河南鄭州周邊地區(qū)小麥田的3種暗色真菌

耿月華　張猛等

摘 要：為研究小麥田土壤真菌物種多樣性，采用稀釋平板法分離20份小麥田土樣進行測定。結果表明：分離獲得3種暗色絲孢菌菌株，分別是麥根腐平臍蠕孢、小孢頭束霉和刺黑烏霉。因此，他們和小麥病害有一定的關系，所研究玻片標本與活菌種均保存于河南農業(yè)大學菌物學標本室。

關鍵詞：土壤真菌；麥根腐平臍蠕孢；小孢頭束霉；刺黑烏霉

中圖分類號： S432.4+4 文獻標識碼： A DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2014.10.021

Dematiaceous Hyphomycetes from Wheat Farmland Soil of Zhengzhou， Henan Province

GENG Yue-hua1，ZHANG Meng1，WANG Min1，LIU Yu-qing3，ZHANG Yu-hui1，GAO Wei2

（1.College of Plant Protection of Henan Agricultural University，Zhengzhou，Henan 450002，China；2.College of Resources and Environmental Sciences， Henan Agricultural University，Zhengzhou，Henan 450002，China；3.Key Laboratory of Natural Products of Henan Academy of Sciences， Zhengzhou， Henan 450000，China）

Abstract： 3 species of soil dematiaceous hyphomycetes were found from 20 soil samples collected from wheat farmland Soil of Zhengzhou， Henan Province.They were Bipolaris sorokiniana， Cephalotrichum microsporum and Memnoiella echinata， they were described in detail. Specimens （dried cultures） and living cultures of all fungi studied have been deposited in the Herbarium of Henan Agricultural University： Fungi.

Key words： soil fungi；Bipolaris sorokiniana；Cephalotrichum microsporum；Memnoiella echinata

河南是小麥種植大省，氣候處于亞熱帶溫帶過渡帶，四季分明[1]，而鄭州地處中原腹地，黃河南岸，氣候非常適合小麥的生長，同時也建有國家糧庫，在國家糧食安全上起著舉足輕重的位置[2]，本文主要從鄭州周邊的小麥田分時段采集根系土壤，分離其中的暗色絲孢菌，通過初步分離鑒定出3種暗色絲孢菌，分別是麥根腐平臍蠕孢（Bipolaris sorokiniana）、小孢頭束霉（Cephalotrichum microsporum）和刺黑烏霉（Memnoiella echinata）。

1 材料和方法

1.1 供試材料

2013年選擇小麥的冬前分蘗期、拔節(jié)期和小麥的抽穗楊花期分別在鄭州周邊小麥田采集了共20份土壤表層土[3]。

1.2 試驗方法

采用稀釋平板法處理土壤樣品，單孢分離法分離純化目的菌株[4]。將自來水瓊脂+小麥秸稈培養(yǎng)基（TWA+W）上長出的菌落置于體視鏡下觀察，用細長挑針挑取目的真菌單個孢子于PDA平板，于21～25 ℃生化培養(yǎng)箱內培養(yǎng)4～7 d后，挑取單菌落，獲得純菌種，無菌操作。采用冷凍管保藏法和斜面保存法結合存放菌株，并制作干制培養(yǎng)物標本并保存，利用挑片法制作玻片標本。采用形態(tài)描述、繪圖與顯微攝影相結合的方式，全面記錄菌株信息。

2 結果與分析

2.1 麥根腐平臍蠕孢（圖1）

PDA上，菌落絨毛狀，中央較隆起，邊緣整齊，褐色至深褐色，背面深褐色，較易產孢，但孢子多存在變形現(xiàn)象。TWA+W上，菌落擴展迅速，輪紋狀展開，產孢量大。表生菌絲淡褐色，具隔膜，多分枝，寬1.5～3.5 μm。分生孢子梗端生或側生于菌絲，單生或簇生，直立，隨產孢屈膝狀彎曲，有時具稀疏分枝，黃褐色或褐色，近端部色漸淡，光滑，具隔膜，長可達200 μm，寬2.5～6 μm。分生孢子寬紡錘形或闊橢圓形[5]，一般直，中部較寬，兩端漸窄，端部和基部鈍圓，有時兩端有輕微隔膜增厚現(xiàn)象，褐色，光滑，6～12假隔膜，（65～88） μm×（21～25） μm，平均78 μm×23 μm。臍點平截，不明顯[6-7]。

2.2 小孢頭束霉（圖2）

菌落平展，粉狀，培養(yǎng)后期明顯可見直立的孢梗束，灰綠色或灰褐色，背面褐色。生長速度中等，PDA上，25 ℃下，2周直徑2.5～3.5 cm。菌絲體表生或大部分埋生。菌絲淡褐色或褐色，光滑，具隔膜，寬1.5～2.5 μm，常形成菌絲束。孢梗束高100～800 μm，柄部暗褐色，由緊密壓在一起的分生孢子梗組成，頭部圓柱形。也有小的孢梗束直接著生在菌絲上。環(huán)痕梗單生或多個簇生在產孢小梗上，5～10 μm長，基部寬3～4 μm，至端部漸尖，寬1.5～2.5 μm，無色，光滑。分生孢子卵形，端部多數尖，少數鈍圓，基部鈍，淡棕色，聚集在一起呈暗褐色，光滑，（3.5～5.5）μm×（2.5～4） μm[8]。

2.3 刺黑烏霉（圖3）endprint

菌落平展，絨毛狀，初無色或極淡黃色，后隨產孢變褐色或黑色，背面黃褐色或灰褐色，邊緣不規(guī)則缺刻狀，顏色較淡，中央大量產孢。生長緩慢，PDA上，25 ℃下，2周直徑達2～2.5 cm。分生孢子梗有限生長，分化明顯，單生或簇生，直立或略彎曲，不分枝，1～2隔膜，長50～80 μm，寬3～6 μm，初無色，后橄欖褐色，近端部常明顯粗糙或被黑色顆粒，基部細胞稍膨大，頂部著生產孢瓶體部位膨大，寬4～6 μm，產孢瓶體6～9個，內壁芽生，有限生長，離生，單細胞，淡橄欖褐色，橢圓形或卵圓形，光滑，具有明顯的領部結構。分生孢子頂生，向基序列產生，初無色，光滑，成熟后褐色或黑色，不透明，具有明顯的瘤突，球形或亞球形，直徑3～6 μm[9-10]。

3 討 論

麥根腐平臍蠕孢（Bipolaris sorokiniana），該菌可以引起小麥根腐病和葉斑病，在小麥的多個生長階段可以致病，幼苗期引起芽腐和苗枯，成株期引起葉斑、穗腐、根腐、莖基腐和黑胚粒。自然界分布廣泛，是屬內常見的一個種[11]。1979年戴芳瀾在《中國真菌總匯》中以禾旋孢腔菌Cochliobolus sativvus收錄了該種。其產生長蠕孢犬牙素，紅色色素，柄曲霉素及長蠕孢素等代謝產物。該種在形態(tài)上與中國平臍蠕孢B. chinensis G.Y. Sun et T.Y. Zhang近似，區(qū)別在于后者的分生孢子常為棍棒形或長橢圓形，與該種寬紡錘形或闊橢圓形的孢子不同。另外，兩者在PDA上培養(yǎng)的菌落形態(tài)不同。而我們是在未發(fā)病的小麥田地分離到的該菌，小麥未發(fā)病的原因可能是環(huán)境條件不適宜，沒有滿足病害三角中的環(huán)境要求。筆者擬繼續(xù)跟蹤該田塊以后幾年內的小麥病害發(fā)生狀況，以便更好地了解該病原菌的流行規(guī)律[12]。

刺黑烏霉（Memnoiella echinata）是1873年Rivolta在意大利北部的干草和空的麥稈上發(fā)現(xiàn)此菌，并定名為Penicillium echinatum Rivolta，其顯著特征是產生黑色鏈生的類似Aspergillus niger的瓶梗孢子和類似Stachybotrys青霉狀的頭部。Saccado（1886）將其從中劃分出來置入HaplographiumBerk.& Br.。忽略了Rivolta的研究，Hhnel在1923年從棉紗上發(fā)現(xiàn)一相同的分離物并建立新種Memnoniella aterrima。Galloway（1933）認真對比了Rivolta和Hhnel的研究后接受H·hnel的Memnoniella，并建立了新組合M. echinata （Riv.） Galloway。Bisby（1943）曾認為M. echinata或許是S. subsimplex的一個非正常階段，因為可能黏球的形成是因為孢子的滯留成鏈而停止。但在1945年通過進一步對比研究不同地區(qū)的幾個分離物后確認二者是完全不同的[13]。與M. echinata相似的種是M. zingiberis Rao，也產生粗糙的球形孢子，直徑4.4～6.8 μm，Jong & Davis認為它可能是M. echinata的同物異名，但由于沒能得到的M. zingiberis培養(yǎng)物而無法進行比較，現(xiàn)在還是把他們作為不同的種對待。另一個相似的種為M. levispora Subramanian，其分生孢子光滑，直徑3～7 μm，二者易于區(qū)分。該種從森林、草地以及耕作田的土壤中都有分離的報道，也存在于香蕉、煙草以及松樹等多種植物的根際，具有較強的纖維素分解能力，可利用纖維素為唯一的碳源[14]。

參考文獻：

[1] 石祖梁，王飛，張傳輝，等.氮肥運籌對稻茬小麥土壤磷素平衡的影響[J].華北農學報，2014（3）：187-192.

[2] 于會佳，楊麗娜，孟天天，等.油污土壤植物與真菌聯(lián)合生物修復的研究[J].天津農業(yè)科學，2013，19（5）：66-69.

[3] 張峰峰，趙玉潔，謝鳳行，等.AM真菌提高植物耐鹽性研究進展與展望[J].天津農業(yè)科學，2008，14（6）：66-70.

[4] 陳銳，朱珠，蘭青闊，等.真菌RNA沉默研究進展[J].天津農業(yè)科學，2014，20（5）：5-13.

[5] Alocorn J L.Genetic concepts in Drechslera，Bipolaris and Exserohilum[J]. Mycotaxon，1983（17）：1-86.

[6] Shoemaker RA.Nomenclature of Drechslera and Bipolaris，grass parasites segregated from Helminthosporium[J]. Canadian Journal of Botany，1959（37）：879-887.

[7] 文景芝，陸家云.內臍蠕孢屬、平臍蠕孢屬和突臍蠕孢屬的分類鑒定[J].東北農學院學報，1991，2（22）：120-126.

[8] Deighton F C.Four synnematous hyphomycetes[J].Trans. Br. Soc，1974，62（2）：243-252.

[9] De-wei Li，Chins Yang，Haugland R， et al. A new species of Memnoniella[J]. Mycotaxon，2003：253-257.

[10] Haugland R A，Vesper S J， Harmon S. Phylogenetic relationships of Memnoniella and Stachybotrys species inferred from ribosomal DNA sequences and evaluation of morphological features for Memnoniella species identification[J]. Mycologia，2001（96）：54-65.

[11] Ellis M B.Dematiaceous Hyphomycetes[M]. Commonwealth Mycological Institute，Kew，1971：1-608.

[12] 王同智，包玉英.AM真菌對瀕危物種四合木及近緣種霸王抗旱性的影響[J].華北農學報，2014（3）：170-175.

[13] 張朝軒，楊天儀，吳淑杭，等.微生物肥料對土壤生態(tài)及葡萄葉片葉綠素熒光特性的影響[J].天津農業(yè)科學，2011，17（1）：92-95.

[14] 王惠哲，李淑菊，霍振榮，等.探討黃瓜枯萎病菌DNA遺傳多態(tài)性研究的可能性[J].天津農業(yè)科學，2006，12（3）：4-7.endprint

菌落平展，絨毛狀，初無色或極淡黃色，后隨產孢變褐色或黑色，背面黃褐色或灰褐色，邊緣不規(guī)則缺刻狀，顏色較淡，中央大量產孢。生長緩慢，PDA上，25 ℃下，2周直徑達2～2.5 cm。分生孢子梗有限生長，分化明顯，單生或簇生，直立或略彎曲，不分枝，1～2隔膜，長50～80 μm，寬3～6 μm，初無色，后橄欖褐色，近端部常明顯粗糙或被黑色顆粒，基部細胞稍膨大，頂部著生產孢瓶體部位膨大，寬4～6 μm，產孢瓶體6～9個，內壁芽生，有限生長，離生，單細胞，淡橄欖褐色，橢圓形或卵圓形，光滑，具有明顯的領部結構。分生孢子頂生，向基序列產生，初無色，光滑，成熟后褐色或黑色，不透明，具有明顯的瘤突，球形或亞球形，直徑3～6 μm[9-10]。

3 討 論

麥根腐平臍蠕孢（Bipolaris sorokiniana），該菌可以引起小麥根腐病和葉斑病，在小麥的多個生長階段可以致病，幼苗期引起芽腐和苗枯，成株期引起葉斑、穗腐、根腐、莖基腐和黑胚粒。自然界分布廣泛，是屬內常見的一個種[11]。1979年戴芳瀾在《中國真菌總匯》中以禾旋孢腔菌Cochliobolus sativvus收錄了該種。其產生長蠕孢犬牙素，紅色色素，柄曲霉素及長蠕孢素等代謝產物。該種在形態(tài)上與中國平臍蠕孢B. chinensis G.Y. Sun et T.Y. Zhang近似，區(qū)別在于后者的分生孢子常為棍棒形或長橢圓形，與該種寬紡錘形或闊橢圓形的孢子不同。另外，兩者在PDA上培養(yǎng)的菌落形態(tài)不同。而我們是在未發(fā)病的小麥田地分離到的該菌，小麥未發(fā)病的原因可能是環(huán)境條件不適宜，沒有滿足病害三角中的環(huán)境要求。筆者擬繼續(xù)跟蹤該田塊以后幾年內的小麥病害發(fā)生狀況，以便更好地了解該病原菌的流行規(guī)律[12]。

刺黑烏霉（Memnoiella echinata）是1873年Rivolta在意大利北部的干草和空的麥稈上發(fā)現(xiàn)此菌，并定名為Penicillium echinatum Rivolta，其顯著特征是產生黑色鏈生的類似Aspergillus niger的瓶梗孢子和類似Stachybotrys青霉狀的頭部。Saccado（1886）將其從中劃分出來置入HaplographiumBerk.& Br.。忽略了Rivolta的研究，Hhnel在1923年從棉紗上發(fā)現(xiàn)一相同的分離物并建立新種Memnoniella aterrima。Galloway（1933）認真對比了Rivolta和Hhnel的研究后接受H·hnel的Memnoniella，并建立了新組合M. echinata （Riv.） Galloway。Bisby（1943）曾認為M. echinata或許是S. subsimplex的一個非正常階段，因為可能黏球的形成是因為孢子的滯留成鏈而停止。但在1945年通過進一步對比研究不同地區(qū)的幾個分離物后確認二者是完全不同的[13]。與M. echinata相似的種是M. zingiberis Rao，也產生粗糙的球形孢子，直徑4.4～6.8 μm，Jong & Davis認為它可能是M. echinata的同物異名，但由于沒能得到的M. zingiberis培養(yǎng)物而無法進行比較，現(xiàn)在還是把他們作為不同的種對待。另一個相似的種為M. levispora Subramanian，其分生孢子光滑，直徑3～7 μm，二者易于區(qū)分。該種從森林、草地以及耕作田的土壤中都有分離的報道，也存在于香蕉、煙草以及松樹等多種植物的根際，具有較強的纖維素分解能力，可利用纖維素為唯一的碳源[14]。

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[3] 張峰峰，趙玉潔，謝鳳行，等.AM真菌提高植物耐鹽性研究進展與展望[J].天津農業(yè)科學，2008，14（6）：66-70.

[4] 陳銳，朱珠，蘭青闊，等.真菌RNA沉默研究進展[J].天津農業(yè)科學，2014，20（5）：5-13.

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[10] Haugland R A，Vesper S J， Harmon S. Phylogenetic relationships of Memnoniella and Stachybotrys species inferred from ribosomal DNA sequences and evaluation of morphological features for Memnoniella species identification[J]. Mycologia，2001（96）：54-65.

[11] Ellis M B.Dematiaceous Hyphomycetes[M]. Commonwealth Mycological Institute，Kew，1971：1-608.

[12] 王同智，包玉英.AM真菌對瀕危物種四合木及近緣種霸王抗旱性的影響[J].華北農學報，2014（3）：170-175.

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[14] 王惠哲，李淑菊，霍振榮，等.探討黃瓜枯萎病菌DNA遺傳多態(tài)性研究的可能性[J].天津農業(yè)科學，2006，12（3）：4-7.endprint

菌落平展，絨毛狀，初無色或極淡黃色，后隨產孢變褐色或黑色，背面黃褐色或灰褐色，邊緣不規(guī)則缺刻狀，顏色較淡，中央大量產孢。生長緩慢，PDA上，25 ℃下，2周直徑達2～2.5 cm。分生孢子梗有限生長，分化明顯，單生或簇生，直立或略彎曲，不分枝，1～2隔膜，長50～80 μm，寬3～6 μm，初無色，后橄欖褐色，近端部常明顯粗糙或被黑色顆粒，基部細胞稍膨大，頂部著生產孢瓶體部位膨大，寬4～6 μm，產孢瓶體6～9個，內壁芽生，有限生長，離生，單細胞，淡橄欖褐色，橢圓形或卵圓形，光滑，具有明顯的領部結構。分生孢子頂生，向基序列產生，初無色，光滑，成熟后褐色或黑色，不透明，具有明顯的瘤突，球形或亞球形，直徑3～6 μm[9-10]。

3 討 論

麥根腐平臍蠕孢（Bipolaris sorokiniana），該菌可以引起小麥根腐病和葉斑病，在小麥的多個生長階段可以致病，幼苗期引起芽腐和苗枯，成株期引起葉斑、穗腐、根腐、莖基腐和黑胚粒。自然界分布廣泛，是屬內常見的一個種[11]。1979年戴芳瀾在《中國真菌總匯》中以禾旋孢腔菌Cochliobolus sativvus收錄了該種。其產生長蠕孢犬牙素，紅色色素，柄曲霉素及長蠕孢素等代謝產物。該種在形態(tài)上與中國平臍蠕孢B. chinensis G.Y. Sun et T.Y. Zhang近似，區(qū)別在于后者的分生孢子常為棍棒形或長橢圓形，與該種寬紡錘形或闊橢圓形的孢子不同。另外，兩者在PDA上培養(yǎng)的菌落形態(tài)不同。而我們是在未發(fā)病的小麥田地分離到的該菌，小麥未發(fā)病的原因可能是環(huán)境條件不適宜，沒有滿足病害三角中的環(huán)境要求。筆者擬繼續(xù)跟蹤該田塊以后幾年內的小麥病害發(fā)生狀況，以便更好地了解該病原菌的流行規(guī)律[12]。

刺黑烏霉（Memnoiella echinata）是1873年Rivolta在意大利北部的干草和空的麥稈上發(fā)現(xiàn)此菌，并定名為Penicillium echinatum Rivolta，其顯著特征是產生黑色鏈生的類似Aspergillus niger的瓶梗孢子和類似Stachybotrys青霉狀的頭部。Saccado（1886）將其從中劃分出來置入HaplographiumBerk.& Br.。忽略了Rivolta的研究，Hhnel在1923年從棉紗上發(fā)現(xiàn)一相同的分離物并建立新種Memnoniella aterrima。Galloway（1933）認真對比了Rivolta和Hhnel的研究后接受H·hnel的Memnoniella，并建立了新組合M. echinata （Riv.） Galloway。Bisby（1943）曾認為M. echinata或許是S. subsimplex的一個非正常階段，因為可能黏球的形成是因為孢子的滯留成鏈而停止。但在1945年通過進一步對比研究不同地區(qū)的幾個分離物后確認二者是完全不同的[13]。與M. echinata相似的種是M. zingiberis Rao，也產生粗糙的球形孢子，直徑4.4～6.8 μm，Jong & Davis認為它可能是M. echinata的同物異名，但由于沒能得到的M. zingiberis培養(yǎng)物而無法進行比較，現(xiàn)在還是把他們作為不同的種對待。另一個相似的種為M. levispora Subramanian，其分生孢子光滑，直徑3～7 μm，二者易于區(qū)分。該種從森林、草地以及耕作田的土壤中都有分離的報道，也存在于香蕉、煙草以及松樹等多種植物的根際，具有較強的纖維素分解能力，可利用纖維素為唯一的碳源[14]。

參考文獻：

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[2] 于會佳，楊麗娜，孟天天，等.油污土壤植物與真菌聯(lián)合生物修復的研究[J].天津農業(yè)科學，2013，19（5）：66-69.

[3] 張峰峰，趙玉潔，謝鳳行，等.AM真菌提高植物耐鹽性研究進展與展望[J].天津農業(yè)科學，2008，14（6）：66-70.

[4] 陳銳，朱珠，蘭青闊，等.真菌RNA沉默研究進展[J].天津農業(yè)科學，2014，20（5）：5-13.

[5] Alocorn J L.Genetic concepts in Drechslera，Bipolaris and Exserohilum[J]. Mycotaxon，1983（17）：1-86.

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[7] 文景芝，陸家云.內臍蠕孢屬、平臍蠕孢屬和突臍蠕孢屬的分類鑒定[J].東北農學院學報，1991，2（22）：120-126.

[8] Deighton F C.Four synnematous hyphomycetes[J].Trans. Br. Soc，1974，62（2）：243-252.

[9] De-wei Li，Chins Yang，Haugland R， et al. A new species of Memnoniella[J]. Mycotaxon，2003：253-257.

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[11] Ellis M B.Dematiaceous Hyphomycetes[M]. Commonwealth Mycological Institute，Kew，1971：1-608.

[12] 王同智，包玉英.AM真菌對瀕危物種四合木及近緣種霸王抗旱性的影響[J].華北農學報，2014（3）：170-175.

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