(dǎo)體液免疫和細(xì)胞免疫，對(duì)各種病原可產(chǎn)生免疫保護(hù)作用，可在宿主體內(nèi)持續(xù)表達(dá)，效率高，安全，接種方法簡單。但DNA疫苗可能導(dǎo)致免疫耐受、自身免疫、過敏反應(yīng)和超免疫性等副作用［15］。

目前我國獲農(nóng)業(yè)部許可生產(chǎn)，應(yīng)用于預(yù)防豬O型口蹄疫的疫苗有兩種:豬口蹄疫O型滅活疫苗和豬口蹄疫O型合成肽疫苗。生產(chǎn)的毒株主要有OS/ 90、OR/80和OZK93。根據(jù)《國家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》要求，口蹄疫疫苗是規(guī)?；i場強(qiáng)制免疫的疾病之一，對(duì)所有的豬只進(jìn)行O型口蹄疫的免疫和抗體監(jiān)測。滅活類疫苗免疫的豬采用正向間接血凝試驗(yàn)或液相阻斷ELISA進(jìn)行免疫效果監(jiān)測，以正向間接血凝試驗(yàn)的抗體效價(jià)≥25判定為免疫合格，液相阻斷ELISA的抗體效價(jià)≥26判定為免疫合格;合成肽疫苗免疫的豬采用VP1結(jié)構(gòu)蛋白ELISA方法，以VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體效價(jià)≥25判定為免疫合格。近年來的臨床經(jīng)驗(yàn)證明，合成肽疫苗的抗體水平雖高，但保護(hù)力與其抗體水平不成正比，原因可能是合成肽疫苗只是單一的抗原表位，并不能激發(fā)對(duì)完整口蹄疫病毒的保護(hù)反應(yīng)。可見，新型疫苗要取代傳統(tǒng)滅活疫苗，還需要更長的實(shí)踐和探索。

7　討論和分析

防控口蹄疫是全球性問題，面臨著許多挑戰(zhàn)。隨著動(dòng)物貿(mào)易和動(dòng)物產(chǎn)品貿(mào)易的全球化進(jìn)一步放大，口蹄疫的遏止難度加大。跨國界的便利交通是造成口蹄疫蔓延的一個(gè)重要因素。為了避免貿(mào)易限制，爆發(fā)疫情的國家延遲報(bào)告其國家疫情，這些延遲報(bào)道增加了疾病傳播的風(fēng)險(xiǎn)。另外，社會(huì)對(duì)疾病傳播威脅宣傳不夠，公眾缺乏此類教育認(rèn)知，導(dǎo)致無效

的口蹄疫預(yù)防和根除計(jì)劃。

因此，提供適當(dāng)?shù)男畔鬏敽图訌?qiáng)防控知識(shí)教育是一項(xiàng)艱巨而長期的任務(wù)。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織和糧農(nóng)組織為了有利于地區(qū)控制和根除口蹄疫疫情，建立了一個(gè)逐步控制口蹄疫的根除計(jì)劃［16，17］。根據(jù)全球各口蹄疫流行區(qū)流行毒株的差異，建立7個(gè)病毒庫，從國家立法、監(jiān)測、免疫以及診斷方法入手，在世界不同區(qū)域?qū)嵤┮幌盗杏?jì)劃，使口蹄疫疫苗更易獲得，保證疫苗及診斷試劑的質(zhì)量符合OIE標(biāo)準(zhǔn)，并提供更好的疫情監(jiān)視以及疫病控制策略，以提高口蹄疫染疫國家動(dòng)物的出口。

疫苗免疫已經(jīng)證明是消滅口蹄疫的有效措施之一。因此，全球共同努力研制安全、有效和廉價(jià)的口蹄疫疫苗是根除口蹄疫疫情的最可行途徑［18，19］。

參考文獻(xiàn)

［1］Knight-Jones TJD，Rushton J.The economic impacts of foot and mouth disease–what are they，how big are they and where do they occur［J］.Prev Vet Med，2013，112: 161－173.

［2］Reid SM，F(xiàn)erris NP，Hutchings GH，Zhang Z，Belsham GJ，Alexandersen S.Detection of all seven serotypes of foot-and-mouth disease virus by real-time，fluorogenic reverse transcription polymerase chain reaction assay［J］.J Virol Methods，2002，105: 67－80.

［3］Smith MT，Bennett AM，Grubman MJ，Bundy BC.Foot

and-mouth disease: Technical and political challenges to eradication［J］.Vaccine，2014，32( 31) : 3902－3908.

［4］Grubman MJ，Baxt B.Foot-and-mouth disease［J］.Clin Microbiol Rev，2004，17: 465－493.

［5］Domingo E，Escarmis C，Martinez MA，Martinez-Salas E，Mateu MG.Foot-and-mouth disease virus populations are quasispecies［J］.Curr Top Microbiol Immunol，1992，176: 33－47.

［6］Morgan ER，Lundervold M，Medley GF，Shaikenov BS，Torgerson PR，MilnerGulland EJ.Assessing risks of disease transmission between wildlife and livestock: the Saiga antelope as a case study［J］.Biol Conserv，2006，131: 244－254.

［7］Li ZY，Liu JX.The current state of vaccines used in the field for foot and mouth disease virus in China［J］.Expert Rev Vaccines，2011，10( 1) : 13－15.

［8］Rodriguez L，Gay C.Development of vaccines toward the global control and eradication of foot-and-mouth disease ［J］.Expert Rev Vaccines，2011，10( 3) : 377－387.

［9］Parida S.Vaccination against foot-and-mouth disease virus: strategies and effectiveness［J］.Expert Rev Vaccines，2009，8: 347－365.

［10］Rodriguez LL，Grubman MJ.Foot and mouth disease virus vaccines［J］.Vaccine，2009，27( Suppl.4) : D90 －94.

［11］Barnett P，Statham R.Long term stability and potency of antigen concentrates held by the International Vaccine Bank.In: European Commission for the control of footand-mouth disease research group of the Standing Technical Committee［J］.Aldershot ( United Kingdom).FAO; 1998.

［12］Liu F，Ge S，Li L，Wu X，Liu Z，Wang Z.Virus-like particles: potential veterinary vaccine immunogens［J］.Res Vet Sci，2012，93: 553－559.

［13］Zheng H，Guo J，Jin Y，Yang F，He J，Lv L，et al.Engineering foot-and-mouth disease viruses with improved growth properties for vaccine development［J］.PLoS ONE，2013，8: e55228.

［14］Hua Tang XSL，F(xiàn)ang YZ，Pan L，Zhang ZW，Zhou P，Jian-Liang LV，et al.Advances in studies on vaccines of foot-and-mouth disease［J］.Asian J Anim Vet Adv，2012，7: 1245－1254.

［15］Smith MT，Varner CT，Bush DB，Bundy BC.The incorporation of the A2 protein to produce novel Qβ viruslike particles using cell-free protein synthesis［J］.Biotechnol Prog，2012，28: 549－555.

［16］FAO.Progressive control pathway for foot-and-mouth disease control ( PCP- FMD)［J］.Rome，Italy: Food and Agriculture Organization of the United Nations，2011.

［17］Sumption K，Domenech J，F(xiàn)errari G.Progressive control of FMD on a global scale［J］.Vet Rec，2012，170: 637.

［18］Dukes J，King D，Alexandersen S.Novel reverse transcription loop-mediated isothermal amplification for rapid detection of foot-and-mouth disease virus［J］.Arch Virol，2006，151: 1093－1106.

［19］Guo HC，Sun SQ，Jin Y，Yang SL，Wei YQ，Sun DH，et al.Foot-and-mouth disease virus-like particles produced by a SUMO fusion protein system in Escherichia coli induce potent protective immune responses in guinea pigs，swine and cattle［J］.Vet Res，2013，44: 48.