紅芪多糖對(duì)膀胱癌大鼠抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究

田河， 邸彥橙， 宋靜， 南錫浩

(黑龍江省牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院泌尿外科，牡丹江 157011)

紅芪為傳統(tǒng)中藥中比較常見的藥材，其主要產(chǎn)地為甘肅省，質(zhì)量極佳，黃芪主要功效為益氣固表、利尿、脫毒排膿、抗氧化、抗腫瘤等，活性成份較多，但是以紅芪多糖為主，其具有抑瘤效應(yīng)，基本機(jī)制都是通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫系統(tǒng)功能而發(fā)揮作用[1]。也有加快損傷的免疫器官修復(fù)過(guò)程，提高免疫細(xì)胞的活性，促進(jìn)抗體、細(xì)胞因子的釋放等。另外該藥物有甘、淡、平，歸腎、膀胱經(jīng)，達(dá)到利水滲濕作用。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

清潔級(jí)雌性 Fisher344大鼠50只，雌雄各半，由牡丹江醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。實(shí)驗(yàn)分為5組，每組10只，即空白對(duì)照組、紅芪多糖高、中、低劑量組、豬苓多糖組。

1.2 主要試劑

紅芪多糖藥品、BBN試劑由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)購(gòu)進(jìn)。IL-2、VEGF、AQP1、AQP3、β-actin測(cè)定試劑盒(哈爾濱海霞試劑有限公司)。

1.3 主要儀器

電子天平；電熱恒溫水浴鍋(華夏儀器制造廠)；微量移液器(上海易友儀器有限公司)；TD5M-WS型臺(tái)式低速離心機(jī)；全自動(dòng)酶標(biāo)儀-WD-2102A酶標(biāo)儀；PCR擴(kuò)增儀(PTC-100TM MJ Research公司)；數(shù)碼凝膠成像分析系統(tǒng)等。

1.4 造模及給藥方法

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為5組，每組10只，即空白對(duì)照組、豬苓多糖100mg/kg組、紅芪多糖25mg/kg 組、紅芪多糖50mg/kg 組、紅芪多糖100mg/kg 組，大鼠飲用含有0.05%BBN，持續(xù)8周，第9周給予含 5%糖精的飲用水和相應(yīng)實(shí)驗(yàn)組注射干預(yù)藥物均為至第20周截止。大鼠采血后，把大鼠麻醉于手術(shù)臺(tái)上分離膀胱組織。

1.5 指標(biāo)測(cè)定

ELISA法測(cè)血清中VEGF、IL-2含量；RT-PCR法測(cè)AQP1和AQP3表達(dá)情況。

1.6 數(shù)據(jù)處理

所得數(shù)據(jù)采用方差分析兩均數(shù)間t檢驗(yàn)，SPSS18.0 軟件分析，各組數(shù)據(jù)由`x±s表示，P<0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

紅芪多糖對(duì)膀胱癌大鼠腫瘤抑制效果以中劑量為佳，其可以提高血清中IL-2含量，減少VEGF含量水平，同時(shí)下調(diào)AQP1 和 AQP3基因表達(dá)，具體結(jié)果見表1，表2。

3 討論

膀胱癌是泌尿外科最為常見的腫瘤之一，占全身癌癥發(fā)病率5﹪，惡性程度較高預(yù)后較差。多中心性發(fā)生和高發(fā)病率是該疾病的主要病程特征，治療后如果復(fù)發(fā)則呈逐級(jí)升高態(tài)勢(shì)。其病因尚不明確，與多種因素有關(guān)并且呈多階段性的發(fā)病。因此，探討膀胱癌的病因、發(fā)生、發(fā)展、治療是我們臨床工作者的重要任務(wù)，而各種腫瘤的發(fā)生發(fā)展都和免疫系統(tǒng)功能有關(guān)，現(xiàn)在治療理念基本是研發(fā)的合成西藥或者干擾素等。本研究側(cè)重于能夠提高人體免疫功能的多糖類入手，從免疫學(xué)方面深入研究，目的是能夠發(fā)現(xiàn)機(jī)體的免疫功能及狀態(tài)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)性[2]。

紅芪多糖具有促血管生成、抗自由基、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、抗腫瘤、抗衰老等活性。有資料記載，抗腫瘤作用主要是由于其可以激活機(jī)體的免疫系統(tǒng)，提高機(jī)體自身的抗腫瘤能力，釋放腫瘤殺傷的生物因子，間接的起到控制腫瘤增長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的效果。免疫系統(tǒng)中T細(xì)胞活化狀態(tài)是由IL-2維持的，其參與T細(xì)胞的活化和增值，促進(jìn)NK細(xì)胞殺傷活性、活化巨噬細(xì)胞等生物學(xué)作用[3]。VEGF具有促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、分化、也能夠增加微血管通透性，同時(shí)誘導(dǎo)血管生成，可以被認(rèn)為是促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的重要因子之一。AQP1和AQP3 與癌癥的發(fā)生關(guān)系密切，在膀胱癌組織中，兩者都較正常膀胱組織表達(dá)偏高[4]。

表1 紅芪多糖對(duì)大鼠外周血清中IL-2、VEGF(`x±s)

表2 紅芪多糖對(duì)大鼠膀胱組織中AQP1和AQP3表達(dá)的影響(`x±s)

在本實(shí)驗(yàn)中豬苓多糖[5]早已經(jīng)應(yīng)用于抗腫瘤領(lǐng)域中，通過(guò)復(fù)制大鼠膀胱癌疾病模型，對(duì)照比較不同劑量對(duì)腫瘤動(dòng)物的體內(nèi)相關(guān)因子檢測(cè)來(lái)進(jìn)一步判斷紅芪多糖拮抗癌細(xì)胞增殖的效果，結(jié)果表明各劑量組對(duì)腫瘤都有抑制作用，以中劑量組最為明顯，有增加血清中IL-2的含量減少VEGF水平，降低瘤組織中AQP1和AQP3表達(dá)能力。因此，我們可以得出，該藥物對(duì)膀胱癌的發(fā)生發(fā)展有一定的影響，希望通過(guò)更多的實(shí)驗(yàn)證實(shí)其具體機(jī)制。

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