不同病理分型胃癌患者放療前后T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞的變化

陳堅(jiān)賢 黃廣優(yōu) 鄧柑雀 黃升武 蒙以良 鄭學(xué)嵩 (百色市人民醫(yī)院腫瘤科，廣西 百色 533000)

手術(shù)治療是目前治療胃癌最有效的手段，然而根治術(shù)后仍有40%左右的患者復(fù)發(fā)，術(shù)后化療聯(lián)合放射治療是降低局部區(qū)域復(fù)發(fā)機(jī)會(huì)和提高生存率的主要方式〔1〕。胃癌的發(fā)生發(fā)展與機(jī)體的免疫功能變化密切相關(guān)。放化療之后，患者的免疫系統(tǒng)遭到破壞，機(jī)體本身的抗腫瘤功能受到影響，化療之后機(jī)體主要表現(xiàn)為免疫細(xì)胞特別是T細(xì)胞和自然殺傷(NK)細(xì)胞數(shù)量減少〔2～4〕。然而對(duì)于放療對(duì)機(jī)體免疫細(xì)胞亞群的影響研究較少，胃癌的病理分型與放療后機(jī)體T細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞變化之間有無(wú)關(guān)系目前沒有報(bào)道。本文主要探討胃癌根治術(shù)后放療對(duì)外周血T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞的影響，同時(shí)研究病理分型與化療后T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞變化的關(guān)系，旨在探討放療對(duì)機(jī)體免疫功能的影響。

1 資料與方法

1.1 對(duì)象 選擇2011年6月至2013年6月在我院收治的55例胃癌手術(shù)患者，男29例，女26例，年齡47～82〔平均(64.2±12.8)〕歲。術(shù)后病理分期為T3或N+期，臨床分期為Ⅱ～Ⅳ期，所有患者均接受放療治療，予以胃原發(fā)灶及轉(zhuǎn)移灶三維適形放射治療，采用醫(yī)用電子直線加速器15 MV X射線放療，胃原發(fā)灶4 500 cGy/25 F，鎖骨及腹主動(dòng)脈轉(zhuǎn)移灶6 000 cGy/30 F。所有患者均經(jīng)過(guò)訓(xùn)練可以自主控制呼吸，心肺功能良好。病理分型(WHO分型):乳頭狀腺癌11例、管狀腺癌19例、印戒細(xì)胞癌9例、黏液腺癌10例、未分化癌6例。另選35例健康志愿者作為對(duì)照組，男19例，女16例，年齡44～80〔平均(62.3 ±11.7)〕歲。

1.2 檢測(cè)指標(biāo)與方法 分別于放療前、放療后3 d采集空腹靜脈血5 ml，同期采集健康對(duì)照組空腹靜脈血5 ml，肝素抗凝后用淋巴細(xì)胞分離液分離兩組外周血標(biāo)本的單個(gè)核細(xì)胞。T細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞檢測(cè)采用如下抗體:CD3-FITC、CD4-PE、CD8-PercpCy5.5、APC-CD45 和 CD3-FITC、CD16-PE、CD56-Percp-Cy5.5、APC-CD45，所有抗體均購(gòu)于美國(guó)Biolegend公司。采用美國(guó)BD公司的FACS Calibur流式細(xì)胞儀檢測(cè)，檢測(cè)方法按照說(shuō)明書執(zhí)行。采用Cell Quest軟件分析數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)CD3+T細(xì)胞(CD45+CD3+)、CD4+T 細(xì)胞(CD45+CD3+CD4+)、CD8+T 細(xì)胞(CD45+CD3+CD8+)和NK細(xì)胞(CD45+CD3-CD56+)的百分比。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0軟件，數(shù)據(jù)資料采用s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 放療對(duì)胃癌患者外周血T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞的影響胃癌患者根治術(shù)后放療前外周血CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞和NK細(xì)胞的比例接近對(duì)照組(P＞0.05);放療后，胃癌患者外周血CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞和NK細(xì)胞的比例顯著降低(P＜0.05)。見表 1。

表1 胃癌患者放療前后T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞水平比較( s，%)

表1 胃癌患者放療前后T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞水平比較( s，%)

與對(duì)照組比較:1)P ＜0.05，與放療前比較:2)P ＜0.05

細(xì)胞放療前 55 63.3 ±5.77 43.49 ±8.68 19.1 ±7.52 34.48 ±9.81組別 n CD3+T細(xì)胞 CD4+T細(xì)胞 CD8+T細(xì)胞 NK放療后 55 56.27 ±8.371)2)38.41 ±5.021)2)15.45 ±5.61)2)30.9 ±7.281)2)對(duì)照組 35 67.34 ±6.98 45.56 ±5.99 21.87 ±4.66 36.3 ±3.29

2.2 放療前后不同病理分型胃癌患者外周血T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞水平比較 不同病理類型的胃癌患者，放療前后其外周血T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞水平存在不同程度的變化，其中乳頭狀腺癌患者放療后CD8+T細(xì)胞、NK細(xì)胞比例減少(P＜0.05)，但是CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞沒有變化。管狀腺癌患者放療后CD3+T細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞和NK細(xì)胞比例顯著降低(P＜0.05)，CD8+T細(xì)胞則沒有變化。印戒細(xì)胞癌和未分化癌的患者T細(xì)胞亞群水平顯著下降(P＜0.05)，但是NK細(xì)胞不受影響。黏液腺癌患者放療前后外周血T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞水平均沒有變化。見表2。

表2 放療前后不同病理分型胃癌患者外周血T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞水平比較( s，%)

表2 放療前后不同病理分型胃癌患者外周血T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞水平比較( s，%)

與放療前比較:1)P＜0.05

放療后乳頭狀腺癌 11 63.89 ±5.77 60.1 ±6.98 40.5 ±6.36 39.13 ±5.3 22.51 ±5.85 15.39 ±5.31) 35.15 ±10.35 30.5 ±7.391)病理類型 n CD3T細(xì)胞放療前 放療后CD4T細(xì)胞放療前 放療后CD8T細(xì)胞放療前 放療后NK細(xì)胞放療前管狀腺癌 19 63.25 ±6.32 50.35 ±8.971) 45.9 ±5.32 35.96 ±4.791) 18.87 ±7.99 17.8 ±5.24 39.56 ±10.78 29.21 ±7.261)印戒細(xì)胞癌 9 64.71 ±3.89 53.61 ±9.61) 43.86 ±9.87 38.12 ±4.841) 20.62 ±8.86 13.3 ±5.981) 30.28 ±9.62 30.17 ±8.01黏液腺癌 10 61.09 ±4.86 60.58 ±10.6 44.6 ±8.82 41.33 ±5.63 17.3 ±6.37 16.53 ±6.02 34.3 ±11.07 32.37 ±6.99未分化癌 6 63.56 ±5.54 56.7 ±4.551) 42.59 ±9.01 37.51 ±5.171) 19.59 ±5.79 14.26 ±5.111)33.12 ±8.23 32.64 ±7.16

3 討論

細(xì)胞免疫是機(jī)體抗腫瘤免疫的主要方式，T淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞是細(xì)胞免疫中的主要效應(yīng)細(xì)胞。T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)可有效殺傷、溶解具有免疫原性的腫瘤細(xì)胞;NK細(xì)胞是自然殺傷細(xì)胞，T細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞是判斷細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)。根據(jù)T細(xì)胞表面分化抗原可將成熟的T細(xì)胞分為CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞兩大亞群。CD4+T細(xì)胞為輔助性T細(xì)胞，具有協(xié)助體液免疫及細(xì)胞免疫的功能;而CD8+T細(xì)胞為細(xì)胞毒性T細(xì)胞，可抑制、殺傷腫瘤細(xì)胞等其他細(xì)胞〔5〕。

與其他消化道腫瘤相比，胃組織本身對(duì)放療具有一定的耐受性，導(dǎo)致胃癌對(duì)放療不敏感，因此限制了放療在胃癌中的應(yīng)用〔6〕。但是由于手術(shù)治療后約有60%的患者會(huì)發(fā)生局部或區(qū)域轉(zhuǎn)移，而隨著放射治療技術(shù)的進(jìn)步，放療不僅可以消滅上述手術(shù)后局部殘存病灶，而且可以同時(shí)消滅體內(nèi)的微小轉(zhuǎn)移病灶。大量臨床研究證實(shí)術(shù)后輔助放化療或輔助放療不僅能提高胃癌術(shù)后患者的局部控制率、減少區(qū)域復(fù)發(fā)，而且還能改善其遠(yuǎn)期生存率。目前胃癌術(shù)后同步放化療已成為胃癌術(shù)后的標(biāo)準(zhǔn)治療方案〔7〕。本研究結(jié)果提示放療時(shí)要注意患者的細(xì)胞免疫功能降低帶來(lái)的危害，應(yīng)該采用相應(yīng)措施增強(qiáng)免疫功能。

胃癌的病理學(xué)分型能夠指導(dǎo)臨床治療，特別是個(gè)性化的治療，同時(shí)幫助臨床醫(yī)生預(yù)測(cè)患者的預(yù)后情況。本研究結(jié)果顯示，放療之后不同病理類型的胃癌，患者機(jī)體免疫功能的變化并不一致。因此，臨床上放療之后應(yīng)該根據(jù)不同的病理類型實(shí)行相應(yīng)增強(qiáng)免疫功能的措施。

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