• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    葎草顆粒對慢性支氣管炎模型小鼠的作用

    2015-01-05 02:48:57李東
    醫(yī)藥導(dǎo)報 2015年10期
    關(guān)鍵詞:灌胃小劑量支氣管炎

    李東

    (徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學院,徐州 221006)

    葎草顆粒對慢性支氣管炎模型小鼠的作用

    李東

    (徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學院,徐州 221006)

    目的 探討葎草顆粒對實驗性慢性支氣管炎小鼠的作用及其作用機制。方法 將小鼠隨機分為正常對照組,右美沙芬組或氯化銨組,葎草顆粒大劑量、中劑量、小劑量組(分別灌胃葎草顆粒溶液3.00,1.50,0.75 g·kg-1),觀察葎草顆粒對濃氨水致咳小鼠影響和對小鼠氣管酚紅排泌量的影響。采用香煙加甲醛熏法復(fù)制慢性支氣管炎小鼠模型,將60只小鼠按隨機數(shù)字法分為6組:正常對照組,模型對照組,桂龍咳喘寧膠囊組,葎草顆粒高劑量、中劑量、低劑量組,每組10只。從造模第18天起,正常對照組和模型對照組小鼠灌胃0.9%氯化鈉溶液,葎草顆粒大劑量、中劑量、小劑量組小鼠灌胃葎草顆粒,劑量分別為3.00,1.50,0.75 g·kg-1;桂龍咳喘寧膠囊組小鼠灌胃桂龍咳喘寧膠囊內(nèi)容物,劑量為600 mg·kg-1,每天1次,共15 d。觀察各組小鼠肺組織白細胞介素-8(IL-8)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的含量。結(jié)果 通過蘇木精-伊紅(HE)染色觀察發(fā)現(xiàn),葎草顆粒能明顯減輕小鼠慢性支氣管炎的損傷程度;正常對照組、葎草顆粒大劑量、中劑量、小劑量組2 min內(nèi)分別咳嗽(17.50±5.38),(11.90±4.46),(12.60±3.47),(9.50±3.24)次;酚紅分泌量分別為(0.52±0.11),(0.65±0.15),(0.64±0.14),(0.67±0.19)μg·mL-1;葎草顆粒能明顯減少氨水導(dǎo)致的小鼠咳嗽次數(shù),增加小鼠氣管酚紅排泄量。正常對照組,模型對照組及葎草顆粒大劑量組肺組織TNF-α的含量分別為(25.8±6.9),(66.3±11.7),(43.5±7.7) ng·mg-1,肺組織IL-8的含量分別為(27.1±9.1),(48.2±11.4),(36.5±8.2) ng·mg-1。模型對照組TNF-α、IL-8含量均較正常對照組明顯升高(P<0.01);與模型對照組比較,高劑量葎草顆粒可明顯降低肺組織中TNF-α和IL-8的含量(P<0.01或P<0.05)。結(jié)論 葎草顆粒對慢性支氣管炎模型小鼠病理損傷有明顯改善作用,并具有鎮(zhèn)咳和祛痰作用,其作用機制可能與降低TNF-α、IL-8含量有關(guān)。

    葎草顆粒;支氣管炎,慢性;腫瘤壞死因子;白細胞介素

    慢性支氣管炎是危害健康的常見病和多發(fā)病,咳、痰是呼吸系統(tǒng)疾病主要癥狀,炎癥和變態(tài)反應(yīng)是疾病的起因[1]。葎草顆粒由葎草、夏枯草、百部、白及等中藥組成,具有清肺止咳的功效。筆者對葎草顆粒的鎮(zhèn)

    咳、祛痰藥理作用進行研究,并采用香煙加甲醛熏法制作慢性支氣管炎小鼠模型,通過觀察葎草顆粒對慢性支氣管炎小鼠肺組織中腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白細胞介素(interleukin,IL)-8含量的影響,以闡明其治療慢性支氣管炎的可能作用機制。

    1 材料與方法

    1.1 實驗動物 清潔級昆明種小鼠,體質(zhì)量(20±2)g,雌雄各半,由徐州醫(yī)學院實驗動物中心提供,實驗動物生產(chǎn)許可證:SCXK(蘇)2010-0003,動物合格證號:SYXK(蘇)20032003。實驗動物使用許可證:SYXK(蘇)2014-0011。飼養(yǎng)環(huán)境20~25 ℃,相對適度60%~70%,保持安靜清潔,通風通氣。

    1.2 藥品與試劑 葎草顆粒(由徐州生物工程學院制劑室制備);IL-8、TNF-α免疫試劑盒購自北京北免東雅生物技術(shù)研究所,批號:120925。氫溴酸右美沙芬膠囊(唐山容大藥業(yè)有限公司,批號:120902);氯化銨,西隴化工股份有限公司,批號:100223;桂龍咳喘寧膠囊[桂龍藥業(yè)(安徽)有限公司,批號:121016];氨水(沈陽天罡化學試劑廠,批號:110811);酚紅(上海撫生生物科技有限公司,批號:130506)。

    1.3 主要儀器 高速離心機(上海分析儀器);可控式恒溫水浴鍋(上海錦屏儀器儀表有限公司);DIAX900內(nèi)切式組織勻漿機(Heidolph公司);SN-682型放射免疫γ計數(shù)器(上海核輻射光電儀器廠);Leica切片機(上海五相儀器儀表有限公司)。

    1.4 對濃氨水致咳小鼠的影響 參照文獻[2]。取小鼠50只,雌雄各半,稱定質(zhì)量、編號后,數(shù)字隨機法分為5組,即正常對照組、右美沙芬組及葎草顆粒大劑量、中劑量、小劑量組,每組10只。葎草顆粒大劑量、中劑量、小劑量組分別灌胃葎草顆粒溶液3.00,1.50,0.75 g·kg-1,右美沙芬組給予右美沙芬0.015 g·kg-1,正常對照組給予等容積0.9%氯化鈉溶液,每只小鼠給藥間隔約4 min,連續(xù)灌胃給藥7 d,末次給藥后1 h,將小鼠扣入500 mL燒杯中,再將注入濃氨水0.2 mL的棉球迅速放入燒杯中,上面加蓋篩網(wǎng),以小鼠腹肌強烈收縮,并且張大嘴為咳嗽動作指標,記錄小鼠的咳嗽潛伏期和2 min內(nèi)及3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)。

    1.5 對小鼠氣管酚紅排泌量的影響 參照文獻[2]。將小鼠隨機分為5組,即正常對照組、氯化銨組及葎草顆粒大劑量、中劑量、小劑量組,每組10只。每天灌胃給藥一次,連續(xù)7 d,葎草顆粒大劑量、中劑量、低劑量組分別灌胃葎草顆粒溶液3.00,1.50,0.75 g·kg-1,氯化銨組前6 d灌胃給予0.9%氯化鈉溶液,于實驗當天給予氯化銨,末次給藥后30 min,腹腔注射5%酚紅溶液500 mg·kg-1,30 min后處死小鼠,取自甲狀軟骨下至氣管分支處的一段氣管,放入盛有5%碳酸氫鈉溶液3 mL中,充分振蕩,使氣管段中的酚紅完全釋放,用分光光度計在波長546 nm處測吸光度(A)值,用酚紅作標準曲線,根據(jù)曲線計算酚紅含量。

    1.6 對小鼠慢性支氣管炎的影響 將60只小鼠按隨機數(shù)字法分為6組:正常對照組,模型對照組,桂龍咳喘寧膠囊組,葎草顆粒大劑量、中劑量、小劑量組,每組10只。小鼠慢性支氣管炎模型的復(fù)制,參照文獻[3]造模方法并加以改進,建立煙熏聯(lián)合甲醛刺激致小鼠慢性支氣管炎模型。將除正常對照組外5組小鼠放置于自制的玻璃煙室內(nèi),在煙室上方用3條細線懸掛直徑為10 cm的圓形濾紙,在濾紙上噴入甲醛,刺激10 min后取出,間隔10 min后,煙熏10 min,每次5支香煙。煙熏聯(lián)合甲醛刺激共25 d,其中前7 d,每次甲醛量為220 μL,從第8天開始每次甲醛量增至1 000 μL,后7 d停用甲醛。從造模第18天起,正常對照組和模型對照組小鼠灌胃0.9%氯化鈉溶液,葎草顆粒大劑量、中劑量、小劑量組小鼠灌胃葎草顆粒,劑量分別為3.00,1.50,0.75 g·kg-1(分別相當于人劑量的14.20,7.10,3.55倍);桂龍咳喘寧膠囊組小鼠灌胃桂龍咳喘寧膠囊,劑量為600 mg·kg-1,每天1次,共15 d。給藥結(jié)束后24 h,取小鼠左側(cè)肺臟中部組織0.4 cm×0.4 cm,用10%甲醛溶液固定,組織切片用蘇木精-伊紅(hematoxylin and eosin,HE)染色,光鏡觀察肺與支氣管的組織形態(tài)變化;同時稱取濕質(zhì)量約0.2 g右肺中部組織,用組織勻漿機制備10%肺組織勻漿,采用放射免疫法檢測肺組織勻漿中IL-8、TNF-α的含量,各項檢測均嚴格按試劑盒說明書操作。

    2 結(jié)果

    2.1 小鼠肺組織病理學變化 正常對照組小鼠支氣管、細支氣管形態(tài)基本正常,細胞排列整齊,未見增厚、變性、壞死及炎癥細胞浸潤等病理變化。模型對照組小鼠肺組織病理切片顯示,大片狀肺泡間隔增寬,肺泡腔內(nèi)出血較多,炎癥細胞浸潤,部分肺組織結(jié)構(gòu)明顯破壞,肺泡萎陷,小鼠支氣管管壁形態(tài)發(fā)生改變,黏膜結(jié)構(gòu)不完整,出現(xiàn)纖毛粘連、倒伏、脫失等病理變化,支氣管管腔出現(xiàn)漿液滲出、黏膜層出現(xiàn)炎癥細胞浸潤,表明模型對照組小鼠出現(xiàn)慢性支氣管炎的病理改變,模型復(fù)制成功。葎草顆粒大劑量、中劑量、小劑量組及桂龍咳喘寧膠囊組小鼠支氣管纖毛上皮細胞變性、壞死、脫落等病理變化均比模型對照組輕;支氣管管腔未見漿液滲出。見圖1。

    2.2 葎草顆粒對濃氨水致咳小鼠的影響 結(jié)果見表1,與正常對照組比較,右美沙芬組小鼠2和3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)明顯減少(P<0.05);葎草顆粒能明顯減少小鼠2 min內(nèi)咳嗽次數(shù),葎草顆粒大劑量組、小劑量組小鼠3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)明顯減少(P<0.05或P<0.01)。

    2.3 葎草顆粒對小鼠氣管酚紅排泌量的影響 結(jié)果見表2。與正常對照組比較,葎草顆粒各劑量組小鼠氣管內(nèi)酚紅分泌量明顯增加(P<0.05)。

    2.4 葎草顆粒對慢支小鼠肺組織中TNF-α和IL-8含量的影響 結(jié)果見表3。與正常對照組比較,模型對照組TNF-α、IL-8含量明顯增加(P<0.01);與模型對照組比較,葎草顆粒大劑量組肺組織中TNF-α(P<0.01)和IL-8(P<0.05)含量明顯降低。

    3 討論

    慢性支氣管炎是常見病、多發(fā)病,隨著年齡增長,患病率遞增,現(xiàn)今公認吸煙為慢性支氣管炎最主要的發(fā)病因素。本實驗采用煙熏聯(lián)合甲醛刺激法復(fù)制小鼠慢性支氣管炎模型,光鏡下可見模型對照組小鼠病理切片支氣管黏膜上皮壞死脫落,間質(zhì)充血水腫,慢性炎癥細胞浸潤。其組織病理學改變與文獻[4]報道相近,表明慢性支氣管炎模型復(fù)制成功。葎草顆粒各劑量組小鼠支氣管炎癥較輕,細支氣管部分上皮脫落缺失,肺泡腔充氣良好,僅有少量炎癥細胞浸潤,表明葎草顆粒可改善慢性支氣管炎模型小鼠支氣管炎的病理變化,具有緩解支氣管炎癥的作用。

    慢性支氣管炎在中醫(yī)學屬于“咳嗽”“痰證”等范疇,咳證病位主要在肺系,故前人有“咳證雖多,無非肺病”的說法[5]。慢性支氣管炎臨床可出現(xiàn)每年持續(xù)3個月以上的咳嗽、咯痰等癥狀。急性發(fā)作期在抗感染治療的同時,應(yīng)用祛痰、鎮(zhèn)咳藥,以改善癥狀[6]。氨水引咳實驗結(jié)果表明,葎草顆粒能明顯減少小鼠咳嗽次數(shù),酚紅排泄實驗結(jié)果表明葎草顆粒能增加小鼠氣管酚紅排泄量,由此可見葎草顆粒具有鎮(zhèn)咳和祛痰作用。

    TNF-α主要由單核-巨噬細胞所產(chǎn)生,活化的中性粒細胞也可合成。TNF-α可參與全身炎癥反應(yīng)和多器官功能障礙的發(fā)生[7]。在高濃度時,會引起局部免疫反應(yīng)器官甚至系統(tǒng)的損害[8]。研究表明,TNF-α可促進肺損傷早期肺泡巨噬細胞凋亡,而細胞凋亡反過來促進急性肺損傷時的炎癥反應(yīng),可反映機體炎性損傷的程度[9-12]。IL-8 對中性粒細胞、嗜堿性粒細胞具有趨化作用,并可激活中性粒細胞,造成多種炎性遞質(zhì)的釋放,在炎癥反應(yīng)中起著重要作用[8]。本實驗結(jié)果顯示,模型對照組小鼠肺組織中TNF-α和IL-8含量均較正常對照組明顯升高;葎草顆粒各劑量組小鼠肺組織中TNF-α和IL-8含量均明顯降低,提示葎草顆粒通過降低TNF-α和IL-8含量,進而抑制慢性支氣管炎的發(fā)展。

    A.正常對照組;B.模型對照組;C.桂龍咳喘寧膠囊組;D.葎草顆粒小劑量組;E.葎草顆粒中劑量組;F.葎草顆粒大劑量組

    圖1 6組小鼠肺組織病理圖片(HE,×100)

    A.normal control group;B.model control group;C.Guilongkechuanningcapsule group;D.low-dose HSP group;E.medium-dose HSP group;F.high-dose HSP group

    Fig.1 Pneumal histopathology of six groups of mice(HE,×100)

    表1 葎草顆粒對濃氨水致咳小鼠的影響

    與正常對照組比較,*1P<0.05,*2P<0.01Compared with normal control group, *1P<0.05,*2P<0.01

    表2 5組小鼠氣管酚紅排泌量的比較

    與正常對照組比較,*1P<0.05Compared with normal control group, *1P<0.05

    表3 6組小鼠肺組織中TNF-α、IL-8含量測定值

    與模型對照組比較,*1P<0.01,*2P<0.05Compared with model control group, *1P<0.01,*2P<0.05

    綜上所述,葎草顆粒對慢性支氣管炎模型小鼠病理損傷有明顯的修復(fù)作用,并且具有鎮(zhèn)咳、祛痰作用。葎草顆粒防治慢性支氣管炎的作用機制可能與減輕氣道炎癥反應(yīng)有關(guān)。

    [1] 丁豐.實用藥物學基礎(chǔ)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2009:131-136.

    [2] 徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實驗方法學[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:882-886,1363-1410.

    [3] 覃冬云,吳鐵,廖蕓蕓,等.構(gòu)建熏煙致慢性支氣管炎小鼠模型[J].中國組織工程研究與臨床康復(fù),2008,12(24):4697-4700.

    [4] 任勃,陶慶豐,馬淑揚,等.慢性支氣管炎動物模型的復(fù)制及病理形態(tài)學觀察[J].天津醫(yī)藥,1995,23(2):102-103.

    [5] 周仲瑛.中醫(yī)內(nèi)科學[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2006:71-74.

    [6] 李宏偉.實用醫(yī)藥基礎(chǔ)[M].杭州:浙江大學出版社,2006:282-295.

    [7] 張樹平,胡濤,欒海云,等.腸缺血再灌注大鼠肺及血液白細胞介素-6、白細胞介素-8和腫瘤壞死因子α變化與輔酶Q10的干預(yù)[J].中國組織工程研究與臨床康復(fù),2007,11(27):5429-5431.

    [8] 陳飛,候芳玉,徐進.瘤壞死因子與AIDS[J].國外醫(yī)學(免疫學分冊),1992,15(4):129-131.

    [9] ROBAYE B,MOSSELMANS R,F(xiàn)IERS W,et al.Tumor nec-rosis factor induces apoptosis (programmed cell death) in normal endothelial cellsinvitro[J].Am J Pathol,1991,138(2):447-453.

    [10] BELPERIO J A,KEANE M P,BRUDICK M D,et al.Cri-tical role for CXCR2 and CXCR2 ligands during the pathogenesis of ventilatiar-induced lung injury[J].J Clin Invest,2002,110(11):1703-1716.

    [11] 黃炎明,左萬里,張康信,等.下呼吸道感染患者血清與肺泡灌洗液白細胞介素-8、白細胞介素-6的動態(tài)監(jiān)測[J].中國實用內(nèi)科雜志,2004,24(1):32-34.

    [12] 潘永利.吡拉米司特對內(nèi)毒素致急性肺損傷大鼠肺組織TNF-α/NF-κB信號通路的影響[J].醫(yī)藥導(dǎo)報,2013,36(10):1285-1288.

    Effect of Humulus Scandens Particles on Chronic Bronchitis Models of Mice

    LI Dong

    (XuzhouVocationalCollegeofBioengineering,Xuzhou221006,China)

    Objective To study the effects and the therapeutic mechanism ofHumulusscandensparticles (HSP) on the mice with chronic bronchitis(CB). Methods Mice were divided into normal control group, dextromethorphan group or ammonium chloride group, the high-, middle- and low-dose of HSP groups (These three groups received gavage administration of HSP at 3.00 g·kg-1, 1.50 g·kg-1and 0.75 g·kg-1,respectively) randomly.The effects of HSP on ammonia-induced cough and trachea phenol red excretion in mice were observed.CB mouse model was established by inhaling smoke and formaldehyde.In total, 60 mice were divided into 6 groups by the method of random digits table: normal control group, model control group,Guilongkechuanningcapsulegroup, the high-, middle- and low-dose HSP groups (n=10 each group).After modeling for 18 days, mice in normal control group and model control group were administered intragastrically with 0.9% sodium chloride solution.Mice in the high-, middle- and low-dose HSP groups were daily treated with HSP at 3.00, 1.50 and 0.75 g·kg-1,respectively, by intragastric administration.Mice inGuilongkechuanningCapsule group were administered withGuilongkechuanningCapsule (600 mg·kg-1), once a day, for 15 days.The tumor necrosis factor alpha (TNF-α) & interleukin-8 (IL-8) contents in lung tissues of each group were determined. Results By hematoxylin-eosin (HE) staining, it was found that HSP alleviated the damage of CB in mice.The frequency of cough in 2 min in the normal control group, the high-, middle- and low-dose HSP groups were (17.50±5.38), (11.90±4.46), (12.60±3.47), (9.50±3.24), respectively, and the ecretion of phenol red were (0.52±0.11), (0.65±0.15), (0.64±0.14), (0.67±0.19) μg·mL-1, respectively.The content of TNF-α in lung tissues of the normal control group, model control group,the high dose HSP group was (25.8±6.9), (66.3±11.7), (43.5±7.7) ng·mg-1, respectively.The content of IL-8 in lung tissues of the normal control group, model control group, the high-dose HSP group were (27.1±9.1), (48.2±11.4) and (36.5±8.2) ng·mg-1, respectively.The contents of TNF-α and IL-8 in lung tissues of the model control group were significantly higher than those in normal control group (bothP<0.01).Compared with the model control group, high-dose HSP could obviously decrease the contents of TNF-α and IL-8 in lung tissues (P<0.01 orP<0.05). Conclusion HSP can obviously alleviate the pathomorphological changes in mice with CB and has antitussive and expectorant effecs.The therapeutic mechanism of HSP for CB may be related to decreasing the contents of TNF-α and IL-8 in lung tissue.

    Humulusscandensparticles;Bronchitis, chronic;Tumor necrosis factor;Interleukin

    2014-08-05

    2014-10-06

    李東(1979-),男,河北徐水人,講師,碩士,研究方向:中藥新藥研發(fā)。電話:0516-3628047,E-mail:lidong3379@aliyun.com。

    R286;R285.5

    A

    1004-0781(2015)10-1284-04

    10.3870/j.issn.1004-0781.2015.10.005

    猜你喜歡
    灌胃小劑量支氣管炎
    慢性支氣管炎中醫(yī)辨證治療體會
    小劑量激素治療在更年期綜合征治療中的應(yīng)用探究
    甘肅科技(2020年21期)2020-04-13 00:34:14
    小劑量 大作用 肥料增效劑大有可為
    茶、飲、汁治療冬季慢性支氣管炎
    慢性支氣管炎緩解期的中醫(yī)調(diào)護
    遠離支氣管炎,輕松過冬
    小鼠、大鼠灌胃注意事項
    來曲唑灌胃后EM大鼠病灶體積及COX-2 mRNA、survivin蛋白表達變化
    實驗小鼠的灌胃給藥技巧
    小劑量輻射比格犬模型的初步研究
    久久亚洲精品不卡| 欧美日韩一级在线毛片| 90打野战视频偷拍视频| 美女午夜性视频免费| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 好男人电影高清在线观看| 国产在线观看jvid| 久久狼人影院| 国产淫语在线视频| 十八禁网站网址无遮挡| 99精国产麻豆久久婷婷| 一区二区三区精品91| 又大又黄又爽视频免费| 国产激情久久老熟女| 久久精品久久精品一区二区三区| 丝袜脚勾引网站| 好男人电影高清在线观看| 91成人精品电影| 日韩欧美一区视频在线观看| 99国产精品免费福利视频| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 9191精品国产免费久久| 女性被躁到高潮视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 欧美在线黄色| 成年av动漫网址| 免费少妇av软件| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 十八禁高潮呻吟视频| 一级黄色大片毛片| 99国产精品一区二区三区| 一区二区三区精品91| 亚洲人成电影免费在线| 日本wwww免费看| 精品国产一区二区久久| 国产精品 欧美亚洲| 好男人视频免费观看在线| 老司机在亚洲福利影院| 男人舔女人的私密视频| av欧美777| 国产av精品麻豆| 18在线观看网站| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 亚洲 欧美一区二区三区| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 精品福利观看| 久久久久久久国产电影| 美女午夜性视频免费| 九草在线视频观看| 免费看十八禁软件| 日本一区二区免费在线视频| av一本久久久久| 午夜福利影视在线免费观看| 一二三四在线观看免费中文在| 国产深夜福利视频在线观看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产成人一区二区在线| 欧美日韩综合久久久久久| 青草久久国产| 亚洲av男天堂| 国产片内射在线| 国产1区2区3区精品| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲伊人色综图| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲成色77777| 亚洲黑人精品在线| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 一边亲一边摸免费视频| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 午夜激情久久久久久久| 黑人欧美特级aaaaaa片| 欧美日韩精品网址| 中文字幕制服av| 国产野战对白在线观看| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 久久国产精品大桥未久av| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国产亚洲av高清不卡| 日韩一区二区三区影片| 国产又爽黄色视频| www.av在线官网国产| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 日本一区二区免费在线视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲欧美清纯卡通| 极品少妇高潮喷水抽搐| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲国产欧美一区二区综合| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 亚洲欧洲日产国产| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 不卡av一区二区三区| 久久热在线av| 黄色怎么调成土黄色| 日韩免费高清中文字幕av| 老司机在亚洲福利影院| 欧美乱码精品一区二区三区| 老司机深夜福利视频在线观看 | 欧美日本中文国产一区发布| 日本五十路高清| 色播在线永久视频| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲人成电影免费在线| 精品福利永久在线观看| 国产精品.久久久| 国产成人系列免费观看| 亚洲伊人色综图| 国产日韩欧美在线精品| 欧美精品高潮呻吟av久久| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产精品免费大片| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 伦理电影免费视频| 久久久久久久久免费视频了| 日日爽夜夜爽网站| 精品久久久精品久久久| 丝袜脚勾引网站| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 美女中出高潮动态图| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲av在线观看美女高潮| 99九九在线精品视频| 日日爽夜夜爽网站| 国产精品欧美亚洲77777| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 久久人妻熟女aⅴ| 看十八女毛片水多多多| 午夜福利乱码中文字幕| 一个人免费看片子| 免费黄频网站在线观看国产| av天堂在线播放| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | av天堂久久9| 亚洲,一卡二卡三卡| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 国产亚洲欧美精品永久| 欧美另类一区| 2018国产大陆天天弄谢| 国产精品免费大片| 亚洲成国产人片在线观看| 成人影院久久| 免费看十八禁软件| 大香蕉久久网| 免费黄频网站在线观看国产| 2021少妇久久久久久久久久久| 欧美精品av麻豆av| 免费观看a级毛片全部| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 免费在线观看完整版高清| 午夜福利视频在线观看免费| 丝袜美腿诱惑在线| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 久久 成人 亚洲| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 十八禁高潮呻吟视频| 90打野战视频偷拍视频| 欧美日韩一级在线毛片| 中国国产av一级| 黄色视频在线播放观看不卡| 一区福利在线观看| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 免费高清在线观看视频在线观看| 久久影院123| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 91老司机精品| 久久亚洲精品不卡| 91精品三级在线观看| 国产有黄有色有爽视频| 欧美精品一区二区免费开放| 精品国产乱码久久久久久小说| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 777米奇影视久久| 电影成人av| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产精品国产av在线观看| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产1区2区3区精品| 久久久久久久国产电影| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产精品99久久99久久久不卡| 99热全是精品| 国产一区有黄有色的免费视频| tube8黄色片| 久久国产精品人妻蜜桃| 欧美乱码精品一区二区三区| 老司机靠b影院| 亚洲,欧美,日韩| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产精品人妻久久久影院| 国产精品免费视频内射| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 啦啦啦 在线观看视频| 成在线人永久免费视频| 高清黄色对白视频在线免费看| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 伊人亚洲综合成人网| 免费观看人在逋| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 日本午夜av视频| av福利片在线| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 搡老岳熟女国产| 亚洲中文av在线| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 又紧又爽又黄一区二区| 午夜免费观看性视频| 国产成人精品久久久久久| 亚洲免费av在线视频| 国产成人免费无遮挡视频| 免费看av在线观看网站| 蜜桃在线观看..| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 日本五十路高清| 成人免费观看视频高清| 青草久久国产| 精品一区在线观看国产| av不卡在线播放| 精品人妻一区二区三区麻豆| 欧美黄色片欧美黄色片| 18在线观看网站| 国产精品免费大片| 国产亚洲精品第一综合不卡| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 精品人妻在线不人妻| 午夜老司机福利片| 晚上一个人看的免费电影| 老鸭窝网址在线观看| 中文字幕高清在线视频| 亚洲久久久国产精品| 精品欧美一区二区三区在线| 丝瓜视频免费看黄片| 丝袜人妻中文字幕| 下体分泌物呈黄色| 大话2 男鬼变身卡| 日韩免费高清中文字幕av| 久久久久精品人妻al黑| 两个人看的免费小视频| 免费看不卡的av| 少妇的丰满在线观看| 欧美成人精品欧美一级黄| 久久久久久久久久久久大奶| 欧美人与性动交α欧美软件| 大陆偷拍与自拍| 我的亚洲天堂| 亚洲,欧美精品.| 一级片'在线观看视频| 久久人人97超碰香蕉20202| 视频在线观看一区二区三区| 9热在线视频观看99| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 久久ye,这里只有精品| 搡老岳熟女国产| 亚洲欧洲国产日韩| 中文字幕亚洲精品专区| 后天国语完整版免费观看| 国产精品久久久久久精品电影小说| 午夜福利在线免费观看网站| 在线观看免费高清a一片| 国产91精品成人一区二区三区 | 欧美激情 高清一区二区三区| 后天国语完整版免费观看| 午夜91福利影院| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 色婷婷av一区二区三区视频| 中文字幕亚洲精品专区| 久9热在线精品视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 99精国产麻豆久久婷婷| 好男人视频免费观看在线| www.999成人在线观看| 国产激情久久老熟女| av在线app专区| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 精品福利观看| av网站免费在线观看视频| 婷婷色综合www| 成人免费观看视频高清| 国产成人免费无遮挡视频| 尾随美女入室| 欧美大码av| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产精品亚洲av一区麻豆| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 视频区图区小说| 亚洲精品国产区一区二| 青草久久国产| 超碰97精品在线观看| 日韩av不卡免费在线播放| 一本大道久久a久久精品| 久久精品人人爽人人爽视色| 黄色毛片三级朝国网站| av有码第一页| 久久 成人 亚洲| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产高清国产精品国产三级| 欧美在线黄色| 2018国产大陆天天弄谢| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 999久久久国产精品视频| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 欧美日韩精品网址| 美女大奶头黄色视频| 国产精品熟女久久久久浪| 国产精品av久久久久免费| 国产成人免费无遮挡视频| 99国产精品免费福利视频| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 精品人妻在线不人妻| av网站在线播放免费| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 免费在线观看黄色视频的| 欧美日韩黄片免| 超色免费av| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 男女边摸边吃奶| 久久久久网色| 男的添女的下面高潮视频| 国产精品熟女久久久久浪| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 精品国产国语对白av| 女性生殖器流出的白浆| 色播在线永久视频| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产精品九九99| 黄色怎么调成土黄色| 高清视频免费观看一区二区| 久久99热这里只频精品6学生| 欧美黑人欧美精品刺激| 黄色怎么调成土黄色| 高清视频免费观看一区二区| xxxhd国产人妻xxx| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 两个人看的免费小视频| 在线精品无人区一区二区三| 少妇粗大呻吟视频| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 自线自在国产av| 男人操女人黄网站| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 亚洲国产av影院在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 中文字幕人妻熟女乱码| 老熟女久久久| 性少妇av在线| 久久久国产欧美日韩av| 成人三级做爰电影| 午夜福利乱码中文字幕| 欧美大码av| 黄片小视频在线播放| 搡老乐熟女国产| 久久毛片免费看一区二区三区| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产av一区二区精品久久| 欧美另类一区| 亚洲男人天堂网一区| 9色porny在线观看| 十八禁网站网址无遮挡| 精品少妇内射三级| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 一本大道久久a久久精品| 天堂中文最新版在线下载| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 久久久久久久久久久久大奶| 午夜两性在线视频| 香蕉国产在线看| 老司机靠b影院| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲精品一区蜜桃| 中文字幕色久视频| 国产主播在线观看一区二区 | 久久鲁丝午夜福利片| 丁香六月欧美| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产精品熟女久久久久浪| 国产成人精品无人区| a 毛片基地| 1024视频免费在线观看| 亚洲av综合色区一区| 日本午夜av视频| 三上悠亚av全集在线观看| 一区二区av电影网| 亚洲欧美色中文字幕在线| 久9热在线精品视频| 欧美日韩精品网址| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 一边摸一边做爽爽视频免费| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产黄色免费在线视频| 韩国高清视频一区二区三区| 国产欧美日韩综合在线一区二区| av在线app专区| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 欧美在线黄色| 欧美大码av| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 男女之事视频高清在线观看 | 国产高清不卡午夜福利| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 97在线人人人人妻| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 蜜桃在线观看..| 午夜免费鲁丝| 天天添夜夜摸| 五月天丁香电影| 麻豆av在线久日| 妹子高潮喷水视频| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 无遮挡黄片免费观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 久热这里只有精品99| 精品第一国产精品| 色94色欧美一区二区| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 男的添女的下面高潮视频| 国产日韩欧美视频二区| 69精品国产乱码久久久| 国产亚洲精品第一综合不卡| 夫妻午夜视频| 亚洲精品美女久久av网站| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产成人精品久久二区二区91| 一级a爱视频在线免费观看| 欧美日韩成人在线一区二区| 自线自在国产av| 狂野欧美激情性xxxx| 国产主播在线观看一区二区 | 欧美日韩综合久久久久久| 我要看黄色一级片免费的| 国产精品 国内视频| 国产精品国产三级国产专区5o| 婷婷色综合大香蕉| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲专区国产一区二区| 嫁个100分男人电影在线观看 | 777米奇影视久久| 国产午夜精品一二区理论片| 欧美国产精品一级二级三级| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产一区二区在线观看av| 嫩草影视91久久| 成人国语在线视频| 蜜桃在线观看..| 中文字幕av电影在线播放| 欧美激情高清一区二区三区| 亚洲五月色婷婷综合| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 涩涩av久久男人的天堂| 免费人妻精品一区二区三区视频| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 国产在线视频一区二区| 精品一区在线观看国产| 精品亚洲成国产av| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 日韩一区二区三区影片| 免费人妻精品一区二区三区视频| 丝瓜视频免费看黄片| 一级片'在线观看视频| 免费在线观看完整版高清| 精品少妇内射三级| 男的添女的下面高潮视频| 婷婷成人精品国产| 国产精品亚洲av一区麻豆| 热99久久久久精品小说推荐| 中文字幕高清在线视频| 美女大奶头黄色视频| 悠悠久久av| 99热网站在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 真人做人爱边吃奶动态| 满18在线观看网站| 妹子高潮喷水视频| 亚洲成国产人片在线观看| kizo精华| 热re99久久国产66热| 欧美在线一区亚洲| 久久久久久人人人人人| 久久久久视频综合| 亚洲,欧美,日韩| 美国免费a级毛片| 日韩av在线免费看完整版不卡| 三上悠亚av全集在线观看| 色综合欧美亚洲国产小说| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 日韩av在线免费看完整版不卡| 999久久久国产精品视频| 成人三级做爰电影| 成年人免费黄色播放视频| netflix在线观看网站| 久久免费观看电影| 亚洲 国产 在线| 久久久国产一区二区| 国产精品国产av在线观看| 国产成人a∨麻豆精品| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 纯流量卡能插随身wifi吗| 一级片'在线观看视频| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 一本大道久久a久久精品| a级毛片在线看网站| 久久久久久久国产电影| 欧美中文综合在线视频| 91成人精品电影| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 丝袜美腿诱惑在线| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产成人免费观看mmmm| 久久av网站| 咕卡用的链子| 大香蕉久久成人网| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久午夜综合久久蜜桃| 香蕉丝袜av| 国产精品一二三区在线看| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 欧美黄色片欧美黄色片| 超碰成人久久| 我要看黄色一级片免费的| 1024视频免费在线观看| 乱人伦中国视频| 亚洲国产中文字幕在线视频| 深夜精品福利| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 只有这里有精品99| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 一级毛片女人18水好多 | 亚洲成人免费电影在线观看 | 国产一卡二卡三卡精品| 9191精品国产免费久久| 免费人妻精品一区二区三区视频| 波多野结衣av一区二区av| 久久久久久久久免费视频了| 久久精品国产亚洲av高清一级| 飞空精品影院首页| 高清av免费在线| 岛国毛片在线播放| 9热在线视频观看99| 少妇人妻 视频| 午夜免费男女啪啪视频观看| 亚洲国产最新在线播放| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| videos熟女内射| 黄色a级毛片大全视频| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 欧美亚洲日本最大视频资源| 2018国产大陆天天弄谢| videosex国产| 国产精品国产三级国产专区5o| 成人国语在线视频| 国产在线视频一区二区| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲 欧美一区二区三区| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 最近手机中文字幕大全| 男的添女的下面高潮视频| 国产一级毛片在线| 色婷婷av一区二区三区视频| 久热这里只有精品99| 国产成人av激情在线播放| 亚洲av电影在线进入| 久久久久网色| 制服诱惑二区| 精品亚洲成a人片在线观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产三级黄色录像| 日本欧美国产在线视频| 免费人妻精品一区二区三区视频| 亚洲精品一区蜜桃| 国产精品 欧美亚洲| 久久鲁丝午夜福利片| 国产免费一区二区三区四区乱码| 久久精品国产亚洲av高清一级| 亚洲欧美激情在线| 视频区图区小说| 国产xxxxx性猛交| 欧美国产精品一级二级三级| 国产一区二区三区综合在线观看| 咕卡用的链子| a级毛片在线看网站| 国产高清视频在线播放一区 | 国产精品人妻久久久影院| 国产又色又爽无遮挡免| 啦啦啦在线免费观看视频4| 中文字幕人妻丝袜制服| 老司机在亚洲福利影院| 国产精品成人在线| 精品人妻1区二区| 国产精品 欧美亚洲| 久久久久精品人妻al黑| 婷婷色综合www| 又大又爽又粗|