手足口病(HFMD)患兒細(xì)胞免疫及體液免疫變化及與病情預(yù)后的關(guān)系探討

武鳴鳳 李 秋 單洪際

吉林省結(jié)核病醫(yī)院，吉林長春 130500

手足口病(HFMD)是臨床常見的嬰幼兒傳染性疾病[1]。發(fā)病人群多為5 歲以下兒童，臨床癥狀主要有手、足、口腔等部位的皰疹或者是破潰性潰瘍等，少數(shù)患兒可引發(fā)腦膜炎、心肌炎以及肺水腫等并發(fā)癥。近幾年來，HFMD 的發(fā)病率逐年升高，如何在發(fā)病早期進(jìn)行有效評估并對重癥患兒危險(xiǎn)性給予及時(shí)干預(yù)，改善患兒病情預(yù)后，一直的臨床研究的重點(diǎn)[2]。目前實(shí)驗(yàn)室T 細(xì)胞亞群及免疫球蛋白等免疫學(xué)檢測指標(biāo)，在一定程度上可有效反映HFMD 患兒的機(jī)體免疫狀態(tài)[3]。該次研究抽選2010年7月—2014年5月175 例HFMD 患兒，對其不同病程患兒血清免疫球蛋白指標(biāo)及T 細(xì)胞亞群相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行分析，并與健康患兒進(jìn)行對比，旨在探討HFMD 患兒病情進(jìn)展與細(xì)胞及體液免疫水平的關(guān)系，以及機(jī)體免疫水平在HFMD 患兒病情進(jìn)展中的作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)抽選該院收治的175 例HFMD 患兒，診斷均符合《手足口病診療指南》[4]的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中男92 例，女83 例，年齡5 個(gè)月～8 歲，平均(2.85±1.07)歲；根據(jù)臨床表現(xiàn)和病情發(fā)展分型：輕癥型63 例，其中男42 例，女21 例，年齡5 個(gè)月～7 歲，平均(2.79±1.09)歲；重型60 例，其中男32 例，女28 例，年齡6 個(gè)月～8 歲，平均(2.83±1.05)歲；危重型52 例，其中男18 例，女34 例，年齡5 個(gè)月～7 歲，平均(2.80±1.11)歲；所有患者均未合并其他慢性疾病史，輕癥型組均治愈好轉(zhuǎn)，重型組病例中死亡3 例，危重型組死亡6例。同時(shí)抽選同期131 例健康體檢兒為對照組，其中男75 例，女60 例，年齡4 個(gè)月～7 歲，平均(2.88±1.06)歲；各組間性別、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 重型及危重型HFMD 患兒臨床特性

重癥均有如單純腦炎、腦炎合并肺炎及其他上呼吸道感染等并發(fā)癥。重型組指有發(fā)熱、皮疹以及神經(jīng)系統(tǒng)受累癥狀，表現(xiàn)為嗜睡、肢顫、陣發(fā)性抽搞、易驚嚇等。危重型組臨床表現(xiàn)為持續(xù)性高熱（基礎(chǔ)體溫≥39.0℃），持續(xù)時(shí)間大約為2～7 d；病情危重，頻繁抽搐以及有嚴(yán)重意識障礙，亦有循環(huán)、呼吸系統(tǒng)受累癥狀。

1.3 檢測方法

各組患兒入院后2 h 內(nèi)（未進(jìn)行治療前）抽取靜脈血送檢。采用免疫比濁法、HITACHI7600 全自動(dòng)特定蛋白分析儀檢測IgM、IgG、IgA 等體液免疫功能，試劑從ORION DIAGNOSTICA 公司（芬蘭）選購，采用BD FACSCalihur 型號的流式細(xì)胞儀（FCM）檢測CD3+、CD4+、CD8+等細(xì)胞免疫功能指標(biāo)，取肝素抗凝新鮮全血1 mL,然后再50 μL 的樣品試管中分別加入10 μL 劑量的相應(yīng)單克隆抗體，充分混勻后室溫避光放置15 min，采用PACS 做溶血，F(xiàn)CM 分>10 000 個(gè)細(xì)胞，儀器和試劑購自BD Biosciences公司（美國）。

表1 HFMD 患兒與健康對照組各免疫指標(biāo)比較（±s）

表1 HFMD 患兒與健康對照組各免疫指標(biāo)比較（±s）

項(xiàng)目HFMD 患兒健康對照組t 值P 值體液免疫（g/L）IgMIgGIgA細(xì)胞免疫（%）CD3+CD4+CD8+1.76±0.34 0.77±0.29 26.81<0.05 8.27±1.63 7.18±1.68 5.71<0.05 0.59±0.19 0.45±0.22 5.96<0.05 48.19±9.21 66.29±10.05 16.23<0.05 27.71±5.19 39.09±6.01 17.73<0.05 20.63±7.73 26.77±8.74 6.50<0.05

表2 HFMD 患兒不同病情程度各免疫指標(biāo)比較（±s）

表2 HFMD 患兒不同病情程度各免疫指標(biāo)比較（±s）

項(xiàng)目輕癥型組重型組危重型組F 值P 值體液免疫（g/L）IgMIgGIgA細(xì)胞免疫（%）CD3+CD4+CD8+1.39±0.35 1.71±0.35 2.07±0.33 4.36<0.05 7.38±1.68 10.72±2.21 15.69±2.55 4.01<0.05 0.53±0.38 0.63±0.31 0.92±0.33 3.52<0.05 58.48±7.86 48.93±8.15 41.33±7.94 10.35<0.05 32.09±6.01 27.41±6.49 22.28±5.495 5.89<0.05 22.77±3.34 20.21±3.52 15.71±3.11 3.78<0.05

1.4 觀察指標(biāo)

包括各組患兒臨床一般情況、表現(xiàn)、病情變化、體液免疫(IgM、IgG、IgA)及細(xì)胞免疫(CD3+、CD4+、CD8+)結(jié)果，判斷疾病預(yù)后。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS17.0 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（±s）表示，兩組間采用t 值檢驗(yàn)，3 組均數(shù)采用F 值檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 HFMD 患兒與健康對照組各免疫指標(biāo)比較

HFMD 患兒細(xì)胞免疫（CD3+、CD4+、CD8+等T 細(xì)胞亞群）水平均顯著低于健康對照組（P<0.05）；體液免疫（IgM、IgG、IgA）水平明顯高于健康對照組（P<0.05），比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；見表1。

2.2 HFMD 患兒不同病情程度各免疫指標(biāo)比較

隨著病情嚴(yán)重程度的加重，輕癥型、重型、危重型患兒的CD3+、CD4+、CD8+水平不斷降低，IgM、IgG、IgA 水平升高，3 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3 討論

手足口病(HFMD)是因感染腸道2 病毒而導(dǎo)致的一種傳染性疾病，可引發(fā)HFMD 的腸道病毒多達(dá)20 多種類型，其中以Cox-A16 及EV71 最為常見。多數(shù)患兒感染HFMD 后預(yù)后良好，有少部分重癥患兒可并發(fā)腦膜炎、心肌炎以及肺水腫等并發(fā)癥，個(gè)別重癥患兒由于病情發(fā)展快速，搶救無效而發(fā)生死亡。有學(xué)者[5]認(rèn)為HFMD 的病情轉(zhuǎn)歸與人體免疫功能可能存在重要相關(guān)性。

目前，臨床通常采用T 細(xì)胞亞群測定來準(zhǔn)確判斷病人機(jī)體細(xì)胞免疫功能。越來越多的研究[6-7]表明，T 細(xì)胞在人體腸道病毒感染后起著重要的免疫介導(dǎo)作用，可釋放出多種細(xì)胞因子，在機(jī)體抗感染、抗病毒感染免疫應(yīng)答機(jī)制中發(fā)揮重要作用。CD4+、CD8+能夠調(diào)節(jié)T 細(xì)胞的免疫功能，其中CD4+對B 淋巴細(xì)胞分化功能具有調(diào)節(jié)作用，刺激產(chǎn)生抗體；而CD8+對抗體合成以及分泌具有抑制作用，同時(shí)可抑制T 細(xì)胞增殖，兩者的協(xié)調(diào)作用使機(jī)體免疫應(yīng)答維持正常。T 細(xì)胞亞群中的CD3+表達(dá)水平代表外周血成熟T 細(xì)胞總數(shù)，CD3+可通過向T 細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)TCR 雙識別信號而促進(jìn)T 細(xì)胞活化，分布于所有活化T 細(xì)胞表面。CD4+又稱為Th 細(xì)胞，是一種輔助誘導(dǎo)性T 細(xì)胞亞群，CD4+上的TCR 能夠識別出抗原肽-II 類分子復(fù)合物，從而參與Th2 細(xì)胞激活。CD8+是一種抑制性(Ts)以及細(xì)胞毒性(Tc)細(xì)胞亞群，可識別并結(jié)合抗原肽-II 類分子，激活細(xì)胞毒性T 細(xì)胞。CD4+與CD8+的比值能夠反映出Th 與Tc 功能間的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，是機(jī)體免疫內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的一項(xiàng)最重要的監(jiān)測指標(biāo)，其比值下降，則表示機(jī)體免疫力下降[8]。該研究HFMD 患兒細(xì)胞免疫（CD3+、CD4+、CD8+等T細(xì)胞亞群）水平均顯著低于健康對照組（P<0.05），并且CD4+下降程度高于CD8+，因此CD4+/CD8+比值降低。提示HFMD 患兒機(jī)體活化的T 淋巴細(xì)胞明顯較少，免疫功能下降，病毒入浸及發(fā)病幾率增大，出現(xiàn)了細(xì)胞免疫功能紊亂。并且表2 還顯示隨著病情嚴(yán)重程度的加重，輕癥型、重型、危重型患兒的CD3+、CD4+、CD8+水平不斷降低（P<0.05），說明感染HFMD 病毒后，隨著病情加重，患兒細(xì)胞免疫功能進(jìn)一步下降?？赡苁且?yàn)橹匕YHFMD 患兒免疫應(yīng)答更為強(qiáng)烈，在機(jī)體免疫保護(hù)、恢復(fù)疾病的同時(shí)，可能造成的免疫損傷更為嚴(yán)重，使部分患兒向危重癥型進(jìn)展。

免疫球蛋白可使體液免疫增強(qiáng)，IgA、IgG 能夠增強(qiáng)巨噬及NK 細(xì)胞的免疫吞噬功能，IgA 通過經(jīng)典途徑還能對補(bǔ)體系統(tǒng)產(chǎn)生激活作用，使得機(jī)體免疫應(yīng)答反應(yīng)明顯增強(qiáng)。有研究顯示，HFMD 患兒體液免疫亢進(jìn)，并且同病情程度存在相關(guān)相關(guān)性，重癥患兒體液免疫亢進(jìn)表現(xiàn)更為明顯，可能與HFMD 患兒機(jī)體防御有關(guān)。本研究中，HFMD 患兒體液免疫（IgM、IgG、IgA）水平明顯高于健康對照組（P<0.05）；提示HFMD 患兒體液免疫功能被激活，出現(xiàn)了強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)。并且隨著病情嚴(yán)重程度的加重，輕癥型、重型、危重型患兒IgM、IgG、IgA 水平不斷升高，3 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。田健美等研究報(bào)道顯示輕癥組和重、危重癥組HFMD 患兒的IgA、IgG、IgM 水平存在明顯異常；而輕癥組與重、危重癥組兩組對比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；危重癥組各項(xiàng)免疫球蛋白表達(dá)水平高于輕癥組（P<0.05），與該研究結(jié)果相一致（P<0.05）。提示HFMD 患兒體液免疫指標(biāo)增加要引起臨床的高度重視，可能將要進(jìn)一步向危重癥發(fā)展，需及早進(jìn)行治療干預(yù)。

綜上所述，HFMD 患兒尤其是有腦炎合并癥的重癥患兒會(huì)出現(xiàn)顯著的細(xì)胞及體液免疫功能低下及調(diào)節(jié)紊亂，與疾病嚴(yán)重程度存在相關(guān)性。

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