睪酮對AMI大鼠病死率及心室重構的影響

張博雅，李永健，黨 群，金 喆

(天津市南開醫(yī)院，天津300100)

男性是冠心病的獨立危險因素之一，但迄今為止沒有證據顯示雄激素可以使冠心病的發(fā)病率增高。研究發(fā)現，男性性激素水平隨其衰老而降低，而睪酮水平越低冠心病發(fā)病率越高。最近，已有丙酸睪酮治療心衰的大規(guī)模臨床觀察研究，并顯示出良好的治療效果。2005年7月～2006年7月，我們在行去勢術的雄性SD大鼠急性心肌梗死(AMI)后6 h開始應用大、小劑量睪酮，觀察其對AMI病死率及心室重構的影響?，F報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組 雄性清潔SD大鼠85只，體質量250～350 g，購自中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心，飼養(yǎng)條件:常溫、普通飼料、自由飲水。隨機選取10只行睪丸切除假手術;其余75只均行睪丸切除術。所有去勢及假去勢大鼠均行冠脈結扎術。術后6 h大鼠正式分組并第1次給藥:其中睪丸切除假手術大鼠給予安慰劑，為假手術對照組;去勢術+冠脈結扎術大鼠隨機分為3組，其中一組給予安慰劑，為安慰劑對照組;一組給予睪酮肌注37.5 mg/kg，每周2次，為大劑量試驗組;一組給予睪酮肌注10 mg/kg，每周2次，為小劑量試驗組;共給藥6周。安慰劑為生理鹽水，肌注0.4 mL/kg，每周2次。觀察6周，記錄大鼠死亡例數。

1.2 大鼠生存情況觀察 清潔飼養(yǎng)各組冠脈結扎心梗術后的SD大鼠，6周后記錄各組存活大鼠及死亡大鼠數量，計算各組大鼠存活率。

1.3 大鼠心臟標本留取及左室游離壁梗死區(qū)厚度心肌橫斷面積(MCSA)的測量 開腹分離腹主動脈，在兩側髂總動脈分叉處，進針放血，同時于下腔靜脈放置滯留針，閉合下腔靜脈遠端，通過滯留針推注4℃的預冷PBS液約50 mL，直至動脈出血處血液顏色變淡。迅速開胸，打開心包，從主動脈根部離斷心臟，取出心臟，迅速放置于4℃ PBS液中洗凈殘血。沿冠狀動脈溝分離心房和心室組織，將心室組織放置于濾紙上1 min去除殘存水滴。稱量心室總重量，而后分離左、右心室，室間隔保留于左室，分別稱量二者重量。將左室放置于10%甲醛溶液中固定10～14 d，切片，進行HE染色。①左室游離壁梗死區(qū)厚度的測量:在40倍視野下，每張切片隨機選取5～6個完全包含梗死區(qū)游離壁自心內膜至心外膜的區(qū)域，應用Image Pro Plus4.5圖像分析軟件計算其平均厚度;②MCSA的測量:在彩色圖像下選取細胞核位于中心且較圓的細胞進行分析，以保證其測量的均一性［1，2］。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件。計量資料以±s表示，多組間均數比較采用One-way ANOVA的 LSD法，如方差不齊，用 Tamhane's T2法。計數資料比較用χ2檢驗。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 睪酮對AMI大鼠病死率的影響 4組行冠脈結扎心梗術大鼠共計85只，6周后存活42只，存活率為49.41%。其中，假手術對照組6周后存活6只，存活率為60.00%;安慰劑對照組33只，存活11只，存活率為33.33%;大劑量試驗組20只，存活13只，存活率為65.00%;小劑量試驗組22只，存活12只，存活率為54.55%。大劑量試驗組較安慰劑對照組存活率高(P＜0.05)。

2.2 睪酮對AMI大鼠心室重構的影響 左室心肌切片HE染色大體觀見圖1。梗死區(qū)室壁厚度、MCSA比較見表1。

圖1 各組大鼠左室心肌切片HE染色

表1 各組大鼠心肌梗死區(qū)室壁厚度及MCSA比較(±s)

表1 各組大鼠心肌梗死區(qū)室壁厚度及MCSA比較(±s)

注:與安慰劑對照組比較，*P＜0.05

組別 n 梗死區(qū)厚度(mm) MCSA(μm2)假手術對照組6 2.62 ±0.28 307.25 ±70.74安慰劑對照組 11 2.97 ±0.42 275.09 ±15.10大劑量試驗組 13 3.01 ±0.88 295.98 ±49.67小劑量試驗組 12 2.94 ±0.39 319.78 ±52.42*

3 討論

越來越多的證據顯示，雄激素與心血管疾病和衰老的關系密切。高TC、LDL、TG血癥是動脈粥樣硬化的獨立危險因素之一，而高HDL則具有保護作用。在臨床上常用LDL/HDL即動脈粥樣硬化指數進行冠心病一級預防的危險分層［3］。

關于睪酮對血脂影響的研究迄今為止已有很多，觀點比較一致，大部分橫斷面研究顯示:內源性睪酮與 HDL 呈正相關［4～6］，與 TC、TG、LDL 呈負相關［7，8］。近年研究結果顯示，去勢術對心梗大鼠血漿脂蛋白水平無顯著性影響。在大多數人群中，外源性睪酮治療會導致HDL減低［9］，但對于老年患者或性腺機能低下者，這種影響并不顯著。有研究顯示，其可能與此類患者多存在肥胖及胰島素抵抗有關。睪酮水平與肥胖呈負相關［10］，而肥胖與HDL水平也呈負相關，外源性睪酮治療可顯著減少內臟及皮下脂肪。一般來說，青年男性及運動員脂肪含量較低，且無胰島素抵抗，而老年人或性腺機能低下者脂肪含量高，并且多有不同程度的胰島素抵抗，所以減低了睪酮對HDL的抑制作用。這就可以解釋為什么睪酮對HDL的抑制作用在青年男性或運動員要比老年人或性腺機能低下者顯著的多。動物實驗［11］顯示，給予外源性雄激素可改善冠脈血流，增加心室縮短分數和心肌耗氧峰值，因而具有改善心功能的作用，而去勢則會導致心室射血分數和舒張功能降低。臨床研究［12］發(fā)現，冠心病患者補充雄激素可使其冠脈血流增加，運動耐量加強。臨床觀察資料顯示，AMI時所有男性患者血漿睪酮水平均顯著降低［13］，因此，AMI時補充睪酮治療，具有合理的病理生理依據。但是，迄今為止國內外關于雄激素治療AMI的動物實驗研究很少，國內尚未見報道，而且尚未見雄激素治療AMI的臨床研究報道。目前，已有2個研究組在動物實驗中嘗試應用雄激素治療AMI，但是他們的實驗結果幾乎對立。Nahrendorf等［14］在雄性大鼠去勢后給予十一酸睪酮替代治療，2周后行左前降支結扎，觀察十一酸睪酮對心室重構的影響，結果發(fā)現，大鼠左室重量顯著增加，心房鈉尿肽(ANP)mRNA無顯著變化，α/β-肌球蛋白重鏈(MHC)表達增加，心臟膠原含量無顯著改變。因此，Nahrendorf等認為，睪酮治療可直接作用于心肌細胞而引發(fā)一種類似“生理性”心肌肥厚，而并非由心臟負荷改變所致;并且，睪酮治療可有效降低左室舒張末期壓力(對心梗后心室重構沒有產生有害影響，甚至具有改善心功能的作用。而Cavasin等［15］在雄性小鼠去勢后給予睪酮替代治療6周，而后行左前降支結扎術。結果顯示，與對照組相比，睪酮治療組心室腔顯著擴大，心臟射血功能下降，心臟破裂發(fā)生率明顯增加。因而，Cavasin等認為，雄激素治療對心梗后心室重構是有害的。基于上述資料，因此，雄激素對AMI心室重構的影響目前尚無定論，其作用機制更不明確。

本研究結果顯示，雄性去勢大鼠AMI后，大劑量睪酮治療可降低AMI的致死率，對梗死區(qū)室壁厚度及MCSA無顯著影響;小劑量睪酮治療使MCSA增加，對梗死區(qū)室壁厚度無顯著影響。因此，睪酮對AMI心室重構影響具有劑量依賴性的特點。

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