甲氨蝶呤聯(lián)合環(huán)磷酰胺治療對(duì)強(qiáng)直性脊柱炎患者血清MMP-3的影響

， ，，，，，(南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院脊柱外科，湖南 衡陽(yáng) 421001)

甲氨蝶呤聯(lián)合環(huán)磷酰胺治療對(duì)強(qiáng)直性脊柱炎患者血清MMP-3的影響

陳小明，曹奇，楊鐵軍，陳亮元，唐國(guó)軍，顏學(xué)亮，唐曉軍
(南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院脊柱外科，湖南 衡陽(yáng) 421001)

目的通過(guò)檢測(cè)強(qiáng)直性脊柱炎患者甲氨蝶呤和環(huán)磷酰胺聯(lián)合治療前后血清基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)的改變，了解甲氨蝶呤和環(huán)磷酰胺聯(lián)合治療強(qiáng)直性脊柱炎的效果及機(jī)制。方法36例強(qiáng)直性脊柱炎患者(甲氨蝶呤組、環(huán)磷酰胺組、甲氨喋呤聯(lián)合環(huán)磷酰胺用藥組，每組12例)分別在治療前、治療后24周時(shí)留取血清標(biāo)本，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)其MMP-3的濃度；分析比較胃腸道損害、肝損害和血象變化等不良事件的發(fā)生率。結(jié)果甲氨蝶呤聯(lián)合環(huán)磷酰胺組MMP-3水平顯著下降，與甲氨蝶呤組和環(huán)磷酰胺組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且甲氨蝶呤聯(lián)合環(huán)磷酰胺組出現(xiàn)胃腸道損害、肝損害和血象變化等不良比單一用藥少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論甲氨蝶呤聯(lián)合環(huán)磷酰胺的治療效果優(yōu)于單一用藥，降低患者血清MMP-3濃度效果更佳，且不良反應(yīng)發(fā)生少,這可能是其發(fā)揮臨床療效的機(jī)制。

強(qiáng)直性； 脊柱炎； 基質(zhì)金屬蛋白酶-3； 甲氨喋呤； 環(huán)磷酰胺

強(qiáng)直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一種慢性全身性自身免疫性疾病，其發(fā)病原因不明的[1]?；颊叱衫奂瓣P(guān)節(jié)及系統(tǒng)外，還可使骨密度(bonemineral density,BMD)下降，甚至發(fā)生骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis,OP)，有些早期即可出現(xiàn)骨密度下降[2]，但針對(duì)強(qiáng)直性脊柱炎繼發(fā)骨密度下降的機(jī)制及骨代謝情況的機(jī)制目前尚不清楚[3]。強(qiáng)直性脊柱炎基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteins)MMPs表達(dá)異常與骨代謝紊亂及OP等疾病的發(fā)生密切相關(guān)[4]。本研究擬通過(guò)甲氨蝶呤、環(huán)磷酰胺及兩者聯(lián)合治療前后強(qiáng)直性脊柱炎患者血清細(xì)胞因子MMP-3的變化，探討甲氨蝶呤聯(lián)合環(huán)磷酰胺發(fā)揮作用的可能機(jī)制。為強(qiáng)直性脊柱炎的防治選擇提供理論基礎(chǔ)，以改善強(qiáng)直性脊柱炎患者的預(yù)后。

1 資料與方法

1.1 主要試劑與儀器

MMP-3 ELISA試劑盒為上海西唐生物科技有限公司產(chǎn)品。主要儀器有：全自動(dòng)定量酶標(biāo)儀(芬蘭DENLEDRAGON Wellscan MK3)，離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠TGL-168)，洗板機(jī)(芬蘭Wellw強(qiáng)直性脊柱炎h 4 MK2)，漩渦混合器(上海青浦滬西儀器廠 XW-80A)，烘箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司DHG-9023A)等。

1.2 病人資料

選擇本院2011年12月～2014至5月接受治療的36例強(qiáng)直性脊柱炎患者病例資料，男性，30例，年齡19歲～52歲，平均年齡34.53±8.26歲；病程3 m～360 m，平均病程79.52±91.06個(gè)月。無(wú)既往病史、體檢及常規(guī)化驗(yàn)檢查無(wú)異常。按目的要求把病例資料分為三組：甲氨蝶呤組12例、環(huán)磷酰胺組12例、甲氨喋呤聯(lián)合環(huán)磷酰胺用藥組(聯(lián)合治療組)12例。

1.3 治療方法

甲氨蝶呤組：甲氨蝶呤10～15 mg/周；環(huán)磷酰胺組：環(huán)磷酰胺200～400 mg/2～3周；甲氨蝶呤和環(huán)磷酰胺聯(lián)合組：甲氨蝶呤10～15 mg/周；環(huán)磷酰胺200～400 mg/2～3周。

1.4 檢測(cè)方法

采靜脈血3 mL分離血清后ELISA法檢測(cè)血清中的MMP-3濃度。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05，認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組強(qiáng)直性脊柱炎患者治療前后血清MMP-3水平的變化

治療后三組患者血清MMP-3水平均有下降趨勢(shì)。甲氨蝶呤和環(huán)磷酰胺聯(lián)合組治療后血清MMP-3水平下降水平與單一用藥比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1各組患者治療前后血清MMP-3(ng/mL)的變化(n=12)

治療前治療后(24周)P值甲氨蝶呤組19．569．870．091環(huán)磷酰胺組16．529．650．091聯(lián)合治療組15．984．830．028

2.1 不良反應(yīng)

各組患者在治療期間均出現(xiàn)于藥物相關(guān)的不良反應(yīng)，共有11例患者(30%)、19例次發(fā)生不良反應(yīng)，甲氨蝶呤組有5例患者(14%)7例次、環(huán)磷酰胺組4例患者(12%)10例次、甲氨蝶呤和環(huán)磷酰胺聯(lián)合組2例患者(6%)2例次。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較分析，單一用藥組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而甲氨蝶呤和環(huán)磷酰胺聯(lián)合組與單一用藥組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。甲氨蝶呤和環(huán)磷酰胺聯(lián)合組出現(xiàn)不良比單一用藥不良反應(yīng)少，見(jiàn)表2。停藥后所有反應(yīng)消失。

表2與藥物直接相關(guān)的不良事件發(fā)生情況(n=12,例)

總的不良反應(yīng)例次胃腸道癥狀肝酶異常白細(xì)胞減低其它甲氨蝶呤組72221環(huán)磷酰胺組103331聯(lián)合治療組20110

3 討 論

強(qiáng)直性脊柱炎患者出現(xiàn)的脊柱活動(dòng)功能障礙與關(guān)節(jié)和骨的破壞和侵蝕關(guān)系密切，其主要原因是軟骨基質(zhì)的被降解是關(guān)節(jié)和骨破壞[5]。這與各種蛋白酶的作用使細(xì)胞外基質(zhì)成分大量降解有關(guān)，而對(duì)這種降解破壞作用具有決定意義的是基質(zhì)金屬蛋白酶[6]。MMP-3能降解大量的細(xì)胞外基質(zhì)成分，且國(guó)內(nèi)外大量研究表明MMP-3在強(qiáng)直性脊柱炎脊柱是評(píng)價(jià)疾病活動(dòng)性的有效指標(biāo)[7]。

有研究發(fā)現(xiàn)，關(guān)節(jié)液中MMP-3的濃度在OP、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎和強(qiáng)直性脊柱炎的炎性疾病中顯著高于非炎性骨關(guān)節(jié)疾病[8]。且血清中MMP-3的水平與其它的炎性標(biāo)志物如IL-6、TNF-α、CRP和ESR之間具有顯著相關(guān)性。還有專家檢測(cè)到RA等炎性關(guān)節(jié)液中前MMP-3的濃度比骨關(guān)節(jié)炎等非炎性關(guān)節(jié)液高9倍[9]，提示MMP-3可能是一個(gè)反映關(guān)節(jié)局部炎癥狀況的標(biāo)志物。

血清MMP-3濃度與強(qiáng)直性脊柱炎病情相關(guān)性的相關(guān)研究報(bào)道不多，都大致認(rèn)為與強(qiáng)直性脊柱炎病情活動(dòng)性相關(guān)，是其骨和軟骨破壞的重要原因。相比之下，結(jié)果顯示治療后三組患者血清MMP-3水平均有下降趨勢(shì)。甲氨蝶呤和環(huán)磷酰胺聯(lián)合組治療后血清MMP-3水平下降水平與單一用藥比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且不良反少。說(shuō)明甲氨蝶呤聯(lián)合環(huán)磷酰胺較單用藥組更能降低患者血清MMP-3水平，且能在治療過(guò)程中減少不良事件的發(fā)生。這可能是其發(fā)揮臨床療效的機(jī)制。

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2095-1116(2014)05-0477-02

2014-05-14

陳小明，男，醫(yī)學(xué)碩士，主治醫(yī)師，研究方向：脊柱外科臨床及相關(guān)基礎(chǔ)研究，E-mail:chenxiaoming82@sina.com.

R593.23

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(此文編輯：秦旭平)