血漿Lp-PLA2及YKL-40濃度與冠狀動脈病變程度的相關(guān)性分析

侯衛(wèi)濤，高東來，彭躍華，周 俐

血漿Lp-PLA2及YKL-40濃度與冠狀動脈病變程度的相關(guān)性分析

侯衛(wèi)濤1，高東來2，彭躍華1，周 俐1

目的 探討血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(LP-PLA2)及幾丁質(zhì)酶-3樣蛋白-1(YKL-40)濃度與冠狀動脈病變嚴(yán)重程度的相關(guān)性。方法 選取2010年12月—2014年6月因胸痛在焦作煤業(yè)集團(tuán)中央醫(yī)院及山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院心內(nèi)科住院并接受冠狀動脈造影術(shù)(CAG)患者230例。將CAG顯示為非冠心病者設(shè)為對照組共76例，穩(wěn)定型心絞痛組68例，急性冠脈綜合征組86例。采用Gensini評分系統(tǒng)評定冠脈病變程度，同時測定3組患者LP-PLA2及血清YKL-40濃度變化，評估冠脈病變嚴(yán)重程度與血漿LP-PLA2及YKL-40水平的相關(guān)性。結(jié)果 穩(wěn)定型心絞痛組、急性冠脈綜合征組Lp-PLA2及YKL-40水平明顯高于非冠心病組(P<0.05)，急性冠脈綜合征組Lp-PLA2及YKL-40水平明顯高于穩(wěn)定型心絞痛組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。將病變支數(shù)相同的患者合并，結(jié)果顯示：隨著病變支數(shù)增加，LP-PLA2及YKL-40水平逐步升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；隨著Gensini積分增加，Lp-PLA2及YKL-40水平逐步升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 LP-PLA2及YKL-40的水平與冠脈病變嚴(yán)重程度及斑塊不穩(wěn)定性相關(guān)，可以作為預(yù)測冠心病危險程度的重要指標(biāo)。

冠狀動脈病變程度；脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2；幾丁質(zhì)酶-3樣蛋白-1

冠心病是當(dāng)今嚴(yán)重危害人類健康、影響人們生活質(zhì)量的最常見心血管疾病之一。目前許多的證據(jù)表明[1]，局部和全身的炎癥在冠心病動脈硬化及其并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)及幾丁質(zhì)酶-3樣蛋白-1(YKL-40)作為新近研究的炎癥介質(zhì)，具有促進(jìn)動脈粥樣硬化的作用，與心血管事件的發(fā)生有密切相關(guān)，可能成為冠心病發(fā)病的獨(dú)立危險因素。因而控制血漿Lp-PLA2及YKL-40活性及含量可能成為冠心病治療的潛在目標(biāo)靶點(diǎn)。本研究入選不同類型冠心病及對照組的患者，對其進(jìn)行選擇性冠狀動脈造影(CAG)，測定不同組別之間血漿中Lp-PLA2及YKL-40的水平，以探討Lp-PLA2及YKL-40與冠狀動脈病變嚴(yán)重程度的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2010年12月—2014年6月因胸痛在焦作煤業(yè)集團(tuán)中央醫(yī)院及山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院心內(nèi)科住院并接受冠狀動脈造影術(shù)患者230例，其中男129例，女101例，年齡36歲～82歲(60.1歲±10.3歲)。將造影顯示為非冠心病者設(shè)為對照組共76例，穩(wěn)定型心絞痛組68例，急性冠脈綜合征組86例。所有患者均詳細(xì)詢問病史、體格檢查、行相關(guān)化驗(yàn)、檢查等。CAG術(shù)前均測定血清Lp-PLA2、YKL-40。本研究經(jīng)焦作煤業(yè)集團(tuán)中央醫(yī)院及山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，入選患者均簽署知情同意書。

1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 血液系統(tǒng)疾病，急慢性感染性疾病，甲狀腺疾病，急慢性肝腎功能不全，自身免疫性疾病，惡性腫瘤及心功能不全、心臟瓣膜病等。

1.3 方法

1.3.1 Lp-PLA2水平測定 冠狀動脈造影當(dāng)天清晨空腹采集肘靜脈血5 mL，肝素抗凝，靜置后以2 500 r/min離心10 min，取上層血漿置于-80 ℃冰凍保存待測。在1個月內(nèi)測定各項(xiàng)指標(biāo)。測定當(dāng)日于37 ℃水浴中迅速復(fù)融。所有樣本一次性成批檢測，試劑盒由南京諾爾曼公司提供。操作過程嚴(yán)格按照說明書要求。

1.3.2 YKL-40水平測定 冠狀動脈造影當(dāng)天清晨空腹采集肘靜脈血5 mL，室溫靜置30 min，離心分離血清，并置于-80 ℃冰箱保存，所有樣本一次性成批檢測。YKL-40測定采用酶聯(lián)免疫吸附測試法(ELISA)，試劑盒由上海基爾頓生物科技有限公司提供。操作過程嚴(yán)格按照說明書要求。

1.3.3 冠狀動脈造影及冠狀動脈狹窄程度的評價 所有入選對象均采用Judkins法進(jìn)行選擇性冠狀動脈造

影，多角度、多體位投照。由2名經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)生共同判讀造影結(jié)果。參照1984年美國心臟病學(xué)會/美國心臟病協(xié)會(ACC/AHA)冠狀動脈造影指南和Gensini積分評估系統(tǒng)，采用兩種方式評估，①冠脈病變支數(shù)：當(dāng)病變管腔狹窄≥50%時為冠心病，累及左前降支、左回旋支、右冠脈各記為1支，累及左主干記為2支。②Gensini積分法：將冠脈分段，根據(jù)病變血管的不同節(jié)段和血管病變不同程度制定不同的權(quán)重系數(shù)，評分方法為冠脈狹窄程度權(quán)重系數(shù)乘以各病變血管的權(quán)重系數(shù)，最后評分為各分支評分之和。

2 結(jié) 果

2.1 3組患者一般資料比較(見表1) 3組在年齡、吸煙、飲酒、血脂、體重指數(shù)、糖尿病發(fā)病率方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。詳見表1。

表1 3組患者一般資料對比情況

2.2 Lp-PLA2及YKL-40水平與冠脈病變支數(shù)關(guān)系 穩(wěn)定型心絞痛組、急性冠脈綜合征組的Lp-PLA2及YKL-40水平明顯高于非冠心病組(P<0.05)，急性冠脈綜合征組Lp-PLA2及YKL-40水平明顯高于穩(wěn)定型心絞痛組(P<0.05)。將病變支數(shù)相同的3組患者合并后結(jié)果顯示：隨著病變支數(shù)增加，Lp-PLA2及YKL-40水平逐步升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Lp-PLA2及YKL-40水平與冠脈狹窄程度評估：隨著Gensini積分增加，Lp-PLA2及YKL-40水平逐步升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 LP-PLA2及YKL-40濃度與冠脈病變支數(shù)的關(guān)系(±s)

2.3 冠心病危險因素Logistic回歸分析 以冠心病(無=0，有=1)為應(yīng)變量，以性別、年齡、高血壓(無=0，有=1)、糖尿病(無=0，有=1)、抽煙(無=0，有=1)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白(a)[LP(a)]、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、Lp-PLA2為自變量，進(jìn)行Logistic回歸分析，結(jié)果顯示：Lp-PLA2、YKL-40、吸煙與LDL-C與冠心病獨(dú)立相關(guān)；性別、TC等其他指標(biāo)與冠心病無明顯相關(guān)。詳見表3。

表3 冠脈病變嚴(yán)重程度的Logistic逐步回歸分析結(jié)果

2.3 冠狀動脈積分(Gensini積分)危險因素的多元逐步回歸分析 以Gensini積分為應(yīng)變量，以年齡、吸煙、體重指數(shù)、TC、TG、HDL-C、LDL-C、血漿Lp-PLA2及YKL-40為自變量進(jìn)行多元逐步回歸分析，采用逐步篩選法引入方程，最終保留在方程中的變量為LDL-C、Lp-PLA2、YKL-40上述3個變量與Gensini積分獨(dú)立相關(guān)。詳見表4。

表4 冠心病患者Gensini積分危險因素的多元逐步回歸分析

3 討 論

動脈粥樣硬化是冠心病形成和進(jìn)展的基礎(chǔ)，炎癥反應(yīng)尤其是血管內(nèi)的炎癥反應(yīng)參與了動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展和斑塊的破裂以及繼發(fā)的心血管事件過程。但是現(xiàn)有的檢測手段不能快速有效地檢測血管內(nèi)的炎癥反應(yīng)情況，從而在早期評估發(fā)生心血管事件的風(fēng)險，以便于盡早干預(yù)，減少惡性心血管事件的發(fā)生。因此，發(fā)現(xiàn)能對心血管事件預(yù)測的靈敏炎癥標(biāo)記物成為目前研究的重點(diǎn)。而Lp-PLA2及YKL-40是近年來發(fā)現(xiàn)的新型炎癥標(biāo)志物，國外諸多研究顯示，Lp-PLA2及YKL-40獨(dú)立于傳統(tǒng)危險因子及炎癥標(biāo)志物，可以動態(tài)反映血管內(nèi)的炎癥反應(yīng)，從而用于預(yù)測冠心病患者遠(yuǎn)期發(fā)生心血管事件的風(fēng)險[2]。

Fan等[3]及Eva Motyková等[4]研究顯示，Lp-PLA2及YKL-40由局部活化的巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞在炎性環(huán)境下分泌、釋放，因此Lp-PLA2及YKL-40多存在于巨噬細(xì)胞高聚集區(qū)，特別是在病灶深處。因此，較之全身炎癥標(biāo)志物C反應(yīng)蛋白等，局部分泌的Lp-PLA2及YKL-40更具特異性。研究顯示[5]，巨噬細(xì)胞在薄纖維粥樣斑塊帽和破裂斑塊中更顯著，提示Lp-PLA2及YKL-40在易損斑塊和破裂斑塊的壞死核心區(qū)及周圍巨噬細(xì)胞中存在強(qiáng)表達(dá)，推測Lp-PLA2及YKL-40有潛在的促進(jìn)斑塊不穩(wěn)定的作用。動脈粥樣硬化研究顯示，Lp-PLA2及YKL-40是炎癥組織局部巨噬細(xì)胞激活的特異性血清學(xué)指標(biāo)[6]。

本研究結(jié)果顯示，穩(wěn)定型心絞痛組、急性冠脈綜合征組Lp-PLA2及YKL-40水平明顯高于非冠心病組，急性冠脈綜合征組Lp-PLA2及YKL-40水平明顯高于穩(wěn)定型心絞痛組，且隨著冠脈積分的增加及冠脈病變血管數(shù)目的增多，血中Lp-PLA2及YKL-40濃度明顯增加，多因素分析表明，冠心病及冠脈積分與吸煙、LDL-C、Lp-PLA2及YKL-40獨(dú)立相關(guān)。說明Lp-PLA2及YKL-40活性不僅與冠脈病變的穩(wěn)定性有關(guān)，且與冠脈病變嚴(yán)重程度明顯相關(guān)。因此，Lp-PLA2及YKL-40不只是冠心病急性階段的炎性標(biāo)志物，而且直接參與了致動脈粥樣硬化作用。這與Predersen等[7]的研究相一致。

Lp-PLA2及YKL-40促進(jìn)粥樣斑塊形成及加速斑塊不穩(wěn)定可能機(jī)制：吸煙、糖尿病、高血脂、血壓變異性大等因素可促使巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞合成并分泌Lp-PLA2及YKL-40，Lp-PLA2及YKL-40產(chǎn)生增加和活性增高后，誘導(dǎo)產(chǎn)生、活化炎癥介質(zhì)，活化的炎性介質(zhì)促進(jìn)單核細(xì)胞從管腔衍化為巨噬細(xì)胞，巨噬細(xì)胞吞噬氧化型低密度脂蛋白變成脂質(zhì)泡沫細(xì)胞，泡沫細(xì)胞增多誘導(dǎo)或加劇炎性反應(yīng)，導(dǎo)致產(chǎn)生更多Lp-PLA2及YKL-40，Lp-PLA2及YKL-40表達(dá)上調(diào)，使局部炎性反應(yīng)加強(qiáng)，從而加重內(nèi)皮的損傷，受損的內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)性機(jī)制破壞，為進(jìn)一步加強(qiáng)局部炎癥反應(yīng)及促進(jìn)新斑塊形成創(chuàng)造了條件；活化的炎性介質(zhì)可直接刺激Lp-PLA2及YKL-40表達(dá)上調(diào)，使血管內(nèi)皮細(xì)胞重塑、增殖，促進(jìn)血管平滑肌的增生和向內(nèi)膜遷移，促進(jìn)形成新生小血管，導(dǎo)致血管壁粥樣斑塊不穩(wěn)定且進(jìn)展迅速，進(jìn)而誘發(fā)心血管事件發(fā)生；同時Lp-PLA2及YKL-40介導(dǎo)的細(xì)胞因子可引起斑塊表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶，基質(zhì)金屬蛋白酶降解纖維帽的平滑肌細(xì)胞和膠原基質(zhì)，使纖維帽變薄，斑塊變得脆弱，導(dǎo)致斑塊在血流沖刷下破裂，誘發(fā)心血管事件?？傊?，Lp-PLA2及YKL-40之間相互聯(lián)系、相互促進(jìn)，形成了一個由Lp-PLA2介導(dǎo)、YKL-40參與放大的炎癥信號傳導(dǎo)通路，形成促炎物質(zhì)的持續(xù)正調(diào)節(jié)，從而促進(jìn)了粥樣斑塊的進(jìn)展及不穩(wěn)定型增加，導(dǎo)致斑塊破裂、血栓形成和不良心血管事件的發(fā)生。

本研究結(jié)果顯示，Lp-PLA2及YKL-40活性不僅與斑塊穩(wěn)定性有關(guān)，并且也與冠心病的嚴(yán)重程度相關(guān)。Winkler等研究也顯示，Lp-PLA2及YKL-40活性和冠心病的嚴(yán)重程度有相關(guān)性，且Lp-PLA2及YKL-40活性升高對冠心病危險的預(yù)示獨(dú)立與其他確定的危險因素之外，尤其獨(dú)立于LDL-C，是冠心病新的獨(dú)立危險因子[8]。因此檢測血漿中Lp-PLA2及YKL-40水平不僅可以用來識別高危個體，也可以預(yù)測冠心病發(fā)生的風(fēng)險。

綜上所述，Lp-PLA2及YKL-40水平在冠心病患者冠脈斑塊的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，與冠心病密切相關(guān)。但因本試驗(yàn)樣本數(shù)量較少，因此，需要更大的樣本量來深入研究兩者與冠心病的關(guān)系。Lp-PLA2及YKL-40將為冠心病的預(yù)防及治療開辟新的途徑。

[1] 任麗玨，王云枝.脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2和YKL-40在2型糖尿病及其大血管病變發(fā)病中的意義[J].醫(yī)學(xué)綜述，2014，20(11)：2023-2025.

[2] Abulajiang M，Boulanger M，Husseini DE，et al．Increased expression of LP-PLA2in aortic stenosis is associated with mineralization and tissue remodelling[J].Canadian Journal of Cardiology，2013，29(10)：s270.

[3] Fan JT，Si XH，Liao Y，et al.The diagnostic and prognostic value of serum YKL-40 in endometrial cancer[J].Arch Gynecol Obstet，2013，287(1)：111-115.

[4] Eva Motyková，Luk? Zlatohlávek，Martina Prusíková，et al．LP-PLA2：a new marker of cardiovascular risk[J].European Journal of Internal Medicine，2011，22(1)：S100

[5] Hyun MK，Chang HJ，Bong SC，et al．Association between coronary heart disease and inflammatory biomarker YKL-40 in type 2 diabetes subjects[J].Journal of Cardiac Failure，2012，18(8)：s16-s17.

[6] Du YM，Wei FT，Dong ZQ，et al．Prognostic value of serum LP-PLA2and hs-CRP in unstable atherosclerotic plaques[J].Clinical and Experimental Hypertension，2011，33(2)：113-116.

[7] Pedersen MW，Koenig W，Christensen JH，et al．The effect of marine n-3 fatty acids in different doses on plasma concentrations of Lp-PLA2in healthy adults[J].European Journal of Nutrition，2009，48(1)：1-5.

[8] Juan PC，Ewa Ninio，Andrie Panayiotou，et al．PLA2G7 genotype，lipoprotein- associated phospholipase A2 activity，and coronary heart disease risk in 10 494 cases and 15 624 controls of European ancestry[J].Circulation，2012，121(21)：2284-2293.

(本文編輯 郭懷印)

1.焦作煤業(yè)集團(tuán)中央醫(yī)院(河南焦作 454000)；2.山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院

高東來，E-mail：houwthappy@126.com

R541.4 R256.2

B

10．3969/j．issn．1672-1349．2015．16．019

1672-1349(2015)16-1869-04

2015-03-02)