七彩鮭胚胎發(fā)育的觀察和研究

張耀紅+葛京+高倩+妥志利+徐建華+尹殿江+薛建敏

七彩鮭魚（Salvelinus Fontinalis），學(xué)名美洲紅點(diǎn)鮭，屬于鮭形目、鮭科、紅點(diǎn)鮭屬，與北極鮭、雷克鮭、多麗鮭、公牛鮭并稱五大名鮭。主要分布于加拿大東部的拉布拉多地區(qū)，因其體表像珠寶一樣光彩奪目，故而在加拿大七彩鮭又被譽(yù)為冰水皇后。

七彩鮭引入我國已有十幾年的歷史，人工養(yǎng)殖、人工繁殖、病害防治等在我國均獲得成功，河北、甘肅、北京、山東等地也已形成了一定的規(guī)模，取得了較好的效益，這些在相關(guān)文獻(xiàn)中多有報(bào)道，但關(guān)于該魚胚胎發(fā)育方面的報(bào)道較少。系統(tǒng)地觀察七彩鮭的胚胎發(fā)育，對其發(fā)育過程進(jìn)行詳盡的描述為同行提供技術(shù)參考是很有必要的。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)親魚為河北省冷水魚良種場——淶源昌源漁場培育的4齡盛產(chǎn)親魚，平均規(guī)格2.1 kg/尾。2013年10月底，親魚陸續(xù)自然成熟，人工采卵、授精，將11月3日所獲受精卵3萬余粒用作胚胎發(fā)育觀察。

1.2 方法

將受精卵放入平列槽中流水孵化，孵化期間水溫9～14.5 ℃，溶氧 6.0～8.5 mg/L，控制水量12～18 L/min。每隔2 h隨機(jī)采卵30～50粒，采用1～4.5連續(xù)變倍體視顯微鏡（目鏡10×物鏡1～4.5）觀察。以觀察卵數(shù)的30%以上個體達(dá)到某個時(shí)期計(jì)為該發(fā)育階段的起始時(shí)間，從前一發(fā)育階段到下一發(fā)育階段的起始時(shí)間為間隔時(shí)間，記錄起始階段水溫，對各個時(shí)期的典型特征進(jìn)行拍照。為避免拍照觀察對試驗(yàn)卵受刺激產(chǎn)生發(fā)育誤差，故觀察后的卵單獨(dú)孵化。

2 結(jié)果

在孵化水溫9～14.5 ℃條件下，七彩鮭受精卵到孵化出膜歷時(shí)673 h。胚胎發(fā)育過程受精卵階段、卵裂階段、囊胚階段、原腸階段、神經(jīng)胚階段、器官形成階段。主要發(fā)育時(shí)期見表1。

2.1 受精卵

七彩鮭魚的成熟卵為圓形，黃色，有粘性，比重大于1，含大量卵黃。吸水前22～24粒/g，卵徑4.0～4.2 mm；受精卵吸水55 min，卵徑達(dá)最大為4.2～4.5 mm，21粒/g左右；卵黃與卵膜之間出現(xiàn)周隙。受精后2～3 h，原生質(zhì)逐漸向動物極集中，并在卵球表面隆起出現(xiàn)盤狀胚盤，卵質(zhì)分布均勻。

2.2 卵裂期

10 h后，受精卵出現(xiàn)第一次卵裂，開始卵裂為經(jīng)裂，胚盤中央產(chǎn)生裂痕并逐漸加深形成分裂溝，進(jìn)而將胚盤一分為二，為2細(xì)胞期；第二次卵裂與第一次垂直，形成4個大小均等的細(xì)胞為4細(xì)胞期；10.5 h即有8細(xì)胞出現(xiàn)，同時(shí)仍有4細(xì)胞存在。之后經(jīng)過16細(xì)胞、32細(xì)胞，進(jìn)入多細(xì)胞期（圖1）。此時(shí)，分裂球越來越小，層次越來越多，界限逐漸模糊，排列規(guī)律不太明顯，多層細(xì)胞高高位于卵黃之上，形如桑葚，進(jìn)入桑葚期（圖2）。

2.3 囊胚期

受精后48 h，隨著細(xì)胞的持續(xù)分裂，分裂球呈半圓形堆積在卵黃上方，與卵黃物質(zhì)交界明顯，此時(shí)隆起最高為囊胚早期（圖3）；細(xì)胞繼續(xù)分裂，囊胚邊緣細(xì)胞逐步增多，胚盤面積不斷變大，開始向植物極下包和內(nèi)卷，囊胚頂端變得稍稍扁平，胚胎進(jìn)入囊胚中期（圖4）；受精99 h后，囊胚細(xì)胞繼續(xù)下包內(nèi)卷，胚盤高度下降變?yōu)楸馄劫N在卵黃囊上，并形成不太明顯的胚環(huán)，進(jìn)入囊胚晚期（圖5）。

胚體劇烈扭動，卵膜變薄，頭部破膜

2.4 原腸期

受精121 h后，囊胚細(xì)胞繼續(xù)下包，內(nèi)卷明顯，胚胎中軸部分出現(xiàn)增厚的盾狀突起即胚盾，此時(shí)下包到卵黃的1/3，為原腸早期；受精127 h，胚環(huán)繼續(xù)下包到1/2，胚盾明顯增大，進(jìn)入原腸中期（圖6）；受精155 h，胚盤下包到卵黃2/3處，植物極由胚層包裹形成胚孔，進(jìn)入原腸晚期（圖7）。

2.5 神經(jīng)胚期

受精后179 h，神經(jīng)板形成，腦部逐步膨大可看出頭部雛形，胚盤下包4/5，未包入的卵黃形成卵黃栓，受精后205.5 h胚孔繼續(xù)收縮，逐步合攏關(guān)閉，脊索呈柱狀，腦泡原基清晰可見，胚體初步形成。

2.6 器官形成期

受精224 h，進(jìn)入肌節(jié)分化期。肌節(jié)先在胚體后部分化，最初隱約可見4對肌節(jié)對稱分布，隨后肌節(jié)數(shù)量陸續(xù)增多，胚體前部肌節(jié)也清晰可辨。受精后232 h，在腦兩側(cè)出現(xiàn)一對腎狀突起，為眼原基（圖8），之后腦開始分化，明顯分為前、中、后腦，隨后在頭部后方出現(xiàn)胸鰭原基；受精后310 h，眼原基進(jìn)一步發(fā)育形成長橢圓形眼囊（圖9）；受精后323 h，尾部從卵黃囊分離變細(xì)，形成尾牙；受精348 h，眼原基發(fā)育形成晶體；受精后373 h，胚體開始微弱的肌肉收縮，6次/min；受精后404 h，眼部開始出現(xiàn)黑色素，眼囊逐步變黑，進(jìn)入發(fā)眼卵階段（圖10）；受精后475 h可看到扁圓狀心臟搏動，70次/min；周身血流清晰，卵黃囊上分布大量血管，血液為淡紅色，進(jìn)入循環(huán)期（圖11）。隨著發(fā)育時(shí)間的延長，心臟變?yōu)榧t色，心室心房清晰，血管分布清晰，血液循環(huán)清晰，心臟搏動頻率增加至100次以上，跳動幅度大而有力；受精后753 h，胚體在卵膜內(nèi)不停地轉(zhuǎn)動，肌肉抽動加劇，心跳達(dá)106～120次/min；卵膜變薄，在胚體運(yùn)動的牽拉下破膜而出。經(jīng)過觀察，絕大多數(shù)以頭部破膜（圖12）。剛破膜的仔魚頭部向卵黃囊彎曲，長度0.9～1.1 cm，靜臥水底，卵黃囊為長橢圓形。

3 討論

七彩鮭作為引進(jìn)的冷水魚類，目前未見有其詳細(xì)、系統(tǒng)胚胎發(fā)育的研究報(bào)道。七彩鮭魚卵裂方式和胚胎發(fā)育時(shí)期與虹鱒及大多數(shù)硬骨魚類相同，都分為6個大的階段[1]。在水溫9～15 ℃，溶氧、pH等因子在最適宜范圍時(shí)，七彩鮭卵需要753 h、394.5 ℃·d破膜。與同批孵化的虹鱒比較，發(fā)眼較虹鱒晚51～60 ℃·d，破膜較虹鱒晚10～15 ℃·d。與同科的幾種冷水魚比較，該魚的卵也是寡質(zhì)卵，沉性，卵膜較厚，富含脂肪滴，卵黃較多，胚盤較小，發(fā)育時(shí)間長。成熟卵為淡橙黃色或黃色，直徑為4～4.2 mm，顯著小于虹鱒卵徑5.236 mm[2]，顯著小于哲羅鮭卵徑5.55 mm[3]，顯著小于白點(diǎn)鮭卵徑6.17±0.15 mm，與細(xì)鱗鮭的受精卵卵徑4.32±0.21 mm基本相同[4]，顯著大于白斑狗魚卵徑2.20 mm（喬德亮等，2005）[4]，顯著大于江鱈卵徑0.8～1.0 mm（高曉田等，2011）[5]。

張永泉等報(bào)道：卵徑的大小是影響魚類破膜所需時(shí)間與積溫的因素之一，而溫度對魚類破膜所需時(shí)間和積溫的影響要強(qiáng)于卵徑大??；卵徑是決定初孵仔魚全長的重要因素。殷名稱指出，卵的大小與初孵仔魚大小密切相關(guān)，一般個體大的仔魚生長迅速，存活率高[6]。我們在胚胎發(fā)育觀察過程中也發(fā)現(xiàn)了個體大的胚胎，心臟跳動更有利，破膜整齊，破膜后死亡率較低。因此，建議在選擇親魚時(shí)，不僅考慮產(chǎn)卵量，還要選擇所產(chǎn)卵的卵徑要大，可以更好地提高初孵仔魚的生長與成活率。

本次試驗(yàn)，未對七彩鮭卵采取剝膜處理，雖然不影響明顯的發(fā)育分期標(biāo)志的觀察，但直接影響拍照效果，因而雖能較準(zhǔn)確地分期，但可用的圖片寥寥。在今后沉性大卵徑魚卵的觀察中，最好用透明液、胰蛋白酶對卵進(jìn)行預(yù)處理，使卵膜變薄或采用甲醛固定剝除卵膜。

參考文獻(xiàn)：

[1]

劉雄，王昭明，金國善，等.虹鱒養(yǎng)殖技術(shù)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1990

[2] 黃金善，等.沉性大卵徑魚卵的觀察方法與虹鱒的胚胎發(fā)育[J].經(jīng)濟(jì)動物學(xué)報(bào)，2005，9（4）：236-238

[3] 張永泉，尹家勝，等，哲羅鮭胚胎和仔魚發(fā)育的研究[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，23（6）：425-430

[4] 喬德亮，李思發(fā)，凌去非，等.白斑狗魚胚胎和卵黃囊期仔魚發(fā)育[J].上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，14（1）：12-18

[5] 高曉田，肖國華，等.江鱈胚胎發(fā)育的研究[J].淡水漁業(yè)，2011，41（6）：85-90

[6] 殷名稱.魚類生態(tài)學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1995，134-272

七彩鮭魚（Salvelinus Fontinalis），學(xué)名美洲紅點(diǎn)鮭，屬于鮭形目、鮭科、紅點(diǎn)鮭屬，與北極鮭、雷克鮭、多麗鮭、公牛鮭并稱五大名鮭。主要分布于加拿大東部的拉布拉多地區(qū)，因其體表像珠寶一樣光彩奪目，故而在加拿大七彩鮭又被譽(yù)為冰水皇后。

七彩鮭引入我國已有十幾年的歷史，人工養(yǎng)殖、人工繁殖、病害防治等在我國均獲得成功，河北、甘肅、北京、山東等地也已形成了一定的規(guī)模，取得了較好的效益，這些在相關(guān)文獻(xiàn)中多有報(bào)道，但關(guān)于該魚胚胎發(fā)育方面的報(bào)道較少。系統(tǒng)地觀察七彩鮭的胚胎發(fā)育，對其發(fā)育過程進(jìn)行詳盡的描述為同行提供技術(shù)參考是很有必要的。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)親魚為河北省冷水魚良種場——淶源昌源漁場培育的4齡盛產(chǎn)親魚，平均規(guī)格2.1 kg/尾。2013年10月底，親魚陸續(xù)自然成熟，人工采卵、授精，將11月3日所獲受精卵3萬余粒用作胚胎發(fā)育觀察。

1.2 方法

將受精卵放入平列槽中流水孵化，孵化期間水溫9～14.5 ℃，溶氧 6.0～8.5 mg/L，控制水量12～18 L/min。每隔2 h隨機(jī)采卵30～50粒，采用1～4.5連續(xù)變倍體視顯微鏡（目鏡10×物鏡1～4.5）觀察。以觀察卵數(shù)的30%以上個體達(dá)到某個時(shí)期計(jì)為該發(fā)育階段的起始時(shí)間，從前一發(fā)育階段到下一發(fā)育階段的起始時(shí)間為間隔時(shí)間，記錄起始階段水溫，對各個時(shí)期的典型特征進(jìn)行拍照。為避免拍照觀察對試驗(yàn)卵受刺激產(chǎn)生發(fā)育誤差，故觀察后的卵單獨(dú)孵化。

2 結(jié)果

在孵化水溫9～14.5 ℃條件下，七彩鮭受精卵到孵化出膜歷時(shí)673 h。胚胎發(fā)育過程受精卵階段、卵裂階段、囊胚階段、原腸階段、神經(jīng)胚階段、器官形成階段。主要發(fā)育時(shí)期見表1。

2.1 受精卵

七彩鮭魚的成熟卵為圓形，黃色，有粘性，比重大于1，含大量卵黃。吸水前22～24粒/g，卵徑4.0～4.2 mm；受精卵吸水55 min，卵徑達(dá)最大為4.2～4.5 mm，21粒/g左右；卵黃與卵膜之間出現(xiàn)周隙。受精后2～3 h，原生質(zhì)逐漸向動物極集中，并在卵球表面隆起出現(xiàn)盤狀胚盤，卵質(zhì)分布均勻。

2.2 卵裂期

10 h后，受精卵出現(xiàn)第一次卵裂，開始卵裂為經(jīng)裂，胚盤中央產(chǎn)生裂痕并逐漸加深形成分裂溝，進(jìn)而將胚盤一分為二，為2細(xì)胞期；第二次卵裂與第一次垂直，形成4個大小均等的細(xì)胞為4細(xì)胞期；10.5 h即有8細(xì)胞出現(xiàn)，同時(shí)仍有4細(xì)胞存在。之后經(jīng)過16細(xì)胞、32細(xì)胞，進(jìn)入多細(xì)胞期（圖1）。此時(shí)，分裂球越來越小，層次越來越多，界限逐漸模糊，排列規(guī)律不太明顯，多層細(xì)胞高高位于卵黃之上，形如桑葚，進(jìn)入桑葚期（圖2）。

2.3 囊胚期

受精后48 h，隨著細(xì)胞的持續(xù)分裂，分裂球呈半圓形堆積在卵黃上方，與卵黃物質(zhì)交界明顯，此時(shí)隆起最高為囊胚早期（圖3）；細(xì)胞繼續(xù)分裂，囊胚邊緣細(xì)胞逐步增多，胚盤面積不斷變大，開始向植物極下包和內(nèi)卷，囊胚頂端變得稍稍扁平，胚胎進(jìn)入囊胚中期（圖4）；受精99 h后，囊胚細(xì)胞繼續(xù)下包內(nèi)卷，胚盤高度下降變?yōu)楸馄劫N在卵黃囊上，并形成不太明顯的胚環(huán)，進(jìn)入囊胚晚期（圖5）。

胚體劇烈扭動，卵膜變薄，頭部破膜

2.4 原腸期

受精121 h后，囊胚細(xì)胞繼續(xù)下包，內(nèi)卷明顯，胚胎中軸部分出現(xiàn)增厚的盾狀突起即胚盾，此時(shí)下包到卵黃的1/3，為原腸早期；受精127 h，胚環(huán)繼續(xù)下包到1/2，胚盾明顯增大，進(jìn)入原腸中期（圖6）；受精155 h，胚盤下包到卵黃2/3處，植物極由胚層包裹形成胚孔，進(jìn)入原腸晚期（圖7）。

2.5 神經(jīng)胚期

受精后179 h，神經(jīng)板形成，腦部逐步膨大可看出頭部雛形，胚盤下包4/5，未包入的卵黃形成卵黃栓，受精后205.5 h胚孔繼續(xù)收縮，逐步合攏關(guān)閉，脊索呈柱狀，腦泡原基清晰可見，胚體初步形成。

2.6 器官形成期

受精224 h，進(jìn)入肌節(jié)分化期。肌節(jié)先在胚體后部分化，最初隱約可見4對肌節(jié)對稱分布，隨后肌節(jié)數(shù)量陸續(xù)增多，胚體前部肌節(jié)也清晰可辨。受精后232 h，在腦兩側(cè)出現(xiàn)一對腎狀突起，為眼原基（圖8），之后腦開始分化，明顯分為前、中、后腦，隨后在頭部后方出現(xiàn)胸鰭原基；受精后310 h，眼原基進(jìn)一步發(fā)育形成長橢圓形眼囊（圖9）；受精后323 h，尾部從卵黃囊分離變細(xì)，形成尾牙；受精348 h，眼原基發(fā)育形成晶體；受精后373 h，胚體開始微弱的肌肉收縮，6次/min；受精后404 h，眼部開始出現(xiàn)黑色素，眼囊逐步變黑，進(jìn)入發(fā)眼卵階段（圖10）；受精后475 h可看到扁圓狀心臟搏動，70次/min；周身血流清晰，卵黃囊上分布大量血管，血液為淡紅色，進(jìn)入循環(huán)期（圖11）。隨著發(fā)育時(shí)間的延長，心臟變?yōu)榧t色，心室心房清晰，血管分布清晰，血液循環(huán)清晰，心臟搏動頻率增加至100次以上，跳動幅度大而有力；受精后753 h，胚體在卵膜內(nèi)不停地轉(zhuǎn)動，肌肉抽動加劇，心跳達(dá)106～120次/min；卵膜變薄，在胚體運(yùn)動的牽拉下破膜而出。經(jīng)過觀察，絕大多數(shù)以頭部破膜（圖12）。剛破膜的仔魚頭部向卵黃囊彎曲，長度0.9～1.1 cm，靜臥水底，卵黃囊為長橢圓形。

3 討論

七彩鮭作為引進(jìn)的冷水魚類，目前未見有其詳細(xì)、系統(tǒng)胚胎發(fā)育的研究報(bào)道。七彩鮭魚卵裂方式和胚胎發(fā)育時(shí)期與虹鱒及大多數(shù)硬骨魚類相同，都分為6個大的階段[1]。在水溫9～15 ℃，溶氧、pH等因子在最適宜范圍時(shí)，七彩鮭卵需要753 h、394.5 ℃·d破膜。與同批孵化的虹鱒比較，發(fā)眼較虹鱒晚51～60 ℃·d，破膜較虹鱒晚10～15 ℃·d。與同科的幾種冷水魚比較，該魚的卵也是寡質(zhì)卵，沉性，卵膜較厚，富含脂肪滴，卵黃較多，胚盤較小，發(fā)育時(shí)間長。成熟卵為淡橙黃色或黃色，直徑為4～4.2 mm，顯著小于虹鱒卵徑5.236 mm[2]，顯著小于哲羅鮭卵徑5.55 mm[3]，顯著小于白點(diǎn)鮭卵徑6.17±0.15 mm，與細(xì)鱗鮭的受精卵卵徑4.32±0.21 mm基本相同[4]，顯著大于白斑狗魚卵徑2.20 mm（喬德亮等，2005）[4]，顯著大于江鱈卵徑0.8～1.0 mm（高曉田等，2011）[5]。

張永泉等報(bào)道：卵徑的大小是影響魚類破膜所需時(shí)間與積溫的因素之一，而溫度對魚類破膜所需時(shí)間和積溫的影響要強(qiáng)于卵徑大小；卵徑是決定初孵仔魚全長的重要因素。殷名稱指出，卵的大小與初孵仔魚大小密切相關(guān)，一般個體大的仔魚生長迅速，存活率高[6]。我們在胚胎發(fā)育觀察過程中也發(fā)現(xiàn)了個體大的胚胎，心臟跳動更有利，破膜整齊，破膜后死亡率較低。因此，建議在選擇親魚時(shí)，不僅考慮產(chǎn)卵量，還要選擇所產(chǎn)卵的卵徑要大，可以更好地提高初孵仔魚的生長與成活率。

本次試驗(yàn)，未對七彩鮭卵采取剝膜處理，雖然不影響明顯的發(fā)育分期標(biāo)志的觀察，但直接影響拍照效果，因而雖能較準(zhǔn)確地分期，但可用的圖片寥寥。在今后沉性大卵徑魚卵的觀察中，最好用透明液、胰蛋白酶對卵進(jìn)行預(yù)處理，使卵膜變薄或采用甲醛固定剝除卵膜。

參考文獻(xiàn)：

[1]

劉雄，王昭明，金國善，等.虹鱒養(yǎng)殖技術(shù)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1990

[2] 黃金善，等.沉性大卵徑魚卵的觀察方法與虹鱒的胚胎發(fā)育[J].經(jīng)濟(jì)動物學(xué)報(bào)，2005，9（4）：236-238

[3] 張永泉，尹家勝，等，哲羅鮭胚胎和仔魚發(fā)育的研究[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，23（6）：425-430

[4] 喬德亮，李思發(fā)，凌去非，等.白斑狗魚胚胎和卵黃囊期仔魚發(fā)育[J].上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，14（1）：12-18

[5] 高曉田，肖國華，等.江鱈胚胎發(fā)育的研究[J].淡水漁業(yè)，2011，41（6）：85-90

[6] 殷名稱.魚類生態(tài)學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1995，134-272

七彩鮭魚（Salvelinus Fontinalis），學(xué)名美洲紅點(diǎn)鮭，屬于鮭形目、鮭科、紅點(diǎn)鮭屬，與北極鮭、雷克鮭、多麗鮭、公牛鮭并稱五大名鮭。主要分布于加拿大東部的拉布拉多地區(qū)，因其體表像珠寶一樣光彩奪目，故而在加拿大七彩鮭又被譽(yù)為冰水皇后。

七彩鮭引入我國已有十幾年的歷史，人工養(yǎng)殖、人工繁殖、病害防治等在我國均獲得成功，河北、甘肅、北京、山東等地也已形成了一定的規(guī)模，取得了較好的效益，這些在相關(guān)文獻(xiàn)中多有報(bào)道，但關(guān)于該魚胚胎發(fā)育方面的報(bào)道較少。系統(tǒng)地觀察七彩鮭的胚胎發(fā)育，對其發(fā)育過程進(jìn)行詳盡的描述為同行提供技術(shù)參考是很有必要的。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)親魚為河北省冷水魚良種場——淶源昌源漁場培育的4齡盛產(chǎn)親魚，平均規(guī)格2.1 kg/尾。2013年10月底，親魚陸續(xù)自然成熟，人工采卵、授精，將11月3日所獲受精卵3萬余粒用作胚胎發(fā)育觀察。

1.2 方法

將受精卵放入平列槽中流水孵化，孵化期間水溫9～14.5 ℃，溶氧 6.0～8.5 mg/L，控制水量12～18 L/min。每隔2 h隨機(jī)采卵30～50粒，采用1～4.5連續(xù)變倍體視顯微鏡（目鏡10×物鏡1～4.5）觀察。以觀察卵數(shù)的30%以上個體達(dá)到某個時(shí)期計(jì)為該發(fā)育階段的起始時(shí)間，從前一發(fā)育階段到下一發(fā)育階段的起始時(shí)間為間隔時(shí)間，記錄起始階段水溫，對各個時(shí)期的典型特征進(jìn)行拍照。為避免拍照觀察對試驗(yàn)卵受刺激產(chǎn)生發(fā)育誤差，故觀察后的卵單獨(dú)孵化。

2 結(jié)果

在孵化水溫9～14.5 ℃條件下，七彩鮭受精卵到孵化出膜歷時(shí)673 h。胚胎發(fā)育過程受精卵階段、卵裂階段、囊胚階段、原腸階段、神經(jīng)胚階段、器官形成階段。主要發(fā)育時(shí)期見表1。

2.1 受精卵

七彩鮭魚的成熟卵為圓形，黃色，有粘性，比重大于1，含大量卵黃。吸水前22～24粒/g，卵徑4.0～4.2 mm；受精卵吸水55 min，卵徑達(dá)最大為4.2～4.5 mm，21粒/g左右；卵黃與卵膜之間出現(xiàn)周隙。受精后2～3 h，原生質(zhì)逐漸向動物極集中，并在卵球表面隆起出現(xiàn)盤狀胚盤，卵質(zhì)分布均勻。

2.2 卵裂期

10 h后，受精卵出現(xiàn)第一次卵裂，開始卵裂為經(jīng)裂，胚盤中央產(chǎn)生裂痕并逐漸加深形成分裂溝，進(jìn)而將胚盤一分為二，為2細(xì)胞期；第二次卵裂與第一次垂直，形成4個大小均等的細(xì)胞為4細(xì)胞期；10.5 h即有8細(xì)胞出現(xiàn)，同時(shí)仍有4細(xì)胞存在。之后經(jīng)過16細(xì)胞、32細(xì)胞，進(jìn)入多細(xì)胞期（圖1）。此時(shí)，分裂球越來越小，層次越來越多，界限逐漸模糊，排列規(guī)律不太明顯，多層細(xì)胞高高位于卵黃之上，形如桑葚，進(jìn)入桑葚期（圖2）。

2.3 囊胚期

受精后48 h，隨著細(xì)胞的持續(xù)分裂，分裂球呈半圓形堆積在卵黃上方，與卵黃物質(zhì)交界明顯，此時(shí)隆起最高為囊胚早期（圖3）；細(xì)胞繼續(xù)分裂，囊胚邊緣細(xì)胞逐步增多，胚盤面積不斷變大，開始向植物極下包和內(nèi)卷，囊胚頂端變得稍稍扁平，胚胎進(jìn)入囊胚中期（圖4）；受精99 h后，囊胚細(xì)胞繼續(xù)下包內(nèi)卷，胚盤高度下降變?yōu)楸馄劫N在卵黃囊上，并形成不太明顯的胚環(huán)，進(jìn)入囊胚晚期（圖5）。

胚體劇烈扭動，卵膜變薄，頭部破膜

2.4 原腸期

受精121 h后，囊胚細(xì)胞繼續(xù)下包，內(nèi)卷明顯，胚胎中軸部分出現(xiàn)增厚的盾狀突起即胚盾，此時(shí)下包到卵黃的1/3，為原腸早期；受精127 h，胚環(huán)繼續(xù)下包到1/2，胚盾明顯增大，進(jìn)入原腸中期（圖6）；受精155 h，胚盤下包到卵黃2/3處，植物極由胚層包裹形成胚孔，進(jìn)入原腸晚期（圖7）。

2.5 神經(jīng)胚期

受精后179 h，神經(jīng)板形成，腦部逐步膨大可看出頭部雛形，胚盤下包4/5，未包入的卵黃形成卵黃栓，受精后205.5 h胚孔繼續(xù)收縮，逐步合攏關(guān)閉，脊索呈柱狀，腦泡原基清晰可見，胚體初步形成。

2.6 器官形成期

受精224 h，進(jìn)入肌節(jié)分化期。肌節(jié)先在胚體后部分化，最初隱約可見4對肌節(jié)對稱分布，隨后肌節(jié)數(shù)量陸續(xù)增多，胚體前部肌節(jié)也清晰可辨。受精后232 h，在腦兩側(cè)出現(xiàn)一對腎狀突起，為眼原基（圖8），之后腦開始分化，明顯分為前、中、后腦，隨后在頭部后方出現(xiàn)胸鰭原基；受精后310 h，眼原基進(jìn)一步發(fā)育形成長橢圓形眼囊（圖9）；受精后323 h，尾部從卵黃囊分離變細(xì)，形成尾牙；受精348 h，眼原基發(fā)育形成晶體；受精后373 h，胚體開始微弱的肌肉收縮，6次/min；受精后404 h，眼部開始出現(xiàn)黑色素，眼囊逐步變黑，進(jìn)入發(fā)眼卵階段（圖10）；受精后475 h可看到扁圓狀心臟搏動，70次/min；周身血流清晰，卵黃囊上分布大量血管，血液為淡紅色，進(jìn)入循環(huán)期（圖11）。隨著發(fā)育時(shí)間的延長，心臟變?yōu)榧t色，心室心房清晰，血管分布清晰，血液循環(huán)清晰，心臟搏動頻率增加至100次以上，跳動幅度大而有力；受精后753 h，胚體在卵膜內(nèi)不停地轉(zhuǎn)動，肌肉抽動加劇，心跳達(dá)106～120次/min；卵膜變薄，在胚體運(yùn)動的牽拉下破膜而出。經(jīng)過觀察，絕大多數(shù)以頭部破膜（圖12）。剛破膜的仔魚頭部向卵黃囊彎曲，長度0.9～1.1 cm，靜臥水底，卵黃囊為長橢圓形。

3 討論

七彩鮭作為引進(jìn)的冷水魚類，目前未見有其詳細(xì)、系統(tǒng)胚胎發(fā)育的研究報(bào)道。七彩鮭魚卵裂方式和胚胎發(fā)育時(shí)期與虹鱒及大多數(shù)硬骨魚類相同，都分為6個大的階段[1]。在水溫9～15 ℃，溶氧、pH等因子在最適宜范圍時(shí)，七彩鮭卵需要753 h、394.5 ℃·d破膜。與同批孵化的虹鱒比較，發(fā)眼較虹鱒晚51～60 ℃·d，破膜較虹鱒晚10～15 ℃·d。與同科的幾種冷水魚比較，該魚的卵也是寡質(zhì)卵，沉性，卵膜較厚，富含脂肪滴，卵黃較多，胚盤較小，發(fā)育時(shí)間長。成熟卵為淡橙黃色或黃色，直徑為4～4.2 mm，顯著小于虹鱒卵徑5.236 mm[2]，顯著小于哲羅鮭卵徑5.55 mm[3]，顯著小于白點(diǎn)鮭卵徑6.17±0.15 mm，與細(xì)鱗鮭的受精卵卵徑4.32±0.21 mm基本相同[4]，顯著大于白斑狗魚卵徑2.20 mm（喬德亮等，2005）[4]，顯著大于江鱈卵徑0.8～1.0 mm（高曉田等，2011）[5]。

張永泉等報(bào)道：卵徑的大小是影響魚類破膜所需時(shí)間與積溫的因素之一，而溫度對魚類破膜所需時(shí)間和積溫的影響要強(qiáng)于卵徑大小；卵徑是決定初孵仔魚全長的重要因素。殷名稱指出，卵的大小與初孵仔魚大小密切相關(guān)，一般個體大的仔魚生長迅速，存活率高[6]。我們在胚胎發(fā)育觀察過程中也發(fā)現(xiàn)了個體大的胚胎，心臟跳動更有利，破膜整齊，破膜后死亡率較低。因此，建議在選擇親魚時(shí)，不僅考慮產(chǎn)卵量，還要選擇所產(chǎn)卵的卵徑要大，可以更好地提高初孵仔魚的生長與成活率。

本次試驗(yàn)，未對七彩鮭卵采取剝膜處理，雖然不影響明顯的發(fā)育分期標(biāo)志的觀察，但直接影響拍照效果，因而雖能較準(zhǔn)確地分期，但可用的圖片寥寥。在今后沉性大卵徑魚卵的觀察中，最好用透明液、胰蛋白酶對卵進(jìn)行預(yù)處理，使卵膜變薄或采用甲醛固定剝除卵膜。

參考文獻(xiàn)：

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[2] 黃金善，等.沉性大卵徑魚卵的觀察方法與虹鱒的胚胎發(fā)育[J].經(jīng)濟(jì)動物學(xué)報(bào)，2005，9（4）：236-238

[3] 張永泉，尹家勝，等，哲羅鮭胚胎和仔魚發(fā)育的研究[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，23（6）：425-430

[4] 喬德亮，李思發(fā)，凌去非，等.白斑狗魚胚胎和卵黃囊期仔魚發(fā)育[J].上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，14（1）：12-18

[5] 高曉田，肖國華，等.江鱈胚胎發(fā)育的研究[J].淡水漁業(yè)，2011，41（6）：85-90

[6] 殷名稱.魚類生態(tài)學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1995，134-272