嚴松俊 周家華 潘時山
(南通市蠶桑指導站 226011)
近年來,桑疫病的發(fā)生逐年上升,已演變?yōu)樘K中地區(qū)蠶桑生產的主要病害,在南通市主要蠶區(qū),桑疫病嚴重的地方發(fā)病面已超過50%,造成了嚴重危害;據不完全統(tǒng)計,全市每年因桑疫病造成的直接經濟損失近億元。為解決桑疫病防治問題,南通市蠶桑指導站專題立項,對桑疫病發(fā)生規(guī)律與防治方法進行研究,并在試驗示范區(qū)域內進行了示范防治應用,取得明顯成效。
經調查研究,大致查明本地桑疫病病原菌的有關性狀以及病害的一般規(guī)律,了解了一些桑品種的抗病性能。
根據其在自然條件下的發(fā)病癥狀可分為三種癥狀型。
1.1.1 黑枯型
一般在嫩葉葉脈周圍產生多角形病斑,由油漬狀后變褐,病斑四周黃綠色或黃色,嚴重時病斑連成片,有的半葉以上變黃褐色;新梢或枝條上常產生黑褐色點線狀條斑,新梢受害時,梢端往往腐敗變黑呈爛頭狀。
1.1.2 縮葉型
病葉葉脈局部褐變壞死、葉片向背面蜷縮呈典型的縮葉狀;葉肉處散生圓形病斑,由油漬狀后變褐,四周黃綠;新梢患病后常使頂芽枯萎,下面腋芽再萌發(fā)新梢形成側枝;枝條上病斑呈凹陷龜裂狀的黑色梭形裂口。
1.1.3 斷柄型
新梢第1~2 片嫩葉葉柄中間呈縊縮發(fā)黑狀,在葉柄縊縮處彎折,葉片枯萎下垂,其后葉柄縊縮處斷裂,桑葉落地,這時新梢已長出第3~5 片葉以上。
以上幾種癥狀型的受害部位,特別是嫩組織病斑,在空氣濕度大時會溢出黃色或白色的菌膿,成為再次侵染的重要來源。
研究表明,桑疫病病原菌(pseudomonas syringae pv.mori Van Hall.)屬裂殖菌綱,假單胞桿菌目,假單胞桿菌科,假單胞桿菌屬。
圖1 分析出的桑疫病病原細菌形態(tài)(電子顯微鏡觀察)
1.2.1 病原特性
1.2.1.1 病原大小
病原菌為短桿狀細菌,兩端鈍圓,大小為0.7~1.3 ×1.6~4.4μm,平均1.4 ×3.2μm,生育溫度范圍2.5~34℃,適溫28~32℃。
1.2.1.2 病原性
用一束針刺新梢葉的半邊,在葉背面噴霧菌液(108/ml)接種,置濕室24h 后移入溫室保護15 天,調查從氣孔侵染而產生的病斑數和從傷口感染而引起病斑擴大的程度,以測定病原力。按這種接種檢定法對2~3個抵抗性品種接種病原菌,從反應可以檢定病原性的有無及強弱。初次或連續(xù)分離培養(yǎng)數次的病菌致病性都很強,但經不斷分離培養(yǎng),較長時間在培養(yǎng)基中生長發(fā)育的病菌其致病力會逐漸減弱。
1.2.1.3 菌落型
縮葉病病菌在培養(yǎng)基上具有白色半透明、中高、圓形、波狀邊緣、濕光的光滑型菌落,菌體具有1~10 根單極性鞭毛,能運動。也有出現(xiàn)不平型菌落株,這種菌落形成較早、扁平且周緣極不整齊,不能正常分裂、絲狀地延長,無鞭毛也無運動性,革蘭氏染色陰性。黑枯病病菌在肉汁瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)的菌落呈乳白色、半透明、圓形,中心凸起,邊緣較整齊,表面平滑濕潤,有熒光,用低倍鏡觀察,菌落內部呈網狀結構。是一種好氣性的專性寄生菌。單極生鞭毛一至多根,無芽孢,無芽膜,革蘭氏染色陰性。
1.2.2 病原與環(huán)境的關系
1.2.2.1 與溫度的關系
本菌的生長溫度范圍為2~35℃,屬于一類中溫菌。兩種病原菌的最適生長溫度,黑枯型菌在28~30℃,縮葉型菌為25~28℃。干熱致死溫度10min,黑枯型菌為90℃,縮葉型菌為120℃,濕熱致死溫度10min,兩種菌均為48℃。
在自然情況下,黑枯型病在溫度較高的夏秋季大發(fā)生,縮葉型病則在溫度稍低的春季大發(fā)生。試驗表明,在癥狀上是屬于縮葉型的M792-7 菌株,最適生長溫度為30℃左右,該菌接種后,其發(fā)病時間同黑枯型菌相似,在7月份發(fā)病仍然嚴重;M292-6菌株測定的最適生長溫度與M282-1 相似,但在自然情況下春季亦有發(fā)病,曾見3月中旬上年感病枝條發(fā)病腐死,4月上旬發(fā)病嚴重的情況。
1.2.2.2 與紫外線之間的關系
病原菌對紫外線都有一定的抵抗能力,其中縮葉型菌比黑枯型菌的抗性強;呈菌落狀態(tài)的幾乎不受日光或紫外線燈照射的影響。由此可見,在自然情況下,菌膿不易受日光的影響,從而成為再次侵染的主要來源。
1.2.2.3 與PH 值之間的關系
病原菌的生長PH 范圍較廣,在5.0~9.0 之間都能生長,6.3~8.0 之間生長最好。所以病原菌在呈中性或略酸性的桑樹組織和PH 在6~7.5 的土壤組織中都能很好地生存。
1.2.3 病原致病性
初次或連續(xù)分離培養(yǎng)數次的病菌致病性都很強,但經不斷分離培養(yǎng),較長時間在培養(yǎng)基中生長發(fā)育的病菌其致病力會逐漸減弱。進行桑品種抗病性鑒定時,在新梢第2~3 片葉背定量噴霧致病性強的菌液(108/m1)或在其嫩葉葉脈上針刺涂菌,保濕12h,在10~12d 內調查從氣孔侵染而產生的病斑數、病斑大小或從傷口感染而引起病斑擴大的程度和速度,以這種接種方式來檢測桑品種的抗性強弱。
在分析研究桑疫病病原過程中,反復得到一種真菌與其共生,經分離分析,系一種木賊鐮刀菌,經查,木賊鐮刀菌是紅樹植物中的一種內生真菌。研究發(fā)現(xiàn):木賊鐮刀菌加入土壤后,細菌的侵染率大大提高。
研究表明,木賊鐮刀菌通過土壤接種方法可以使桑疫病病原丁香假單胞菌對桑樹的侵染力明顯增強。由于木賊鐮刀菌對桑樹維管組織的破壞,導致桑疫病病原菌容易入侵,從而使桑疫病發(fā)病增加;當桑樹生長良好且無桑疫病病原菌存在時,木賊鐮刀菌對健康桑樹無致病性;當桑疫病病原菌侵入桑樹樹體時,表現(xiàn)出弱致病性,但木賊鐮刀菌與桑疫病病原菌同時存在,并侵入桑樹樹體時,則表現(xiàn)出致病性增強的現(xiàn)象。
病原菌在病枝條活組織內越冬,到第二年侵染新萌發(fā)的芽和葉,成為早春初次侵染的主要病原。枝條內的病菌在次年春季氣溫變暖時,隨枝條內營養(yǎng)液的流動,內部病斑中細菌由維管束蔓延到桑芽和嫩葉,引起初次侵染,并在葉柄、葉脈上形成新病斑。病斑內的細菌迅速繁殖,溢出黃白色菌濃。菌膿隨雨水滴濺到鄰近芽葉上,或者經昆蟲、枝葉相互接觸等所造成的傷口侵入,也可通過氣孔侵入,引起發(fā)病。病原菌侵染后,經3~4日的潛育期即形成病斑。因此,在條件適宜時,可經多次侵染,病害迅速蔓延擴大,導致流行。
桑疫病的發(fā)生或流行與桑品種、氣候、地形地貌、蟲害及桑園管理等各種因素有關。
1.4.1 桑品種
桑品種之間的感病性差異很大,有不少品種極易感病,并在桑組織中迅速發(fā)展蔓延,有的可深達枝條基部或拳部,成為第2年春季或夏伐后桑樹的主要侵染來源。如果桑田中有易感品種混栽其中,往往成為每年發(fā)病的主要來源;若是成片栽植易感桑品種,則容易造成病害的流行。
從病葉率和病情指數可以看出,不同桑品種對縮葉型細菌病的抗性依次為新一之瀨>湖桑32 號>育71-1 >農桑8 號。
表1 桑品種的桑疫病抗性調查
1.4.2 氣候
溫濕度、降水等氣象因子對桑疫病的影響甚大。病原菌在適溫適濕條件下繁殖加快,在大風、多雨情況下會加速擴展蔓延,而高溫、干燥會使病情減緩甚至暫停。本地蠶區(qū)內桑黑枯型疫病春季也發(fā)病,而在夏伐后的夏、秋季節(jié)發(fā)病嚴重,特別是在連續(xù)陰雨、日照不足,或溫高、濕重的條件下往往會大發(fā)生;縮葉型疫病主要發(fā)生在春季和夏伐后的7月上中旬之前,以后的高溫季節(jié)中極少發(fā)生,這與二種病型的病原最適生長溫度相一致。
表2 溫濕度對桑疫病發(fā)生的影響
1.4.3 蟲害
在桑樹的蟲害發(fā)生比較嚴重的桑園,桑細菌病發(fā)病率也有較高的傾向,其中主要原因是由于害蟲作媒介進行傳播。
1.4.4 土壤肥力
在偏施N 肥的桑園中,易發(fā)生細菌病,這是由于偏施N 肥就會導致桑樹徒長,葉質偏嫩。葉質偏嫩是導致細菌病發(fā)生的直接原因。
1.4.5 地下水位
一般情況下,地下水位較高的桑園,細菌病發(fā)病率也有較高的傾向。
1.4.6 其它因素
靠近江、湖、溝、河及海邊的桑園及坡谷地等招風地段的桑樹容易發(fā)病;桑園密植、通風透光差的桑園,發(fā)病率高。
分別用桑保Ⅰ號、Ⅱ號和農用鏈霉素對重癥區(qū)和輕癥區(qū)桑疫病進行防治試驗,發(fā)病嚴重的,在連續(xù)交替使用8 次桑保Ⅰ號、Ⅱ號后,有明顯預防效果。防治區(qū)發(fā)病株率比未使用藥物的對照區(qū)低56.7%,且平均條長長93.8 c m,病枝率低89.6%。但用藥較遲、次數較少的區(qū)域,效果較差。系因桑樹已經出現(xiàn)病癥,藥物對桑疫病治療效果差。
表3 桑保Ⅰ號、Ⅱ號及農用鏈霉素對桑疫病的防治效果試驗
連續(xù)交替使用桑保Ⅰ號、Ⅱ號對桑疫病的預防效果好,農用鏈霉素的預防效果差。桑保Ⅰ、Ⅱ號對桑疫病的預防效果好,但治療效果較差。
使用桑保Ⅰ、Ⅱ號,應自桑樹夏伐后,在桑樹出現(xiàn)桑疫病病癥前盡早使用,可控制桑疫病的發(fā)生,減少危害。同時應根據桑園病情靈活掌握。病情較重的桑園,第一次使用時間以夏伐后一個月內為宜,即枝生長到3 0~5 0 cm 開始第一次防治。
依桑保I 號、Ⅱ號的有效成分,蠶期亦可使用有利于控制田間病情的進一步發(fā)展。
用鋅菌胺醋酸鹽、鋅·咪·多、諾氟沙星膠囊進行防治試驗,連續(xù)使用鋅菌胺醋酸鹽、鋅菌胺醋酸鹽+諾氟沙星、鋅菌胺醋酸鹽+咪鮮胺錳鹽+多菌靈等藥物對桑疫病均有一定的防治效果,但以鋅·咪·多的預防、治療效果為好(表4)。
單獨使用鋅菌胺醋酸鹽或鋅菌胺醋酸鹽+諾氟沙星防治三次仍有新的病株發(fā)生,說明使用上述藥物,應根據桑園發(fā)病情況,適當增加使用次數。
將葉片皺縮、部分黃化,枝條頂端出現(xiàn)線狀黑斑的枝條定為Ⅰ級,開始爛頭的枝條定為Ⅱ級,葉片掉落,枝條停止生長、枯死的枝條為Ⅲ級(最高級),防治前后的病情指數調查見表5。鋅·咪·多防治區(qū)校正防效大于80%,防效最好。
表4 病情指數調查
表5 發(fā)病枝條病情指數調查
根據調查研究的情況,建立桑疫病的檢疫預警機制,根據不同的發(fā)生情況采取相應的防范措施,減輕病害的發(fā)生和減少損失。
將桑疫病列為桑蠶病蟲害重點預警對象,以田間實際監(jiān)測為依據,結合歷年發(fā)病規(guī)律、特點及影響因素的相關性,訂立預警分級指標,分別不同類別加以處置。具體可將桑疫病預警指標分為四類,即:田間株發(fā)生率>80%時,為Ⅰ級發(fā)生,系暴發(fā)性災害;株發(fā)生率在50%~80%時,為Ⅱ級發(fā)生,系突發(fā)性災害;株發(fā)生率在10%~50%時,為Ⅲ級發(fā)生,系一般性災害;<10%時,則為Ⅳ級,視為安全性正常報告。在桑病蟲發(fā)生信息的發(fā)布機制上,采取預警信息分級發(fā)布。Ⅲ、Ⅳ級指標時,僅需通過《桑病蟲情報》發(fā)布信息,Ⅱ級指標時通過《桑病蟲情報》、電話與傳真發(fā)布信息,Ⅰ級指標則通過《桑病蟲情報》、電話與傳真、電視滾動字幕、如皋農業(yè)網、南通農業(yè)網等渠道發(fā)布信息,同時召開緊急會議,全面部署貫徹落實桑蠶病蟲害及主要環(huán)境災害的防治。
根據桑蠶病蟲害及主要環(huán)境災害的發(fā)生情況與分級標準,制定相應的控制技術措施;符合Ⅰ、Ⅱ級預警指標的采取應急控制技術,凡是符合Ⅲ、Ⅳ級預警指標的采取常規(guī)控制技術。應急控制技術措施包括:截干、除葉,清理桑園、更新桑園,連續(xù)交替使用桑保Ⅰ號、Ⅱ號噴藥防治,或用鋅菌胺醋酸鹽、或(鋅菌胺醋酸鹽辛+米多唑+多菌靈的復配藥劑,進行藥物防治。
常規(guī)控制技術包括:選栽抗病品種,避免大范圍成片栽植單一易感品種;注意合理密植,避免偏施氮肥,增施有機肥料,增強樹勢;加強桑園管理,如清溝理墑、開溝降漬;隨時巡查桑園,發(fā)現(xiàn)病芽病葉及時剝除;發(fā)病桑樹及時挖除或進行降干剪伐,剪下的病枝病葉應帶出桑園銷毀,以減少再侵染來源;春季要重剪梢,減少桑園病原菌基數。