藍狐的人工授精技術

劉敏　劉濤　蔣巖

摘要：人工授精可以提高種公狐的利用率，加速良種狐的改良工作，有效防止狐生殖道疾病的傳播。簡要闡述了狐的人工授精技術，為實際生產(chǎn)提供參考。

關鍵詞：藍狐；發(fā)情鑒定；人工授精

中圖分類號：S865.2+3 文獻標識碼：B 文章編號：1007-273X（2014）08-0064-03

隨著經(jīng)濟的發(fā)展和人民生活水平的提高，養(yǎng)狐業(yè)的發(fā)展前景越來越廣闊。與國外相比，我國養(yǎng)狐業(yè)具有明顯的優(yōu)勢，一是我國生產(chǎn)狐產(chǎn)品的成本較低，主要是勞動力成本低，容易獲得較高的利潤，如在我縣目前每只狐的利潤在300元左右。二是我國具有巨大的消費市場。經(jīng)濟的發(fā)展使我國服裝行業(yè)的消費群體從過去的耐用、實用型向高檔次看齊，動物裘皮特有的光彩為其他產(chǎn)品無法替代。目前我國裘皮的人均占有量還相對較低，國產(chǎn)高檔毛皮數(shù)量遠遠不能滿足消費者需求，很大程度上仍依賴進口。因此，充分利用我國的資源優(yōu)勢，開展藍狐的規(guī)?；B(yǎng)殖前景十分廣闊。

1 開展狐人工授精技術的好處

開展狐人工授精有以下好處：①可提高良種狐利用率（公狐自然交配一般3～4只母狐，人工授精時，一只公狐可授精20～30只母狐）；②克服自交中的一些困難如公母大小不好配、母狐拒配、母狐弓腰難配及母狐外生殖器畸形等；③可減少部分疾病的發(fā)生和傳播；④可提高母狐的受胎率、產(chǎn)仔數(shù)；⑤節(jié)省了人工、飼養(yǎng)及欄舍等開支[1]。

2 種公狐的選擇、管理與防疫

2.1 種公狐的選擇

選擇純種和品質優(yōu)良、繁殖力強的個體作種狐。用于雜交改良的北極狐公狐必需是純種的。種公狐不要過肥達中等略偏上體況為佳。

2.2 種公狐的管理

在不同季節(jié)和不同發(fā)育期，對種公狐要采取各個時期適宜的管理方法。冬季要防寒保暖，增加運動和光照，夏季要做好防暑，特別在繁殖期要合理搭配各種所需營養(yǎng)，過肥過瘦都不好。

配種期來臨前1個月，采取公、母狐互換籠舍，通過異性刺激促進狐群的性興奮。

2.3 種公狐的防疫

預防種狐生殖道疾病：12月份至翌年1月份及時注射狐陰道加德納氏菌病和綠膿桿菌疫苗，做好生殖道疾病防疫[2]。

3 狐的人工授精技術

3.1 場地和種狐的消毒

人工授精的場地清掃干凈后地面用2%福爾馬林或5%工業(yè)用苛性鈉溶液或10%～20%的漂白粉溶液消毒，也可用噴燈火焰消毒。

人工授精中的保定人員和操作者要固定在本區(qū)內工作，不要隨意亂串，要穿消過毒的工作服、工作鞋。操作人員的手須用75%乙醇擦后再用中性水或蒸餾水沖洗。采精或輸精所用器械，每次使用前都必須清洗，然后用l%新潔爾滅溶液消毒，最后還要用中性水或蒸餾水沖洗。

采精或輸精的種狐，對其局部要進行清洗和消毒。如公狐的龜頭、包皮及其周圍的被毛，在采精前用0.1%～0.2%新潔爾滅溶液浸泡的毛巾拭擦腹部和會陰部，也可用布兜住腹部與肛門區(qū)。母狐的外陰及其周圍的被毛也要進行清洗消毒。

3.2 授精器械的消毒

許多病原菌通過消毒不徹底的器械在人工授精過程中使母狐生殖器官感染，影響母狐的生殖能力，造成不孕、流產(chǎn)、流膿、胎兒死亡，嚴重者可造成母狐死亡，如發(fā)現(xiàn)母狐陰道有炎癥，主要是綠膿桿菌、加德納氏菌等，用注射用水清洗陰道后，再注入陰道160萬U的青霉素。

人工授精器械，如輸精器、陰道擴張器、集精杯等，必須經(jīng)過嚴格的消毒后方可使用，使用1次消毒1次。消毒方法是用清水沖洗3遍放入烤箱內用250 ℃烘干30 min后即可使用，紗布用蒸鍋蒸25 min，蒸好后，用紗布擦公狐陰莖。母狐輸精要1只母狐用1根輸精器，1個陰道套管，器械不能交叉使用。

3.3 采精

3.3.1 捉狐 用捉狐器套住狐頭，固定住，然后抓后臀部皮膚，捉住后拉出，這樣使狐不受傷。

3.3.2 操作過程 采精時先按摩公狐睪丸和會陰部，給狐一個采精信號。按摩數(shù)秒后，采精者將拇指、食指捏在公狐陰莖兩側，中指捏在陰莖腹面，捏住陰莖中部并沿陰莖縱向擼壓和滑動陰莖包皮，對陰莖進行摩擦刺激。擼壓開始時滑動速度要快一些，大約4～5次/s，擼動幅度約7～8 cm。擼壓5～7 s后，陰莖勃起，隨之陰莖中部的球狀海綿體膨大。此時，將陰莖從公狐兩后腿之間拉向后方，將包皮擼至球狀海綿體后方繼續(xù)擼壓球狀海綿體和后部的陰莖，擼壓速度減慢，每10 s擼壓12～13次。擼壓球狀海綿體時，稍用力些，如此反復擼壓按摩（5～7 s或約10 s）直至公狐射精為止。為提高采精效果，按摩時應配合公狐性反射行為調整擼壓按摩頻率和力度，以刺激公狐排精。適度的擼壓刺激公狐表現(xiàn)興奮和舒適，刺激力度不夠，公狐無性反射，陰莖勃起速度慢且不堅挺，而刺激力度過強時，公狐有痛感，性反射抑制。

3.3.3 精液的接取收集 在一只手按摩公狐陰莖即將開始射精時，另一只手握住集精杯底部準備接取精液。公狐射精時，首先射出的是副性腺分泌物，白色透明尿樣，可不接或接取棄之不用。后射出的是乳白色的精液，要及時接取在集精杯內。公狐射精過程中仍需對其按摩刺激，整個擼壓采精過程大約需幾十秒鐘，最多不超過2min。公狐射精結束后待陰莖回縮時將包皮向陰莖頭部擼擠，使陰莖復原，將精液迅速送往精檢室內，放在37℃保溫瓶或水浴鍋內，并做好采精記錄。初次采精時，不能過于急躁，必須經(jīng)過2-3d訓練后才能形成條件反射。

3.3.4 采精頻度 公狐每周采精2～3次，如果連續(xù)采精2～3 d應休息1～2 d。

3.4 精液的品質檢查

3.4.1 精液量檢測 集精杯上有刻度，可直接讀取記錄。一般狐每次采精量為0.25～2.00mL（不含精清）。

3.4.2 色澤及氣味 正常的精液顏色為白色、均勻、不透明。氣味微腥或無味，顏色和氣味異常的精液不能供輸精使用。

3.4.3 精液的pH檢測 用pH試紙蘸少量精液比色檢查。狐精液pH為6.5，偏酸，如pH改變，說明精液中混有異物，如尿液、不良稀釋液或狐副性腺有病等，不能用作輸精。

3.4.4 精子活力檢查 簡易方法是滴l滴待檢的精液于載玻片上，制成精液壓片在35～37 ℃條件下用顯微鏡觀察精子運動情況，精子活力以直線前進運動精子的百分比表示，活力低于70%不能用其輸精。

3.4.5 精子密度 狐的精子一般每毫升精液含精子7億-8億個，個別優(yōu)良個體可達每毫升精液含精子13億個。精子密度低于0.5億個/mL時不能提供輸精用。

3.4.6 畸形精子 畸形精子多、精液品質低，受胎率就低。畸形精子有巨形、短小、雙頭、雙尾、頭尾殘缺、無尾、互相粘連及帶有原生質顆粒等。畸形率超過20%的精液不能供輸精用。

3.5 精液的稀釋與保存

3.5.1 稀釋 經(jīng)檢驗合格的精液，要根據(jù)原精液的精子密度用特制的稀釋液進行稀釋。精液稀釋的適宜倍數(shù)：按精液密度、活力和畸形精子率的檢測結果計算出每毫升原精子中有效精子數(shù)，再按稀釋后精液應含有的有效精子數(shù)（7 000萬個/mL）和當日輸精母狐數(shù)量計算出稀釋倍數(shù)。稀釋倍數(shù)=每毫升原精液中有效精子數(shù)/輸精時每毫升稀釋精液中所要求的精子數(shù)。

精液稀釋的操作：事先把精液稀釋液移至試管內，并置于盛有35～37 ℃的廣口保溫瓶或水浴鍋內保存?zhèn)溆谩Ｏ♂寱r先按適宜稀釋倍數(shù)準確量取所需的稀釋液，再將稀釋液沿集精杯壁緩慢加入到精液中，輕輕搖勻，嚴禁稀釋液快速沖入精液和劇烈震蕩。

3.5.2 保存 稀釋后的狐精液適于25～35 ℃條件下保存，保存時間不超過3 h。低溫保存、冷凍保存技術尚不成熟。

3.6 母狐發(fā)情鑒定

3.6.1 根據(jù)癥狀鑒定 母狐發(fā)情時，躁動不安，運動量增加；食欲減退，排尿頻繁，尿液較濃，呈黃綠色；經(jīng)常用舌舔舐外陰。發(fā)情盛期，食欲廢絕，不斷發(fā)出急促的“嗷嗷”求偶叫聲。發(fā)情后期，活動逐漸趨于正常，飲食恢復，精神安定。

3.6.2 外陰檢查 根據(jù)母狐外陰生理和形態(tài)變化，可將母狐的發(fā)情期（10～12d）分為5個階段。第一至第三階段為發(fā)情前期，第四階段為發(fā)情排卵期，第五階段為發(fā)情后期。

第一階段：陰毛分開，陰門明顯可見，陰門由靜止期的陰毛覆蓋變?yōu)橥馔鼓[脹，陰蒂增大。儀器檢驗，陰道涂片可見白血球多，在個別標本中可看到有核細胞。這時母狐卵巢中濾泡正在逐漸擴大，卵巢體積約達1 cm3。此階段正常情況可持續(xù)2～3 d，個別的延續(xù)5～7 d。

第二階段：陰門腫脹，用手觸摸有彈性，陰蒂增大。儀器檢驗，陰道涂片可見到有核細胞增多。這時母狐卵巢體積增加到1.5～2.0 cm3，濾泡顯著增大。此階段大約經(jīng)過l～2d。

第三階段：陰門極度腫脹，腫脹面光亮、較硬、凸起，陰蒂呈紅色的圓錐形。儀器檢查，陰道涂片可觀察到有大約同等數(shù)量的有核細胞和角質化無核細胞。這時，母狐的卵巢體積增至2.0～2.3 cm3，濾泡達到豌豆粒大小。此階段一般持續(xù)2～3 d。

第四階段：陰門近于“O”形、外翻、濕潤，可見分泌出的乳白色或微黃色黏液。陰門顏色漸深，呈暗紅色，腫脹面變軟，上面有輕微的皺褶，陰蒂稍萎縮，這時成熟的卵細胞逐漸排出。儀器檢驗，陰道涂片可見到角質化的無核細胞占多數(shù)，這正是交配的最佳時機。此階段，北極狐可持續(xù)3～5 d。

第五階段：陰門腫脹開始消退，逐漸恢復正常，周圍顏色變深。卵巢開始縮小，排卵結束，黃體形成。儀器檢驗，陰道涂片上可見到有核角質化上皮細胞和白細胞。幼年母狐的外生殖器官和成年母狐相似，但不如成年母狐明顯，發(fā)情期較成年母狐延續(xù)的時間長一些，可達8～10d。

3.6.3 放對試情 公狐試情法是將母狐放到公狐籠舍內，根據(jù)母狐的行為來判斷母狐的發(fā)情程度。當發(fā)現(xiàn)母狐嗅聞公狐的陰部，抬尾接受公狐爬跨和不回頭咬公狐時，可認為母狐進入發(fā)情持續(xù)期，即配種適宜期。這時可將母狐與試情公狐分開，放到預配的公狐籠內或人工授精站進行實配。如發(fā)現(xiàn)母狐仍未達到適宜期而拒配時，應立即將母狐分出，避免母狐驚恐?？纱稳栈蚋羧赵俜艑Γ蚍湃肫渌N公狐籠試配。

有些公狐或初次發(fā)情的母狐，外陰部發(fā)情無變化，但已達到發(fā)情持續(xù)期，在行為上完全接受公狐交配，這叫隱性發(fā)情，放對有促進母狐發(fā)情的作用。試情時間不要過長，一般不要超過20 min，如不接受交配，次日再進行試情。

3.6.4 發(fā)情檢測器檢測 母狐發(fā)情時用發(fā)情檢測器測定發(fā)情母狐陰道電阻值，電阻值逐漸增高至峰值為發(fā)情前期，達峰值后電阻值明顯下降時為發(fā)情期。最佳輸精時間的選擇為北極狐在電阻峰值下降第2天。

3.6.5 陰道細胞學檢查 用棉簽或吸管蘸取或吸取陰道分泌物制成涂片，在200～400倍顯微鏡下觀察，圓型細胞逐漸減少，角化細胞逐漸增多為發(fā)情前期；角化細胞占滿視野，圓型細胞缺少為發(fā)情期即適宜輸精期；角化細胞減少，圓型細胞又重新出現(xiàn)時為發(fā)情后期。

3.7 輸精

3.7.1 輸精器材的準備 輸精前應做好輸精器、陰道插管、注射器、酒精棉球等準備工作。室內溫度應保持在18～25 ℃，同時按常規(guī)進行室內外的消毒工作。所用授精器材如輸精品、陰道插管等經(jīng)事先嚴密消毒備用，使用時每狐l份。用后再統(tǒng)一消毒處理。所用5 mL注射器最好為醫(yī)用一次性注射器。

3.7.2 輸精操作 輸精時兩人配合操作，一人保定，一人輸精。保定人員用保定鉗保定母狐，一手握住母狐尾部使尾朝上，用0.1%～0.2%新潔爾滅消毒液消毒外陰部及其周圍部分。

先將陰道插管插入母狐陰道內，其前端抵達子宮頸；左手虎口部托于母狐下腹部，以拇指、中指和食指摸到陰道插管的前端。以左手拇指、食指、中指固定子宮頸位置（向斜下方壓開膣器，先摸開膣器的頭部然后在過管頭l cm范圍內摸到花生粒至黃豆粒大小的凸起，隨著開膣器的運動而運動，即可判定為子宮頸），右手握持輸精器末端把陰道插管內腔插入，前端抵子宮頸處調整輸精的位置探尋子宮頸口。左手、右手配合將輸精器前端輕輕插入子宮體內1～2 cm，固定不動。由助手將吸有精液的注射器插接在輸精器上，推動注射器把精液緩慢地注入子宮內，輸精技術熟練者，也可事先將吸有精液的注射器插在輸精器上，由輸精者直接將精液輸入。向注射器內吸取精液時，應注意注射器的溫度與精液溫度一致，緩慢吸取至固定的刻度，可再吸入少許空氣，以保證輸精時將所有精液輸入子宮內，以防殘留在輸精針管腔內，造成浪費。輸精后輕輕拉出輸精器，如果輸精手法得當，母狐生殖道無畸形，則輸精過程中母狐表現(xiàn)安靜。每次輸精量為稀釋后的1～1.5mL，輸入有效精子不少于7 000萬。輸精次數(shù)，一般連續(xù)輸精2～3次，每日1次。初次輸精誤為假發(fā)情時，待發(fā)情后再輸2～3次。

3.7.3 輸精效果判斷 拉出輸精器時手感覺有點阻力，拉出輸精器時無血液，拉出輸精器時精液不倒流，鏡檢輸精器內殘留的精液，精子活力不低于70%。

3.7.4 人工輸精結束后工作 清潔消毒：一個批次的人工授精器材（如上、下午、一日），輸精結束后立即清理室內衛(wèi)生、清洗消毒人工授精器材，室內地面用新潔爾滅消毒液消毒；整理：每日人工授精工作結束后整理好輸精記錄，做好下批次人工授精準備工作；歸檔：每年人工授精工作結束后，所有有關記錄、技術資料要進行歸檔和存檔，以備查閱。