癲癇患兒血清中S-100β蛋白變化的意義

吳 濤，羅序峰，張 勝，朱建萍，周 濤

(南方醫(yī)科大學(xué)附屬中山市博愛(ài)醫(yī)院兒科，中山 528400;*通訊作者，E-mail:1438821620@qq.com)

癲癇是小兒神經(jīng)系統(tǒng)的常見(jiàn)病，人群累積患病率為7%(2001)［1］。在癲癇人群患者中，50%以上在10歲以?xún)?nèi)起病。在新診斷的癲癇患者中，有20%的患者經(jīng)治療，其驚厥發(fā)作仍持續(xù)存在而成為難治性癲癇，嚴(yán)重影響小兒精神運(yùn)動(dòng)的發(fā)育［2］。而癲癇發(fā)作引起的腦部損傷早期通過(guò)影像學(xué)方法是不能觀察到的。因此如果能尋找一種可以反映這種變化的生化指標(biāo)，并且應(yīng)用于臨床，就可以及時(shí)檢測(cè)到腦損傷，指導(dǎo)臨床治療。本文觀察72例癲癇患兒血清中S-100β蛋白濃度的變化，發(fā)現(xiàn)血清中S-100β蛋白隨癲癇病情嚴(yán)重程度而變化，推測(cè)S-100β蛋白可能可以作為反映腦損傷的嚴(yán)重程度和觀察抗癲癇藥物療效的監(jiān)測(cè)指標(biāo)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2010－06～2012－12在我院兒科確診的癲癇患兒72例，其中新診斷癲癇組28例(全面性發(fā)作及部分性發(fā)作);難治性癲癇44例。新診斷癲癇28例患兒從收住院完善檢查，到確診癲癇并加用藥物治療所用時(shí)間11－30 d不等，平均為14.8 d。難治性癲癇44例(其中嬰兒痙攣22例，癲癇電持續(xù)狀態(tài)11例，不典型失神2例，Lennox－Gastaut綜合征1例，肌陣攣性癲癇3例，無(wú)法確定類(lèi)型的癲癇5例)，從首次確診癲癇并接受正規(guī)的抗癲癇藥物治療，到確診為難治性癲癇所用時(shí)間為4月－1.1年，平均為8.4月。全部病例均完善了頭顱MRI、視頻腦電圖、血串聯(lián)質(zhì)譜分析、尿氣相色譜分析、電解質(zhì)、肝腎功能、血?dú)?、血氨等檢查，排除了先天遺傳代謝性疾病、顱內(nèi)占位性疾病、腦出血、腦梗死及神經(jīng)系統(tǒng)器質(zhì)性疾病。診斷均符合癲癇及難治性癲癇的診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］。均采用口服抗癲癇藥物治療:新診斷癲癇組28例為單藥治療;難治性癲癇組均為3種藥物聯(lián)合治療。

72例癲癇患兒中，男性40例，女性32例;年齡最小4個(gè)月，最大8歲，中位年齡11個(gè)月。對(duì)照組31例均為同期我院兒童保健科健康體檢的患兒(采血前已經(jīng)與家長(zhǎng)簽署同意書(shū));年齡最小7個(gè)月，最大6.5歲，年齡中位數(shù)11.5月，與研究組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 試驗(yàn)方法

新診斷癲癇病例組(確診即采靜脈血)、難治性癲癇組(分別于確診及經(jīng)治療臨床緩解50%以上4周時(shí)采靜脈血)和對(duì)照組患兒均取靜脈血2 ml，于低溫離心機(jī)(4℃)2 000 r/min離心10 min，留取上清，置－20℃冰箱保存待檢。S-100β蛋白水平測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)雙抗體夾心法，試劑盒購(gòu)自CUSa Bio.Biotech公司(美國(guó))。檢測(cè)儀器為酶標(biāo)儀(DG3022型)。嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，對(duì)計(jì)量資料采用配對(duì)t檢驗(yàn)及單因素方差分析，對(duì)計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

三組治療前血清S-100β蛋白測(cè)定結(jié)果顯示，新診斷癲癇組及難治性癲癇組血清S-100β蛋白均明顯高于對(duì)照組，差異顯著(P＜0.01，見(jiàn)表1);難治性癲癇組血清S-100β蛋白明顯高于癲癇組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

表1 治療前新診斷癲癇組、難治性癲癇組與對(duì)照組血清S-100β蛋白測(cè)定結(jié)果Table 1 Comparison of serum level of S-100βprotein among three groups before treatment

難治性癲癇組治療前后血清S-100β測(cè)定結(jié)果顯示，治療后(癥狀緩解50%以上4周)血清S-100β蛋白較治療前明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［(19.62±8.07)μg/L vs(66.0± 13.6)μg/L，t=18.509，P＜0.01］。

3 討論

癲癇是一種常見(jiàn)的、慢性腦部疾病，其特點(diǎn)是由于大腦神經(jīng)元過(guò)度同步放電所致的突然、短暫的和反復(fù)性發(fā)作的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能失常。癲癇的整個(gè)神經(jīng)活動(dòng)過(guò)程中，神經(jīng)細(xì)胞膜、突觸功能以及興奮性和抑制性介質(zhì)起著極其重要的作用，常伴隨不同程度的腦組織損傷。有研究顯示［4］，癲癇發(fā)作造成腦組織損傷是一個(gè)慢性、復(fù)雜的過(guò)程，涉及腦微血管的改變，神經(jīng)元變性、壞死、凋亡，膠質(zhì)細(xì)胞增生，中樞神經(jīng)髓鞘的脫失等病理變化。

S-100蛋白是一種能與鈣、鋅結(jié)合的酸性蛋白家族。由α、β兩種亞基組成。S-100αα(主要存在于橫紋肌、心臟、腎臟)、S-100αβ(主要存在于膠質(zhì)細(xì)胞)、S-100ββ(主要存在于神經(jīng)膠質(zhì)及雪旺細(xì)胞)三種組合形式。中樞神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)的主要是S－100β，主要定位于星形膠質(zhì)細(xì)胞，少突膠質(zhì)細(xì)胞及周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)的Schwann細(xì)胞，是S-100蛋白的活性形式。S-100β蛋白基因位于人類(lèi)2l號(hào)染色體遠(yuǎn)端q22.2－q22.3處，編碼 91個(gè)氨基酸。S－100β是在腦內(nèi)主要和最具活性的成員，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、能量代謝和參與細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的作用，是膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元相互作用的橋梁。S-100β對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織具有高度特異性，生理濃度下發(fā)揮多種重要的生理功能;過(guò)量則誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、甚至壞死。S100β持續(xù)激活RAGE受體，破壞細(xì)胞內(nèi)的氧化還原反應(yīng)，增加了氧自由基的產(chǎn)生，引起線粒體功能的紊亂和細(xì)胞凋亡;過(guò)多的S-100β也可參與炎癥反應(yīng)加重腦損傷。中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損時(shí)，S-100β蛋白在腦脊液中的濃度可以反映中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損害的程度。同時(shí)S-100β蛋白可透過(guò)受損的血腦屏障進(jìn)入血液循環(huán)，所以通過(guò)檢測(cè)血清中S－100β蛋白濃度同樣可以反應(yīng)腦損害的程度。另一方面，S-100β蛋白作為一種鈣結(jié)合蛋白參與Ca2+介導(dǎo)的信號(hào)傳遞途徑，而Ca2+在癲癇的發(fā)病中具有重要的作用。有文獻(xiàn)［5］報(bào)道，卡因酸注射鼠細(xì)胞外S100β水平明顯增加，這一結(jié)果提示S－100β的釋放與癲癇發(fā)病有關(guān)。癲癇發(fā)作可引起S-100β蛋白的增加，而增加的S-100β可通過(guò)改變神經(jīng)元的電活動(dòng)而促使癲癇發(fā)作。綜上所述，S-100β蛋白可以作為評(píng)價(jià)及檢測(cè)腦組織損傷的特異性指標(biāo)［6］。

本文針對(duì)72例癲癇患兒及31例正常對(duì)照組兒童血清中S-100β蛋白濃度進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示:癲癇組及難治性癲癇組血清S-100β均明顯高于對(duì)照組，差異非常顯著(P＜0.01);難治性癲癇組較初診斷癲癇組血清S-100β蛋白水平明顯升高，差異顯著(P＜0.01);提示癲癇患兒血清S-100β蛋白水平明顯升高;其升高的程度與癲癇的嚴(yán)重程度相關(guān)。與相關(guān)報(bào)道一致［6］。

本文中44例難治性癲癇患兒治療后(癥狀緩解50%以上4周)血清S-100β蛋白水平明顯低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。此結(jié)論顯示，隨著癲癇患兒癥狀的緩解，血清S-100β蛋白水平明顯下降。提示血清S－100β蛋白可以作為癲癇療效判斷的指標(biāo)，與相關(guān)報(bào)道一致［7］。

綜上所述，血清S-100β蛋白濃度的變化，對(duì)于癲癇導(dǎo)致的腦損傷具有早期預(yù)警作用。其測(cè)定方便、可靠、實(shí)用，可幫助臨床提高癲癇的診斷、判斷預(yù)后、估計(jì)療效。

［1］胡亞美，江載芳，諸福棠.實(shí)用兒科學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2008:1850－1851.

［2］吳希如，林慶.小兒神經(jīng)系統(tǒng)疾病基礎(chǔ)與臨床［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2000:34.

［3］林慶.小兒癲癇發(fā)作的分類(lèi)及最新進(jìn)展［J］.中華兒科雜志，2002 ，40(5):313－315.

［4］Sutula TP，Hagen J，Pitkanen A.Do epileptic seizures damage the brain［J］.Curt Opin Neurol，2003，16(2):189－195.

［5］Sakatani S，Seto－Ohshima A，Shinohara Y，etal.Neura-activitydependent release of S-100βfrom astroeytes enhances kainite-induced gamma Oscilations in vivo［J］.J Neurosci，2008，28(43):10928－10936.

［6］杭妍，張暉.癲癇腦損傷早期標(biāo)志物的研究進(jìn)展［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2010，4(18):1190－1192.

［7］MeHo LE，Cavailheiro EA，Tan AM，etal.Circuit mechanisms of seizures in the pilocarpine model of chronic epilepsy:cell loss and mossy fiber sproufing［J］.Epilepsia，1993，34(6):985－995.

［8］馬歡，陳雪紅，王正江，等.癲癇發(fā)作間期腦血流灌注功能與腦組織損傷程度相關(guān)性研究［J］.中華核醫(yī)學(xué)雜志，2011，31(1):58－60.