參芎葡萄糖注射液對移植腎纖維化中轉化生長因子-β1表達水平的影響※

段 斌 職 瑾 裴繼文 職利琴 孫建國

(陜西省人民醫(yī)院腎移植科，陜西 西安 710068)

1 陜西省西安市第一醫(yī)院神經內科，陜西 西安 710002

2 陜西省西安市中醫(yī)醫(yī)院內科，陜西 西安 710001

3 陜西省西安市第五醫(yī)院心內科，陜西 西安 710082

腎小管間質纖維化是指腎小管萎縮和消失，腎間質淋巴和單核細胞浸潤及纖維組織增生。轉化生長因子-β(TGF-β)是一類多功能的多肽類生長因子，由體內分泌的信號分子組成，目前已知約有30多種蛋白，TGF-β除調節(jié)細胞功能外，還參與了細胞發(fā)育和致癌作用，同時是導致體內纖維化最強和最廣泛的介質之一，尤其在肺纖維化、肝纖維化、慢性胰腺炎、硬皮病和腎小球纖維化及放療、化療和組織移植中并發(fā)的多器官纖維化方面，TGF-β均為重要的介質之一。臨床和實驗研究提供的大量證據表明，TGF-β在腎小管間質纖維化發(fā)生機制中起重要作用，因此了解TGF-β的生物學活性及其信號轉導途徑，對腎小管間質纖維化的防治，以及有效延緩腎衰竭的進展有著重要的臨床意義［1］。丹參、川芎對正常人及硬皮病患者成纖維細胞增殖的抑制作用有相似的趨勢，說明它們對成纖維細胞增殖的抑制作用是非特異性的，不僅對病變細胞有抑制作用，對正常細胞也有相同的作用，不僅能抑制成纖維細胞的增殖，同時可以抑制成纖維細胞合成膠原，發(fā)揮抗纖維化作用［2］。2010-10—2012-12，我們采用參芎葡萄糖注射液對移植腎纖維化21例進行干預性治療，結果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 全部21例均為陜西省人民醫(yī)院腎移植科行腎移植術后，經移植腎穿刺檢查證實為慢性纖維化患者。男13例，女8例;年齡24～56歲，中位齡37歲。

1.2 治療方法 均予應用免疫抑制劑、激素沖擊治療、抗感染及維持水、電解質和酸堿平衡等常規(guī)綜合治療，并予參芎葡萄糖注射液(貴州景峰注射劑有限公司，國藥準字H52020703)200 mL，每日1次靜脈滴注，14 d為1個療程，療程間隔10 d，共治療3個療程。

1.3 觀察指標及方法 分別于治療前及治療1、2、3個療程后測定血清 TGF-β1表達水平。抽取外周靜脈血5 mL，分離血清，-20℃保存?zhèn)溆?。血清TGF-β1的測定采用酶聯免疫吸附法(ELISA)，試劑盒選用深圳晶美生物工程技術有限公司，全部操作均按試劑盒說明書進行。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 13統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析，計量資料用均數±標準差(±s)表示，采用非參數秩和檢驗。

2 結果

21例移植腎纖維化治療前及治療1、2、3個療程后血清TGF-β1水平變化比較見表1。

表1 21例移植腎纖維化治療前及治療1、2、3個療程后血清TGF-β1水平變化比較ng/mL，±s

表1 21例移植腎纖維化治療前及治療1、2、3個療程后血清TGF-β1水平變化比較ng/mL，±s

個療程后TGF-β1治療前 治療1個療程后 治療2個療程后 治療3 80.0 ±13.0 68.0 ±11.5 56.8 ±7.3 47.9 ±12.4

經秩和檢驗統(tǒng)計分析，治療1、2、3個療程后血清TGF-β1水平與治療前比較均有明顯降低(P＜0.05)，且隨著治療療程的增加，下降水平越明顯(P＜0.05)。

3 討論

組織纖維化可累及人體幾乎所有器官和系統(tǒng)，其病因眾多，機制復雜，屬于典型的多基因、多表型疾病，是許多不同組織損傷的共同后果，也是嚴重威脅人類健康疾病的基本病理改變?，F代細胞生物學和分子生物學的研究認為，其發(fā)生過程極復雜，是由多種細胞和炎性介質參與的網絡式炎性反應。多年來，人們致力于從各方面了解此網絡，希望為臨床尋找有效的防治措施。目前臨床上常規(guī)的治療手段均收效甚微。纖維化的西醫(yī)治療以腎上腺皮質激素及免疫抑制藥為主，皮質激素可以減少膠原的合成，但它同時也抑制了膠原酶的產生，且長期應用皮質激素可使機體免疫力下降，使隱匿感染灶播散或誘發(fā)新的感染，而嚴重的繼發(fā)感染又是纖維化致死的重要原因。

腎間質纖維化是多種慢性腎臟疾病進展至終末期引起腎衰竭的共同病理改變。間質纖維化的程度對腎臟疾病的預后起著決定性作用，形成的機制尚不完全明確，一般認為與成纖維細胞的過量增殖和細胞外基質(ECM)的過量分泌、異常沉積有關。腎小管間質病變與腎小球濾過率之間均呈高度相關性，腎小管間質纖維化程度預示著腎功能受損嚴重性，決定慢性腎臟疾病患者的預后。在腎臟疾病中，由于殘存腎單位的腎小管代償性耗氧量增加，促進腎小管上皮細胞產生氨和氧自由基增多，可引起補體活化，產生膜攻擊復合物Csb-9，激活腎小管上皮細胞產生細胞因子和膠原，進而導致間質纖維化，在這些細胞因子中，TGF-β1的作用是較明顯的。TGF-β1是一種公認的強烈的促纖維化因子，同時亦是重要的促炎癥因子，它從多個方面促使纖維化的發(fā)生和發(fā)展，低氧、高血糖、高蛋白可直接引起人近端腎小管上皮細胞TGF-β1的表達增加，繼而在腎小管間質纖維化的發(fā)生發(fā)展中多個環(huán)節(jié)起作用。研究表明，TGF-β1主要通過激活Smad通路促進纖維化的發(fā)生和發(fā)展，Smad蛋白在腎臟的固有細胞中普遍表達，而且在多種腎臟纖維化模型中表達增高，間質成纖維細胞在TGF-β1的刺激下能活化為肌成纖維細胞，肌成纖維細胞出現是慢性腎間質纖維化的決定性事件［3］。

參芎葡萄糖注射液是丹參和川芎提取物的復方制劑，主要成分為丹參素和川芎嗪。丹參具有祛瘀止痛、活血通經、清心除煩等功用，相關實驗研究表明，丹參可以減輕心肌、腦缺血再灌注損傷，抑制血小板凝聚和血栓形成［4］，減少α平滑肌肌動蛋白的表達，通過抑制腎小管細胞向肌成纖維細胞轉化，起到延緩腎間質纖維化的作用［5］。川芎具有活血行氣、消散瘀血、祛風止痛的功效，川芎嗪是由川芎的根莖提取的有效成分，相關實驗研究表明，川芎嗪具有抗血小板凝聚、擴張小動脈、改善微循環(huán)、抗氧化、拮抗鈣離子及抗纖維化等作用［6］，能降低血壓，減少腎血管阻力，減輕腎小球代償性增殖肥大，從而延緩腎小球硬化的進程，川芎嗪可抑制成纖維細胞轉化，使肌成纖維細胞的表達減少，從而抑制了腎間質纖維化的形成和發(fā)展［7］。

近年來，丹參聯合川芎治療肝纖維化、肺纖維化及心肌纖維化等方面均有報道，在腎臟纖維化的動物模型試驗中也有驗證，近年因腎源緊缺，臨床工作更傾向于腎移植術后的長期效果及慢性并發(fā)癥的診治。本研究結果表明，采用參芎葡萄糖注射液治療移植腎纖維化具有顯著療效，可有效降低TGF-β1水平，且隨著療程的增加效果更明顯，有效改善移植腎纖維化，使得移植腎達到更好的長期存活。

［1］Kumagai H，Katoh S，Hirosawa K，et al.Renal tubulointerstitial injury in weanling rats with hyperhomocysteinemia［J］.Kidney Int，2002，62(4):1219-1228.

［2］商慶新，張滌生.丹參和川芎嗪對瘢痕成纖維細胞DNA含量及細胞周期進程的影響［J］.中國修復重建外科雜志，1998，12(6):325-328.

［3］Ortega-Velazquez R，Gonzalez-Rubio M，Ruiz-Torres MP，et al.Collagen I upregulates extracellular matrix gene expression and secretion of TGF-beta 1 by cultured human mesangial cells［J］.Am J Physiol Cell Physiol，2004，286(6):C1335-C1343.

［4］張洪波，史華，陳波，等.丹參對大鼠腎缺血再灌注損傷保護作用的實驗研究［J］.中國中醫(yī)藥科技，2002，9(3):148.

［5］林瓊真，于潔，鄧英輝，等.丹參注射液對大鼠梗阻性腎間質纖維化的保護作用［J］.中國中西醫(yī)結合腎病雜志，2003，4(2):71-73.

［6］尚立芝，崔明霞，王建人.川芎嗪預處理對大鼠腎臟缺血再灌注損傷的保護作用［J］.河南醫(yī)學研究，2006，15(3):215-217.

［7］王亞平，李伯祥.川芎嗪防治腎間質纖維化作用的實驗研究［J］.中國中西醫(yī)結合腎病雜志，2002，3(2):77-78.