• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    野木瓜提取液清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成研究

    2015-01-20 11:52:24崔霖蕓
    湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年22期
    關(guān)鍵詞:亞硝酸鈉亞硝胺

    崔霖蕓

    摘要:以乙醇、去離子水為提取劑,采用分光光度法和紫外光解法測定不同量的野木瓜(Stauntonia chinensis)醇提物和水提物對亞硝酸鹽的清除和亞硝胺的阻斷作用。結(jié)果表明,加入4.0 mL提取液(相當于從0.8 g的野木瓜粉中提取的量),醇提物和水提物對亞硝酸鹽的清除率分別為86.84%和75.88%,對亞硝胺合成阻斷率可達92.91%和87.50%,說明野木瓜有良好的抗癌作用,且其醇提物優(yōu)于水提物。

    關(guān)鍵詞:野木瓜(Stauntonia chinensis);亞硝酸鈉;清除;亞硝胺;阻斷

    中圖分類號:R730.1 文獻標識碼:A 文章編號:0439-8114(2014)22-5504-03

    N-亞硝基化合物是一類強烈的化學(xué)致癌物質(zhì),它們能誘發(fā)許多動物的多種器官組織惡性腫瘤[1],它主要是通過誘發(fā)DNA互補堿基對之間的交聯(lián)而啟動細胞的癌變[2],至今尚未發(fā)現(xiàn)一種動物對N-亞硝基化合物的致癌作用有抵抗力[3]。正常情況下人們直接從食物中攝入的亞硝胺的量微乎其微,但其前身仲胺和亞硝酸鹽卻廣泛存在于食物和水體中。仲胺廣泛存在于魚類、谷類、茶、煙葉等食品飲品中,食物烹調(diào)和體內(nèi)代謝也可能產(chǎn)生仲胺,而亞硝酸鹽則更廣泛地存在于土壤、水體和食物中[1],亞硝胺很容易由仲胺和亞硝酸鹽反應(yīng)合成[1],在人體胃液的環(huán)境下尤為容易。因此,清除亞硝酸鹽或阻斷亞硝胺的合成,是防癌抗癌的有效途徑。眾多學(xué)者研究證實黃酮類化合物對清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成有顯著作用[4-6],另外,酚類、還原糖和多糖類、維生素類、氧化還原酶類等物質(zhì)也有一定的清除和阻斷作用[7]。

    野木瓜(Stauntonia chinensis)是木通科野木瓜屬植物。貴州省正安縣于1996被國務(wù)院發(fā)展研究中心等單位命名為“中國野木瓜之鄉(xiāng)”,其盛產(chǎn)的野木瓜以果大、 皮薄、 肉細、 氣香、 味甘酸等特點著稱[8]。中醫(yī)典籍記載其莖葉微苦,其果味甘、平,歸心、腎經(jīng)[9],具有舒筋活絡(luò)、解渴生津、平肝和胃、祛風止痛等功效?,F(xiàn)代研究表明,野木瓜中含有豐富的皂苷,主要包括去甲五環(huán)三萜皂苷類化合物和木脂素苷類化合物,還含有黃酮苷類化合物、酚性成分、糖類化合物[10],此外,野木瓜果實中含有豐富的有機酸、果膠、胡蘿卜素、黃酮類、氨基酸、多種維生素和多種礦物質(zhì)等[11],這些物質(zhì)對清除亞硝酸鹽和阻斷亞硝胺合成均有一定的作用。國內(nèi)外對野木瓜的鎮(zhèn)痛抗炎、放射增敏及肝保護等方面的研究較多[12,13],但對野木瓜提取物清除亞硝酸鹽和阻斷亞硝胺合成能力的研究卻很少。顯然,在人們?nèi)找骊P(guān)注自身保健的今天,若能發(fā)現(xiàn)野木瓜有清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成的功效,將對開發(fā)其在保健、防癌抗癌方面的新用途具有積極的意義。本試驗在體外模擬人體胃液的條件下,研究野木瓜對亞硝酸鹽的清除和亞硝胺合成的阻斷作用,以期為野木瓜資源的進一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 材料與試劑 野木瓜,購自貴州正安縣。試劑:石油醚、無水乙醇、碳酸鈉、33%(質(zhì)量分數(shù))二甲胺均為化學(xué)純,α-萘胺、亞硝酸鈉、對氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽均為分析純,pH 3.0的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液(配置方法見文獻[14]),試驗用水均為去離子水。

    1.1.2 儀器 752N型紫外可見分光光度計(上海儀電分析儀器有限公司),SHZ-DⅢ型予華牌循環(huán)水真空泵(鞏義市予華儀器有限責任公司),BSA223型電子天平(北京賽多利斯天平有限公司),RE-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠),ZF-20D型暗箱式紫外分析儀(上海顧村電光儀器廠),DK-S26 型恒溫水浴鍋(上海森信實驗儀器有限公司),PHS-2F型精密酸度計(上海雷磁儀器廠)。

    1.2 方法

    1.2.1 樣品預(yù)處理 將野木瓜鮮果洗凈→去子囊切成2~5 mm薄片→50 ℃烘干→粉碎后過40目篩→石油醚脫色回流至石油醚無色→抽濾,濾渣風干。

    1)準確稱取處理后的野木瓜粉5 g,置于250 mL圓底燒瓶中,加入83%乙醇151 mL,在70 ℃回流浸提2 h,抽濾,濾液在60 ℃減壓濃縮,最后定容至25 mL,得野木瓜醇提物。

    2)準確稱取處理后的野木瓜粉5 g,置于250 mL圓底燒瓶中,加入去離子水151 mL,在70 ℃回流浸提2 h,抽濾,濾液在60 ℃減壓濃縮,最后定容至25 mL,得野木瓜水提物。

    1.2.2 對亞硝酸鹽清除率的測定[15,16] 亞硝酸鹽在弱酸性條件下,與對氨基苯磺酸重氮化后,再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色絡(luò)合物,用分光光度計測出該化合物的吸光度,就可知道反應(yīng)液中亞硝酸鹽含量多少。根據(jù)這一原理比較不同試驗條件下亞硝酸鹽含量的多少來反映不同濃度野木瓜提取液清除亞硝酸鹽能力的大小,亞硝酸鹽含量少,野木瓜提取液清除能力就強,反之則弱。

    準確吸取pH 3.0的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液10 mL于20 mL容量瓶中,分別加入“1.2.1”所得的野木瓜醇提物和水提物樣液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 mL。再加入0.1 g/L的亞硝酸鈉溶液2 mL,用去離子水定容至刻度,37 ℃恒溫反應(yīng)1 h取出,分別吸取反應(yīng)液1 mL置于10 mL容量瓶中,加入0.4%的對氨基苯磺酸2 mL,搖勻,靜置5 min,然后加入0.2%鹽酸萘乙二胺2 mL。搖勻,靜置15 min,在540 nm處測定吸光度,平行做3次求平均值。

    清除率=(A0-Ax)/A0×100%

    式中,A0為未加提取液(即加入0 mL提取液)時的吸光度;Ax為加入不同量提取液的吸光度。

    1.2.3 對亞硝胺合成阻斷率的測定[14] 在體外模擬人體胃液的條件下(pH 3.0,溫度為37 ℃),二甲胺很容易與亞硝酸鈉反應(yīng),合成二甲基亞硝胺,其化學(xué)反應(yīng)方程式為:

    HCl

    (CH3)2NH+NaNO2→(CH3)2N·N0+NaCl+H2O

    當往野木瓜醇提物和水提物中依次加入二甲胺與亞硝酸鈉時,提取物優(yōu)先同亞硝酸鈉作用,從而達到阻止亞硝胺生成的目的。據(jù)此可以通過比較相同條件下生成亞硝胺量的多少來反映提取物阻斷能力的強弱,生成亞硝胺量少,提取液的阻斷能力就強,反之則弱[14]。

    基于N-亞硝基化合物的光化學(xué)反應(yīng),在紫外光照射下,亞硝胺光解并轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的仲胺和亞硝酸根,基反應(yīng)式為:

    紫外光

    H2O+(CH3)2N·NO→(CH3)2NH2++NO2-

    測定NO2-的含量(方法見“1.2.2”)即可知二甲基亞硝胺的含量,從而即可測出提取液對亞硝胺合成的阻斷率。具體方法為:準確吸取“1.2.1”所得野木瓜醇提取物和水提物樣液0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 mL于20 mL容量瓶中,分別加入pH 3.0的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液10 mL,再加入0.1 g/L的亞硝酸鈉溶液2 mL, 加入1 mmol/L的二甲胺溶液1 mL, 用去離子水定容,37 ℃恒溫反應(yīng)1 h。準確吸取1 mL上述溶液到7 cm2培養(yǎng)皿中,加入0.5% Na2CO3溶液0.5 mL,在紫外分析儀上照射15 min(紫外燈距液面15 cm)。取出加入1%的對氨基苯磺酸和0.1%α-萘胺各1.5 mL,加入去離子水0.5 mL,混勻,靜置15 min,在525 nm處測定吸光度,平行做3次求平均值。計算公式為:

    阻斷率=(A0-Ax)/A0×100%

    式中,A0為未加提取液(即加入0 mL提取液)時的吸光度;Ax為加入不同量提取液的吸光度

    2 結(jié)果與分析

    2.1 野木瓜提取液對亞硝酸鹽清除作用

    野木瓜提取液對亞硝酸鹽清除作用見圖1。從圖1可以看出,在體外模擬人體胃液的條件下,當加入提取液的量較少時,野木瓜提取液(醇提物和水提物)對亞硝酸鹽的清除作用均較小,并隨著提取液量的增加而緩慢增加,醇提物的清除作用略高于水提物,原因可能是盡管醇提物中黃酮含量高于水提物,但由于水提物中溶解了更多的糖類化合物和有機酸,這些物質(zhì)對亞硝酸鹽具有一定的清除作用,所以使二者的差距不大。當加入提取液的量由1.0 mL增加到2.0 mL時,對亞硝酸鹽的清除作用迅速增加,超過2.0 mL后,增長放緩,醇提物對亞硝酸鹽的清除作用明顯高于水提物,并且差距越來越大,這可能是醇提物中含有更多的黃酮類化合物,對亞硝酸鹽的清除作用更突顯出來。當加入提取液4.0 mL,醇提物對亞硝酸鹽的清除率可以達到86.84%(水提物為75.88%),說明野木瓜對亞硝酸鹽有較好的清除作用。

    2.2 野木瓜提取液對亞硝胺合成的阻斷作用

    野木瓜提取液對亞硝胺合成的阻斷作用見圖2。由圖2可知,在體外模擬人體胃液的條件下,隨著野木瓜提取液量的增加,對亞硝胺合成的阻斷能力迅速提高,在0.5~1.0 mL時,野木瓜醇提物對亞硝胺的阻斷率略低于水提物,可能是由于水提物中溶解了更多的糖類化合物和有機酸的原因。當加入提取液量超過1.0 mL后,醇提物對亞硝胺合成的阻斷作用迅速增長,快于水提物,并慢慢超過水提物,這可能是由于醇提物中含有較多的黃酮類化合物,其對亞硝胺合成的阻斷作用逐漸突顯出來。當加入提取液量超過1.5 mL后,水提物對亞硝胺合成的阻斷作用的增加逐漸放緩,而醇提物在超過1.5 mL后仍快速增加,直到2.0 mL后才放緩,并使其阻斷率顯著高于水提物。在加入提取液量超過3.0 mL時醇提物和水提物對亞硝胺合成的阻斷作用的變化均趨于平緩。當加入提取液量4.0 mL(相當于0.8 g野木瓜粉的提取液)時,醇提物對亞硝胺合成的阻斷率可達92.91%(水提物也可達87.50%),說明野木瓜對亞硝胺合成有很好的阻斷作用。

    3 結(jié)論

    研究結(jié)果表明,在體外模擬人體胃液的條件下(pH 3.0,溫度為37 ℃),用0.8 g野木瓜粉的乙醇提取液對亞硝酸鹽的清除率可達86.84%,而水提取液為75.88%,乙醇提取液對亞硝胺合成阻斷率可達92.91%,而水提取液為87.50%,說明野木瓜提取液對亞硝酸鹽的清除和亞硝胺合成阻斷均有明顯的作用,其中,醇提物對亞硝酸鹽的清除及對亞硝胺合成阻斷作用均高于水提物。因此,野木瓜的抗癌開發(fā)利用前景可觀,它可能成為一種經(jīng)濟有效的天然抗癌生物資源和抗癌保健食品或飲品。

    參考文獻:

    [1] 胡榮梅.N-亞硝基化合物分析方法[M].北京:科學(xué)出版社,1980.

    [2] 戴乾圜,逯 萍,彭少華.黃曲霉素和N-亞硝基化合物借誘發(fā)DNA互補堿對交聯(lián)而啟動癌變[J].自然科學(xué)進展,2003,13(7):693-697.

    [3] 曾瑤池,胡敏予.食物中N-亞硝基化合物與腫瘤關(guān)系的研究進展[J].中華腫瘤防治雜志,2008,1(2):151-155.

    [4] 張慶樂,王 浩,李 靜,等.黃酮類化合物在阻斷亞硝胺合成中的應(yīng)用[J].食品科技,2008(8):165-167.

    [5] 閆向陽,劉建平,夏季紅,等.甘草黃酮提取條件的優(yōu)化及抑制亞硝化反應(yīng)的研究[J].河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2007,28(2):35-37,50.

    [6] 楊轉(zhuǎn)琴,王 磊,范 娜,等.柚皮黃酮化合物含量及抗氧活性的研究[J].食品科學(xué),2006,27(4):102-105.

    [7] 陳 忻,劉愛文,陳純馨,等.殼聚糖及其衍生物對亞硝化反應(yīng)的抑制作用[J].精細化工,2005(3):209-211.

    [8] 王文平,郭祀遠,李 琳,等.野木瓜多糖中糖醛酸含量測定[J].食品科技,2007(10):84-86.

    [9] 苗明三.法定中藥藥理與臨床[M].北京:世界圖書出版公司, 1998.

    [10] 陳 瑛,李 錦,吳英良.野木瓜化學(xué)成分及其藥理和臨床研究進展[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報,2008,25(11):924-928.

    [11] 張 毅,王少敏.木瓜高效栽培與利用[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2003.

    [12] 陳國棟,楊 磊,陳少丹,等.野木瓜屬植物化學(xué)成分和生物活性研究概況[J].中藥材,2008(2):309-315.

    [13] 龐戰(zhàn)軍.自由基醫(yī)學(xué)研究方法[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000.

    [14] 袁毅樺,陳 忻,陳純馨,等.柚皮提取物對亞硝化反應(yīng)抑制作用研究[J].化學(xué)世界,2004(1):26-28,34.

    [15] 張 虹,許 鋼,袁建耀.劉寄奴提取液對亞硝化反應(yīng)的抑制作用[J].鄭州糧食學(xué)院學(xué)報,2000(1):50-53.

    [16] 謝祥茂,丁小雯,陳俊琴.金櫻子提取液對NO2-清除作用的體外試驗研究[J].食品科學(xué),2001,22(1):31.

    (責任編輯 龍小玲)

    HCl

    (CH3)2NH+NaNO2→(CH3)2N·N0+NaCl+H2O

    當往野木瓜醇提物和水提物中依次加入二甲胺與亞硝酸鈉時,提取物優(yōu)先同亞硝酸鈉作用,從而達到阻止亞硝胺生成的目的。據(jù)此可以通過比較相同條件下生成亞硝胺量的多少來反映提取物阻斷能力的強弱,生成亞硝胺量少,提取液的阻斷能力就強,反之則弱[14]。

    基于N-亞硝基化合物的光化學(xué)反應(yīng),在紫外光照射下,亞硝胺光解并轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的仲胺和亞硝酸根,基反應(yīng)式為:

    紫外光

    H2O+(CH3)2N·NO→(CH3)2NH2++NO2-

    測定NO2-的含量(方法見“1.2.2”)即可知二甲基亞硝胺的含量,從而即可測出提取液對亞硝胺合成的阻斷率。具體方法為:準確吸取“1.2.1”所得野木瓜醇提取物和水提物樣液0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 mL于20 mL容量瓶中,分別加入pH 3.0的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液10 mL,再加入0.1 g/L的亞硝酸鈉溶液2 mL, 加入1 mmol/L的二甲胺溶液1 mL, 用去離子水定容,37 ℃恒溫反應(yīng)1 h。準確吸取1 mL上述溶液到7 cm2培養(yǎng)皿中,加入0.5% Na2CO3溶液0.5 mL,在紫外分析儀上照射15 min(紫外燈距液面15 cm)。取出加入1%的對氨基苯磺酸和0.1%α-萘胺各1.5 mL,加入去離子水0.5 mL,混勻,靜置15 min,在525 nm處測定吸光度,平行做3次求平均值。計算公式為:

    阻斷率=(A0-Ax)/A0×100%

    式中,A0為未加提取液(即加入0 mL提取液)時的吸光度;Ax為加入不同量提取液的吸光度

    2 結(jié)果與分析

    2.1 野木瓜提取液對亞硝酸鹽清除作用

    野木瓜提取液對亞硝酸鹽清除作用見圖1。從圖1可以看出,在體外模擬人體胃液的條件下,當加入提取液的量較少時,野木瓜提取液(醇提物和水提物)對亞硝酸鹽的清除作用均較小,并隨著提取液量的增加而緩慢增加,醇提物的清除作用略高于水提物,原因可能是盡管醇提物中黃酮含量高于水提物,但由于水提物中溶解了更多的糖類化合物和有機酸,這些物質(zhì)對亞硝酸鹽具有一定的清除作用,所以使二者的差距不大。當加入提取液的量由1.0 mL增加到2.0 mL時,對亞硝酸鹽的清除作用迅速增加,超過2.0 mL后,增長放緩,醇提物對亞硝酸鹽的清除作用明顯高于水提物,并且差距越來越大,這可能是醇提物中含有更多的黃酮類化合物,對亞硝酸鹽的清除作用更突顯出來。當加入提取液4.0 mL,醇提物對亞硝酸鹽的清除率可以達到86.84%(水提物為75.88%),說明野木瓜對亞硝酸鹽有較好的清除作用。

    2.2 野木瓜提取液對亞硝胺合成的阻斷作用

    野木瓜提取液對亞硝胺合成的阻斷作用見圖2。由圖2可知,在體外模擬人體胃液的條件下,隨著野木瓜提取液量的增加,對亞硝胺合成的阻斷能力迅速提高,在0.5~1.0 mL時,野木瓜醇提物對亞硝胺的阻斷率略低于水提物,可能是由于水提物中溶解了更多的糖類化合物和有機酸的原因。當加入提取液量超過1.0 mL后,醇提物對亞硝胺合成的阻斷作用迅速增長,快于水提物,并慢慢超過水提物,這可能是由于醇提物中含有較多的黃酮類化合物,其對亞硝胺合成的阻斷作用逐漸突顯出來。當加入提取液量超過1.5 mL后,水提物對亞硝胺合成的阻斷作用的增加逐漸放緩,而醇提物在超過1.5 mL后仍快速增加,直到2.0 mL后才放緩,并使其阻斷率顯著高于水提物。在加入提取液量超過3.0 mL時醇提物和水提物對亞硝胺合成的阻斷作用的變化均趨于平緩。當加入提取液量4.0 mL(相當于0.8 g野木瓜粉的提取液)時,醇提物對亞硝胺合成的阻斷率可達92.91%(水提物也可達87.50%),說明野木瓜對亞硝胺合成有很好的阻斷作用。

    3 結(jié)論

    研究結(jié)果表明,在體外模擬人體胃液的條件下(pH 3.0,溫度為37 ℃),用0.8 g野木瓜粉的乙醇提取液對亞硝酸鹽的清除率可達86.84%,而水提取液為75.88%,乙醇提取液對亞硝胺合成阻斷率可達92.91%,而水提取液為87.50%,說明野木瓜提取液對亞硝酸鹽的清除和亞硝胺合成阻斷均有明顯的作用,其中,醇提物對亞硝酸鹽的清除及對亞硝胺合成阻斷作用均高于水提物。因此,野木瓜的抗癌開發(fā)利用前景可觀,它可能成為一種經(jīng)濟有效的天然抗癌生物資源和抗癌保健食品或飲品。

    參考文獻:

    [1] 胡榮梅.N-亞硝基化合物分析方法[M].北京:科學(xué)出版社,1980.

    [2] 戴乾圜,逯 萍,彭少華.黃曲霉素和N-亞硝基化合物借誘發(fā)DNA互補堿對交聯(lián)而啟動癌變[J].自然科學(xué)進展,2003,13(7):693-697.

    [3] 曾瑤池,胡敏予.食物中N-亞硝基化合物與腫瘤關(guān)系的研究進展[J].中華腫瘤防治雜志,2008,1(2):151-155.

    [4] 張慶樂,王 浩,李 靜,等.黃酮類化合物在阻斷亞硝胺合成中的應(yīng)用[J].食品科技,2008(8):165-167.

    [5] 閆向陽,劉建平,夏季紅,等.甘草黃酮提取條件的優(yōu)化及抑制亞硝化反應(yīng)的研究[J].河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2007,28(2):35-37,50.

    [6] 楊轉(zhuǎn)琴,王 磊,范 娜,等.柚皮黃酮化合物含量及抗氧活性的研究[J].食品科學(xué),2006,27(4):102-105.

    [7] 陳 忻,劉愛文,陳純馨,等.殼聚糖及其衍生物對亞硝化反應(yīng)的抑制作用[J].精細化工,2005(3):209-211.

    [8] 王文平,郭祀遠,李 琳,等.野木瓜多糖中糖醛酸含量測定[J].食品科技,2007(10):84-86.

    [9] 苗明三.法定中藥藥理與臨床[M].北京:世界圖書出版公司, 1998.

    [10] 陳 瑛,李 錦,吳英良.野木瓜化學(xué)成分及其藥理和臨床研究進展[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報,2008,25(11):924-928.

    [11] 張 毅,王少敏.木瓜高效栽培與利用[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2003.

    [12] 陳國棟,楊 磊,陳少丹,等.野木瓜屬植物化學(xué)成分和生物活性研究概況[J].中藥材,2008(2):309-315.

    [13] 龐戰(zhàn)軍.自由基醫(yī)學(xué)研究方法[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000.

    [14] 袁毅樺,陳 忻,陳純馨,等.柚皮提取物對亞硝化反應(yīng)抑制作用研究[J].化學(xué)世界,2004(1):26-28,34.

    [15] 張 虹,許 鋼,袁建耀.劉寄奴提取液對亞硝化反應(yīng)的抑制作用[J].鄭州糧食學(xué)院學(xué)報,2000(1):50-53.

    [16] 謝祥茂,丁小雯,陳俊琴.金櫻子提取液對NO2-清除作用的體外試驗研究[J].食品科學(xué),2001,22(1):31.

    (責任編輯 龍小玲)

    HCl

    (CH3)2NH+NaNO2→(CH3)2N·N0+NaCl+H2O

    當往野木瓜醇提物和水提物中依次加入二甲胺與亞硝酸鈉時,提取物優(yōu)先同亞硝酸鈉作用,從而達到阻止亞硝胺生成的目的。據(jù)此可以通過比較相同條件下生成亞硝胺量的多少來反映提取物阻斷能力的強弱,生成亞硝胺量少,提取液的阻斷能力就強,反之則弱[14]。

    基于N-亞硝基化合物的光化學(xué)反應(yīng),在紫外光照射下,亞硝胺光解并轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的仲胺和亞硝酸根,基反應(yīng)式為:

    紫外光

    H2O+(CH3)2N·NO→(CH3)2NH2++NO2-

    測定NO2-的含量(方法見“1.2.2”)即可知二甲基亞硝胺的含量,從而即可測出提取液對亞硝胺合成的阻斷率。具體方法為:準確吸取“1.2.1”所得野木瓜醇提取物和水提物樣液0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 mL于20 mL容量瓶中,分別加入pH 3.0的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液10 mL,再加入0.1 g/L的亞硝酸鈉溶液2 mL, 加入1 mmol/L的二甲胺溶液1 mL, 用去離子水定容,37 ℃恒溫反應(yīng)1 h。準確吸取1 mL上述溶液到7 cm2培養(yǎng)皿中,加入0.5% Na2CO3溶液0.5 mL,在紫外分析儀上照射15 min(紫外燈距液面15 cm)。取出加入1%的對氨基苯磺酸和0.1%α-萘胺各1.5 mL,加入去離子水0.5 mL,混勻,靜置15 min,在525 nm處測定吸光度,平行做3次求平均值。計算公式為:

    阻斷率=(A0-Ax)/A0×100%

    式中,A0為未加提取液(即加入0 mL提取液)時的吸光度;Ax為加入不同量提取液的吸光度

    2 結(jié)果與分析

    2.1 野木瓜提取液對亞硝酸鹽清除作用

    野木瓜提取液對亞硝酸鹽清除作用見圖1。從圖1可以看出,在體外模擬人體胃液的條件下,當加入提取液的量較少時,野木瓜提取液(醇提物和水提物)對亞硝酸鹽的清除作用均較小,并隨著提取液量的增加而緩慢增加,醇提物的清除作用略高于水提物,原因可能是盡管醇提物中黃酮含量高于水提物,但由于水提物中溶解了更多的糖類化合物和有機酸,這些物質(zhì)對亞硝酸鹽具有一定的清除作用,所以使二者的差距不大。當加入提取液的量由1.0 mL增加到2.0 mL時,對亞硝酸鹽的清除作用迅速增加,超過2.0 mL后,增長放緩,醇提物對亞硝酸鹽的清除作用明顯高于水提物,并且差距越來越大,這可能是醇提物中含有更多的黃酮類化合物,對亞硝酸鹽的清除作用更突顯出來。當加入提取液4.0 mL,醇提物對亞硝酸鹽的清除率可以達到86.84%(水提物為75.88%),說明野木瓜對亞硝酸鹽有較好的清除作用。

    2.2 野木瓜提取液對亞硝胺合成的阻斷作用

    野木瓜提取液對亞硝胺合成的阻斷作用見圖2。由圖2可知,在體外模擬人體胃液的條件下,隨著野木瓜提取液量的增加,對亞硝胺合成的阻斷能力迅速提高,在0.5~1.0 mL時,野木瓜醇提物對亞硝胺的阻斷率略低于水提物,可能是由于水提物中溶解了更多的糖類化合物和有機酸的原因。當加入提取液量超過1.0 mL后,醇提物對亞硝胺合成的阻斷作用迅速增長,快于水提物,并慢慢超過水提物,這可能是由于醇提物中含有較多的黃酮類化合物,其對亞硝胺合成的阻斷作用逐漸突顯出來。當加入提取液量超過1.5 mL后,水提物對亞硝胺合成的阻斷作用的增加逐漸放緩,而醇提物在超過1.5 mL后仍快速增加,直到2.0 mL后才放緩,并使其阻斷率顯著高于水提物。在加入提取液量超過3.0 mL時醇提物和水提物對亞硝胺合成的阻斷作用的變化均趨于平緩。當加入提取液量4.0 mL(相當于0.8 g野木瓜粉的提取液)時,醇提物對亞硝胺合成的阻斷率可達92.91%(水提物也可達87.50%),說明野木瓜對亞硝胺合成有很好的阻斷作用。

    3 結(jié)論

    研究結(jié)果表明,在體外模擬人體胃液的條件下(pH 3.0,溫度為37 ℃),用0.8 g野木瓜粉的乙醇提取液對亞硝酸鹽的清除率可達86.84%,而水提取液為75.88%,乙醇提取液對亞硝胺合成阻斷率可達92.91%,而水提取液為87.50%,說明野木瓜提取液對亞硝酸鹽的清除和亞硝胺合成阻斷均有明顯的作用,其中,醇提物對亞硝酸鹽的清除及對亞硝胺合成阻斷作用均高于水提物。因此,野木瓜的抗癌開發(fā)利用前景可觀,它可能成為一種經(jīng)濟有效的天然抗癌生物資源和抗癌保健食品或飲品。

    參考文獻:

    [1] 胡榮梅.N-亞硝基化合物分析方法[M].北京:科學(xué)出版社,1980.

    [2] 戴乾圜,逯 萍,彭少華.黃曲霉素和N-亞硝基化合物借誘發(fā)DNA互補堿對交聯(lián)而啟動癌變[J].自然科學(xué)進展,2003,13(7):693-697.

    [3] 曾瑤池,胡敏予.食物中N-亞硝基化合物與腫瘤關(guān)系的研究進展[J].中華腫瘤防治雜志,2008,1(2):151-155.

    [4] 張慶樂,王 浩,李 靜,等.黃酮類化合物在阻斷亞硝胺合成中的應(yīng)用[J].食品科技,2008(8):165-167.

    [5] 閆向陽,劉建平,夏季紅,等.甘草黃酮提取條件的優(yōu)化及抑制亞硝化反應(yīng)的研究[J].河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2007,28(2):35-37,50.

    [6] 楊轉(zhuǎn)琴,王 磊,范 娜,等.柚皮黃酮化合物含量及抗氧活性的研究[J].食品科學(xué),2006,27(4):102-105.

    [7] 陳 忻,劉愛文,陳純馨,等.殼聚糖及其衍生物對亞硝化反應(yīng)的抑制作用[J].精細化工,2005(3):209-211.

    [8] 王文平,郭祀遠,李 琳,等.野木瓜多糖中糖醛酸含量測定[J].食品科技,2007(10):84-86.

    [9] 苗明三.法定中藥藥理與臨床[M].北京:世界圖書出版公司, 1998.

    [10] 陳 瑛,李 錦,吳英良.野木瓜化學(xué)成分及其藥理和臨床研究進展[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報,2008,25(11):924-928.

    [11] 張 毅,王少敏.木瓜高效栽培與利用[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2003.

    [12] 陳國棟,楊 磊,陳少丹,等.野木瓜屬植物化學(xué)成分和生物活性研究概況[J].中藥材,2008(2):309-315.

    [13] 龐戰(zhàn)軍.自由基醫(yī)學(xué)研究方法[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000.

    [14] 袁毅樺,陳 忻,陳純馨,等.柚皮提取物對亞硝化反應(yīng)抑制作用研究[J].化學(xué)世界,2004(1):26-28,34.

    [15] 張 虹,許 鋼,袁建耀.劉寄奴提取液對亞硝化反應(yīng)的抑制作用[J].鄭州糧食學(xué)院學(xué)報,2000(1):50-53.

    [16] 謝祥茂,丁小雯,陳俊琴.金櫻子提取液對NO2-清除作用的體外試驗研究[J].食品科學(xué),2001,22(1):31.

    (責任編輯 龍小玲)

    猜你喜歡
    亞硝酸鈉亞硝胺
    亞硝酸鈉中紅外光譜及熱變性分析
    生姜對亞硝胺合成及體內(nèi)代謝活化的抑制作用
    云南化工(2020年11期)2021-01-14 00:50:38
    黃芪百合顆粒對亞硝酸鈉中毒致缺氧性損傷小鼠的保護作用
    中成藥(2018年7期)2018-08-04 06:03:58
    藤茶抑制N-亞硝胺的生成及誘導(dǎo)人前列腺癌PC-3細胞凋亡作用
    中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:50:29
    亞硝酸鈉價格上漲
    京津冀地區(qū)雞產(chǎn)品中N-亞硝胺含量分析
    二乙基亞硝胺誘導(dǎo)肝癌小鼠肝組織膠原纖維的變化
    碳納米管/石墨烯負載四氨基鈷酞菁電極用于亞硝酸鈉的檢測
    植物乳桿菌AB-1降解亞硝酸鈉的條件優(yōu)化
    中國釀造(2014年9期)2014-03-11 20:21:02
    黑糯玉米色素清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成的研究
    免费观看精品视频网站| 欧美性长视频在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费 | 日日干狠狠操夜夜爽| 精品熟女少妇八av免费久了| 欧美一级a爱片免费观看看 | 亚洲一区二区三区不卡视频| 午夜福利18| АⅤ资源中文在线天堂| 久久香蕉激情| 一区二区三区国产精品乱码| 婷婷精品国产亚洲av在线| 啦啦啦 在线观看视频| 高清毛片免费观看视频网站| 久久热在线av| 黄色 视频免费看| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 露出奶头的视频| 久久香蕉激情| 99久久99久久久精品蜜桃| 女同久久另类99精品国产91| 国产91精品成人一区二区三区| 老鸭窝网址在线观看| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 午夜亚洲福利在线播放| 老司机福利观看| 无限看片的www在线观看| 波多野结衣高清无吗| 国产精品日韩av在线免费观看 | 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 久久精品成人免费网站| 国产精品一区二区免费欧美| 妹子高潮喷水视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 给我免费播放毛片高清在线观看| 欧美久久黑人一区二区| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 国产一区二区三区综合在线观看| 久久这里只有精品19| 日日夜夜操网爽| 亚洲精品在线美女| 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲成a人片在线一区二区| 久久 成人 亚洲| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 国产一卡二卡三卡精品| 后天国语完整版免费观看| xxx96com| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 久久久久国产一级毛片高清牌| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 日本五十路高清| 久久久精品欧美日韩精品| 国产成人av教育| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲精品av麻豆狂野| 久久婷婷成人综合色麻豆| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲在线自拍视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 免费观看人在逋| 首页视频小说图片口味搜索| 国语自产精品视频在线第100页| 乱人伦中国视频| 一进一出好大好爽视频| 搡老妇女老女人老熟妇| 成年女人毛片免费观看观看9| 日韩国内少妇激情av| 在线视频色国产色| 男女下面插进去视频免费观看| 亚洲avbb在线观看| 国产乱人伦免费视频| 久久狼人影院| 国产成人影院久久av| 国产人伦9x9x在线观看| 成人av一区二区三区在线看| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产麻豆69| 在线观看舔阴道视频| av中文乱码字幕在线| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 69精品国产乱码久久久| 黑人操中国人逼视频| 精品人妻1区二区| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 国产精品爽爽va在线观看网站 | 亚洲七黄色美女视频| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产野战对白在线观看| 在线观看午夜福利视频| 成人精品一区二区免费| 国产又色又爽无遮挡免费看| 亚洲国产精品成人综合色| 午夜成年电影在线免费观看| 国产成人欧美| 国产精品av久久久久免费| 亚洲成国产人片在线观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 中文字幕精品免费在线观看视频| 亚洲成人久久性| av在线播放免费不卡| 他把我摸到了高潮在线观看| 亚洲av片天天在线观看| 最新美女视频免费是黄的| 激情在线观看视频在线高清| 乱人伦中国视频| 色综合站精品国产| 好男人在线观看高清免费视频 | 国产亚洲欧美98| 9色porny在线观看| 国产精品一区二区免费欧美| 午夜日韩欧美国产| 亚洲熟女毛片儿| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 一二三四社区在线视频社区8| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 99香蕉大伊视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 精品高清国产在线一区| 午夜激情av网站| av中文乱码字幕在线| 99在线人妻在线中文字幕| 一级,二级,三级黄色视频| e午夜精品久久久久久久| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产精品久久久人人做人人爽| a在线观看视频网站| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲精品一区av在线观看| 99国产综合亚洲精品| 国产亚洲欧美精品永久| 午夜两性在线视频| 久久久久久国产a免费观看| 女人精品久久久久毛片| 久久精品91蜜桃| 国产午夜精品久久久久久| 操出白浆在线播放| 一级毛片高清免费大全| 日韩精品免费视频一区二区三区| 精品欧美国产一区二区三| 99国产精品免费福利视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲av日韩精品久久久久久密| 女人精品久久久久毛片| 亚洲电影在线观看av| 久久精品人人爽人人爽视色| 国产精品永久免费网站| 韩国精品一区二区三区| 十八禁人妻一区二区| 窝窝影院91人妻| 国产亚洲精品第一综合不卡| 日韩大码丰满熟妇| 欧美日本视频| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 大码成人一级视频| 身体一侧抽搐| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲第一电影网av| 国产精品影院久久| 国产精品 国内视频| 久久人妻av系列| 国产精品综合久久久久久久免费 | 真人做人爱边吃奶动态| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲中文日韩欧美视频| 日本 av在线| 午夜精品在线福利| 搞女人的毛片| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲成国产人片在线观看| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 日韩三级视频一区二区三区| 色av中文字幕| ponron亚洲| 狠狠狠狠99中文字幕| 最近最新中文字幕大全电影3 | 欧美在线黄色| 国产精华一区二区三区| 丝袜美足系列| 午夜福利一区二区在线看| 69精品国产乱码久久久| 亚洲最大成人中文| 18禁国产床啪视频网站| 热99re8久久精品国产| 日韩精品中文字幕看吧| 宅男免费午夜| 免费在线观看亚洲国产| av免费在线观看网站| 在线天堂中文资源库| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 欧美在线黄色| 精品欧美国产一区二区三| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 在线免费观看的www视频| 国内精品久久久久久久电影| av免费在线观看网站| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产成人啪精品午夜网站| 老汉色∧v一级毛片| 18禁美女被吸乳视频| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产成人系列免费观看| 两性夫妻黄色片| 超碰成人久久| АⅤ资源中文在线天堂| 成熟少妇高潮喷水视频| 久久婷婷成人综合色麻豆| 日日干狠狠操夜夜爽| 国内精品久久久久精免费| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 最近最新中文字幕大全免费视频| 久久人妻av系列| 久久国产乱子伦精品免费另类| 十八禁人妻一区二区| 欧美日本视频| 日韩欧美三级三区| 国产区一区二久久| 9热在线视频观看99| 久久精品影院6| 色综合欧美亚洲国产小说| 日韩中文字幕欧美一区二区| 久久中文字幕一级| 欧美久久黑人一区二区| 欧美av亚洲av综合av国产av| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 国产成+人综合+亚洲专区| 欧美激情 高清一区二区三区| 女人被狂操c到高潮| 一级a爱视频在线免费观看| 90打野战视频偷拍视频| 日本三级黄在线观看| 日韩精品青青久久久久久| www.www免费av| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲av美国av| 国产亚洲欧美精品永久| www.自偷自拍.com| 久久久久国内视频| 亚洲专区字幕在线| 99精品欧美一区二区三区四区| 女人被狂操c到高潮| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 国内精品久久久久精免费| 国产不卡一卡二| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 又紧又爽又黄一区二区| 黄色视频,在线免费观看| 91老司机精品| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产视频一区二区在线看| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产精品电影一区二区三区| 两个人免费观看高清视频| 日本vs欧美在线观看视频| 国产一区二区三区视频了| 久久亚洲真实| 欧美乱码精品一区二区三区| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 亚洲情色 制服丝袜| 久久国产精品男人的天堂亚洲| bbb黄色大片| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 看黄色毛片网站| 亚洲成人国产一区在线观看| 91麻豆av在线| 乱人伦中国视频| 精品欧美国产一区二区三| 国产精品98久久久久久宅男小说| 免费高清在线观看日韩| 国产成人av激情在线播放| 久热这里只有精品99| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 老汉色∧v一级毛片| 一级,二级,三级黄色视频| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 国产精品一区二区三区四区久久 | 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产野战对白在线观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 搡老妇女老女人老熟妇| 在线国产一区二区在线| 国产欧美日韩精品亚洲av| 精品日产1卡2卡| 亚洲专区中文字幕在线| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 亚洲熟妇熟女久久| 国产av一区在线观看免费| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 桃色一区二区三区在线观看| 不卡一级毛片| 这个男人来自地球电影免费观看| 女性被躁到高潮视频| 免费高清在线观看日韩| 亚洲 欧美一区二区三区| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产精品久久电影中文字幕| 在线视频色国产色| 日本vs欧美在线观看视频| ponron亚洲| 久久午夜亚洲精品久久| 一边摸一边做爽爽视频免费| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 高清在线国产一区| 男女下面进入的视频免费午夜 | 亚洲国产中文字幕在线视频| 美女大奶头视频| av片东京热男人的天堂| 日韩精品青青久久久久久| 一级作爱视频免费观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久久久久久久久久久大奶| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 91成年电影在线观看| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 在线观看一区二区三区| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 可以在线观看的亚洲视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 午夜福利视频1000在线观看 | 国产麻豆成人av免费视频| 妹子高潮喷水视频| 嫁个100分男人电影在线观看| av免费在线观看网站| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 国产亚洲精品av在线| 亚洲精品美女久久av网站| 两个人看的免费小视频| 99re在线观看精品视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 精品久久久久久久毛片微露脸| 中文字幕久久专区| 十八禁网站免费在线| 最近最新中文字幕大全电影3 | 淫秽高清视频在线观看| 一区二区三区国产精品乱码| 欧美日本中文国产一区发布| 国产精品一区二区免费欧美| 日韩欧美三级三区| 最近最新中文字幕大全电影3 | 一个人免费在线观看的高清视频| 99国产精品99久久久久| 久久久久久国产a免费观看| 丁香六月欧美| 变态另类丝袜制服| 99精品在免费线老司机午夜| 在线天堂中文资源库| 脱女人内裤的视频| 变态另类丝袜制服| 啦啦啦韩国在线观看视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 免费观看精品视频网站| 亚洲精品美女久久av网站| 脱女人内裤的视频| 国产一区二区三区综合在线观看| 久久热在线av| 欧美黑人欧美精品刺激| 午夜免费鲁丝| 久久精品影院6| 中文字幕久久专区| 啦啦啦 在线观看视频| 99精品在免费线老司机午夜| 国产黄a三级三级三级人| 日日夜夜操网爽| 美女高潮到喷水免费观看| 看片在线看免费视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 国产精品野战在线观看| 国产午夜精品久久久久久| 国产精品野战在线观看| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 一级毛片高清免费大全| 免费高清在线观看日韩| 亚洲一区二区三区不卡视频| 男女之事视频高清在线观看| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 久久亚洲真实| 女同久久另类99精品国产91| 大香蕉久久成人网| 妹子高潮喷水视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 午夜视频精品福利| 日韩有码中文字幕| 久久欧美精品欧美久久欧美| 日本vs欧美在线观看视频| 十八禁网站免费在线| 久久影院123| 一级a爱视频在线免费观看| 日韩精品青青久久久久久| 无遮挡黄片免费观看| 村上凉子中文字幕在线| 午夜亚洲福利在线播放| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 操出白浆在线播放| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 99久久久亚洲精品蜜臀av| cao死你这个sao货| 成人精品一区二区免费| 国产精品久久久人人做人人爽| 黄色片一级片一级黄色片| 久热爱精品视频在线9| 日本免费a在线| 国产在线精品亚洲第一网站| 在线观看一区二区三区| 午夜精品在线福利| 亚洲色图综合在线观看| 少妇粗大呻吟视频| 亚洲,欧美精品.| 男女之事视频高清在线观看| 一级作爱视频免费观看| 又黄又粗又硬又大视频| 久久精品国产清高在天天线| 亚洲五月天丁香| 中文字幕av电影在线播放| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 国产成人av教育| 亚洲中文字幕日韩| 国产国语露脸激情在线看| 无限看片的www在线观看| 久久精品影院6| 中文字幕最新亚洲高清| 成人三级黄色视频| 国产成人av教育| 亚洲电影在线观看av| 亚洲av熟女| 9191精品国产免费久久| 欧美日本中文国产一区发布| 国产亚洲欧美精品永久| 久久欧美精品欧美久久欧美| 黄片大片在线免费观看| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 性少妇av在线| 十分钟在线观看高清视频www| 国产午夜福利久久久久久| 国产高清有码在线观看视频 | av免费在线观看网站| 久久香蕉国产精品| 欧美丝袜亚洲另类 | 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产精品久久久久久精品电影 | 久久精品91蜜桃| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲伊人色综图| 成年女人毛片免费观看观看9| 在线观看一区二区三区| 黄色a级毛片大全视频| 亚洲av美国av| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 无遮挡黄片免费观看| 久久久久国内视频| 国产1区2区3区精品| 美女大奶头视频| 桃红色精品国产亚洲av| 久久精品国产综合久久久| 国产私拍福利视频在线观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 岛国在线观看网站| 老汉色av国产亚洲站长工具| www.精华液| 午夜福利18| 操美女的视频在线观看| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 在线观看日韩欧美| 亚洲精品国产区一区二| 午夜福利视频1000在线观看 | 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲一区中文字幕在线| 国产亚洲精品久久久久5区| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产在线观看jvid| 一级作爱视频免费观看| 在线观看免费视频日本深夜| 日韩欧美免费精品| 可以在线观看毛片的网站| 午夜福利欧美成人| x7x7x7水蜜桃| 不卡一级毛片| 最近最新免费中文字幕在线| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 久久香蕉激情| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲国产欧美一区二区综合| 一本大道久久a久久精品| 叶爱在线成人免费视频播放| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产精品九九99| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 制服人妻中文乱码| 天堂动漫精品| 国产亚洲精品一区二区www| 日本 欧美在线| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲激情在线av| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久亚洲精品不卡| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲精品国产区一区二| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| www.999成人在线观看| 91九色精品人成在线观看| 国产精品久久视频播放| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲第一电影网av| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 又黄又爽又免费观看的视频| tocl精华| 亚洲国产精品999在线| 最新美女视频免费是黄的| 极品教师在线免费播放| 又紧又爽又黄一区二区| 99久久国产精品久久久| av视频免费观看在线观看| 看片在线看免费视频| 国产成人精品无人区| 不卡一级毛片| 久久这里只有精品19| 纯流量卡能插随身wifi吗| 一二三四社区在线视频社区8| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产精品影院久久| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 91成人精品电影| 少妇的丰满在线观看| 欧美黑人精品巨大| 久久热在线av| av有码第一页| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 性色av乱码一区二区三区2| 午夜激情av网站| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 欧美av亚洲av综合av国产av| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产精品,欧美在线| 日日爽夜夜爽网站| 欧美激情极品国产一区二区三区| 99久久99久久久精品蜜桃| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产一卡二卡三卡精品| 欧美一级a爱片免费观看看 | 日韩国内少妇激情av| 国产亚洲精品久久久久5区| 老司机在亚洲福利影院| 国产成人影院久久av| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 男女下面进入的视频免费午夜 | 亚洲国产精品成人综合色| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 好男人在线观看高清免费视频 | 国产主播在线观看一区二区| 亚洲情色 制服丝袜| 黄片小视频在线播放| 国产1区2区3区精品| 91av网站免费观看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 青草久久国产| 激情在线观看视频在线高清| 高清毛片免费观看视频网站| 男人舔女人的私密视频| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产精品久久久人人做人人爽| 成人欧美大片| 午夜亚洲福利在线播放| 国产精品亚洲一级av第二区| 中亚洲国语对白在线视频| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲成国产人片在线观看| 久热这里只有精品99| 我的亚洲天堂| 日本免费a在线| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产熟女午夜一区二区三区| 99国产极品粉嫩在线观看| 人妻久久中文字幕网| 深夜精品福利| 色综合婷婷激情| 免费搜索国产男女视频| 成人av一区二区三区在线看| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产高清激情床上av| 午夜久久久久精精品| 亚洲人成77777在线视频| 九色亚洲精品在线播放| 69精品国产乱码久久久| 国产男靠女视频免费网站| 多毛熟女@视频| 欧美激情极品国产一区二区三区| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 免费人成视频x8x8入口观看| 一边摸一边做爽爽视频免费| 午夜精品在线福利| 亚洲伊人色综图| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲第一青青草原|