男性不育患者精漿彈性硬蛋白酶與精子密度及動(dòng)力的關(guān)系研究＊

邴晏如，莫和國，黃健云，歐水連，黎泳儀，蔡錦梅，陸小琴（南方醫(yī)科大學(xué)附屬小欖醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東中山 528415）

隨著社會(huì)的發(fā)展，不育癥的發(fā)病率呈明顯上升趨勢，育齡夫婦不育癥的發(fā)病率己從20世紀(jì)60年代的7%～8%上升到近年來的15%～20%［1］。不育原因中20%是單獨(dú)由男性因素引起，其余還有30%～40%與男性因素有關(guān)［2－3］。因此，有關(guān)精子質(zhì)量與男性不育原因的研究越來越引起臨床的重視。在影響男性生育功能的眾多因素中。有研究認(rèn)為男性生殖道感染是導(dǎo)致男性不育的主要原因之一［4－5］。本文研究男性不育患者精漿彈性硬蛋白酶與精子密度及動(dòng)力的關(guān)系，為進(jìn)一步探討精漿彈性硬蛋白酶對(duì)于男性生育力的評(píng)估價(jià)值，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年5月至2013年11月在本院男科門診就診的不育男性患者230例，且精液檢查至少有1項(xiàng)參數(shù)結(jié)果異常，年齡23～50歲，平均32.5歲，分別根據(jù)年齡段（21～25、＞25～30、＞30～35、＞35～40、＞40～50歲）和精漿彈性硬蛋白酶濃度（大于1 000 ng／mL、290～1 000 ng／mL、小于290ng／mL）進(jìn)行檢測。納入標(biāo)準(zhǔn)：同居1年及以上；性生活正常，無其他系統(tǒng)疾??；未采用任何避孕措施；女方各項(xiàng)檢查均正常。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集與保存 檢查前禁欲3～7d，手淫法取精液于干燥無菌廣口杯內(nèi)，37℃液化，液化后進(jìn)行精液常規(guī)檢測。精漿彈性硬蛋白酶濃度測定：新鮮標(biāo)本液化后立即取部分標(biāo)本3 000 r／min離心10min，留取精漿測精漿彈性硬蛋白酶濃度。標(biāo)本離心后，用Eppendorf管分裝數(shù)支后，－20℃保存。

1.2.2 主要儀器試劑及檢測方法 精液常規(guī)采用北京偉力WLJY－9000型彩色精子分析儀檢測；精漿彈性硬蛋白酶采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定，定量試劑盒均購自深圳華康公司；全自動(dòng)酶標(biāo)儀為美國Bio－Tek ELx800。

1.2.3 精液常規(guī)指標(biāo)和精漿彈性硬蛋白酶的正常參考值 精液常規(guī)按《世界衛(wèi)生組織人類精液及精子－宮頸粘液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢測手冊(cè)》（第4版）進(jìn)行分析，精液量大于或等于1.5 mL，pH≥7.2，精子活動(dòng)率大于或等于40%，精子前向運(yùn)動(dòng)百分比大于或等于32%，精子密度大于或等于15×106／mL，總精子數(shù)大于或等于39×106。精漿彈性硬蛋白酶正常參考值為小于290ng／mL。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理，計(jì)量資料以表示，組間比較采用方差分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同年齡段患者精漿彈性硬蛋白酶濃度、精子密度和精子動(dòng)力檢測結(jié)果 各年齡段患者的精漿彈性硬蛋白酶濃度、精子密度和精子活動(dòng)率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 不同年齡段患者精漿彈性硬蛋白酶與精子密度和精子活力檢測結(jié)果（）

表1 不同年齡段患者精漿彈性硬蛋白酶與精子密度和精子活力檢測結(jié)果（）

年齡（歲） n 彈性硬蛋白酶（ng／mL）精子密度（106／mL）精子活動(dòng)率（%）21～25 40 1594 .3±658.6 57 .44±20.34 56 .50±21.19＞25～30 52 1653 .2±715.6 61 .36±23.36 61 .35±25.39＞30～35 49 1640 .7±710.6 57 .88±22.67 58 .45±24.35＞35～40 48 1704 .7±753.2 58 .35±23.18 56 .59±23.49＞40～50 41 1604 .4±698.5 57 .58±22.56 55 .23±22.59

2.2 患者精漿水平彈性蛋白酶與精子密度關(guān)系分析 在不同精漿彈性硬蛋白酶濃度的患者中，前向運(yùn)動(dòng)精子密度、非前向運(yùn)動(dòng)精子密度和不動(dòng)精子密度比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），且前向運(yùn)動(dòng)精子密度均值均大于30.0×106／mL。見表2。

2.3 患者精漿彈性硬蛋白酶濃度與精子動(dòng)力關(guān)系分析 在不同精漿彈性硬蛋白酶濃度的患者中，前向運(yùn)動(dòng)精子百分比、非前向運(yùn)動(dòng)精子百分比、精子曲線速度和直線速度比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），且前向運(yùn)動(dòng)精子百分比均值均大于42.0%。見表3。

表2 患者精漿彈性硬蛋白酶與精子密度的關(guān)系分析（，×106／mL）

表2 患者精漿彈性硬蛋白酶與精子密度的關(guān)系分析（，×106／mL）

（ng／mL） n 前向運(yùn)動(dòng)精子密度彈性硬蛋白酶不動(dòng)1 000 102 33 .15±12.35 13 .42±5.12 24 .46±8.92 290～1 000 78 30 .51±11.26 12 .18±4.56 22 .29±8.69＜精子密度＞非前向運(yùn)動(dòng)精子密度290 50 31 .26±12.06 14 .21±5.13 24 .23±9.05

表3 患者精漿彈性硬蛋白酶與精子動(dòng)力的關(guān)系分析（）

表3 患者精漿彈性硬蛋白酶與精子動(dòng)力的關(guān)系分析（）

（ng／mL） n 前向運(yùn)動(dòng)精子（%）彈性硬蛋白酶 非前向運(yùn)動(dòng)精子（%）曲線速度（μm／s）直線速度（μm／s）＞1 000 102 43 .8±15.3 15 .24±5.2 43 .6±9.2 28 .3±9.2 290～1 000 78 42 .64±14.9 13 .91±4.8 42 .5±8.9 26 .9±8.1＜290 50 42 .69±14.7 15 .86±4.9 42 .8±8.8 27 .8±7.9

3 討 論

男性不育癥是許多疾病或多種因素造成，而不是一種獨(dú)立的疾病。對(duì)于男性不育的病因并不十分明確。對(duì)于精漿彈性硬蛋白酶是否與精液中各項(xiàng)指標(biāo)具有相關(guān)性存在廣泛爭議。王賀等［6］通過對(duì)患者精漿彈性硬蛋白酶的檢測發(fā)現(xiàn)，精漿彈性硬蛋白酶濃度升高可導(dǎo)致精子活率和活力降低，但不影響精子密度。Moretti等［7］通過對(duì)患者精漿彈性硬蛋白酶的檢測發(fā)現(xiàn)，精漿彈性硬蛋白酶濃度大于1 000 ng／mL組與精漿彈性硬蛋白酶濃度小于290ng／mL組在精子密度、活率、活力及頭部畸形等方面存在明顯差異。與之相反，Eggert－Kruse等［8］研究發(fā)現(xiàn)，不育患者血清及精漿彈性硬蛋白酶濃度與精液各項(xiàng)指標(biāo)及精子功能各項(xiàng)指標(biāo)均無相關(guān)性。Henkel等［9］也得到同樣結(jié)論。本實(shí)驗(yàn)室通過對(duì)生殖科門診就診不孕男性患者精漿彈性硬蛋白酶檢測發(fā)現(xiàn)，不同精漿彈性硬蛋白酶含量患者在精子密度、活率和運(yùn)動(dòng)速度方面差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），與Eggert－Kruse等［9］和 Henkel等［10］的結(jié)論相同。

綜上所述，本研究結(jié)果顯示精漿彈性硬蛋白酶濃度不影響精子的密度、活率及運(yùn)動(dòng)速度。由于本研究未對(duì)精液做病原菌培養(yǎng)和白細(xì)胞計(jì)數(shù)，未能確定精漿彈性硬蛋白酶濃度的升高是否與感染有關(guān)，因此，精漿彈性硬蛋白酶濃度與感染的相關(guān)性有待進(jìn)一步的研究。

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