椎動脈型頸椎病動物模型的病理學(xué)研究

郭建闊 李衛(wèi)華 李繼鋒 王曉

[摘要] 目的 建立一種椎動脈型頸椎病動物模型，探索椎動脈型頸椎病的病因和發(fā)病機(jī)制。 方法 采用切除兔頸背部淺、深兩層肌肉的方法建立動物模型。120 d后制作病理切片檢測椎動脈。結(jié)果 椎動脈管腔變窄，內(nèi)膜增生，管壁明顯增厚。 結(jié)論采用破壞兔頸部動力平衡的方法可以成功制作椎動脈型頸椎病動物模型。模型中椎動脈結(jié)構(gòu)出現(xiàn)異常。

[關(guān)鍵詞] 椎動脈；頸椎??；動物模型；兔

[中圖分類號] R725 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2014）02（a）-0035-02

椎動脈型頸椎?。╝rteria vertebral cervical spondylosis）是因為椎動脈受壓迫或刺激而引起其供血不足所產(chǎn)生的一系列癥狀[1]。是由各種機(jī)械性與動力性因素致使椎動脈遭受刺激或壓迫，以致血管狹窄、折曲而造成以椎——基底動脈供血不全為主要癥狀的癥候群[2]。該研究自2012—2013年擬通過手術(shù)切除兔頸背部淺、深兩層肌肉的方法建立動物模型，病理學(xué)檢測椎動脈，探討椎動脈型頸椎病的病因及發(fā)病機(jī)制?，F(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

采用80只成年健康新西蘭白兔，由鄭州大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物中心提供，6月齡，雌性，清潔級，普通飼料喂養(yǎng)，體質(zhì)量（2.5±0.3）kg。

1.2 分組及模型制備

采用隨機(jī)函數(shù)法分為兩組，即實驗組（40只）和對照組（40只）。實驗組：結(jié)扎并切斷頸椎2到7（C2～7）節(jié)段背部淺、深肌群后縫合切口；對照組：僅切開并縫合頸背部皮膚，切口長度與試驗組相同。

1.3 病理學(xué)檢測方法

兩組兔于術(shù)后第120天用失血法處死，剔除周圍軟組織，水平位取C5～6椎間段，生理鹽水沖洗后置入10%甲醛固定液中6小時，水洗10 min后移入8%鹽酸組織脫鈣液（由上海田源生物技術(shù)有限公司提供）脫鈣2 h，常規(guī)制作病理切片后鏡檢，使用上海勤翔科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)的PowerSign530 顯微圖像采集系統(tǒng)測量椎動脈外徑（ED）、內(nèi)徑（ID）、管壁厚度（WT）。

1.4 統(tǒng)計方法

研究數(shù)據(jù)用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件包對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，進(jìn)行t檢驗。

2 結(jié)果

病理學(xué)檢測 對照組椎動脈各層清晰，內(nèi)膜可見內(nèi)皮細(xì)胞排列稀疏；實驗組椎動脈管腔較窄，內(nèi)膜增生明顯，管壁較厚。見圖1、圖2。

圖1 對照組術(shù)后第120天，鏡檢椎動脈

椎動脈內(nèi)皮細(xì)胞排列稀疏（HE染色×100）

圖2 實驗組術(shù)后第120天，鏡檢椎動脈

椎動脈內(nèi)膜增生明顯，管腔狹窄（HE染色×100）

實驗組術(shù)后第120天椎動脈ED為（612.89±26.37 ）mm，對照組為（606.58±26.58）mm，兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；實驗組術(shù)后第120天椎動脈ID為（410.29±30.25）mm，對照組為（487.27±29.38）mm，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P< 0.05）；實驗組術(shù)后第120天椎動脈WT為（87.56±16.47） mm，對照組為（57.47±16.73） mm，兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 實驗組和對照組術(shù)后第120天椎動脈ED、ID、WT[mm，（x±s）]

[組別＼&ED;＼&ID;＼&WT;＼&實驗組（n=40）

對照組（n=40）

t值＼&612.89±26.37

（606.58±28.58）△

0.672＼&410.29±30.25

（487.27±29.38）﹡

1.876＼&87.56±16.47

（57.47±16.73）﹡

2.015＼&]

注：與實驗組比較， △P>0.05；﹡P <0.05。

3 討論

3.1 破壞兔頸部動力平衡的方法制作椎動脈型頸椎病動物模型的可行性

椎動脈型頸椎病的發(fā)病機(jī)制尚不明確，對于發(fā)病機(jī)制，國內(nèi)外的相關(guān)研究多為解剖研究及臨床觀察[3-7]。將人類疾病復(fù)制到動物身上是醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要途徑， 對探討發(fā)病機(jī)制，以及預(yù)防和治療方法的選擇與改進(jìn)上，都有重要的作用， 在動物實驗上建立椎動脈型頸椎病模型， 通過研究動物模型探索椎動脈型頸椎病的病因和發(fā)病機(jī)制等[8-9]， 是目前對其研究的重要途徑之一。該課題設(shè)計采用破壞兔頸部動力平衡的方法造模。造模120 d后制作病理切片檢測椎動脈。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：造模后120 d，管壁增厚，管腔狹窄，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。從而成功制成椎動脈型頸椎病動物模型。本模型符合臨床椎動脈型頸椎病發(fā)病原理，容易復(fù)制，簡便易行。

3.2 椎動脈內(nèi)徑、管壁厚度結(jié)果分析

該實驗結(jié)果表明，在術(shù)后第120天，實驗組椎動脈管腔較窄，內(nèi)膜增生；對照組椎動脈各層清晰，內(nèi)膜可見單層內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋。實驗組術(shù)后第120天椎動脈WT高于對照組（P<0.05）；ID低于對照組（P <0.05）。可能是因為頸椎長期動力性失衡，導(dǎo)致椎動脈受到牽張性刺激，血管內(nèi)皮完整性被破壞。防止內(nèi)膜增生的最重要基礎(chǔ)是正常的血管內(nèi)皮完整性。一旦內(nèi)皮受到損傷，喪失完整性，內(nèi)膜就可能增生；內(nèi)膜是由內(nèi)皮細(xì)胞和內(nèi)皮下層組成的，內(nèi)皮細(xì)胞能產(chǎn)生大量具有雙向功能的分子，能促進(jìn)和抑制效應(yīng)達(dá)到平衡。當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞失去維持這一平衡的能力時，脂質(zhì)和白細(xì)胞就會侵入到內(nèi)皮，從而引起炎性反應(yīng)和脂紋的形成，導(dǎo)致管腔狹窄；同時內(nèi)皮細(xì)胞釋放內(nèi)皮素-1，它能夠促進(jìn)平滑肌細(xì)胞的有絲分裂，平滑肌細(xì)胞分泌的生長因子，能夠加速周圍平滑肌細(xì)胞的增生，其向內(nèi)膜游移，以及細(xì)胞外基質(zhì)的合成，可使管壁增厚，管腔狹窄[10]。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 郇海紅.椎動脈型頸椎病治療的研究進(jìn)展[J]. 西部中醫(yī)藥，2011（24）： 110-113.

[2] 陳光華，朱葉珊，王金榜. 丹紅注射液配合頸椎牽引治療椎動脈型頸椎病40例的療效觀察[D].濟(jì)南：山東大學(xué)，2004.

[3] Bayrak IK， Durmus D， Bayrak AO，et al. Effect of cervical spondylosis on vertebral arterial flow and its association with vertigo[J]. Clin Rheumatol，2009，28（1）：59-64.

[4] Guinand N， Guyot JP. Cervical vertigo： myth or reality[J]. Rev Med Suisse. 2009， 5（219）：1922-1924.

[5] Machaly SA， Senna MK， Sadek AG. Vertigo is associated with advanced degenerative changes in patients with cervical spondylosis[J]. Clin Rheumato[J].2011，30（12）：1527-1534.

[6] Fischer S， Schul C， Lanzer P， et al.Cervical vertebral artery dissection and recurrent in-stent stenosis due to C6/7 foraminal spondylosis[J]. Clin Neuroradiol，2010，20（2）：117-21.

[7] Cobzeanu MD， Rusu D， Moraru R， et al.The implications of cervical spine degenerative and traumatic diseases in the pathogenesis of cervical vertigo and hearing loss[J].Rev Med Chir Soc Med Nat Iasi，2009，113（3）：814-818.

[8] Zhang CW， Wu JJ， Han Y， et al. Experimental study of eliminat dampness resolv phlegm method in treating cervical spondylopathy of thevertebral artery type[J]. Zhongguo Gu Shang，2010，23（7）：534-537.

[9] Shou Z， Shen L， Xiong P. Assessing the validity of a novel model of vertebral artery type of cervical syndrome induced by injecting sclerosing agent next to transverse process of cervical vertebra[J].J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci，2010，30（1）：85-88.

[10] 蘇顯明，王東琦，崔長琮. 經(jīng)皮冠狀動脈成形術(shù)對冠狀動脈內(nèi)皮功能的影響[J]. 西安交通大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2002（4）：58-61.

（收稿日期：2013-12-13）