魚油對高脂誘導(dǎo)小鼠血脂增長的抑制作用

鐘曉敬 王秀珍 盛宏光 (湖州市中心醫(yī)院內(nèi)分泌科，浙江 湖州 33000)

高血脂、肥胖伴隨著一系列的健康問題，包括增加了糖尿病、胰島素抵抗、脂肪肝、動脈粥樣硬化的危險，還包括一些退行性疾病，如老年癡呆，呼吸系統(tǒng)疾病和腫瘤類疾病〔1〕。魚油中的多不飽和脂肪酸是細(xì)胞膜磷脂的重要成分，多不飽和脂肪酸具有調(diào)節(jié)血脂作用，魚油中的多不飽和脂肪酸通過抑制肝臟脂肪酶基因和糖脂解酶基因表達(dá)，進(jìn)而抑制肝臟脂肪的生成〔2〕。魚油中的多不飽和脂肪酸還能調(diào)節(jié)ATP-檸檬酸裂解酶基因的表達(dá)，影響能量代謝〔3〕。本實驗采用魚油抑制高脂誘導(dǎo)脂肪模型，效果較滿意。

1 材料與方法

1.1 動物及飼料 以8周齡大無特定病原體(SPF)級雄性小鼠野生型(WT)，雄性，體重19～21.4 g，購自上海斯萊克實驗動物公司，生產(chǎn)許可證號SCXK(滬)2004-0910;使用許可證號:SYXK(滬)2004-0013，并飼養(yǎng)在中國科學(xué)院上海生命科學(xué)院營養(yǎng)所動物實驗中心。普通飼料出上海生科院營養(yǎng)所動物實驗中心提供，高脂飼料購于Research Diets公司，貨號是D14292。高脂(高糖)飼料成分:其中含10%蔗糖，10%豬油，5%膽固醇由基礎(chǔ)鼠飼料加蔗糖、煉豬油和蛋黃按比搭配制作高脂高糖飼料:其比例為豬油18%，蔗糖20%，蛋黃3%，基礎(chǔ)飼料59%。

1.2 藥物和試劑 魚油購于美國安利公司A8914，主要成分為不飽和脂肪酸、EPA和DHA，多甲醛，中性樹脂等。

1.3 實驗儀器 MD-100型自動生化儀、恒溫水浴鍋、電子分析平、滴定架、萬能架等，顯微鏡OLYMPUS BX51，切片機(jī)，Leica RM2016展片機(jī)Leica HI1210。

1.4 實驗方法

1.4.1 實驗動物的準(zhǔn)備 選取健康雄性SPF級小鼠30只，體重19～21.4 g，按體重隨機(jī)分三組。基礎(chǔ)對照組:喂基礎(chǔ)飼料同時灌胃給予生理鹽水5 ml·kg-1·d-1。高脂組:喂高脂飼料同時灌胃給予生理鹽水5 ml·kg-1·d-1。魚油組:喂高脂飼料同時灌胃給予魚油5 ml·kg-1·d-1。每籠2只，自由飲水。

1.4.2 觀察指標(biāo) ①體重的增長率:從實驗開始到實驗結(jié)束對小鼠每3天測量一次體重并做記錄，體重增長率(%)=增加的體重/實驗前的體重(開始實驗第1天測得的體重)。②攝食量:分別記錄每周每日平均進(jìn)食量。③肝臟切片，各組小鼠的胰腺切片蘇木精伊紅(HE)染色，在顯微鏡下取拍照，脂肪含量:取新鮮肝組織0.5 g，用無水硫酸鈉研磨成粉，再放入索氏提取器中，用無水乙醚萃取肝臟中的脂肪。④血膽固醇(TC)，甘油三酯(TG)，清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)，谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和血肌酐(Scr)的測定:實驗結(jié)束時，引頸法處死小鼠，心臟取血，離心后收集上清液檢測TC，TG，ALT，AST和SCr的水平。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS15.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行方差分析q檢驗。

2 結(jié)果

2.1 各組小鼠平均進(jìn)食量比較 三組進(jìn)食量均無顯著性差異(P＞0.01)。見圖1。

2.2 肝臟HE染色 中央靜脈(CV)，門靜脈(PV)，魚油組脂肪明顯少于高脂組。

2.3 各組的平均體重增長率 實驗結(jié)束時魚油組和高脂組小鼠體重平均增長率顯著高于對照組(q=8.245，14.742，P均＜0.01)，而魚油組低于高脂組(q=11.768，P＜0.01)。見表 1。

2.4 各組肝腎脂肪含量及肝腎功能指標(biāo)的比較 魚油組肝臟脂肪含量較高脂組明顯降低(P＜0.05);魚油組TC、TG含量顯著低于高脂組(P均＜0.01)。見表1，表2。

圖1 各組小鼠1～14 w平均進(jìn)食量

圖2 各組小鼠的肝臟切片HE染色

表1 實驗結(jié)束時各組檢測指標(biāo)(s，n=10，%)

表1 實驗結(jié)束時各組檢測指標(biāo)(s，n=10，%)

與對照組比較:1)P＜0.01;與由于組比較:2)P＜0.01

組別 體重增長率 肝臟脂肪含量對照組 8.54±2.13 9.88±2.55高脂組 47.22±5.87 36.12±7.121)2)魚油組 32.68±3.78 22.4±5.371)

表2 各組肝腎實驗指標(biāo)比較(s，n=10)

表2 各組肝腎實驗指標(biāo)比較(s，n=10)

與對照組比較:1)P＜0.01;與魚油組比較:2)P＜0.01

對照組 23.38±2.99 101.67±12.45 63.58±5.97 2.52±0.34 0.89±0.27高脂組 24.04±2.89 106.88±12.95 65.49±5.12 7.33±0.551)2)3.89±0.141)2)魚油組 24.23±2.01 104.26±12.05 64.33±5.29 3.56±0.63 1.56±0.45

3 討論

肥胖不僅影響人們的工作和日常生活，而且同多種疾病的發(fā)病有關(guān)〔4〕。但迄今為止尚無理想的減肥方法，所以肥胖的發(fā)生機(jī)制成為研究的熱點〔5〕。從進(jìn)化的理論來看，動物在脂肪組織儲存多余高能TG的能力可以使動物度過經(jīng)常遇到的食物缺乏期，使生命得以延續(xù)?？梢姡逝质巧镞M(jìn)化的結(jié)果〔6〕。但是，在食物充足的當(dāng)今時代，過多的能量儲備易導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生。機(jī)體有一個復(fù)雜的生理系統(tǒng)來調(diào)節(jié)能量代謝，使之處在一個適當(dāng)?shù)乃奖３帜芰科胶狻?〕。肥胖，高血脂和脂肪肝之間也有重要的聯(lián)系，高脂血癥是代謝紊亂的標(biāo)志〔8〕，也是脂肪肝的主要誘因。魚油是深海魚類體內(nèi)不飽和脂肪的簡稱 ，富含不飽和脂酸EPA和DHA，EPA能顯著地降低總TG和極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)水平。DHA能引起HDL2-C/HDL3-C比值的顯著升高。魚油中的多不飽和脂肪酸通過抑制肝臟脂肪酶基因和糖脂解酶基因表達(dá)，進(jìn)而抑制肝臟脂肪的生成。魚油中的多不飽和脂肪酸能直接參加細(xì)胞核的活動、調(diào)控某些基因如肝脂肪酸合成酶(FAS)基因的轉(zhuǎn)錄〔2〕。

本實驗結(jié)果表明，魚油能抑制高脂組小鼠體重的增長，這可能與魚油組的減少脂肪含量有關(guān)。魚油能夠調(diào)節(jié)體內(nèi)紊亂的脂質(zhì)平衡，可能還具有防治對脈粥樣硬化，胰島素抵抗，脂肪肝等疾病的潛在作用。本實驗結(jié)果說明魚油對肝腎功能沒有明顯的影響，無明顯的不良反應(yīng)。

1 Semenkovich CF.Insulin resistance and atherosclerosis〔J〕.J Clin Invest，2006;116(7):1813-22.

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3 Fukuda H，Iritani N，Katsurada A，et al.Insulin and polyunsaturated fatty acid-responsive region(s)of rat ATP citrates lyase gene promoter〔J〕.FEBS Lett，1996;12:380(1-2):204-7.

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