昆明市延安醫(yī)院2001—2012年產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌耐藥性變遷

黃云昆， 朱雯梅， 姚 瑤， 王 佳， 翁媛媛

·論著·

昆明市延安醫(yī)院2001—2012年產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌耐藥性變遷

黃云昆， 朱雯梅， 姚 瑤， 王 佳， 翁媛媛

目的分析昆明市延安醫(yī)院大腸埃希菌超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBL）的檢出率變遷情況及對(duì)常用抗菌藥物的耐藥性，為臨床合理治療和控制該菌感染提供科學(xué)依據(jù)。方法用WHONET5.6藥敏統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)分析2001—2012年逐年大腸埃希菌ESBL的檢出率，分析其變遷情況，并就產(chǎn)ESBL大腸埃希菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥性進(jìn)行分析。結(jié)果2001—2012年共分離到非重復(fù)大腸埃希菌3 177株，其中產(chǎn)ESBL大腸埃希菌1 906株，總陽性率為60.0%（1 906/3 177）。期間2001年ESBL陽性檢出率最低，為36.9%（59/160），以后逐年上升，以2003—2004年上升最為明顯，從48.4%（75/155）上升至63.2% （74/117），2008年產(chǎn)ESBL大腸埃希菌檢出率最高，為72.9%（175/240），從2004—2012年ESBL檢出率呈現(xiàn)出波動(dòng)狀態(tài)，波動(dòng)在54.2%～72.9%，2008—2012年表現(xiàn)出逐年下降趨勢(shì)。在常用抗菌藥物中，產(chǎn)ESBL大腸埃希菌對(duì)美羅培南和亞胺培南的敏感率最高，分別為95.5%和95.1%；對(duì)阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦、呋喃妥因、頭孢西丁、頭孢吡肟和頭孢他啶也有較高的敏感率，分別為91.9%、85.7%、74.1%、85.7%、72.6%、76.3%和61.4%；對(duì)環(huán)丙沙星、左氧氟沙星的敏感率較低，分別為27.8%和30.3%。結(jié)論大腸埃希菌中ESBL檢出率在經(jīng)歷了一個(gè)快速上升期后，目前似已進(jìn)入一個(gè)相對(duì)平穩(wěn)波動(dòng)期，美羅培南和亞胺培南等碳青霉烯類仍是對(duì)產(chǎn)ESBL大腸埃希菌抗菌活性最強(qiáng)的抗菌藥物。該菌對(duì)哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦、阿米卡星、呋喃妥因、頭孢西丁、頭孢吡肟及頭孢他啶等也有較高的敏感性，對(duì)氟喹諾酮類敏感性偏低，產(chǎn)ESBL大腸埃希菌感染時(shí)宜根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用抗菌藥物治療。

大腸埃希菌； 超廣譜β內(nèi)酰胺酶； 耐藥性

大腸埃希菌是醫(yī)院感染最常見的病原菌之一。據(jù)全國(guó)耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)顯示，大腸埃希菌為引起醫(yī)院感染首位的病原菌［1］，可引起呼吸道、傷口、血流、泌尿道等多種器官和組織的感染，同時(shí)也是最常見的醫(yī)院感染多重耐藥菌之一。該菌主要的耐藥機(jī)制為產(chǎn)質(zhì)粒介導(dǎo)的超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBL），可對(duì)所有的青霉素類、頭孢菌素類及單環(huán)類等β內(nèi)酰胺類抗生素耐藥，對(duì)臨床有效治療大腸埃希菌引起的感染造成了很大困難。其位于質(zhì)粒的耐藥基因易于通過基因轉(zhuǎn)移和基因重組，在同種或不同種菌株間傳播，可引起耐藥性的迅速傳播和醫(yī)院感染的暴發(fā)流行。分析大腸埃希菌中ESBL檢出率的變遷情況及對(duì)該菌有效的治療藥物，對(duì)臨床合理治療、有效控制產(chǎn)ESBL大腸埃希菌引起的感染均有重要作用。本課題分析了我院2001—2012年大腸埃希菌ESBL檢出率的變遷及耐藥性情況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 所有菌株來源于我院2001—2012年住院和門診患者標(biāo)本，包括痰、肺泡灌洗液等呼吸道分泌物、血液、尿液、傷口分泌物、膿液等，按常規(guī)方法培養(yǎng)分離菌株。

1.1.2 儀器和試劑 自動(dòng)微生物鑒定藥敏系統(tǒng)VITEK-32及革蘭陰性菌鑒定卡GNI+，VITEK2-Compact及革蘭陰性菌鑒定卡GN、藥敏卡ASTGN14由生物梅里埃公司提供，K-B法MH培養(yǎng)基購(gòu)自杭州天和生物制品有限公司，美羅培南、亞胺培南、頭孢哌酮-舒巴坦藥敏紙片為OXOID產(chǎn)品，其他藥敏紙片由北京天壇藥物生物技術(shù)開發(fā)公司提供，藥敏質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853，由云南省臨床檢驗(yàn)中心提供。

1.2 方法

1.2.1 菌種鑒定和藥敏試驗(yàn) 按儀器操作程序用VITEK-32或VITEK2-Compact進(jìn)行菌種鑒定，藥敏試驗(yàn)2012年以前為K-B法，2012年為VITEK2-Compact自動(dòng)儀器法，ESBL檢測(cè)按NCCLS/CLSI標(biāo)準(zhǔn)采用雙紙片協(xié)同法、表型確證法及儀器法。

1.2.2 數(shù)據(jù)分析 根據(jù)CLSI 2011折點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)，用WHONET5.6藥敏統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，剔出重復(fù)菌株，只統(tǒng)計(jì)每例患者首次分離株。

2 結(jié)果

2.1 大腸埃希菌中ESBL的檢出情況

2001—2012年12年間從各類臨床標(biāo)本中共分離到非重復(fù)大腸埃希菌3 177株，其中住院患者2 904株，門診患者273株，ESBL總陽性率60.0% （1 906/3 177），其中住院患者ESBL陽性率61.2% （1 777/2 904），門診患者為47.3%（129/273）。

2.2 大腸埃希菌中ESBL檢出率的變遷

2001—2012年大腸埃希菌中ESBL檢出率的變遷見表1。

表1 大腸埃希菌ESBL檢出率的變遷Table1 Changing prevalence of ESBLs-producing Escherichia coli during the period from 2001 to 2012

2.3 產(chǎn)ESBL大腸埃希菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥性

2001—2012年分離的產(chǎn)ESBL大腸埃希菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥性見表2。

表2 產(chǎn)ESBL大腸埃希菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table2 Susceptibility of ESBLs-producing Escherichia coli to commonly used antimicrobial agents

3 討論

分析2001—2012年大腸埃希菌ESBL檢出率變遷情況可以看出，ESBL檢出率的變遷大致可分為3個(gè)時(shí)期，第1個(gè)時(shí)期為2001—2004年，ESBL的檢出率呈現(xiàn)出明顯上升，和國(guó)內(nèi)其他學(xué)者的研究結(jié)果一致［2-3］，其檢出率及上升速度均明顯高于國(guó)外同期研究結(jié)果［4-5］。第2階段為2004—2011年間，ESBL的檢出率呈現(xiàn)波動(dòng)狀態(tài)，與這一時(shí)期對(duì)ESBL的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其耐藥機(jī)制逐漸有了更多的研究，對(duì)產(chǎn)ESBL菌株引起的感染診治引起了足夠的重視，對(duì)控制產(chǎn)ESBL菌株的進(jìn)一步傳播起到了積極作用有關(guān)。第3階段為2008—2012年，ESBL的檢出率出現(xiàn)逐年下降的趨勢(shì)，原因可能是在這期間，衛(wèi)生部先后頒布多個(gè)加強(qiáng)抗菌藥物管理的制度，對(duì)產(chǎn)ESBL菌株起到了有效控制作用。尤其是衛(wèi)生部2010年開始的合理應(yīng)用抗菌藥物專項(xiàng)整治工作，提高了臨床對(duì)微生物檢驗(yàn)標(biāo)本的送檢率，使大腸埃希菌ESBL的檢出率呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。

雖然近年來國(guó)內(nèi)很多地區(qū)不同程度地出現(xiàn)了產(chǎn)碳青霉烯酶（KPC酶）、高產(chǎn)β內(nèi)酰胺酶和抗生素滲透障礙等耐藥機(jī)制的大腸埃希菌和其他腸桿菌科細(xì)菌［6］，使大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌等腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類出現(xiàn)了耐藥性，但從我們的統(tǒng)計(jì)結(jié)果看，亞胺培南和美羅培南仍表現(xiàn)出對(duì)產(chǎn)ESBL大腸埃希菌高度的抗菌活性；大腸埃希菌對(duì)哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦等酶抑制劑復(fù)合制劑、阿米卡星、頭孢西丁等仍保持著較高敏感性。該菌對(duì)氟喹諾酮類藥物的耐藥性很高。本資料顯示，在采用CLSI 2010新折點(diǎn)后，產(chǎn)ESBL大腸埃希菌對(duì)頭孢他啶、頭孢吡肟具有較高的敏感率，對(duì)頭孢曲松的耐藥率則很高。

總之，目前大腸埃希菌中ESBL的檢出率仍較高，各級(jí)醫(yī)院應(yīng)繼續(xù)嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生部對(duì)合理應(yīng)用抗菌藥物和多重耐藥菌的各種管理制度，重視包括對(duì)產(chǎn)ESBL在內(nèi)的多重耐藥菌的管理，合理應(yīng)用抗菌藥物，嚴(yán)格進(jìn)行消毒隔離工作，有效控制產(chǎn)ESBL大腸埃希菌耐藥性的發(fā)生發(fā)展。美羅培南、亞胺培南仍是對(duì)產(chǎn)ESBL大腸埃希菌最強(qiáng)的抗菌藥物；哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦、阿米卡星、呋喃妥因、頭孢西丁、頭孢吡肟及頭孢他啶等也有較高的抗菌活性，可根據(jù)具體感染情況選用，氟喹諾酮類藥物不宜用于產(chǎn)ESBL大腸埃希菌感染的經(jīng)驗(yàn)治療。

［1］ 薛峰，呂媛.衛(wèi)生部全國(guó)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)2011年度非ICU住院感染患者細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)［J］.中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，2012，28（12）；910-915.

［2］ 葉曉光，王若倫，林紅燕，等.產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌耐藥譜動(dòng)態(tài)觀察［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2004，14（5）；492-495.

［3］ 陳孝進(jìn)，彭蘭.3種常見腸桿菌科細(xì)菌耐藥性變遷調(diào)查［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2006，16（1）；112-113.

［4］ Luzzaro F，Mezzatesta M，Muenaiolic C，et al.Trends in production of extended-spectrumβ-lactamases amongEnterobacteriaof medical interest；report of the second Italian Nationwide Survey［J］.J Clin Microbiol，2006，44 （5）；1659-1664.

［5］ Carattdi A，Garcia-Fernandez A，Varesi P，et al.Molecular epidemiology ofEscherichia coliproducing extended-spectrum beta-lactamases isolated in Rome，Italy［J］.J Clin Microbiol，2008，46（1）；103-108.

［6］ 張嶸，蔡加昌，周宏偉，等.腸桿菌科細(xì)菌中質(zhì)粒介導(dǎo)的KPC-2型碳青霉烯酶的檢測(cè)［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008，31（10）；1134-1141.

Changing prevalence and antibiotic resistance profile of extended-spectrum β-lactamases-producing Escherichia coli strains during 2001-2012 in Kunming Yan'an Hospital

HUANG Yunkun，ZHU Wenmei，YAO Yao，WANG Jia，WENG Yuanyuan.（Department of Laboratory Medicine，Kunming Yan'an Hospital，Kunming 650051，China）

；ObjectiveTo investigate the changing pattern of antibiotic resistancein the extended-spectrumβ-lactamases（ESBLs）producingEscherichia colistrains for better supporting clinical treatment and infection control.MethodsWHONET 5.6 software was used to analyze the changing pattern of antibiotic resistance in ESBLs-producingE.coliduring the period from 2001 to 2012.ResultsDuring the period from 2001 to 2012，a total of 3 177 non-duplicateE.colistrains were isolated in our hospital，of which 1 906 were ESBLs-producingE.coli.The overall prevalence of ESBLs was 60.0%（1 906/3 177）.In 2001，the prevalence of ESBLs was the lowest（36.9%），and since then increased gradually.An obvious increase was documented from 2003（48.4%）to 2004（63.2%）.In 2008，the prevalence of ESBLs reached peak of 72.9%.During 2004 and 2012，the prevalence of ESBLs ranged from 54.2%to 72.9%.And from 2008 to 2012，the rate declined yearly.Among the common antibiotics，meropenem（95.5%）and imipenem（95.1%）showed the highest susceptibility rate.About 91.9%，85.7%，74.1%，85.7%，72.6%，76.3%，61.4%of these strains were still sensitive to amikacin，piperacillin-tazobactam，cefoperazone-sulbactam，nitrofurantoin，cefoxitin，cefepime，and ceftazidime，respectively.About 27.8%and 30.3%of these strains were susceptible to ciprofloxacin and levofloxacin，respectively.ConclusionsAfter a period of rapid increase，the prevalence of ESBLs-producingE.coliseems stable now.Carbapenems such as meropenem and imipenem are the most active antibiotics against ESBLs-producingE.coli.Piperacillin-tazobactam，cefoperazone-sulbactam，amikacin，nitrofurantoin，cefoxitin，cefepime，and ceftazidime also provide relatively high antimicrobial activity.Fluoroquinolones are no longer suitable for treatment of the infections caused by ESBLs-producingE.coli.

；Escherichia coli；extended-spectrumβ-lactamases；resistance

R378.21

A

1009-7708（2015）02-0146-03

2014-04-04

2014-07-07

昆明市延安醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，昆明 650051。

黃云昆（1966—），男，學(xué)士，副主任技師，主要從事臨床微生物檢驗(yàn)與細(xì)菌耐藥研究。

黃云昆，E-mail；huangyunkun?hotmail.com。