紫蘇籽提取物對蛋雞產(chǎn)蛋高峰后期血液生理生化指標(biāo)的影響

時藝霖，趙胤博，王占彬，黃 勇，毛 薇，顧憲紅

（1.河南科技大學(xué)動物科技學(xué)院河南省飼草飼料資源開發(fā)與畜禽健康養(yǎng)殖院士工作站，河南洛陽471003；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所動物營養(yǎng)學(xué)國家重點實驗室，北京100193；3.鄭州鐵路職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南鄭州450000）

動物性產(chǎn)品的安全性越來越受到消費者的關(guān)注。長期以來，抗生素等化學(xué)合成類飼料添加劑的濫用，使細菌產(chǎn)生耐藥性，藥物殘留于動物性產(chǎn)品中，給消費者的健康帶來嚴(yán)重的隱患，因此利用天然植物開發(fā)無污染、無藥物殘留的綠色飼料添加劑替代抗生素已經(jīng)成為目前動物營養(yǎng)學(xué)探究的熱點之一。研究發(fā)現(xiàn)，天然植物飼料添加劑兼有藥用和營養(yǎng)的雙重作用，其含有的多糖、甙類、酚酸等多種活性成分具有增強機體免疫力、提高動物抗疾病能力和生產(chǎn)性能等作用［1－4］。紫蘇籽（PerillaFrutescensSeed）為唇形科一年生草本植物紫蘇（Perillafrutescens（L）Britt）的干燥成熟果實，無毒，是我國傳統(tǒng)的藥、食兩用類中藥材［5］，資源豐富。紫蘇籽提取物主要成分為α－亞麻酸、黃酮、咖啡酸、迷迭香酸、齊墩果酸、烏索酸等［6－10］，藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)紫蘇籽提取物有護肝、抗衰老、清除體內(nèi)自由基、抑菌、降血脂、降低膽固醇、提高機體免疫力等功效［11］。目前以紫蘇籽提取物作為飼料添加劑對動物生產(chǎn)性能、動物性產(chǎn)品品質(zhì)、免疫功能及血脂水平影響的報道為數(shù)不多［12］，有關(guān)其對蛋雞產(chǎn)蛋高峰后期血液理化指標(biāo)影響的研究尚未見報道。本試驗在產(chǎn)蛋高峰后期蛋雞日糧中添加紫蘇籽提取物，研究其對蛋雞血液理化指標(biāo)的影響，旨在為紫蘇籽資源的開發(fā)利用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

紫蘇籽提取物由河南科技大學(xué)動物科技學(xué)院動物營養(yǎng)實驗室制備，提取方法參照文獻［10，13］，有效成分為α－亞麻酸53.25mg／g、黃酮30.41mg／g、迷迭香酸10.18mg／g。

1.2 試驗動物與飼養(yǎng)管理

選擇480只健康狀況良好、產(chǎn)蛋率和體重相近的48周齡海蘭褐蛋雞，隨機分為4個處理組，每個處理組6個重復(fù)，每個重復(fù)20只雞。預(yù)試期7d，試驗期30d。4個處理組蛋雞分別為空白對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，處理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.01%、0.02%、0.03%的紫蘇籽提取物。所有試驗雞只采用常規(guī)三層階梯式籠養(yǎng)，每籠3只，自由采食和飲水，每天觀察雞只的飲食情況和精神狀態(tài)，定期清理糞污。參照NRC（1994）蛋雞營養(yǎng)需要配置基礎(chǔ)飼糧，其日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of experiment diets（air－dried basis）

1.3 樣品采集

分別于試驗期的第15天和30天，每個重復(fù)抽取5只雞，翅下靜脈采血7mL，2mL置于肝素鈉抗凝管中，用于血液常規(guī)指標(biāo)檢測；5mL 靜置后3000 r／min離心10min，制備血清后置于－20℃冰箱保存，用于測定血清生化指標(biāo)。

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 血常規(guī)指標(biāo) 檢測的血常規(guī)指標(biāo)有全血中紅細胞數(shù)（RBC，×1012／L）、血紅蛋白（HGB，g／L）、紅細胞壓積（HCT，%）、平均紅細胞體積（MCV，fL）、平均血紅蛋白量（MCH，pg）、平均血紅蛋白濃度（MCHC，g／L）、紅細胞分布寬度（RDW－CV，%）、血小板（109／L）含量，檢測儀器為希森美康醫(yī)用電子有限公司的XS系列自動血液分析儀進行分析。

1.4.2 血液生化指標(biāo) 使用深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司的全自動生化分析儀檢測總蛋白（TP，g／L）、白蛋白（ALB，g／L）、球蛋白（GLB，g／L）、尿酸（UA，umol／L）、直接膽紅素（DBIL，μmol／L）、總膽紅素（TBIL，μmol／L）、甘油三酯（TG，mmol／L）、總膽固醇（TC，mmol／L）、高密度脂蛋白（HDL，mmol／L）、低密度脂蛋白（LDL，mmol／L）、葡萄糖（GLU，mmol／L）等物質(zhì)含量，所用試劑盒購自南京建成生物科技有限公司。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與處理

試驗數(shù)據(jù)通過Excel 2003 整理后，采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析（ANOVA），組間差異采用LSD 進行多重比較，試驗數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 紫蘇籽提取物對蛋雞產(chǎn)蛋高峰后期血液常規(guī)指標(biāo)的影響

由表2可知，試驗第15天，與對照組相比，三個試驗組的紅細胞數(shù)、血紅蛋白含量、平均紅細胞體積、平均血紅蛋白量、平均血紅蛋白濃度、紅細胞分布寬度、血小板含量都略高于對照組，但差異不顯著（P＞0.05）；試驗第30天，試驗Ⅱ組血紅蛋白量、紅細胞壓積顯著高于對照組（P＜0.05），其他所測指標(biāo)各組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 紫蘇籽提取物對蛋雞產(chǎn)蛋高峰后期血液生化指標(biāo)和脂肪代謝指標(biāo)的影響

2.2.1 紫蘇籽提取物對蛋雞產(chǎn)蛋高峰后期血液生化指標(biāo)的影響 由表3可知，試驗第15天，3個試驗組與對照組之間所測血液生化指標(biāo)沒有顯著差異（P＞0.05）；試驗第30天，試驗Ⅱ組白蛋白含量顯著高于對照組（P＜0.05），試驗Ⅲ組葡萄糖水平顯著高于對照組和試驗Ⅰ組（P＜0.05），除此之外，其它所測各項指標(biāo)各組間差異不顯著（P＞0.05）。

表2 紫蘇籽提取物對蛋雞產(chǎn)蛋高峰后期血液常規(guī)指標(biāo)的影響Table 2 Effect of Perilla Frutescens seed extracts on blood routine parameters of layers during the late laying peak period

2.2.2 紫蘇籽提取物對蛋雞產(chǎn)蛋高峰后期血液脂肪代謝指標(biāo)的影響 由表4可知，試驗第15天，試驗Ⅰ組總膽固醇的含量顯著低于對照組（P＜0.05），其他各組間所測指標(biāo)均無顯著差異（P＞0.05）；試驗第30天，三個試驗組甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白含量與對照組相比差異不顯著（P＞0.05）。

表3 紫蘇籽提取物對蛋雞產(chǎn)蛋高峰后期血液生化指標(biāo)的影響Table 3 Effect of Perilla Frutescens seed extracts on blood routine parameters of layer during the late laying peak period

表4 紫蘇籽提取物對蛋雞產(chǎn)蛋高峰后期血液脂肪代謝指標(biāo)的影響Table 4 Effect of Perilla Frutescens seed extracts on blood fat metabolism parameters of layer during the late laying peak period

3 討論

3.1 紫蘇籽提取物對蛋雞血液常規(guī)指標(biāo)的影響

血液常規(guī)指標(biāo)可反映動物健康狀況，常用來預(yù)測疾病的發(fā)生［14］。紅細胞和血紅蛋白是血液的重要組成部分，能反映動物機體造血功能，紅細胞壓積、平均紅細胞體積（MCV）、平均血紅蛋白量（MCH）、平均血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細胞分布寬度（RDW－CV）是鑒別貧血的重要指標(biāo)，血小板具有護肝、凝血、止血、促進纖維蛋白溶解以及維持血管壁的完整性等作用［15］。本試驗結(jié)果表明，在蛋雞日糧中添加適量的紫蘇籽提取物有增加蛋雞血液中紅細胞、血紅蛋白、平均血紅蛋白量、平均血紅蛋白濃度、血小板等成分的趨勢，添加0.02%紫蘇籽提取物可顯著提高第30天血樣中血紅蛋白和紅細胞壓積濃度，添加0.03%紫蘇籽提取物有降低血液細胞趨勢，因此本試驗結(jié)果說明紫蘇籽提取物有改善蛋雞產(chǎn)蛋高峰后期機體造血機能，但其添加量不宜過高，過高則可能引起細胞數(shù)量下降，表現(xiàn)出了天然提取物的雙向調(diào)節(jié)作用。

3.2 紫蘇籽提取物對蛋雞血液生化指標(biāo)的影響

血清所含成分與組織間液相接近，代表動物機體內(nèi)環(huán)境的物理化學(xué)狀況，比全血更能反映機體的狀態(tài)，故血清生化指標(biāo)可以作為反映動物體內(nèi)某些組織器官機能狀態(tài)變化和物質(zhì)代謝的重要指標(biāo)［16］。禽類血清中總蛋白、白蛋白及尿酸含量的高低能反映動物機體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝能力強弱，總蛋白含量升高說明組織蛋白質(zhì)沉淀作用和機體肝臟的蛋白質(zhì)合成代謝加強，白蛋白含量升高說明機體免疫力提高、消化吸收蛋白質(zhì)能力加強，而尿酸則反映機體蛋白質(zhì)分解代謝水平，尿酸含量降低，表明機體內(nèi)蛋白質(zhì)合成代謝加強、分解代謝減弱，促進了機體對營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化率。血清球蛋白又稱抗體，主要由B 細胞轉(zhuǎn)化為漿細胞后分泌產(chǎn)生的，能反映機體的免疫力［17－18］。高士爭等［19］報道，在育肥豬日糧中添加中草藥飼料添加劑可顯著提高育肥豬不同生長階段血液中總蛋白、白蛋白、球蛋白的含量。本試驗結(jié)果顯示，日糧中添加紫蘇籽提取物30d可不同程度提高蛋雞血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白含量，降低尿酸含量，說明紫蘇籽提取物有促進蛋白質(zhì)消化吸收、提高機體免疫力的作用。

葡萄糖是動物體內(nèi)各組織細胞活動的能量來源，其濃度高低反映動物體內(nèi)葡萄糖代謝情況，因此葡萄糖濃度只有保持在一定水平才能維持機體正常需要［20］。本試驗中，在蛋雞飼糧中添加紫蘇籽提取物，飼喂30d可顯著提高蛋雞血清中葡萄糖濃度（在血糖正常范圍之內(nèi)），原因可能是紫蘇籽提取物中的活性成分，使動物體內(nèi)消化酶的活性提高，促進了碳水化合物的消化，進而使血糖含量升高。

血清中膽紅素水平的高低可直接反映出肝臟是否病變或膽管是否阻塞。近年來有研究報道，膽紅素是一種生理抗氧化劑，具有比維生素C、維生素E等更強的抗氧化性，適量的膽紅素對心、腦、肝等組織和器官具有良好的保護作用［21］。本試驗結(jié)果表明，在蛋雞日糧中適量添加紫蘇籽提取物30d后蛋雞血清中總膽紅素和直接膽紅素的含量有升高的趨勢，表明紫蘇籽提取物可能具有護肝抗氧化的作用，但是紫蘇籽提取物中具體影響血清中膽紅素含量變化的成分還不確定，有待于進一步的研究。

3.3 紫蘇籽提取物對蛋雞血脂水平的影響

膽固醇是動物細胞膜及神經(jīng)髓鞘的重要組成成分，是VD3、類固醇激素和膽酸鹽的前體，對于維持機體正常的生理活動及脂類代謝具有重要的作用。但是，如果血液中膽固醇水平過高則會引起動脈粥樣硬化及心腦血管疾病。高密度脂蛋白可代表機體內(nèi)膽固醇的清除情況［22］。甘油三酯是脂類物質(zhì)代謝過程中的一種重要中間產(chǎn)物，主要作用是為細胞提供能量。血清中甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的含量可反映動物體內(nèi)脂肪的合成與分解情況［23－24］。有研究報道，給大鼠飼喂高脂飼糧同時添加不同劑量紫蘇籽油，飼喂28d后，可顯著降低飼喂1 000mg／kg紫蘇籽油組大鼠血清中總膽固醇含量，說明紫蘇籽具有降血脂的作用［25］。Tan等［26］研究表明，日糧中添加紫蘇籽提取物能顯著降低鵪鶉血清中總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白含量，升高血清中高密度脂蛋白含量。本試驗中，在蛋雞日糧中添加紫蘇籽提取物15d后血清中甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白濃度有顯著降低或降低趨勢，高密度脂蛋白濃度則有升高趨勢，說明紫蘇籽提取物具有調(diào)節(jié)機體內(nèi)脂類物質(zhì)代謝的作用。降低蛋雞血清中總膽固醇、甘油三酯等濃度的原因可能是，1）紫蘇籽體取物中α－亞麻酸系ω－3多不飽和脂肪酸，其代謝產(chǎn)物二十碳五烯酸（EPA）有抑制脂肪酶合成及促進脂肪氧化分解和抑制肝細胞中甘油二脂轉(zhuǎn)?；富钚?，從而降低血清中總膽固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白濃度，增加高密度脂蛋白濃度［27－28］；2）植物類黃酮可通過影響與脂類代謝有關(guān)的基因表達，對機體脂質(zhì)代謝起調(diào)節(jié)作用。Kirk等［29］報道，大豆類黃酮可通過增加LDLR 的活性來降低機體血液中膽固醇含量。

4 小結(jié)

綜上所述，與對照組相比，添加0.01% ～0.03%紫蘇籽提取物對蛋雞部分血常規(guī)、血液生化和脂肪代謝指標(biāo)均有不同程度改善，提示紫蘇籽提取物可能具有提高蛋雞產(chǎn)蛋高峰后期機體蛋白質(zhì)、脂肪代謝水平、改善機體免疫功能的作用。

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