紅花注射液對(duì)急性腦梗死患者神經(jīng)功能及血清IL-6、IL-10水平的影響＊

江晉渝，馬慶慶，宋 芳，楊小艷，羅 勇，2△

(1.貴州航天醫(yī)院，貴州遵義 563003;2.遵義市第一人民醫(yī)院，貴州遵義 563002)

急性腦梗死(Acute cerebral infarction，ACI)是常見(jiàn)的腦血管病，致死和致殘率均較高。紅花為菊科植物，是活血化瘀的傳統(tǒng)中藥，臨床廣泛用于治療缺血性心臟病、腦中風(fēng)、腦梗死等，研究表明紅花具有抗炎和提高耐氧能力的作用［1］。筆者應(yīng)用紅花注射液與常規(guī)治療對(duì)比的方法，比較ACI患者治療前后神經(jīng)功能缺損評(píng)分，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)IL-6、IL-10水平的變化，從而探討紅花注射液治療ACI患者的臨床療效及其可能的機(jī)制。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取臨床資料完整的急性腦梗死患者97例，按住院先后順序隨機(jī)分為紅花注射液組(紅花注射液+常規(guī)治療)和常規(guī)治療組(常規(guī)治療)。紅花注射液組45例，其中男22例，女23例，發(fā)病年齡54歲～77歲，平均年齡(65.4±9.1)歲;常規(guī)治療組52例，其中男24例，女28例，發(fā)病年齡50歲～79歲，平均年齡(65.2±10.5)歲。2組患者在性別、年齡、治療前IL-6和IL-10水平等方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2=1.108，P＞0.05)，具有可比性。所有納入患者病程均為急性期(2周以內(nèi))，符合全國(guó)第四屆腦血管學(xué)術(shù)會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］，并經(jīng)頭部CT或MRI證實(shí)，按腦卒中患者臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)［2］中的評(píng)分規(guī)則進(jìn)行評(píng)定。輕型(0～15分)，中型(16～30分)，重型(31～45分)。所有入選者均排除冠心病、心肌梗死、心房纖顫、肝腎功能不全、惡性腫瘤、自身免疫性疾病、急性或慢性感染性疾病，近6個(gè)月內(nèi)未使用糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑;另將同時(shí)期來(lái)我院健康體檢且性別、年齡上比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的志愿者30例作為健康對(duì)照組，均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 常規(guī)治療組根據(jù)病情給予抗血小板聚集(腸溶阿司匹林)、抗自由基損害(依達(dá)拉奉)、甘露醇(大面積腦梗死、梗死灶周圍水腫明顯具有顱內(nèi)高壓征者)、胞二膦膽堿等治療。紅花注射液組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上給予紅花注射液20 mL/d(5%葡萄糖注射液250 mL+紅花注射液20 mL滴注，四川雅安三九藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z51020673，批號(hào)100818)，連續(xù)使用14 d為1個(gè)療程。

1.2.2 標(biāo)本采集 抽取所有患者入院后24 h(治療前)及7、14、30 d(治療后)外周靜脈血各3 mL;并采集健康對(duì)照組外周靜脈血3 mL作為對(duì)照。4000 r/min離心5 min分離血清(離心半徑為13.5 cm)，所有入選標(biāo)本置－86℃超低溫冰柜保存待檢測(cè)。

1.2.3 細(xì)胞因子測(cè)定 促炎細(xì)胞因子(IL-6)和抗炎細(xì)胞因子(IL-10)檢測(cè)所用的酶標(biāo)儀為美國(guó)Thermo Scientific全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀，試劑購(gòu)自上海麥約爾生物技術(shù)有限公司，操作方法及結(jié)果判定嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。

1.2.4 神經(jīng)功能缺損評(píng)分 采用全國(guó)第四屆腦血管學(xué)術(shù)會(huì)議制定的臨床神經(jīng)功能評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)［2］，對(duì)2組患者在入院后24 h及治療后7、14、30 d進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，采用單因素方差分析。紅花注射液組與常規(guī)治療組組間比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，分別與健康對(duì)照組比較采用t檢驗(yàn)。變量相關(guān)性分析采用Spearman分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ACI患者臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分與血清IL-6和IL-10水平的關(guān)系

表1顯示，ACI患者(輕型、中型、重型)的血清IL-6和IL-10水平均明顯高于健康對(duì)照組(P＜0.05)，重型ACI患者的血清IL-6和IL-10水平高于中、輕型ACI患者(P＜0.05)，中型ACI患者的血清IL-6和IL-10水平高于輕型ACI患者(P＜0.05)。

表1 ACI患者不同臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分組血清IL-6和IL-10濃度比較

2.2 ACI患者臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分與血清IL-6、IL-10水平的相關(guān)性

圖1顯示，ACI患者臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分與血清 IL-6水平呈正相關(guān) (r=0.691，P=0.024);圖2顯示，ACI患者臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分與血清IL-10水平呈正相關(guān)(r=0.732，P=0.013);圖3顯示，ACI患者血清IL-6和IL-10水平呈正相關(guān) (r=0.556，P=0.032)。

2.3 經(jīng)治療后不同時(shí)間點(diǎn)2組患者血清細(xì)胞因子Il-6、IL-10水平濃度比較

表2顯示，入院后24 h 2組患者血清IL-6、IL-10水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);治療后7、14 d 2組患者血清IL-6、IL-10水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);治療后30 d 2組患者血清IL-6、IL-10水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2.4 2組患者經(jīng)治療后IL-6/IL-10值在發(fā)病后不同時(shí)間點(diǎn)的動(dòng)態(tài)變化

表2 不同時(shí)間點(diǎn)2組患者血清細(xì)胞因子Il-6、IL-10水平濃度比較(±s，pg/mL)

表2 不同時(shí)間點(diǎn)2組患者血清細(xì)胞因子Il-6、IL-10水平濃度比較(±s，pg/mL)

注:與常規(guī)治療組比較:*P＜0.05

時(shí)間點(diǎn) 血清IL-6水平血清IL-10水平常規(guī)治療組 紅花注射液組 常規(guī)治療組 紅花注射液組24 h 51.02±3.35 52.25±1.23 98.32±5.38 97.50±7.73 6.26 7 d 43.65±7.26 34.18±5.30* 84.56±6.91 72.44±7.49*14 d 29.06±7.34 24.86±1.42* 63.63±7.86 58.93±5.31*30 d 19.12±3.19 19.07±2.33 51.65±4.43 52.80±

圖4顯示，IL-6/IL-10的比值被認(rèn)為可客觀反映機(jī)體免疫應(yīng)答狀態(tài)和預(yù)示炎癥反應(yīng)發(fā)生發(fā)展的指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示:腦梗死患者早期IL-6/IL-10的比值偏高，提示機(jī)體免疫調(diào)節(jié)失控。經(jīng)治療后IL-6/IL-10比值的下降，提示機(jī)體抗炎反應(yīng)的增強(qiáng)，紅花注射液在控制腦梗死患者機(jī)體的炎癥反應(yīng)方面顯示較好的有效性。

圖1 臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分與血清IL-6的相關(guān)性

圖2 臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分與血清IL-10的相關(guān)性

圖3 血清IL-6和IL-10的相關(guān)性

圖4 2組患者經(jīng)治療后IL-6/IL-10的比值發(fā)病后不同時(shí)間點(diǎn)的動(dòng)態(tài)變化

2.5 經(jīng)治療后不同時(shí)間點(diǎn)2組患者神經(jīng)功能缺損評(píng)分程度比較

表3顯示，入院后24 h 2組患者神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);治療后7、14 d 2組患者神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);治療后30 d 2組患者神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表3 不同時(shí)間點(diǎn)2組患者神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分比較(±s)

表3 不同時(shí)間點(diǎn)2組患者神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分比較(±s)

注:與常規(guī)治療組比較:*P＜0.05

組 別 神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分24 h 7 d 14 d 30 d常規(guī)治療組 28.35±3.80 27.12±4.76 22.25±3.91 19.87±3.56紅花注射液組 28.63±4.05 21.90±3.26*19.75±3.79*15.66±4.53*

3 討論

近年來(lái)研究證實(shí)，局部和全身炎癥貫穿于動(dòng)脈粥樣硬化病變發(fā)生發(fā)展的全過(guò)程，并在一定程度上決定著粥樣斑塊的穩(wěn)定性和自然進(jìn)程，ACI發(fā)生后的氧化應(yīng)激和炎性反應(yīng)同為神經(jīng)元損傷的重要病理機(jī)制。

細(xì)胞因子作為重要的免疫遞質(zhì)，被認(rèn)為是ACI發(fā)病機(jī)制中的關(guān)鍵介質(zhì)。細(xì)胞因子按其功能可以分為促炎細(xì)胞因子(主要是 IL-6、TNF-α、IL-β、IFN-γ)和抗炎細(xì)胞因子(主要是 IL-10、TGF-β、IL-13)，以IL-6等細(xì)胞因子為代表的多種炎性介質(zhì)過(guò)度釋放而產(chǎn)生的“瀑布樣效應(yīng)”，能加重神經(jīng)細(xì)胞損傷［3～5］。本研究對(duì)97例急性腦梗死患者進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示不論是輕、中、重型ACI患者都檢測(cè)到較高水平的促炎細(xì)胞因子IL-6，均明顯高于健康對(duì)照組，并與臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分密切相關(guān)。高水平的IL-6能激活中性粒細(xì)胞和誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子表達(dá)，促進(jìn)血管炎性反應(yīng)，并可激活補(bǔ)體系統(tǒng)，通過(guò)促進(jìn)自由基釋放及增強(qiáng)興奮性氨基酸作用而引起神經(jīng)元死亡［6］。

目前普遍認(rèn)為，IL-10在許多炎癥性疾病中作為一種有效的抗炎物質(zhì)，可廣泛抑制活性單核巨噬細(xì)胞功能，有效抑制Th1、Th2細(xì)胞亞群產(chǎn)生TNF-α、IL-β等細(xì)胞因子，限制炎癥反應(yīng)。既往的研究證實(shí)，ACI發(fā)生后早期測(cè)得(24 h內(nèi))IL-10水平的表達(dá)與腦梗死面積、臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分呈正相關(guān)。腦梗死面積越大，IL-10水平越高;神經(jīng)功能缺損評(píng)分越高，IL-10水平越高;提示腦梗死急性期血清IL-10水平可預(yù)示梗死范圍及嚴(yán)重程度，本研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)外報(bào)道一致［7，8］。

促炎細(xì)胞因子與抗炎細(xì)胞因子之間的動(dòng)態(tài)平衡是維持機(jī)體正常免疫狀態(tài)、抗病、免疫自穩(wěn)的關(guān)鍵因素。本研究結(jié)果顯示，急性腦梗死患者初期(24h)促炎因子IL-6水平越高，反饋性引起抗炎因子IL-10的表達(dá)增高，二者相關(guān)性比較呈正相關(guān)。促炎-抗炎細(xì)胞因子平衡學(xué)說(shuō)認(rèn)為，在機(jī)體受到有害刺激時(shí)，機(jī)體釋放促炎細(xì)胞因子，同時(shí)抗炎系統(tǒng)也被啟動(dòng)，釋放抗炎細(xì)胞因子對(duì)炎癥反應(yīng)進(jìn)行牽制和下調(diào)。因此，尋找促炎、抗炎細(xì)胞因子之間的平衡點(diǎn)，則可為臨床治療開(kāi)辟一條新的治療途徑，從而減少腦梗死的嚴(yán)重性和致死率，這對(duì)腦梗死的治療有重要意義。

紅花注射液為近年廣泛應(yīng)用于臨床治療的中藥制劑，能夠抑制血小板聚集，增加纖維蛋白溶解，抗凝并改善血液流變學(xué)指標(biāo)，抗血栓形成，擴(kuò)張血管同，清除自由基，抑制脂質(zhì)氧化，有效改善腦組織缺血缺氧狀態(tài)。有研究表明，紅花注射液對(duì)腦缺血再灌注損傷具有積極的防治作用，對(duì)ACI患者神經(jīng)功能缺損可取得較好的臨床療效［9］。本研究應(yīng)用紅花注射液與常規(guī)治療比較方法，選擇4個(gè)時(shí)間點(diǎn)(24 h、7、14、30 d)對(duì) 97 例首次發(fā)病的 ACI患者進(jìn)行治療前后血清IL-6、IL-10的監(jiān)測(cè)。研究結(jié)果顯示，紅花注射液能顯著降低ACI患者血清IL-6、IL-10水平。表明紅花注射液可抑制腦梗死患者炎癥反應(yīng)，改善病灶缺血、水腫，抑制血栓形成，能較好地起到改善腦供血、促進(jìn)病灶神經(jīng)功能恢復(fù)的作用。從臨床神經(jīng)功能評(píng)分比較來(lái)看，經(jīng)紅花注射液聯(lián)合常規(guī)治療后臨床神經(jīng)功能評(píng)分顯著改善，治療效果優(yōu)于常規(guī)治療組，發(fā)揮了較好的神經(jīng)功能改善作用。

IL-6/IL-10的比值被認(rèn)為可客觀反映機(jī)體免疫應(yīng)答狀態(tài)和預(yù)示炎癥反應(yīng)發(fā)生發(fā)展的指標(biāo)。通過(guò)本研究發(fā)現(xiàn)，腦梗死患者早期IL-6/IL-10的比值偏高，提示機(jī)體免疫調(diào)節(jié)失控，抗炎細(xì)胞因子分泌不足難以抑制促炎細(xì)胞因子造成的瀑布效應(yīng)，從而導(dǎo)致各種炎癥過(guò)程。經(jīng)紅花注射液治療后IL-6/IL-10比值下降，提示機(jī)體抗炎反應(yīng)增強(qiáng)。

綜上所述，我們的研究結(jié)果表明，監(jiān)測(cè)血清IL-6、IL-10及IL-6/IL-10比值水平有助于判斷腦梗死的預(yù)后;紅花注射液及其聯(lián)合應(yīng)用有助于較快降低急性腦梗死患者血清IL-6、IL-10水平，從而減輕腦組織損傷，改善神經(jīng)功能，有利于腦梗死患者的轉(zhuǎn)歸。但紅花注射液的具體作用路徑和臨床效果尚有待進(jìn)一步研究。

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