發(fā)酵床與傳統(tǒng)水沖圈模式下豬瘟、藍耳病及口蹄疫血清抗體差異調(diào)查

摘要：為了比較發(fā)酵床模式和傳統(tǒng)水沖圈模式下生豬的豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫血清抗體的差異，于2012年11月以及2013年5月在江蘇省阜寧縣22個鎮(zhèn)（區(qū)）分別采集生豬血樣1 313份（發(fā)酵床602份）和1 235（發(fā)酵床563份）共計2 548份，用ELISA法檢測血清中豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫抗體陽性率。結(jié)果顯示：2012年11月和2013年5月發(fā)酵床模式下豬瘟血清抗體陽性率分別為97.7%、97.9%，略高于水沖圈的95.4%、96.0%；豬藍耳病病毒血清抗體陽性率分別為65.3%、75.2%，高于水沖圈的50.2%、70.4%；口蹄疫血清抗體陽性率分別為95.2%、96.8%，與水沖圈的94.1%、99.1%基本持平。

關(guān)鍵詞：發(fā)酵床；水沖圈；豬瘟；豬藍耳??；口蹄疫；抗體檢測；ELISA

中圖分類號： S858.28文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2014）09-0178-02

收稿日期：2013-12-04

基金項目：江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號：CX（12）1001-05]。

作者簡介：華利忠（1982—），男，江蘇無錫人，博士，助理研究員，從事獸醫(yī)傳染病及獸醫(yī)病理學研究。E-mail：steven828@126.com。

通信作者：邵國青，男，江蘇鹽城人，博士，研究員，主要從事獸醫(yī)傳染病學研究。E-mail：gqshaojaas@gmail.com。發(fā)酵床養(yǎng)豬法是近幾年從日本、韓國引入的新型養(yǎng)豬方法[1]，是一種使用微生物墊料（鋸末、稻殼、花生殼等含粗纖維高的物質(zhì)中的2種或多種混合物，再加上復合微生物菌種）來養(yǎng)豬的方式[2]。有研究表明，與傳統(tǒng)養(yǎng)豬模式相比，發(fā)酵床養(yǎng)豬可大大降低碳排放量和養(yǎng)殖成本，提高豬肉品質(zhì)和養(yǎng)豬效益[3-4]，可是在疾病防控方面還有一些爭論。一些研究表明，微生態(tài)發(fā)酵床內(nèi)含有多類致病性細菌，對豬的健康具有潛在威脅，說明微生態(tài)發(fā)酵床養(yǎng)豬模式存在較大的安全隱患[5]；也有一些研究得出相反的結(jié)論，認為生物發(fā)酵床改善了豬舍環(huán)境，增強了豬的體況，提高了免疫效果，保障了豬群的健康[6-7]。目前，疫苗免疫是生豬疾病防控的主要措施之一，然而發(fā)酵床模式對生豬常規(guī)疫苗的免疫效率有何影響還沒有研究；因此，本研究對江蘇省阜寧縣發(fā)酵床與傳統(tǒng)水沖圈模式下豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫疫苗免疫后的血清抗體進行調(diào)查，探討發(fā)酵床模式對豬常規(guī)疫苗免疫效率的影響。

1材料與方法

1.1主要試劑

豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒和豬藍耳病病毒ELISA抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司；豬口蹄疫病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗診斷試劑盒購自上海優(yōu)耐特生物醫(yī)藥有限公司。

1.2主要儀器

Denley Dragon Wellscan MK 3酶標儀（Ascent software for Multiskan分析軟件，Thermo，芬蘭），PYX-DHS數(shù)字顯示隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海躍進醫(yī)療器械廠），微量反應(yīng)板及封條（上海躍進醫(yī)療器械廠），TGL-168離心機（上海安亭科學儀器廠），10～1 000 μL移液槍及300 μL排槍（艾本德中國有限公司）。

1.3樣本來源

分別于2012年11月和2013年5月采集江蘇省阜寧縣發(fā)酵床和傳統(tǒng)水沖圈的生豬（50～75 kg/頭）血樣共2 548份，進行豬瘟、豬藍耳病及豬口蹄疫血清抗體檢測。其中，發(fā)酵床樣品1 165份，水沖圈樣品1 383份，樣品情況詳見表1。

1.4全血采集后的處理

每次抽血后傾斜45°于室溫下放置30 min，立即放入有冰塊的疫苗運輸箱內(nèi)，帶回江蘇省阜寧縣畜牧獸醫(yī)站，將血清倒入2 mL EP管中，5 000 r/min離心10 min，吸取上清移入另一干凈的2 mL EP管中，做好標記，-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5血清抗體的檢測

每批次樣品全部采集完后，嚴格按相應(yīng)試劑盒的操作說明進行豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫的血清抗體ELISA檢測。

2結(jié)果與分析

由表2可知，發(fā)酵床模式下的豬藍耳病抗體陽性率無論是2012年11月的65.3%，還是2013年5月的76.2%，均比同批次傳統(tǒng)水沖圈模式下的高。豬瘟陽性率發(fā)酵床模式略高于傳統(tǒng)水沖圈，口蹄疫抗體陽性率基本一致。同時還發(fā)現(xiàn)，2013年5月的抗體陽性率普遍比2012年11月高，但藍耳病血清抗體陽性率普遍偏低，沒有達到農(nóng)業(yè)部的免疫標準。

3結(jié)論與討論

發(fā)酵床養(yǎng)豬是依托日本、韓國自然養(yǎng)殖經(jīng)驗，并根據(jù)國內(nèi)實際情況不斷創(chuàng)新完善提出的一種環(huán)保、安全、有效的生態(tài)養(yǎng)豬法[8]。

然而，目前養(yǎng)豬界對發(fā)酵床在疫病防控方面仍然褒貶不一。一些研究認為，發(fā)酵床可以通過避免沖洗豬舍、豬糞和尿零排放、無臭味、無公害、環(huán)保等因素提高豬的免疫力和生產(chǎn)性能[11]。王誠等發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵床模式能提高血清IgA、IgG含量以提高機體免疫力[12]；王志強等研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵床豬舍能有效提高舍內(nèi)環(huán)境溫度和地面溫度，并能顯著降低豬舍的NH3含量，在寒冷季節(jié)通風條件差時能有效控制豬舍的氨氣排放，有利于保持豬舍小環(huán)境空氣質(zhì)量和減少仔豬發(fā)病[13]。還有一些研究認為，發(fā)酵床容易引起霉菌毒素中毒、寄生蟲病滋生[14-15]以及因木屑、米糠等粉狀物引起的呼吸道疾病[16]。

豬瘟、藍耳病和豬口蹄疫是生豬養(yǎng)殖常見的疫病[17-18]，也是國家強制免疫的3種豬主要疫病，目前主要靠疫苗免疫防控，所以進行豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫疫苗免疫后血清抗體的監(jiān)測和分析，對防控這3種疫病具有重要的指導意義。而發(fā)酵床模式對生豬疫苗免疫效率的影響目前還未見報道，本研究通過對阜寧縣發(fā)酵床養(yǎng)豬模式和傳統(tǒng)水沖圈生豬豬瘟、藍耳病和豬口蹄疫疫苗免疫后血清抗體的監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵床模式下豬藍耳病抗體陽性率、豬瘟陽性率比傳統(tǒng)水沖圈高，口蹄疫抗體陽性率基本一致。同時還發(fā)現(xiàn)，對于免疫效率較差的藍耳病疫苗，發(fā)酵床養(yǎng)豬有顯著促進疫苗免疫保護率的作用；而對于疫苗保護率較好的豬瘟疫苗和口蹄疫疫苗，發(fā)酵表22012年11月和2013年5月水沖圈和發(fā)酵床模式下生豬血清抗體檢測果endprint

摘要：為了比較發(fā)酵床模式和傳統(tǒng)水沖圈模式下生豬的豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫血清抗體的差異，于2012年11月以及2013年5月在江蘇省阜寧縣22個鎮(zhèn)（區(qū)）分別采集生豬血樣1 313份（發(fā)酵床602份）和1 235（發(fā)酵床563份）共計2 548份，用ELISA法檢測血清中豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫抗體陽性率。結(jié)果顯示：2012年11月和2013年5月發(fā)酵床模式下豬瘟血清抗體陽性率分別為97.7%、97.9%，略高于水沖圈的95.4%、96.0%；豬藍耳病病毒血清抗體陽性率分別為65.3%、75.2%，高于水沖圈的50.2%、70.4%；口蹄疫血清抗體陽性率分別為95.2%、96.8%，與水沖圈的94.1%、99.1%基本持平。

關(guān)鍵詞：發(fā)酵床；水沖圈；豬瘟；豬藍耳??；口蹄疫；抗體檢測；ELISA

中圖分類號： S858.28文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2014）09-0178-02

收稿日期：2013-12-04

基金項目：江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號：CX（12）1001-05]。

作者簡介：華利忠（1982—），男，江蘇無錫人，博士，助理研究員，從事獸醫(yī)傳染病及獸醫(yī)病理學研究。E-mail：steven828@126.com。

通信作者：邵國青，男，江蘇鹽城人，博士，研究員，主要從事獸醫(yī)傳染病學研究。E-mail：gqshaojaas@gmail.com。發(fā)酵床養(yǎng)豬法是近幾年從日本、韓國引入的新型養(yǎng)豬方法[1]，是一種使用微生物墊料（鋸末、稻殼、花生殼等含粗纖維高的物質(zhì)中的2種或多種混合物，再加上復合微生物菌種）來養(yǎng)豬的方式[2]。有研究表明，與傳統(tǒng)養(yǎng)豬模式相比，發(fā)酵床養(yǎng)豬可大大降低碳排放量和養(yǎng)殖成本，提高豬肉品質(zhì)和養(yǎng)豬效益[3-4]，可是在疾病防控方面還有一些爭論。一些研究表明，微生態(tài)發(fā)酵床內(nèi)含有多類致病性細菌，對豬的健康具有潛在威脅，說明微生態(tài)發(fā)酵床養(yǎng)豬模式存在較大的安全隱患[5]；也有一些研究得出相反的結(jié)論，認為生物發(fā)酵床改善了豬舍環(huán)境，增強了豬的體況，提高了免疫效果，保障了豬群的健康[6-7]。目前，疫苗免疫是生豬疾病防控的主要措施之一，然而發(fā)酵床模式對生豬常規(guī)疫苗的免疫效率有何影響還沒有研究；因此，本研究對江蘇省阜寧縣發(fā)酵床與傳統(tǒng)水沖圈模式下豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫疫苗免疫后的血清抗體進行調(diào)查，探討發(fā)酵床模式對豬常規(guī)疫苗免疫效率的影響。

1材料與方法

1.1主要試劑

豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒和豬藍耳病病毒ELISA抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司；豬口蹄疫病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗診斷試劑盒購自上海優(yōu)耐特生物醫(yī)藥有限公司。

1.2主要儀器

Denley Dragon Wellscan MK 3酶標儀（Ascent software for Multiskan分析軟件，Thermo，芬蘭），PYX-DHS數(shù)字顯示隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海躍進醫(yī)療器械廠），微量反應(yīng)板及封條（上海躍進醫(yī)療器械廠），TGL-168離心機（上海安亭科學儀器廠），10～1 000 μL移液槍及300 μL排槍（艾本德中國有限公司）。

1.3樣本來源

分別于2012年11月和2013年5月采集江蘇省阜寧縣發(fā)酵床和傳統(tǒng)水沖圈的生豬（50～75 kg/頭）血樣共2 548份，進行豬瘟、豬藍耳病及豬口蹄疫血清抗體檢測。其中，發(fā)酵床樣品1 165份，水沖圈樣品1 383份，樣品情況詳見表1。

1.4全血采集后的處理

每次抽血后傾斜45°于室溫下放置30 min，立即放入有冰塊的疫苗運輸箱內(nèi)，帶回江蘇省阜寧縣畜牧獸醫(yī)站，將血清倒入2 mL EP管中，5 000 r/min離心10 min，吸取上清移入另一干凈的2 mL EP管中，做好標記，-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5血清抗體的檢測

每批次樣品全部采集完后，嚴格按相應(yīng)試劑盒的操作說明進行豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫的血清抗體ELISA檢測。

2結(jié)果與分析

由表2可知，發(fā)酵床模式下的豬藍耳病抗體陽性率無論是2012年11月的65.3%，還是2013年5月的76.2%，均比同批次傳統(tǒng)水沖圈模式下的高。豬瘟陽性率發(fā)酵床模式略高于傳統(tǒng)水沖圈，口蹄疫抗體陽性率基本一致。同時還發(fā)現(xiàn)，2013年5月的抗體陽性率普遍比2012年11月高，但藍耳病血清抗體陽性率普遍偏低，沒有達到農(nóng)業(yè)部的免疫標準。

3結(jié)論與討論

發(fā)酵床養(yǎng)豬是依托日本、韓國自然養(yǎng)殖經(jīng)驗，并根據(jù)國內(nèi)實際情況不斷創(chuàng)新完善提出的一種環(huán)保、安全、有效的生態(tài)養(yǎng)豬法[8]。

然而，目前養(yǎng)豬界對發(fā)酵床在疫病防控方面仍然褒貶不一。一些研究認為，發(fā)酵床可以通過避免沖洗豬舍、豬糞和尿零排放、無臭味、無公害、環(huán)保等因素提高豬的免疫力和生產(chǎn)性能[11]。王誠等發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵床模式能提高血清IgA、IgG含量以提高機體免疫力[12]；王志強等研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵床豬舍能有效提高舍內(nèi)環(huán)境溫度和地面溫度，并能顯著降低豬舍的NH3含量，在寒冷季節(jié)通風條件差時能有效控制豬舍的氨氣排放，有利于保持豬舍小環(huán)境空氣質(zhì)量和減少仔豬發(fā)病[13]。還有一些研究認為，發(fā)酵床容易引起霉菌毒素中毒、寄生蟲病滋生[14-15]以及因木屑、米糠等粉狀物引起的呼吸道疾病[16]。

豬瘟、藍耳病和豬口蹄疫是生豬養(yǎng)殖常見的疫病[17-18]，也是國家強制免疫的3種豬主要疫病，目前主要靠疫苗免疫防控，所以進行豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫疫苗免疫后血清抗體的監(jiān)測和分析，對防控這3種疫病具有重要的指導意義。而發(fā)酵床模式對生豬疫苗免疫效率的影響目前還未見報道，本研究通過對阜寧縣發(fā)酵床養(yǎng)豬模式和傳統(tǒng)水沖圈生豬豬瘟、藍耳病和豬口蹄疫疫苗免疫后血清抗體的監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵床模式下豬藍耳病抗體陽性率、豬瘟陽性率比傳統(tǒng)水沖圈高，口蹄疫抗體陽性率基本一致。同時還發(fā)現(xiàn)，對于免疫效率較差的藍耳病疫苗，發(fā)酵床養(yǎng)豬有顯著促進疫苗免疫保護率的作用；而對于疫苗保護率較好的豬瘟疫苗和口蹄疫疫苗，發(fā)酵表22012年11月和2013年5月水沖圈和發(fā)酵床模式下生豬血清抗體檢測果endprint

摘要：為了比較發(fā)酵床模式和傳統(tǒng)水沖圈模式下生豬的豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫血清抗體的差異，于2012年11月以及2013年5月在江蘇省阜寧縣22個鎮(zhèn)（區(qū)）分別采集生豬血樣1 313份（發(fā)酵床602份）和1 235（發(fā)酵床563份）共計2 548份，用ELISA法檢測血清中豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫抗體陽性率。結(jié)果顯示：2012年11月和2013年5月發(fā)酵床模式下豬瘟血清抗體陽性率分別為97.7%、97.9%，略高于水沖圈的95.4%、96.0%；豬藍耳病病毒血清抗體陽性率分別為65.3%、75.2%，高于水沖圈的50.2%、70.4%；口蹄疫血清抗體陽性率分別為95.2%、96.8%，與水沖圈的94.1%、99.1%基本持平。

關(guān)鍵詞：發(fā)酵床；水沖圈；豬瘟；豬藍耳??；口蹄疫；抗體檢測；ELISA

中圖分類號： S858.28文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2014）09-0178-02

收稿日期：2013-12-04

基金項目：江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號：CX（12）1001-05]。

作者簡介：華利忠（1982—），男，江蘇無錫人，博士，助理研究員，從事獸醫(yī)傳染病及獸醫(yī)病理學研究。E-mail：steven828@126.com。

通信作者：邵國青，男，江蘇鹽城人，博士，研究員，主要從事獸醫(yī)傳染病學研究。E-mail：gqshaojaas@gmail.com。發(fā)酵床養(yǎng)豬法是近幾年從日本、韓國引入的新型養(yǎng)豬方法[1]，是一種使用微生物墊料（鋸末、稻殼、花生殼等含粗纖維高的物質(zhì)中的2種或多種混合物，再加上復合微生物菌種）來養(yǎng)豬的方式[2]。有研究表明，與傳統(tǒng)養(yǎng)豬模式相比，發(fā)酵床養(yǎng)豬可大大降低碳排放量和養(yǎng)殖成本，提高豬肉品質(zhì)和養(yǎng)豬效益[3-4]，可是在疾病防控方面還有一些爭論。一些研究表明，微生態(tài)發(fā)酵床內(nèi)含有多類致病性細菌，對豬的健康具有潛在威脅，說明微生態(tài)發(fā)酵床養(yǎng)豬模式存在較大的安全隱患[5]；也有一些研究得出相反的結(jié)論，認為生物發(fā)酵床改善了豬舍環(huán)境，增強了豬的體況，提高了免疫效果，保障了豬群的健康[6-7]。目前，疫苗免疫是生豬疾病防控的主要措施之一，然而發(fā)酵床模式對生豬常規(guī)疫苗的免疫效率有何影響還沒有研究；因此，本研究對江蘇省阜寧縣發(fā)酵床與傳統(tǒng)水沖圈模式下豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫疫苗免疫后的血清抗體進行調(diào)查，探討發(fā)酵床模式對豬常規(guī)疫苗免疫效率的影響。

1材料與方法

1.1主要試劑

豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒和豬藍耳病病毒ELISA抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司；豬口蹄疫病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗診斷試劑盒購自上海優(yōu)耐特生物醫(yī)藥有限公司。

1.2主要儀器

Denley Dragon Wellscan MK 3酶標儀（Ascent software for Multiskan分析軟件，Thermo，芬蘭），PYX-DHS數(shù)字顯示隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海躍進醫(yī)療器械廠），微量反應(yīng)板及封條（上海躍進醫(yī)療器械廠），TGL-168離心機（上海安亭科學儀器廠），10～1 000 μL移液槍及300 μL排槍（艾本德中國有限公司）。

1.3樣本來源

分別于2012年11月和2013年5月采集江蘇省阜寧縣發(fā)酵床和傳統(tǒng)水沖圈的生豬（50～75 kg/頭）血樣共2 548份，進行豬瘟、豬藍耳病及豬口蹄疫血清抗體檢測。其中，發(fā)酵床樣品1 165份，水沖圈樣品1 383份，樣品情況詳見表1。

1.4全血采集后的處理

每次抽血后傾斜45°于室溫下放置30 min，立即放入有冰塊的疫苗運輸箱內(nèi)，帶回江蘇省阜寧縣畜牧獸醫(yī)站，將血清倒入2 mL EP管中，5 000 r/min離心10 min，吸取上清移入另一干凈的2 mL EP管中，做好標記，-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5血清抗體的檢測

每批次樣品全部采集完后，嚴格按相應(yīng)試劑盒的操作說明進行豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫的血清抗體ELISA檢測。

2結(jié)果與分析

由表2可知，發(fā)酵床模式下的豬藍耳病抗體陽性率無論是2012年11月的65.3%，還是2013年5月的76.2%，均比同批次傳統(tǒng)水沖圈模式下的高。豬瘟陽性率發(fā)酵床模式略高于傳統(tǒng)水沖圈，口蹄疫抗體陽性率基本一致。同時還發(fā)現(xiàn)，2013年5月的抗體陽性率普遍比2012年11月高，但藍耳病血清抗體陽性率普遍偏低，沒有達到農(nóng)業(yè)部的免疫標準。

3結(jié)論與討論

發(fā)酵床養(yǎng)豬是依托日本、韓國自然養(yǎng)殖經(jīng)驗，并根據(jù)國內(nèi)實際情況不斷創(chuàng)新完善提出的一種環(huán)保、安全、有效的生態(tài)養(yǎng)豬法[8]。

然而，目前養(yǎng)豬界對發(fā)酵床在疫病防控方面仍然褒貶不一。一些研究認為，發(fā)酵床可以通過避免沖洗豬舍、豬糞和尿零排放、無臭味、無公害、環(huán)保等因素提高豬的免疫力和生產(chǎn)性能[11]。王誠等發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵床模式能提高血清IgA、IgG含量以提高機體免疫力[12]；王志強等研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵床豬舍能有效提高舍內(nèi)環(huán)境溫度和地面溫度，并能顯著降低豬舍的NH3含量，在寒冷季節(jié)通風條件差時能有效控制豬舍的氨氣排放，有利于保持豬舍小環(huán)境空氣質(zhì)量和減少仔豬發(fā)病[13]。還有一些研究認為，發(fā)酵床容易引起霉菌毒素中毒、寄生蟲病滋生[14-15]以及因木屑、米糠等粉狀物引起的呼吸道疾病[16]。

豬瘟、藍耳病和豬口蹄疫是生豬養(yǎng)殖常見的疫病[17-18]，也是國家強制免疫的3種豬主要疫病，目前主要靠疫苗免疫防控，所以進行豬瘟、豬藍耳病和豬口蹄疫疫苗免疫后血清抗體的監(jiān)測和分析，對防控這3種疫病具有重要的指導意義。而發(fā)酵床模式對生豬疫苗免疫效率的影響目前還未見報道，本研究通過對阜寧縣發(fā)酵床養(yǎng)豬模式和傳統(tǒng)水沖圈生豬豬瘟、藍耳病和豬口蹄疫疫苗免疫后血清抗體的監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵床模式下豬藍耳病抗體陽性率、豬瘟陽性率比傳統(tǒng)水沖圈高，口蹄疫抗體陽性率基本一致。同時還發(fā)現(xiàn)，對于免疫效率較差的藍耳病疫苗，發(fā)酵床養(yǎng)豬有顯著促進疫苗免疫保護率的作用；而對于疫苗保護率較好的豬瘟疫苗和口蹄疫疫苗，發(fā)酵表22012年11月和2013年5月水沖圈和發(fā)酵床模式下生豬血清抗體檢測果endprint