老年糖尿病合并高血壓患者血清內(nèi)脂素與一氧化氮、一氧化氮合酶的關(guān)系

岳 偉，崔秋子，田 雪，王艷齡，劉立先，柴國(guó)祿

（1.佳木斯市骨科醫(yī)院內(nèi)科，黑龍江 佳木斯 154002；2.佳木斯大學(xué)第五臨床醫(yī)院內(nèi)分泌科，黑龍江 佳木斯 154002）

老年糖尿?。―M）合并高血壓（HT）的發(fā)病機(jī)理至今尚不十分清楚，本研究測(cè)定了合并HT 老年DM 患者和血壓正常老年DM 患者血清內(nèi)脂素（visfatin），一氧化氮（NO）、一氧化氮合（NOS）酶水平。探討它們?cè)诶夏闐M 合并HT 發(fā)病中的可能作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

老年2型DM 患者120例，均符合世界衛(wèi)生組織1999年糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)和2010年中國(guó)高血壓防治指南高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中合并HT組60例，男30例，女30例，年齡61～86歲，平均（67.91±9.67）歲。血壓正常組60例，男30例，女30例，年齡61～89歲，平均（68.57±9.94）歲。選擇鍵康老年人30例為正常對(duì)照組，男15例，女15例，年齡61～90歲，平均（68.98±9.13）歲。三組性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)無(wú)顯著差異。

1.2 方法

1.2.1 觀察指標(biāo)的測(cè)定

采用標(biāo)準(zhǔn)水銀柱式袖帶血壓計(jì)，清晨6：00平臥位測(cè)受試者右上臂血壓，連續(xù)3次，每次間隔5min取其平均值，計(jì)算平均動(dòng)脈壓（MAP）=舒張壓+1／3脈壓差。對(duì)照組、血壓正常老年DM組、合并HT老年DM組治療前后經(jīng)禁食12h，晨空腹采取肘靜脈血分離血清，置-70℃保存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定visfatin，藥盒由美國(guó)GBD公司提供。硝酸還原酶比色法測(cè)定NO、NOS，藥盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.2.2 給藥方法

合并HT 老年DM 患者抽取血標(biāo)本后給依那普利（Enaiapril上?，F(xiàn)代制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H31021938）10mg每日一次，早餐后服用，療程4周。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用spss17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差±s）表示，兩組間差異性測(cè)定采用t檢驗(yàn)，兩指標(biāo)間的相互關(guān)系采用Person直線相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 3組血清visfatin、NO、NOS測(cè)定

見(jiàn)表1。

表1 各組血清visfatin、NO、NOS水平比較（±s）

表1 各組血清visfatin、NO、NOS水平比較（±s）

＊與正常對(duì)照組比P＜0.01；△ 與血壓正常DM組比P＜0.01。

結(jié)果顯示，合并HT 老年DM組血清visfatin水平較血壓正常老年DM組明顯升高（P＜0.01），血清NO、NOS水平明顯降低（均P＜0.01）。

2.2 合并HT 老年DM 患者血清visfatin、NO、NOS、MAP間相互關(guān)系分析

合并HT 老年DM 患者血清visfatin與患者M(jìn)AP呈明顯正相關(guān)（r=0.613，P＜0.01），血清NO、NOS與患者M(jìn)AP均呈明顯負(fù)相關(guān)（r=-0.587，r=-0.641，均P＜0.01），患者血清visfatin水平與NO、NOS水平均呈明顯負(fù)相關(guān)（r=-0.628，r=-0.663，均P＜0.01）。

2.3 合并HT 老年DM 患者治療前后MAP、血清visfatin、NO、NOS水平變化

見(jiàn)表2。

表2 合并高血壓組治療前后血清MAP、visfatin、NO、NOS水平變化±s，n=60）

表2 合并高血壓組治療前后血清MAP、visfatin、NO、NOS水平變化±s，n=60）

＊與治療前比較P＜0.01。

3 討論

隨著我國(guó)人口的老齡化，老年DM 發(fā)病人數(shù)迅速增加，HT 是老年DM 患者導(dǎo)致心腦腎等器官慢性并發(fā)癥，引起患者生活質(zhì)量下降，甚至致死、致殘的主要原因。老年DM 合并HT 的病因病機(jī)是當(dāng)今內(nèi)分泌學(xué)界研究的熱點(diǎn)之一，但至今仍懸而未解。近年研究發(fā)現(xiàn)脂肪組織分泌的細(xì)胞因子visfatin在DM合并HT的發(fā)病中可能發(fā)揮作用［1，2］。visfa-tin是日本學(xué)者Fukuhara從小鼠和人內(nèi)臟脂肪組織中發(fā)現(xiàn)的由467個(gè)氨基酸組成的多肽類(lèi)蛋白質(zhì)激素。visfatin有類(lèi)胰島素樣作用，在脂代謝紊亂、胰島素抵抗等方面發(fā)揮重要作用。visfatin在促進(jìn)炎性因子表達(dá)和誘導(dǎo)血管生成等方面也發(fā)揮一定作用［3］。本研究發(fā)現(xiàn)合并HT 老年DM 患者血清visfatin水平較血壓正常者明顯升高。并且患者血清visfatin水平與患者M(jìn)AP 呈明顯正相關(guān)。合并HT 老年DM患者經(jīng)降壓藥物治療后隨著血壓恢復(fù)正常的同時(shí)患者血清visfatin水平也降至接近正常水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，血清visfatin水平升高可能通過(guò)某種機(jī)制引起老年DM 患者血壓升高。已有研究證明，胰島素抵抗（IR）可引起DM 患者血壓升高［4］。IR 引起血壓升高主要源于IR 繼發(fā)的高胰島素血癥（HIS）。其可能的機(jī)制是：（1）HIS可激活交感神經(jīng)系統(tǒng)活性，使去甲腎上腺素、腎上腺素分泌增多，使心排血量增加，周?chē)苁湛s，血壓升高。（2）HIS使Na+-K+交換，Na+-Ca2+交換和Na+-K+-ATP酶活化致細(xì)胞內(nèi)鈉增加，機(jī)體鈉潴留導(dǎo)致血容量及心輸出量增加促進(jìn)血壓升高。（3）HIS可降低Ca2+-ATP 酶活性，并通過(guò)細(xì)胞膜電壓依賴的鈣通道使Ca2+內(nèi)流增加，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高，血管收縮，周?chē)茏枇υ黾右鹧獕荷摺＃?）胰島素的結(jié)構(gòu)與類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子（IGF）有類(lèi)似之處，是一種很強(qiáng)的促細(xì)胞增殖因子，與IGF受體結(jié)合后可促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增生。HIS可刺激血管壁細(xì)胞增殖，使阻力血管管壁增厚變狹，造成血管阻力增加導(dǎo)致HT。IR 引起HT，老年DM 患者血清visfatin水平升高不僅通過(guò)激活前脂肪細(xì)胞、脂肪細(xì)胞膜上的胰島素受體，還通過(guò)促進(jìn)某些脂肪細(xì)胞分化關(guān)鍵因子如脂肪酸合成酶、甘油二酯?；D(zhuǎn)移酶、過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ等的過(guò)度表達(dá)促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)化合成為甘油三酯，并使其在前脂肪細(xì)胞、脂肪細(xì)胞合成聚集，引起IR［5］。同時(shí)visfatin可促進(jìn)前炎癥因子腫瘤壞死因-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）等mRNA 高度表達(dá)，促進(jìn)TNF-α、IL-6過(guò)度生成［6］。而TNF-α、IL-6可導(dǎo)致、加重IR［7］。visfatin通過(guò)引起IR 使老年DM 患者發(fā)生HT。同時(shí)visfatin有類(lèi)生長(zhǎng)因子樣作用，能激活細(xì)胞內(nèi)煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶活性，促使依賴煙酰胺腺嘌呤二核苷酸相關(guān)蛋白的脫乙?；罨?，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的成熟，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞從增殖表型向收縮表型轉(zhuǎn)化［8］。Visfatin促進(jìn)細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）、血管黏附分子-1（VCAM-1）、E-選擇素和IL-6、IL-8在血管內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)，增加白細(xì)胞黏附于動(dòng)脈血管內(nèi)皮［9］，并活化內(nèi)皮成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2、基質(zhì)金屬蛋白-2、基質(zhì)金屬蛋白-9、單核細(xì)胞趨化蛋白-1及其趨化因子受體-2 等血管生成因子，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣斑塊的形成［10］，外周動(dòng)脈血管的收縮和粥樣硬化，使外周血管阻力增加引起老年DM 患者發(fā)生HT。

NO 是人體內(nèi)最重要的內(nèi)源性舒張因子，NO 主要由NOS催化L-精氨酸和分子氧產(chǎn)生，NO 可松弛平滑肌，擴(kuò)張血管，調(diào)節(jié)周?chē)茏枇?。NO 可抑制血小板對(duì)血管內(nèi)皮的黏附，有強(qiáng)大的抑制血管平滑肌增殖和抗血栓形成作用［11］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)與血壓正常老年DM 患者相比合并HT 老年DM 患者血清NO、NOS水平明顯降低，血清NO、NOS水平與患者M(jìn)AP 呈明顯負(fù)相關(guān)。正常人體血管內(nèi)皮細(xì)胞合成的NO 通過(guò)彌散至血管平滑肌細(xì)胞，與細(xì)胞膜受體作用，激活鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶，促使三磷酸鳥(niǎo)苷（GTP）環(huán)化生成環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷（cGMP），cGMP 激活平滑肌細(xì)胞內(nèi)的cGMP 依賴性蛋白激酶，使細(xì)胞液內(nèi)Ca2+進(jìn)入肌漿網(wǎng)，細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度降低，血管平滑肌松弛。NO 對(duì)調(diào)節(jié)血管的基礎(chǔ)張力和維持基礎(chǔ)血壓的穩(wěn)定至關(guān)重要［11］。老年DM 患者NOS減少、活性降低，NO 合成減少，血液NO 濃度降低是老年DM 患者發(fā)生HT 的另一重要原因。

本研究還發(fā)現(xiàn)合并HT 老年DM 患者血清visfatin水平與患者NO、NOS水平呈明顯負(fù)相關(guān)。合并HT 老年DM 患者患者治療后伴隨患者血清NO、NOS 水平升高患者血清visfatin水平明顯降低。提示患者血清NO、NOS水平與血清visfatin水平改變間存在一定關(guān)系。人和嚙齒動(dòng)物的脂肪組織也可內(nèi)源性產(chǎn)生NO，并參與脂肪細(xì)胞的內(nèi)分泌功能調(diào)節(jié)［12］。有研究證明，NO 合成減少所致的組織和血管內(nèi)皮損傷可引起血漿visfatin合成釋放增多［13］，此點(diǎn)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中也得到進(jìn)一步證實(shí)。在進(jìn)行缺氧對(duì)小鼠脂肪組織visfatin mRNA 表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，缺氧和缺氧誘導(dǎo)因子1α的過(guò)度表達(dá)能增強(qiáng)visfatinmRNA 啟動(dòng)子的活性，通過(guò)上調(diào)脂防組織visfatinmRNA的表達(dá)促進(jìn)visfatin合成分泌［14］。NO 合成減少導(dǎo)致的組織缺血缺氧促進(jìn)visfatin合成分泌。因此老年DM 合并HT 患者血清visfatin水平升高與患者血清NOS減少、活性降低，NO 合成減少有關(guān)。還有研究證明，血清visfatin水平升高可抑制NOS活性，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生NO［15］。因此血清visfatin與NO 相互作用、相互影響共同參與了老年DM 合并HT 發(fā)病的病理生理過(guò)程。提高患者血清NO 水平，抑制visfatin合成、拮抗其生物活性可能成為老年DM 合并HT 治療的新靶點(diǎn)。

［1］姜榮艷，柴國(guó)祿.糖尿病合并高血壓患者血清內(nèi)脂素水平變化及腎素血管緊張素系統(tǒng)對(duì)其影響［J］.黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2010，33（6）：8-9

［2］林穎，柴國(guó)祿.妊娠高血壓綜合征患者血漿內(nèi)皮素、一氧化氮水平的變化［J］.黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2005，28（4）：34-35

［3］Esteghamati A，Alamdari A，Zandich A，et al.Visfatin is associated with type 2diabetes mellitus independent of insulin resistance and obesity［J］.Diabetes Res Clin Pract，2011，91（2）：154-158

［4］陳軍，柴國(guó)祿.糖尿病患者合并高血壓與胰島素抵抗及血漿腎上腺髓質(zhì)素素內(nèi)皮素變化的關(guān)系［J］.黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2006，29（1）：30-31

［5］HammarstedtA，PihlajannakiJ，Sopaasakis VS，et al.Visfatin is an adipokine but it is not regulated by Thiazolidinediones［J］.Clin Endocrinol Metab，2006，91（3）：1181-1184

［6］Moschen AR，Kaser A，Enrich B，et al.Visfatin an adipocytokine with proinflammatory and immunodulatiny proerties［J］.JImmunol，2007，178（3）：1748-1785

［7］Li L，Yang G，Shi S，et al.The adipose triglyceride lipace，adiponetin and visfatyn are down regulated by tumor necrosis factor-alpha（TNF-alpha）in vivo［J］.Cytokpne，2009，45（1）：12-19

［8］Kitani T，Okuno S，F(xiàn)ujisawa H.Growth phase-dependent changes in the subcellular localization of pre-B-cell colong-enhancing factor［J］.FEBS Lett，2003，544（3）：74-78

［9］Lee WJ，WuCS，LinH，et al.Visfatin-induced expression of inflammatory mediators in human endothelial cells through the NF-kappa B pathway［J］.Int J Obes，2009，33（4）：465-472

［10］Adyo R，Tan BR，Chen J，et al.Pre-B-cell colony enhancing factor（PBEF）／visfatin induces secretion of MCP-1in human endothelial cells：role in visfatin-induced angiogenesis［J］.Atherosclerosis，2009，205（1）：113-119

［11］Shimokawa H，Tsutsui M.Nitric oxide synthases in the pathogenesis of cardiovascular disease：lessons from genetically modified mice［J］.Flugers Arch，2010，459（6）：959-967

［12］Elizalde ResM，Ryden M，Haimelen V，et al.Expression of nitric oxid synthases in subcutance adipose tissue of nonbese and obesehumans［J］.JLipidRes，2000，41（8）：1244-1251

［13］Yilmaz ML，Saglam M，Carrero JJ，et al.Serum visfatin concentration and endothelial dysfunction in chronic kidney disease［J］.Nephrol Dial Transplant，2008，1（4）：1-7

［14］Segawa K，F(xiàn)ukuhara A，Hasogai N，et al.Visfatin in adipocytes is upregulated by hypoxia through HIFI alpha-dependent mechanism［J］.Biochem Biophhys Res Commun，2006，349（3）：875-882

［15］TakechayashiK，SuetsuguM，Wakabayashi S，et al.Association between plasma visfatin and vascular endothelial function in patients with tipe2diabetes mellitus［J］.Metabolism，2007，56（4）：451-458