妊娠湖羊補充L-Arg和Se對初乳及羔羊初生重的影響

楊 潔， 王連群 *， 侯 芳， 馬 林， 張俊瑜， 柳柏年

（1.塔里木大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，新疆阿拉爾 843300；2.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團塔里木畜牧科技重點實驗室，新疆阿拉爾 843300；3.瑪納斯縣樂土驛鎮(zhèn)獸醫(yī)站，新疆瑪納斯 832207；4.新疆畜牧科學(xué)院飼料研究所，新疆烏魯木齊 830000；5.瑪納斯縣涼州戶鎮(zhèn)獸醫(yī)站，新疆瑪納斯 832219）

幼畜機體新陳代謝活動旺盛，體內(nèi)的氧化還原反應(yīng)相對較快，如果沒有充足的抗氧化物質(zhì)，氧化還原反應(yīng)生成的自由基就會蓄積，導(dǎo)致機體產(chǎn)生氧化應(yīng)激，造成機體損傷。Se能夠提高家畜的抗氧化能力，減少機體性氧化應(yīng)激反應(yīng)（袁施彬，2007）。初乳是新生羔羊最佳日糧，初乳組成及IgG水平直接影響新生羔羊的健康和成活率。已有研究表明，日糧Se能夠提高母羊初乳的IgG水平，并通過初乳增加了羔羊血清IgG的水平（Stewart等，2013）。本試驗擬通過妊娠湖羊補充L-Arg和Se來研究外源性的L-Arg和Se對初乳的組成、抗氧化性、IgG水平及羔羊初生重的影響，并對二者進行比較。旨在為生產(chǎn)中提高初乳的各營養(yǎng)成分含量、抗氧化性、IgG水平及羔羊的初生重提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 試驗選用20只體況良好、平均體重為（41.38±2.13）kg的同期發(fā)情處理的已孕湖羊母羊。

1.2 試驗設(shè)計 試驗采用多因素完全隨機區(qū)組試驗設(shè)計，將體重相近的20只同期發(fā)情處理的已孕湖羊母羊隨機分為4組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)1只湖羊。將添加Se日糧和靜脈注射L-Arg及二者互作的因素隨機分配給4組湖羊，即Se組（于妊娠期的50 d至分娩飼喂Se含量為0.3 mg/kg的日糧）、Arg組（于妊娠期的130 d至分娩每天靜脈注射70 mg/kg體重的 L-Arg）、AS組 （于妊娠期50 d至分娩每天飼喂Se含量為0.3 mg/kg的日糧結(jié)合妊娠期130 d至分娩靜脈注射70 mg/kg體重的L-Arg）、對照組，各組羊只的基礎(chǔ)日糧相同。基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 各組母羊分欄飼喂，自由采食，自由飲水。粗飼料（玉米秸稈）經(jīng)飼料粉碎機粉碎后與精料（Se組和AS組在精料中添加亞硒酸鈉）混合均勻，添加水使整個混合日糧的水分達到40%左右，每天飼喂兩次（11∶30 和 18∶30），每天要求剩料量在10%左右。Arg組和AS組分別于妊娠期的130 d至分娩的每天早上10∶30靜脈注射鹽酸精氨酸[鹽酸精氨酸注射液（L-型）上海信誼金朱藥業(yè)有限公司]，注射劑量為每天每只70 mg/kg體重。

1.4 樣品采集與指標(biāo)測定

1.4.1 飼料樣品 試驗開始前收集飼料樣品，測定常規(guī)養(yǎng)分。干物質(zhì)采用GB 6435-86方法測定；粗蛋白質(zhì)采用GB/T 6432-94方法測定；中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維依據(jù)范氏洗滌纖維分析法測定；鈣和磷采用原子吸收法測定，Se采用2，3-二氨基萘熒光法（GB/T 13883-92）測定（王加啟，2004）。

1.4.2 初乳樣品 試驗羊只在分娩后羔羊未吃初乳前立即采集初乳樣品，于-20℃冷凍保存，待測定乳常規(guī)成分、IgG和抗氧化性指標(biāo)。

初乳在室溫下解凍后，乳常規(guī)成分通過乳成分分析儀（FOSS，F(xiàn)T 120）測定，初乳中的 IgG 采用瓊脂糖單向免疫擴散法測定。初乳中的抗氧化性指標(biāo)采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒進行分析，初乳中的丙二醛（MDA）含量測定采用硫代巴比妥酸法，超氧化物歧化酶（SOD）活力測定采用黃嘌呤氧化法，谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力測定采用DTNB顯色法，總抗氧化能力（T-AOC）測定采用比色法。

1.5 數(shù)據(jù)處理 試驗數(shù)據(jù)利用Excel 2003進行初步整理，統(tǒng)計分析利用SAS軟件包（The SAS System for Windows 9.0）中的ANOVA過程進行多因素方差分析和F檢驗。差異顯著性采用Duncan’s法進行多重比較，所有數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，以ALPHA=0.05為顯著性檢驗和判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 L-Arg和Se對初乳組成及羔羊初生重的影響 由表2可知，雖然各組羔羊的初生重和初乳組成無顯著變化（P＞0.05），但是，Arg組和AS組羔羊的初生重和初乳蛋白質(zhì)含量比對照組分別提高了16.2%、11.3%和15.8%、13.3%，乳糖含量略有降低。

表2 L-Arg和Se對初乳組成及羔羊初生重的影響

2.2 L-Arg和Se對初乳抗氧化性及IgG含量的影響 由表3可知，Se組、AS組的SOD活性較對照組和Arg組分別提高30.2%、23.3%和 39.0%、31.6%（P＜0.05）。 Se組、Arg組和 AS組的 GSHPx活性較對照組分別提高24.5%、20.7%和30.1%（P ＜ 0.05），但三組間差異均不顯著（P ＞ 0.05）。各組間的T-AOC、MDA和IgG水平差異均不顯著（P＞0.05），但與對照組比較，試驗組的T-AOC和IgG水平有上升的趨勢。

表3 L-Arg和Se對初乳抗氧化性及IgG含量的影響

3 討論

3.1 L-Arg和Se對初乳組成及羔羊初生重的影響 通常，母羊分娩后1周內(nèi)分泌的乳汁稱為初乳，在這1周內(nèi)，隨著泌乳時間和擠奶次數(shù)增加，初乳中的干物質(zhì)、乳蛋白、乳脂肪含量均呈現(xiàn)遞減的態(tài)勢，而乳糖含量呈現(xiàn)遞增的趨勢（娜日娜等，2005），不僅如此，初乳的組成還會隨著妊娠期或泌乳期的營養(yǎng)而改變 （O’Doherty和 Crosby，1997）。本研究表明，雖然各處理組的各乳成分含量均未達到顯著水平（P＞0.05），但是，與對照組比較，單獨進行靜脈注射L-Arg或與日糧補充Se聯(lián)用分別使初乳蛋白質(zhì)含量增加了15.8%和13.3%，乳糖含量略有下降。Vicini等（1988）研究報道，給泌乳期為73～87 d的奶牛靜脈注射LArg沒有影響乳成分。江雪梅（2011）在妊娠母豬日糧中添加L-Arg增加了初乳中大部分氨基酸的濃度，顯著提高了初乳中纈氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸和Arg的濃度（P＜0.05）。初乳中這些氨基酸濃度的提高有利于乳蛋白的合成。Arg還可通過鳥氨酸循環(huán)和三羧酸循環(huán)轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌被幔@將為乳蛋白的合成提供更為豐富的氨基酸原料。本研究通過日糧補充Se未對湖羊初乳組成產(chǎn)生顯著影響（P＞0.05），這與Swanson等（2008）的研究結(jié)果一致。

本研究表明，雖然各組羔羊初生重均未達到顯著差異（P＞0.05），但是，與對照組比較，靜脈注射L-Arg或與日糧補充Se聯(lián)用使羔羊初生重分別提高了16.2%和11.3%。Lassala等（2011）通過靜脈注射L-Arg提高了羔羊的初生重，這與Arg在體內(nèi)的代謝有關(guān)。多胺能夠調(diào)節(jié)DNA的表達和蛋白質(zhì)的合成，從而對細胞的增殖和分化進行調(diào)節(jié)（Flynn等，2002）。本研究通過日糧給妊娠湖羊補充Se并未影響羔羊的初生重，這與Swanson等（2008）給妊娠母羊補充富硒酵母對羔羊初生重的影響結(jié)果一致，然而，曹貴東和武曉英（2012）卻通過納米硒顯著提高了110 d妊娠母羊的胎兒體重 （P＜0.05），這一差異可能是日糧硒源不同的結(jié)果。

3.2 L-Arg和Se對初乳抗氧化性及IgG含量的影響 本研究通過日糧補充Se或與靜脈注射LArg合用顯著提高了湖羊初乳中SOD和GSH-Px的活性（P＜0.05），初乳中T-AOC的水平有上升的趨勢（P=0.08），單獨進行靜脈注射L-Arg僅提高了GSH-Px的活性（P＜0.05），由此表明，妊娠湖羊補充Se和L-Arg提高了初乳的抗氧化性。鄭萍等（2010）研究表明，外源性的Arg具有提高機體抗氧化性的作用。妊娠母羊補充L-Arg后血清中半胱氨酸的水平顯著增加 （P＜0.01）（Lassala等，2011），半胱氨酸是GSH合成所需的主要限制性氨基酸（Wu等，2004）。在本研究中，初乳GSHPx活性的提高可能源于血液為乳腺提供了更為充足的半胱氨酸所致。Se是GSH-Px活性中心的必需元素，因而，在機體的抗氧化物酶系統(tǒng)中具有很重要的作用。王連群（2008）在泌乳奶牛日糧中添加亞硒酸鈉提高了常乳中SOD的活性 （P=0.08）。李星（2009）研究表明，與亞硒酸鈉比較，硒代蛋氨酸使母豬初乳具有更高的SOD、GSH-Px、T-AOC水平和更低的MDA水平（P＜0.05）。

初乳中足夠的免疫球蛋白能夠使新生羔羊獲得較為理想的被動免疫，從而提高新生羔羊的抗病力和成活率。Stewart等（2013）給妊娠母羊提供Se，提高了初乳中IgG的水平。彭易柱（2013）給妊娠獺兔補充不同水平的L-Arg，結(jié)果各組初乳中的IgG水平均高于未補充L-Arg的對照組，其中，最高量的L-Arg補充組顯著高于對照組（P＜0.05），由此說明初乳中IgG的濃度與補充LArg的水平有關(guān)。在本研究中，妊娠母羊補充Se和L-Arg在一定程度上提高了初乳中的lgG水平。其中未顯著提高初乳中IgG的濃度 （P＞0.05），其原因可能與L-Arg的補充量有關(guān)，這需要進一步研究。

4 結(jié)論

妊娠湖羊補充Se和L-Arg均能夠提高初乳的抗氧化性，單獨補充L-Arg或與Se聯(lián)用，在一定程度上提高了初乳中乳蛋白、IgG含量和羔羊的初生重，單獨補充Se在一定程度上能夠提高初乳中IgG的水平。

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