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    化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢測乙肝表面抗原陽性患者不同乙肝模式乙肝前S1蛋白的臨床價值

    2014-12-03 03:28:10錢宏波周曉冬
    中國療養(yǎng)醫(yī)學(xué) 2014年7期
    關(guān)鍵詞:化學(xué)發(fā)光乙肝陽性率

    錢宏波 周曉冬

    (西安市第八醫(yī)院檢驗科,710061)

    我國是乙肝大國,屬于乙肝病毒(HBV)高流行區(qū),HBV傳染性強,在我國發(fā)病率高[1]。因此HBV實驗室檢測具有很重要的篩查和診斷意義,其實驗方法也逐漸增多[2]。HBV外膜蛋白由S蛋白、前S1(pre-S1)和前S2(pre-S2)組成,pre-S1是乙肝病毒外膜蛋白的重要組成部分,其所含的肝細胞膜受體對乙肝病毒感染肝細胞和機體的免疫應(yīng)答具有十分重要的作用,研究表明HBV pre-S1抗原陽性率與HBV-DNA陽性率一致,其能夠反映HBV在患者體內(nèi)的復(fù)制情況[3]。目前,臨床實驗室大多采用ELISA方法檢測pre-S1,隨著化學(xué)發(fā)光技術(shù)的日益成熟,利用化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢測pre-S1在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用[4]。本研究利用化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢測乙肝表面抗原(HBsAg)陽性患者不同乙肝模式乙肝pre-S1蛋白,旨在探討其臨床價值,為臨床提供參考。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選擇2013-02—2014-02在本院檢測HBsAg結(jié)果為陽性患者400例,患者來自門診和住院部。其中男230例,女170例;年齡17~81歲,平均(49.2±18.5)歲。本研究所有患者均獲得知情同意,并上報本院學(xué)術(shù)委員會批準備案。

    1.2 儀器與試劑 pre-S1和乙肝兩對半的定量檢測采用雅培ARCHITECT i2000化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析儀及其配套試劑,由美國雅培公司生產(chǎn);pre-S1所使用的試劑為上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供的乙型肝炎病毒pre-S1抗原檢測試劑盒[國食藥監(jiān)械(準)字2010第3400465號],儀器為鄭州安圖生物工程有限公司生產(chǎn)的Autobio LUMO型化學(xué)發(fā)光儀。

    1.3 試驗方法 不同乙肝模式的定量采用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析,嚴格按照試劑盒上的說明操作,結(jié)果的判斷為:≥0.05 IU/mL時,HBsAg陽性;≥10 mIU/mL時,HBsAb陽性;S/CO≥1時,HBeAg和HBcAb陽性;S/CO≤1時,HBeAb陽性。pre-S1的測定采用化學(xué)發(fā)光技術(shù),利用化學(xué)免疫分析儀測定每孔RLU值后計算S/CO值,S/CO≥1時判斷為陽性。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 本研究采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計和分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 乙肝模式分布 本研究中共有7種不同的乙肝模式。Ⅰ:HBsAg+HBeAg+HBcAb陽性;Ⅱ:HBsAg+HBeAg+HBeAb+HBcAb陽性;Ⅲ:HBsAg+HBsAb+HBeAg+HBcAb陽性;Ⅳ:HBsAg+HBsAb+HBeAg+HBeAb+HBcAb陽性;Ⅴ:HBsAg+HBeAb+HBcAb陽性;Ⅵ:HBsAg+HBsAb+HBeAb+HBcAb陽性;Ⅶ:HBsAg+HBcAb陽性。其分布及pre-S1陽性率(表1),可見HBV大三陽模式中pre-S1陽性率較高。

    2.2 HBsAg濃值與pre-S1的關(guān)系 將HBsAg按照濃度值分為5組,對濃度值在>250的標本使用雅培HBsAg Auto試劑自動稀釋500倍后重新檢測乙肝表面抗原,部分“大三陽”模式患者HBsAg濃度值升高到10 000以上,顯示當HBsAg濃度增加,HBV病毒載量的增加,前S1蛋白陽性率也增加。Ⅰ:HBsAg濃度值0.05~50;Ⅱ:HBsAg濃度值51~250;Ⅲ:HBsAg濃度值251~1 000;Ⅳ:HBsAg濃度值1 001~5 000;Ⅴ:HBsAg濃度值>5 000。比較5組pre-S1陽性率,結(jié)果(表2),HBsAg濃度值與pre-S1陽性率具有相關(guān)性,HBsAg濃度值越高,pre-S1陽性率越高。

    2.3 HBeAg陽性及陰性患者中pre-S1陽性率 HBeAg陽性及陰性患者中pre-S1陽性率比較χ2=54.55,P<0.01(表3)。

    表1 400例患者乙肝模式分布及pre-S1陽性率

    表2 不同HBsAg濃度值的pre-S1陽性率

    表3 HBeAg陽性及陰性患者中pre-S1陽性率比較

    3 討論

    化學(xué)發(fā)光技術(shù)是一種新興的非放射免疫分析方法,其原理為化學(xué)發(fā)光技術(shù)和抗原-抗體的特異性反應(yīng),具有靈敏度高、精密度高、廉價、快速等優(yōu)點,目前已經(jīng)在臨床上廣泛使用[5]。利用化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢出HBV pre-S1較ELISA法更加準確和敏感。

    HBV pre-S1是急性HBV早期感染的重要標志,在患者谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高達到峰值之前,pre-S1已經(jīng)達到了較高的水平,甚至在HBV核酸檢出前就可檢測到[6]。臨床上常常將pre-S1作為急性HBV預(yù)后判斷的重要指標,pre-S1轉(zhuǎn)陰越早,提示患者預(yù)后越好。有研究表明[7],亞病毒科里在HBV感染的過程中能夠增強細胞內(nèi)病毒的復(fù)制和其基因表達,而這被證明是pre-S蛋白反式激活觸發(fā)。除此之外,還有研究表明HBV包膜形成的過程需要HBsAg、pre-S1和pre-S2蛋白的參與[8]。

    HBV HBsAg的濃度值能反映出HBV病毒的滴度,本研究中HBsAg濃度值與pre-S1陽性率呈正相關(guān),在HBsAg濃度值<250時,pre-S1蛋白陽性率相對較低,而當HBsAg濃度值>250時,pre-S1陽性率顯著升高。本研究中,HBsAg濃度值<250時pre-S1呈陽性患者多為HBeAg陽性,這表明HBV HBsAg濃度值與病毒載量具有一定的相關(guān)性,反映出pre-S1與HBV在患者體內(nèi)的復(fù)制有關(guān)。

    本研究中,HBeAg陰性時,仍有較高的pre-S1陽性率(76.10%),這可能是由于HBV病毒仍然處于感染狀態(tài),但其基因發(fā)生了變異,不能檢出HBeAg,因此HBV發(fā)生變異時,只測定HBeAg來判斷HBV復(fù)制水平不能反映出真實情況,這可能與HBV逃避機體免疫攻擊有關(guān)。因此pre-S1與HBeAg相比能夠更加準確地反映出患者體內(nèi)HBV的復(fù)制情況。

    綜上所述,利用化學(xué)發(fā)光技術(shù)測定HBsAg陽性HBV患者血清pre-S1蛋白對HBV早期感染的診斷、預(yù)后判斷和檢測病毒復(fù)制情況具有重要的臨床意義,且廉價易在臨床推廣。

    [1]陳銀萍,吳愛萍,余亮科,等.組合模型對乙肝發(fā)病趨勢的預(yù)測研究[J].解放軍醫(yī)學(xué)雜志,2014,39(1):52-56.

    [2]楊笑瓊,何海洪,楊秀珠,等.ELISA法和MEIA法測定乙肝病毒血清標志物的比較研究[J].北方藥學(xué),2014,11(2):16-17.

    [3]董運啟.乙型肝炎病毒前S1蛋白檢測的臨床價值[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(S1):20-21.

    [4]顧春瑜,許瓊,趙喬妹,等.化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢測乙肝前S1蛋白的臨床價值[J].感染、炎癥、修復(fù),2013,14(2):107-109.

    [5]李璐,邢文革.化學(xué)發(fā)光技術(shù)在HCV和HIV檢測中的應(yīng)用[J].中國艾滋病性病,2011,17(3):382-284.

    [6]黃啟強,黃麗慶,周曉蘭,等.乙型肝炎病毒前S1抗原與傳統(tǒng)標志物相關(guān)性分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(11):1341-1343.

    [7]張和平,林國躍,王萍,等.HBV前S-2蛋白檢測與HBV-DNA和乙肝二對半模式相關(guān)性研究[J].醫(yī)學(xué)綜述,2011,17(1):139-140.

    [8]楊晉榮,楊棟梁.HBeAg陰性HBV感染者不同病毒載量與前S1抗原和大蛋白關(guān)系研究[J].臨床合理用藥雜志,2011,4(33):12-13.

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