大葉傘標(biāo)準(zhǔn)化繁育技術(shù)研究

武建云 王華宇 楊利平 王鵬良

摘要：以大葉傘（Schefflera actinophylla）幼嫩頂芽和莖段為外植體進(jìn)行芽誘導(dǎo)、增殖、生根和移栽技術(shù)研究。結(jié)果表明，最佳增殖培養(yǎng)基為MS+1.5 mg/L 6-BA+0.15 mg/L NAA ，最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.10～0.15 mg/L NAA。大葉傘增殖階段對(duì)光照度和培養(yǎng)周期適應(yīng)范圍較廣，連續(xù)培養(yǎng)時(shí)光強(qiáng)設(shè)為1 000～1 500 lx，增殖周期設(shè)為6周，可以提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本。水分管理是大葉傘低溫季節(jié)溫室移栽的關(guān)鍵，生根試管苗移栽入泥炭∶珍珠巖=3∶1的混合基質(zhì)中，成活率可達(dá)95%以上。

關(guān)鍵詞：大葉傘（Schefflera actinophylla）;繁育技術(shù);增殖;生根;移栽

中圖分類號(hào)：Q813.1+2 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ? ? ? ?文章編號(hào)：0439-8114（2014）21-5285-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.21.061

Study on Standardized Propagation Technique of Schefflera actinophylla

WU Jian-yun1，WANG Hua-yu2， YANG Li-ping2， WANG Peng-liang1

（1.Guangxi Forestry Research Institute， Nanning 530002，China;2 Qinzhou Forestry Research Institute， Qinzhou 535099，Guangxi， China）

Abstract： The young terminal bud and stem of Schefflera actinophylla were used as explants and the techniques of bud induction， propagation， rooting and transplanting were studied. The results showed that the best media for proliferation was MS +1.5 mg/L 6-BA +0.15 mg/L NAA， and the best media for rooting was 1/2MS + 0.10～0.15 mg/L NAA. The tissue culture plants in proliferation stage were allowed to vary within relatively wide limits， while keeping the TC plants at 1 000～1 500 lx and making the cutting cycle for 6 weeks could improve the productivity and reduce the production cost. Water management in low temperature was the key to the control of greenhouse， and the survival rate of rooted plantlets could be up to 95% when transplanted onto the substrate （peat soil∶perlite=3∶1）.

Key words： Schefflera actinophylla; reproductive technique; multiplication; rooting; transplanting

大葉傘（Schefflera actinophylla）又名澳洲鵝掌柴、輻葉鵝掌柴、昆士蘭傘木等，為五加科鵝掌柴屬，是一種常綠木本觀葉植物[1]。大葉傘喜溫暖濕潤及通風(fēng)良好的環(huán)境，喜陽也耐陰，適應(yīng)性良好，其葉片寬大，且柔軟下垂，形似傘狀;枝葉層層疊疊，株形優(yōu)雅，極富層次感，所以近年來被廣泛用作室內(nèi)美化樹種、行道樹或孤植、叢植樹種，并日益受到韓國、日本客戶的青睞。大葉傘傳統(tǒng)繁殖方法為播種繁殖和扦插繁殖[2]，但受季節(jié)影響較大，且種苗一致性較差，滿足不了市場的需求。因此，本研究在深入研究大葉傘各培養(yǎng)環(huán)節(jié)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步優(yōu)化培養(yǎng)基配方和生產(chǎn)流程，并結(jié)合工廠化生產(chǎn)實(shí)際情況，針對(duì)光照度、培養(yǎng)周期、溫室管理等關(guān)鍵環(huán)節(jié)進(jìn)行研究，以期為大葉傘種苗的產(chǎn)業(yè)化、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)提供依據(jù)。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

選取生長健壯、無病蟲害的優(yōu)良大葉傘單株，剪取幼嫩頂芽和莖段作為外植體。

1.2 ?方法

1.2.1 ?外植體消毒 ?保留頂芽或莖段（帶有節(jié)）長約1.5 cm，切除葉片，葉柄基部保留長約0.5 cm，流水沖洗15 min后，在超凈工作臺(tái)上用75%乙醇浸泡15 s，0.1%升汞（加吐溫5滴）振蕩消毒15 min，再用無菌水沖洗5次后用無菌濾紙吸干水分，切去部分葉片和莖端，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。

1.2.2 ?培養(yǎng)基配方 ?誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)以MS為基本培養(yǎng)基，生根培養(yǎng)以1/2MS為基本培養(yǎng)基。①誘導(dǎo)培養(yǎng)基，MS+1.0 mg/L 6-BA +0.5 mg/L NAA;②增殖培養(yǎng)基，細(xì)胞分裂素6-BA和生長素NAA協(xié)同使用時(shí)，其濃度比例設(shè)為10∶1，具體配方如下：MS + 0.5 mg/L 6-BA+ 0.05 mg/L NAA;MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA;MS +1.5 mg/L 6-BA+0.15 mg/L NAA;MS +2.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA;MS +2.5 mg/L 6-BA+ 0.25 mg/L NAA;③生根培養(yǎng)基，1/2MS+ 0.05 mg/L NAA;1/2MS+ 0.1 mg/L NAA;1/2MS+0.15 mg/L NAA;1/2MS+0.2 mg/L NAA。

1.2.3 ?培養(yǎng)條件 ?上述培養(yǎng)基均添加3%蔗糖和0.6%瓊脂粉，pH 5.8～6.0。試管苗培養(yǎng)溫度為（25±2） ℃，光照時(shí)間12 h/d，光照度1 500～2 500 lx。

1.2.4 ?光照度對(duì)增殖苗生長的影響 ?選取90瓶增殖苗，分為3組，每組30瓶，設(shè)置光照度為1 000～1 500 lx、1 500～2 500 lx，以散射光狀態(tài)下（約500 lx）生長的增殖苗為對(duì)照，觀察記錄不同光照度對(duì)大葉傘生長的影響，相同條件下連續(xù)培養(yǎng)3個(gè)生長周期，每個(gè)生長周期均為6周。

1.2.5 ?增殖周期對(duì)增殖效率的影響 ?選取一致性較好的增殖苗，放置在相同的培養(yǎng)條件下，設(shè)置增殖周期分別為4、6、8、12周，觀察記錄組培苗生長情況并統(tǒng)計(jì)增殖系數(shù)。

將已生根的試管苗洗去根部附著的培養(yǎng)基，移栽至裝有泥炭土∶珍珠巖=3∶1（體積比）的穴盤中，按照常規(guī)管理方法[2，3]進(jìn)行幼苗的溫室管理。

1.3 ?數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

每種處理調(diào)查30個(gè)，統(tǒng)計(jì)誘導(dǎo)率、芽增殖系數(shù)、生根率。

誘導(dǎo)率=（出芽外植體數(shù)/接種數(shù)）×100%

芽增殖系數(shù)=增殖芽數(shù)/出芽株數(shù)

生根率=（生根株數(shù)/接種數(shù)）×100%

統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)使用Statistica統(tǒng)計(jì)分析軟件，對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncans新復(fù)極差法統(tǒng)計(jì)各處理顯著性水平。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?大葉傘無菌材料的獲得

將大葉傘外植體接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，及時(shí)剔除污染材料和消毒死亡的外植體，并做好觀察記錄。接種4周時(shí)，污染率和死亡率約為30%;接種6周時(shí)，可以觀察到葉腋部位開始有綠色突起，并逐漸增大;接種8周時(shí)，有腋芽冒出的材料約為消毒材料的50%。此時(shí)，視外植體情況進(jìn)行適當(dāng)切割和繼代培養(yǎng)。

2.2 ?不同激素配比對(duì)大葉傘增殖的影響

將大葉傘叢生芽或單株轉(zhuǎn)入不同的增殖培養(yǎng)基，切去部分基部愈傷組織，小苗團(tuán)塊增殖，大苗（高于2.5 cm）截取頂芽和莖段增殖，培養(yǎng)6周時(shí)觀察生長情況并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。如表1所示，不同激素配比對(duì)大葉傘的增殖系數(shù)和長勢影響不同。隨著6-BA和NAA濃度的增加，增殖系數(shù)隨之增加;當(dāng)6-BA、NAA濃度分別提高到1.5、0.15 mg/L時(shí)，增殖系數(shù)達(dá)到3.0，且組培苗長勢最好（圖1A）;當(dāng)二者濃度分別提高到2.0、0.2 mg/L以上時(shí)，增殖系數(shù)達(dá)到3.8以上，愈傷組織生長明顯，但組培苗出現(xiàn)玻璃化。因此，選用培養(yǎng)基MS+1.5 mg/L 6-BA+ 0.15 mg/L NAA為大葉傘增殖的最佳培養(yǎng)基。

2.3 ?不同激素配比對(duì)大葉傘生根的影響

選取高度2.5 cm以上的大葉傘增殖苗，取帶頂芽的莖段轉(zhuǎn)入不同的生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)3周后，統(tǒng)計(jì)生根情況。由表2可知，NAA濃度為0.05 mg/L時(shí)，生根率為93%，根系正常;NAA濃度為0.10和0.15 mg/L時(shí)，生根率均可達(dá)100%（圖1B）;NAA濃度為0.20 mg/L時(shí)，生根率雖也達(dá)到100%，但根部有愈傷組織出現(xiàn)。因此，大葉傘生根培養(yǎng)基NAA最適濃度可設(shè)定為0.10～0.15 mg/L。

2.4 ?不同光照度對(duì)大葉傘生長的影響

從表3看出，在光照度1 000～1 500 lx下進(jìn)行連續(xù)培養(yǎng)，大葉傘長勢最好，繼代時(shí)的增殖效率最大。試驗(yàn)結(jié)果也表明，大葉傘對(duì)光照度要求不太嚴(yán)格，在光照度500～2 500 lx范圍內(nèi)，培養(yǎng)1～2個(gè)周期對(duì)其長勢影響不大，在工廠化組培中對(duì)于提高培養(yǎng)室的空間利用效率和降低生產(chǎn)成本具有一定意義。

2.5 ?不同增殖周期對(duì)大葉傘增殖效率的影響

將同一批大葉傘增殖苗在相同的培養(yǎng)條件下設(shè)置不同的增殖周期，統(tǒng)計(jì)增殖系數(shù)并記錄生長情況。從表4可以看出，大葉傘增殖周期從第4周增加到第12周時(shí)，增殖系數(shù)也隨之增加，但組培苗長勢在第6周和第8周時(shí)最好。綜合考慮增殖系數(shù)和組培苗生長情況，設(shè)置最佳增殖周期為6周。但大葉傘增殖周期的伸縮性相對(duì)較強(qiáng)，試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)室溫度不高于22 ℃時(shí)，培養(yǎng)時(shí)間可長達(dá)到20周，仍未出現(xiàn)芽點(diǎn)死亡、黃葉等現(xiàn)象，但培養(yǎng)基逐漸干涸（圖1C）。這對(duì)于工廠化組培生產(chǎn)中根據(jù)市場情況調(diào)節(jié)生產(chǎn)節(jié)奏、保持庫存具有一定優(yōu)勢。

2.6 ?移栽及溫室管理

大葉傘生根培養(yǎng)3周后，根系長達(dá)2～3 cm，即可進(jìn)行洗苗移栽。洗凈根部培養(yǎng)基，再移植入泥炭土∶珍珠巖=3∶1的穴盤中，置于溫室中培養(yǎng)，光照、溫濕度、施肥和病蟲害防治參照常規(guī)的溫室管理方法進(jìn)行幼苗管理。

管理初期，應(yīng)注意水分的管理，特別是室溫低于20 ℃時(shí)，基質(zhì)過濕容易造成植株生長停滯和根部、莖部腐爛，從而造成大面積死亡（圖1D）。因此，水分管理是低溫季節(jié)大葉傘溫室管理的關(guān)鍵，應(yīng)堅(jiān)持寧干勿濕的原則。做好初期的水分管控，大葉傘最終成活率可達(dá)95%以上（圖1E、1F）。

3 ?討論

高等植物幾乎所有的器官和組織都可以作為外植體，在合適的時(shí)間，選擇適宜的苗齡、合適部位的外植體是誘導(dǎo)愈傷組織的關(guān)鍵[4]，誘導(dǎo)不定芽和腋芽也同樣如此。本試驗(yàn)在外植體取材和誘導(dǎo)培養(yǎng)基篩選中參照鞠志新等[5]的研究成果，使用嫩芽和莖段作為外植體，取得了理想的試驗(yàn)效果，且采用誘導(dǎo)的腋芽進(jìn)行增殖和繼代培養(yǎng)，避免了愈傷組織再生過程中容易出現(xiàn)的變異現(xiàn)象，有利于建立更加穩(wěn)定的無性快繁體系。

大葉傘對(duì)光照要求不嚴(yán)，無論在強(qiáng)烈日照或弱光室內(nèi)均能適應(yīng)[2]。根據(jù)這個(gè)特性，在組培苗生產(chǎn)中設(shè)計(jì)了不同光照度對(duì)其生長的影響。結(jié)果表明，大葉傘組培苗對(duì)光照度要求也不嚴(yán)格，在光強(qiáng)度500～2 500 lx范圍內(nèi)，培養(yǎng)1～2個(gè)周期對(duì)其長勢影響不大，并且不同的增殖周期對(duì)大葉傘的增殖效率影響也不顯著，增殖周期可長達(dá)20周。在工廠化生產(chǎn)中，水電費(fèi)約占組培苗成本的1/7～1/3[6-8]。因此，對(duì)光照度和生產(chǎn)周期的研究結(jié)果在大葉傘工廠化組培中對(duì)于降低生產(chǎn)成本、根據(jù)市場情況靈活調(diào)整生產(chǎn)計(jì)劃、提高原種苗使用效率具有積極的意義。

由于大葉傘在國內(nèi)引種栽培的歷史不長，相關(guān)繁殖、栽培和病蟲害資料較少[2，9，10]，在組培苗的移栽和溫室管理方面尚無相關(guān)報(bào)道。大葉傘的溫室管理可參照常規(guī)的溫室育苗管理措施，但溫度和水分是影響其溫室移栽成活率的關(guān)鍵因素。培養(yǎng)溫度應(yīng)保持在20～30 ℃，當(dāng)溫度低于20 ℃時(shí)，應(yīng)特別注意控制水分供應(yīng)，避免基質(zhì)過濕，以防止根腐病和莖腐病的發(fā)生。有關(guān)移栽苗的生長規(guī)律和栽培管理技術(shù)，尚需進(jìn)一步研究。

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（責(zé)任編輯 ?趙 ?娟）