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    上海市成人靜脈血淋巴細(xì)胞絕對(duì)值參考范圍調(diào)查與探討

    2014-10-16 08:13:50劉曼嬌唐大海黃國(guó)其
    海軍醫(yī)學(xué)雜志 2014年4期
    關(guān)鍵詞:青年組淋巴細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室

    劉曼嬌,岳 波,唐大海,黃國(guó)其

    淋巴細(xì)胞是構(gòu)成機(jī)體免疫系統(tǒng)的主要細(xì)胞群,在機(jī)體免疫應(yīng)答中起重要作用,淋巴細(xì)胞的數(shù)量和功能的變化與超敏反應(yīng)、免疫缺陷病、自身免疫性疾病、持續(xù)性病毒感染、腫瘤等關(guān)系密切,因此研究淋巴細(xì)胞絕對(duì)值與相關(guān)疾病的關(guān)系具有重要意義。淋巴細(xì)胞絕對(duì)值是血常規(guī)中的一項(xiàng)參數(shù),很多醫(yī)院的正常參考范圍都是直接引用《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版的標(biāo)準(zhǔn),這樣顯然欠妥。筆者認(rèn)為,該參考范圍應(yīng)用前需加以驗(yàn)證,有條件的臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自身不同檢測(cè)系統(tǒng)建立各自人群特征的參考區(qū)間[1]。

    1 對(duì)象與方法

    1.1 對(duì)象 選取2012年3-11月來(lái)我院體檢的上海地區(qū)各企事業(yè)單位職工(包括部隊(duì)、傳媒、醫(yī)療、工廠、公安系統(tǒng)等)作為研究對(duì)象,年齡18~60歲,所有選取對(duì)象經(jīng)我院各項(xiàng)檢查(肝功能、腎功能、血脂、血糖、B超、胸透、心電圖等)排除異常者。檢驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±3倍標(biāo)準(zhǔn)差±3s)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行剔除,統(tǒng)計(jì)有效人數(shù)共3 081人,其中男1 778人,女1303人;按年齡分組,18~39歲為青年組,40~60歲為中年組,其中男青年組988人,男中年組790人,女青年組732人,女中年組571人。

    1.2 標(biāo)本采集 檢測(cè)對(duì)象空腹,坐位,由檢驗(yàn)科人員使用真空管采血法采集。

    1.3 儀器與試劑 日本Sysmex公司XT-1800i五分類(lèi)全自動(dòng)血液分析儀和配套原裝試劑。

    1.4 檢測(cè)項(xiàng)目 白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、淋巴細(xì)胞百分比(LY%)、淋巴細(xì)胞絕對(duì)值等24個(gè)項(xiàng)目。淋巴細(xì)胞絕對(duì)值采用激光流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)合核酸熒光染色技術(shù)。

    1.5 檢測(cè)方法 Sysmex XT-1800i五分類(lèi)全自動(dòng)血液分析儀每半年由廠家進(jìn)行1次校準(zhǔn),并進(jìn)行校準(zhǔn)驗(yàn)證。在校準(zhǔn)有效期內(nèi)參加上海市臨床檢驗(yàn)中心的室間質(zhì)量評(píng)價(jià),結(jié)果均合格,確保檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度。每日標(biāo)本檢測(cè)前采用高、低2個(gè)濃度水平質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制,確保結(jié)果在控后才開(kāi)始檢測(cè)。

    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn),各組數(shù)據(jù)均符合正態(tài)性分布,統(tǒng)計(jì)各組均值)和標(biāo)準(zhǔn)差(s),使用參數(shù)法x±1.96s確定95%可信區(qū)間(CI,即參考范圍),按照NCCLS指南,各組間比較采用Z檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 按性別分組 男女2組均符合正態(tài)分布,男性淋巴細(xì)胞絕對(duì)值分布見(jiàn)圖1。男性為(2.18±0.59)×109/L,女性為(2.06±0.57)×109/L。采用Z 檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較,男性高于女性,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。由±1.96s分別得出 95%CI:男性為(1.02~3.35)×109/L,女性為(0.94 ~3.18)×109/L。

    圖1 男性淋巴細(xì)胞分布直方圖

    2.2 按年齡分組 各年齡組均符合正態(tài)分布,見(jiàn)表1。采用Z檢驗(yàn)分別進(jìn)行同性別組間比較,男青年組略高于男中年組,女青年組略高于女中年組,但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    表1 上海市不同性別不同年齡組間淋巴細(xì)胞絕對(duì)值比較

    2.3 95%CI 將本次調(diào)查的95%CI與其他文獻(xiàn)和《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版比較,見(jiàn)表2。由于淋巴細(xì)胞絕對(duì)值符合正態(tài)分布,所以可以由x±1.96s算出95%CI,反過(guò)來(lái),可以由95%CI推出均值和標(biāo)準(zhǔn)差。先計(jì)算出每個(gè)參考范圍的均值和標(biāo)準(zhǔn)差,然后采用Z檢驗(yàn)分別與本結(jié)果進(jìn)行比較。除了南充地區(qū)女性和本地區(qū)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外,其他地區(qū)和本地區(qū)的差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。由于操作規(guī)程中的參考范圍來(lái)源的樣本量未知,無(wú)法進(jìn)行Z檢驗(yàn),故將本次調(diào)查的均值作為樣本均數(shù),操作規(guī)程的均值作為總體均數(shù),采用t檢驗(yàn)進(jìn)行比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

    表2 上海市成人淋巴細(xì)胞絕對(duì)值調(diào)查結(jié)果與其他文獻(xiàn)比較(×109/L)

    2.4 參考范圍的驗(yàn)證 按照NCCLS指南,驗(yàn)證參考范圍需要20例以上正常人群標(biāo)本,假如受試者中不超過(guò)10%的觀測(cè)值落在起始報(bào)告的界限之外,試劑生產(chǎn)廠商或其他實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的95%參考限可以有效地應(yīng)用于接收實(shí)驗(yàn)室。將本次調(diào)查新建立的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值參考范圍為參考范圍Ⅰ,操作規(guī)程中的參考范圍為參考范圍Ⅱ,用本次調(diào)查的3 081例樣本分別對(duì)2個(gè)參考范圍進(jìn)行驗(yàn)證,分別統(tǒng)計(jì)落在2個(gè)參考范圍之外的百分比,見(jiàn)表3。結(jié)果顯示兩者都可以有效地應(yīng)用于本實(shí)驗(yàn)室。

    2.5 參考范圍的應(yīng)用 分別用2個(gè)參考范圍對(duì)我院2012年5-9月住院患者的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值結(jié)果進(jìn)行判讀統(tǒng)計(jì),共13 675例,其中男9 107例,女4 568例,結(jié)果超出參考范圍的視為陽(yáng)性,分別統(tǒng)計(jì)2個(gè)參考范圍各自判讀的陽(yáng)性率,見(jiàn)表4。參考范圍Ⅰ判讀的男性陽(yáng)性率約為參考范圍Ⅱ的1.52倍,參考范圍Ⅰ判讀的女性陽(yáng)性率約為參考范圍Ⅱ的1.52倍。

    表3 2個(gè)參考范圍的驗(yàn)證后差異比較

    表4 2個(gè)參考范圍判讀13 675例標(biāo)本的陽(yáng)性率比較

    3 討論

    本次調(diào)查顯示,18~60歲之間的男性淋巴細(xì)胞絕對(duì)值高于女性,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。同性別之間,青年組淋巴細(xì)胞絕對(duì)值略高于中年組,這種現(xiàn)象和國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值有隨年齡的增高而遞減的趨勢(shì)相吻合[7]。本次調(diào)查中同性別2個(gè)年齡組間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,可能是由于在18~60歲這個(gè)年齡段中,淋巴細(xì)胞絕對(duì)值受年齡的影響比較小,因此可以把青年組和中年組合并作為1個(gè)年齡組來(lái)設(shè)立參考范圍。

    由表2可以看出,上海地區(qū)淋巴細(xì)胞絕對(duì)值參考范圍與大部分地區(qū)存在差異。因此,不同地區(qū)、不同實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該建立各自檢測(cè)系統(tǒng)的參考區(qū)間[8]。國(guó)際臨床化學(xué)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(huì)(IFCC)建議,每個(gè)有條件的臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)不同檢測(cè)系統(tǒng)建立各自人群特征的參考區(qū)間[9]。本次調(diào)查初步建立了本實(shí)驗(yàn)室上海地區(qū)成人靜脈血淋巴細(xì)胞絕對(duì)值的參考范圍。

    美國(guó)CLIA-88要求實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證廠家的參考區(qū)間是否適合實(shí)驗(yàn)室患者的群體[6]。觀察2個(gè)參考范圍的驗(yàn)證結(jié)果發(fā)現(xiàn),兩者都符合落在參考范圍之外的觀測(cè)值不超過(guò)10%的條件,即2個(gè)參考范圍都可以有效地應(yīng)用于本實(shí)驗(yàn)室,2個(gè)參考范圍都可以在一定程度上減少假陽(yáng)性。由表4可以看出,用參考范圍Ⅰ判讀淋巴細(xì)胞絕對(duì)值結(jié)果得到的陽(yáng)性率約為參考范圍Ⅱ的1.52倍,即參考范圍Ⅰ比參考范圍Ⅱ多檢出了52%存在淋巴細(xì)胞絕對(duì)值異常的患者。但2個(gè)參考范圍都符合NCCLS指南,都可以有效減少假陽(yáng)性,但參考范圍Ⅰ比參考范圍Ⅱ提高了檢測(cè)淋巴細(xì)胞絕對(duì)值異常的靈敏度,所以與操作規(guī)程比較,本次調(diào)查得到的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值參考范圍更適合本實(shí)驗(yàn)室。

    本次調(diào)查新建立的參考范圍提高了檢測(cè)淋巴細(xì)胞絕對(duì)值異常的靈敏度,可以減少一部分患者的漏診和誤診。某些淋巴系的血液病(比如漿細(xì)胞白血病、慢淋等)在早期出現(xiàn)外周血淋巴細(xì)胞絕對(duì)值的輕微升高時(shí),用操作規(guī)程中的參考范圍判讀可能就是陰性,未能引起臨床重視,導(dǎo)致延遲診斷或漏診;而用新的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值參考范圍判讀可能就是陽(yáng)性,能夠及時(shí)提醒臨床進(jìn)行相關(guān)方面的排查。在某些病毒感染的病例中,淋巴細(xì)胞絕對(duì)值升高不明顯,用新參考范圍判讀是陽(yáng)性,可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)病毒感染,而用操作規(guī)程中的參考范圍判斷可能就是陰性,此時(shí)患者如果再伴隨疼痛、緊張等因素導(dǎo)致WBC生理性升高,那么臨床就很可能誤診為細(xì)菌感染。所以本次建立的新的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值參考范圍或許可以減少一些細(xì)菌感染的誤診,降低抗生素的誤用。

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