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    腎臟仿生脈動灌注保存和功能損傷研究

    2014-09-29 15:41:54陳潔毅徐銘恩王玲嚴明郭淼
    科技創(chuàng)新與應用 2014年30期

    陳潔毅+徐銘恩+王玲+嚴明+郭淼

    摘 要:器官智能和便攜保存技術,是延長器官保存時間、運輸距離和提高移植成功率的關鍵。本研究,首先研發(fā)了一套帶多參數實時檢測反饋的腎臟仿生脈動灌注保存系統(tǒng),并基于該系統(tǒng)研究了豬腎在仿生脈動灌注過程中的功能損傷。研究結果證明:通過嵌入式系統(tǒng)動態(tài)仿真反饋調控灌注壓和灌注波形,系統(tǒng)能實現對腎臟的全仿真脈動灌注;多種傳感器可同步監(jiān)測腎臟的生理指標;系統(tǒng)集成度高便攜性強。0到24h的灌注流量結果顯示,待腎臟適應低溫情況后,灌注量保持穩(wěn)定,隨著保存延長灌注量緩慢下降。腎皮質切片結果顯示,相對于單純冷藏保存,仿生脈動灌注保存腎臟中的腎小管損傷較輕,結構保存較為完好。研究證明,腎臟實時反饋仿生脈動灌注保存,可以有效延長器官保存時間,從而增加運輸距離,對我國構建器官捐贈體系具有重要意義。

    關鍵詞:器官移植;器官灌注保存;仿生脈動;腎小管損傷

    引言

    2012年中國“鼓勵公民逝世后捐獻器官”等法律條例頒布,國家人體器官捐獻體系開始建立,全國范圍內的移植器官捐贈、配型、調配運輸工作即將開展。器官智能保存運輸是器官跨醫(yī)院、地區(qū)調配的技術基礎,我國在智能、仿生、便攜器官保存系統(tǒng)的研究和開發(fā)領域的工作急待展開。此外,隨著醫(yī)療水平的提高和人類平均壽命的延長,器官移植的患者數量急劇增加,器官供需失衡的問題也越來越嚴重。缺乏有效的器官保存技術是造成器官浪費,加劇移植器官供需失衡的重要原因之一[1-2]。研究智能、仿生和便攜器官保存系統(tǒng)對提高移植器官質量、降低器官浪費和建立國家器官捐贈移植體系具有重要意義。

    目前技術條件下待移植器官的保存有效時限短,離體腎臟保存時間很難超過24-30h, 肝臟和心臟的有效保存時間更短,而且保存系統(tǒng)復雜龐大,對移植器官的運輸和大范圍調配提出很大挑戰(zhàn)。單純冷凍保存和機械連續(xù)灌流是近三十年來最主要的離體腎臟體外支持方法[3-8]。傳統(tǒng)的冷凍保存方式由于具有方法簡便的優(yōu)點目前仍是臨床供腎保存的主要方法,但是器官在單純冷凍保存模式下的利用率并不高,也無法進行有效的生物修飾[4-5]。機器灌注保存(Continuous Hypothermic Perfusion,CHP)是現有器官體外支持技術的突破,其具有延長腎臟保存時間,提高供腎尤其邊緣供腎的利用率,并能顯著降低移植腎功能恢復延遲(DGF)等技術優(yōu)勢[6-7]。機器灌注保存發(fā)揮優(yōu)勢的關鍵在于如何實現智能化灌注,并盡量模擬腎臟體內生理環(huán)境。

    在原有保存技術的基礎上,文章研制了一套脈動式多參數監(jiān)測的腎臟低溫灌注保存系統(tǒng),系統(tǒng)利用蠕動泵來提供灌注壓,配合多種傳感器配合同步監(jiān)測待移植腎臟的生命指標,通過嵌入式系統(tǒng)動態(tài)仿真反饋精確調控灌注壓和灌注波形,實現對腎臟的全仿真脈動灌注。在該系統(tǒng)上進行了離體豬腎的灌注實驗,研究結果表明相對于傳統(tǒng)的持續(xù)式機器灌注,全仿真脈動灌注能夠更真實模擬主動脈壓力波形,最小程度的減少灌注損傷。

    1 腎臟低溫灌注保存系統(tǒng)設計

    1.1 系統(tǒng)總體結構設計

    多參數脈動式腎臟低溫灌注保存系統(tǒng)的總體結構框架如圖1所示。系統(tǒng)主要由儲腎盒、灌注動力單元、灌注通道、參數監(jiān)測單元、嵌入式控制單元和人機交互6個部分構成。嵌入式控制單元是整個系統(tǒng)智能化運行的核心,主要由STM32F103系列微處理器和驅動電路組成,其作用是接受傳感器檢測的參數和鍵盤輸入,在進行數據分析和處理后向執(zhí)行器和顯示器輸出調節(jié)規(guī)律。參數監(jiān)測單元主要由溫度傳感器、壓力傳感器,液位傳感器、氣泡探測器、流量傳感器組成,作用是實時監(jiān)測器官接受灌注時的各種生理參數,并傳送給微處理器以便響應和控制。儲腎盒的作用是允許腎臟容易且安全地在用于灌注、存儲、分析、運輸該待移植腎臟的設備之間移動。灌注動力單元提供精確調控壓力源和脈動波形調整。通道控制通過控制電磁閥切換不同的灌注回路,用于排除灌注管道內的空氣。人機交互部分的主要功能通過鍵盤鍵入一些參數,如灌注平均壓力值,以及系統(tǒng)能實時通過顯示屏顯示灌注狀態(tài)等。

    1.2 灌注模塊設計

    灌注模塊的原理框圖如圖2所示,該模塊利用直流減速電機作為動力源驅動蠕動泵,利用蠕動泵的滾輪連續(xù)壓動膠管將灌注液壓入腎臟。灌注模塊采用雙通道設計,通過濾器、氣泡檢測器、氣泡緩沖室、雙路電磁夾管閥的組合同時實現灌注液的抽吸、過濾、氧合和去泡功能。灌注有兩種模式:沖洗模式和灌注模式。沖洗模式用于灌注之前排盡管道回路內的氣泡。灌注模式在管道內無氣泡條件下對腎臟的離體灌注保存。兩種模式可手動和自動切換。預留加藥口是為了方便待移植腎臟的生物免疫修飾和提取溶液樣本進行生化檢查。

    圖2 灌注模塊結構原理框圖

    1.3 灌注壓與灌注波形的精確調控

    灌注壓與灌注波形的精確調控是通過反饋控制直流減速電機來實現的。電機采用MOS管驅動橋驅動,驅動橋用PWM波控制,PWM波的占空比即為直流電機在一個周期中通電時間所占的比例。而蠕動泵每轉動一個滾軸,對灌注回路壓入的一個單位的灌注液。因此,通過控制PWM波的頻率以及占空比可以精確的控制灌注管道內的壓力。灌注壓與灌注波形精確調控的反饋控制過程如圖3所示。在灌注開始前,根據不同類型的腎臟設定平均灌注壓力值,該壓力值在嵌入式控制系統(tǒng)內自動對應一個灌注壓力波形F(t),直流電機再根據該波形匹配一定的轉動頻率,同時灌注管道內的壓力傳感器檢測實際灌注壓力F1(t)反饋給微處理器,修正電機轉動頻率,從而實現通道內的灌注壓和灌注波形的全仿真動態(tài)反饋調控,對腎臟進行全仿真脈動灌注。

    圖3 灌注壓與灌注波形的反饋控制原理框圖

    2 系統(tǒng)對豬腎的灌注保存實驗

    腎臟體內的功能為維持水和電解質平衡、過濾血液和排出尿液,故而我們統(tǒng)計腎臟的動脈灌注流量、腎靜脈流出流量和輸尿管分泌的尿液來衡量腎臟在灌注保存期間的功能動態(tài)。腎臟是雙臟器器官,在實驗中,我們同時摘取豬的左右腎,取左腎進行仿生灌注保存,同時,右腎以單純冷藏的方式保存,作為灌注保存的對照實驗。實驗灌流保存豬腎24小時,統(tǒng)計其在0h至24h時間上的灌注的流量變化。在灌注結束后,取灌注保存腎臟和單純冷藏保存腎臟樣品做成切片后在顯微鏡下觀察結構的區(qū)別。endprint

    2.1 實驗材料與方法

    2.1.1 取大小相近健康狀況良好家豬,腹腔切除左右腎臟。腎動脈插管,利用6℃灌注溶液沖洗,沖洗壓力為1.0m至1.2m水柱高度。

    2.1.2 沖洗后取左腎置于6℃灌流液,灌注保存。灌流液均采用美國Organ Recovery Systems公司的UW液,灌注壓力值設為30mmHg,灌注保存24小時。

    2.1.3 作為對照實驗,單純冷藏的腎臟的摘除、沖洗的過程與灌注保存時操作方式一致,只是在沖洗之后不接入仿生脈動灌注保存系統(tǒng),而是以單純冷藏的方式保存在同樣溫度的灌流液環(huán)境中。

    2.1.4 統(tǒng)計灌注保存的腎臟在0h、1h、2h、4h、8h、12h、16h、20h、24h時間上的灌注的流量變化,每個時間節(jié)點重復8次。

    2.1.5 灌注后取腎皮質樣品,用10%甲醛固定,乙醇梯度脫水后,石蠟包埋HE(蘇木精伊紅)染色,利用Olympus CKX41型顯微鏡下觀察腎皮質組織結構變化。

    2.2 實驗結果與分析

    2.2.1 離體腎臟維持24h過程中灌注流量的動態(tài)變化

    灌注過程中,統(tǒng)計腎動脈灌注流入量,腎靜脈流出量和輸尿管的流量,流量單位均為用每克組織每分鐘的灌注量(ml/(min·g)),通過檢測流量的變化了解灌注過程腎功能動態(tài)變化的基本信息。結果進行方差分析處理,p<0.05,具有統(tǒng)計學意義。灌流流量和相對應的腎靜脈、輸尿管流量如表1所示。

    表1 灌流流量表

    圖4 流量折線圖

    腎臟的主要功能是過濾血液和排出尿液,因此腎臟動脈灌入流量,腎臟靜脈輸出流量和輸尿管輸出流量變化是反映腎臟功能的重要指標,隨著腎臟腎小球,腎小管結構的破壞,會造成灌注量下降。0到24h的灌注流量的結果顯示如圖4所示,在0到2小時,灌注量迅速下降;4小時到24小時,灌注量成緩慢下降趨勢,但總體上能夠保持平穩(wěn)。造成這種現象的主要原因是因為,灌注開始時腎臟處于低溫適應階段,灌注流量快速下降。待腎臟適應低溫情況后,灌注量保持穩(wěn)定,隨著灌注保存時間延長,細胞損傷逐漸累加,腎臟腎小球,腎小管結構逐漸破壞,造成灌注量成不斷下降的趨勢。

    2.2.2 灌注與冷藏的組織切片結果對比分析

    組織切片可以直觀反映腎臟腎小球和腎小管結構的改變。圖5、圖6分別為灌注保存24小時的腎皮質組織結構顯微圖和單純冷藏保存腎皮質組織結構顯微圖。圖中,其中深色小球為細胞核,淺色結構為細胞質,白色為組織的細胞間隙。血管壁上皮細胞呈扁平或橢圓形,排列緊密;腎小管上皮細胞核大,呈圓形,在管腔外排列成環(huán)。RT為腎小管,Lu為腎小管管腔,Ve是血管管腔,CV為毛細血管,Gl為腎小球,BC為腎小囊,Gap所指血管與腎小管外周間隙。

    圖5顯示腎小囊和腎小球結構保存良好,腎小管上皮細胞的刷狀緣結構完整,細胞排列整齊,間距小。

    圖6為冷凍保存24小時的腎組織結構圖。腎小管(RT)、腎小管管腔(Lu)受損嚴重,出現大量脫落的絨毛。管腔與周邊組織間隙增大。

    對比圖5、圖6可以看出仿生脈動式灌流保存的腎臟切片中腎小管細胞排列較為整齊,腎小管結構保存較為完好,而單純冷藏保存的腎臟切片顯示腎小管上皮細胞間隙之間的體積逐漸增大。故而認為仿生脈動保存系統(tǒng)對腎小管結構具有良好的保護效果。

    3 結束語

    器官灌流保存技術已有幾十年的發(fā)展歷史,傳統(tǒng)的灌流方式及氣動供能方式使得整個灌流系統(tǒng)體積龐大,操作復雜,運行不夠穩(wěn)定,這些局限性限制了其在臨床上的應用。本研究設計出一種腎臟仿生脈動灌流保存系統(tǒng),能夠更真實模擬主動脈壓力波形,從而最小程度的減少灌注損傷。我們在這套系統(tǒng)的平臺上對豬腎進行了仿生灌注保存實驗,驗證系統(tǒng)在對腎臟離體保存中具有良好的保存效果,并對腎臟功能的動態(tài)變化進行了初步的研究。

    2012年中國“鼓勵公民逝世后捐獻器官”等法律條例頒布,國家人體器官捐獻體系開始建立,全國范圍內的移植器官捐贈、配型、調配和移植的工作即將開展。器官保存系統(tǒng)是器官跨醫(yī)院、地區(qū)調配的技術基礎。希望由我們設計并開發(fā)的這套腎臟仿生脈動灌注保存系統(tǒng)能夠為國家的移植事業(yè)做出應有的貢獻,我們也希望越來越多的有志之士能夠參與到腎臟移植的相關研究上來。

    參考文獻

    [1]殷勝勇,葛霽光,郭淼,等.長期灌流維持腎臟功能損傷的內在機理研究[J].浙江大學學報(工學版),2006,40(8):1339-1343.DOI:10.3785/j.issn.1008-973X.2006.08.011.

    [2]徐秋萍,陳周聞,殷勝勇,等.離體貓腎人工生命維持系統(tǒng)的建立[J].中國病理生理,2005,21(9):1870-1872.

    [3]徐嘯,馬潞林.供腎的機器灌注保存及 LifePort腎轉運器簡介[J].中華器官移植,2009,30(9):572-573.DOI:10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2009.09.019.

    [4]王小波,夏全剛,宋曉燕,等.一種新型器官保存裝置的設計[J].低溫與超導,2012,40(4):63-65.DOI:10.3969/j.issn.1001-7100.2012.04.0

    15.

    [5]郭明曉.器官保存研究進展及展望[J].醫(yī)學研究生學報,2011,24(11):1216-1221.DOI:10.3969/j.issn.1008-8199.2011.11.025.

    [6]趙聞雨,曾力,朱有華等.器官保存技術新進展[J].中華移植(電子版),2011,5(3):41-44.DOI:10.3877/cma.j.issn.1647-3903.2011.03.012.

    [7]J.F.McAnulty. Hypothermic organ preservation by static storage methods: Current status and a view to the future.Cryobiology,60(2010),pp.S13-S19.endprint

    2.1 實驗材料與方法

    2.1.1 取大小相近健康狀況良好家豬,腹腔切除左右腎臟。腎動脈插管,利用6℃灌注溶液沖洗,沖洗壓力為1.0m至1.2m水柱高度。

    2.1.2 沖洗后取左腎置于6℃灌流液,灌注保存。灌流液均采用美國Organ Recovery Systems公司的UW液,灌注壓力值設為30mmHg,灌注保存24小時。

    2.1.3 作為對照實驗,單純冷藏的腎臟的摘除、沖洗的過程與灌注保存時操作方式一致,只是在沖洗之后不接入仿生脈動灌注保存系統(tǒng),而是以單純冷藏的方式保存在同樣溫度的灌流液環(huán)境中。

    2.1.4 統(tǒng)計灌注保存的腎臟在0h、1h、2h、4h、8h、12h、16h、20h、24h時間上的灌注的流量變化,每個時間節(jié)點重復8次。

    2.1.5 灌注后取腎皮質樣品,用10%甲醛固定,乙醇梯度脫水后,石蠟包埋HE(蘇木精伊紅)染色,利用Olympus CKX41型顯微鏡下觀察腎皮質組織結構變化。

    2.2 實驗結果與分析

    2.2.1 離體腎臟維持24h過程中灌注流量的動態(tài)變化

    灌注過程中,統(tǒng)計腎動脈灌注流入量,腎靜脈流出量和輸尿管的流量,流量單位均為用每克組織每分鐘的灌注量(ml/(min·g)),通過檢測流量的變化了解灌注過程腎功能動態(tài)變化的基本信息。結果進行方差分析處理,p<0.05,具有統(tǒng)計學意義。灌流流量和相對應的腎靜脈、輸尿管流量如表1所示。

    表1 灌流流量表

    圖4 流量折線圖

    腎臟的主要功能是過濾血液和排出尿液,因此腎臟動脈灌入流量,腎臟靜脈輸出流量和輸尿管輸出流量變化是反映腎臟功能的重要指標,隨著腎臟腎小球,腎小管結構的破壞,會造成灌注量下降。0到24h的灌注流量的結果顯示如圖4所示,在0到2小時,灌注量迅速下降;4小時到24小時,灌注量成緩慢下降趨勢,但總體上能夠保持平穩(wěn)。造成這種現象的主要原因是因為,灌注開始時腎臟處于低溫適應階段,灌注流量快速下降。待腎臟適應低溫情況后,灌注量保持穩(wěn)定,隨著灌注保存時間延長,細胞損傷逐漸累加,腎臟腎小球,腎小管結構逐漸破壞,造成灌注量成不斷下降的趨勢。

    2.2.2 灌注與冷藏的組織切片結果對比分析

    組織切片可以直觀反映腎臟腎小球和腎小管結構的改變。圖5、圖6分別為灌注保存24小時的腎皮質組織結構顯微圖和單純冷藏保存腎皮質組織結構顯微圖。圖中,其中深色小球為細胞核,淺色結構為細胞質,白色為組織的細胞間隙。血管壁上皮細胞呈扁平或橢圓形,排列緊密;腎小管上皮細胞核大,呈圓形,在管腔外排列成環(huán)。RT為腎小管,Lu為腎小管管腔,Ve是血管管腔,CV為毛細血管,Gl為腎小球,BC為腎小囊,Gap所指血管與腎小管外周間隙。

    圖5顯示腎小囊和腎小球結構保存良好,腎小管上皮細胞的刷狀緣結構完整,細胞排列整齊,間距小。

    圖6為冷凍保存24小時的腎組織結構圖。腎小管(RT)、腎小管管腔(Lu)受損嚴重,出現大量脫落的絨毛。管腔與周邊組織間隙增大。

    對比圖5、圖6可以看出仿生脈動式灌流保存的腎臟切片中腎小管細胞排列較為整齊,腎小管結構保存較為完好,而單純冷藏保存的腎臟切片顯示腎小管上皮細胞間隙之間的體積逐漸增大。故而認為仿生脈動保存系統(tǒng)對腎小管結構具有良好的保護效果。

    3 結束語

    器官灌流保存技術已有幾十年的發(fā)展歷史,傳統(tǒng)的灌流方式及氣動供能方式使得整個灌流系統(tǒng)體積龐大,操作復雜,運行不夠穩(wěn)定,這些局限性限制了其在臨床上的應用。本研究設計出一種腎臟仿生脈動灌流保存系統(tǒng),能夠更真實模擬主動脈壓力波形,從而最小程度的減少灌注損傷。我們在這套系統(tǒng)的平臺上對豬腎進行了仿生灌注保存實驗,驗證系統(tǒng)在對腎臟離體保存中具有良好的保存效果,并對腎臟功能的動態(tài)變化進行了初步的研究。

    2012年中國“鼓勵公民逝世后捐獻器官”等法律條例頒布,國家人體器官捐獻體系開始建立,全國范圍內的移植器官捐贈、配型、調配和移植的工作即將開展。器官保存系統(tǒng)是器官跨醫(yī)院、地區(qū)調配的技術基礎。希望由我們設計并開發(fā)的這套腎臟仿生脈動灌注保存系統(tǒng)能夠為國家的移植事業(yè)做出應有的貢獻,我們也希望越來越多的有志之士能夠參與到腎臟移植的相關研究上來。

    參考文獻

    [1]殷勝勇,葛霽光,郭淼,等.長期灌流維持腎臟功能損傷的內在機理研究[J].浙江大學學報(工學版),2006,40(8):1339-1343.DOI:10.3785/j.issn.1008-973X.2006.08.011.

    [2]徐秋萍,陳周聞,殷勝勇,等.離體貓腎人工生命維持系統(tǒng)的建立[J].中國病理生理,2005,21(9):1870-1872.

    [3]徐嘯,馬潞林.供腎的機器灌注保存及 LifePort腎轉運器簡介[J].中華器官移植,2009,30(9):572-573.DOI:10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2009.09.019.

    [4]王小波,夏全剛,宋曉燕,等.一種新型器官保存裝置的設計[J].低溫與超導,2012,40(4):63-65.DOI:10.3969/j.issn.1001-7100.2012.04.0

    15.

    [5]郭明曉.器官保存研究進展及展望[J].醫(yī)學研究生學報,2011,24(11):1216-1221.DOI:10.3969/j.issn.1008-8199.2011.11.025.

    [6]趙聞雨,曾力,朱有華等.器官保存技術新進展[J].中華移植(電子版),2011,5(3):41-44.DOI:10.3877/cma.j.issn.1647-3903.2011.03.012.

    [7]J.F.McAnulty. Hypothermic organ preservation by static storage methods: Current status and a view to the future.Cryobiology,60(2010),pp.S13-S19.endprint

    2.1 實驗材料與方法

    2.1.1 取大小相近健康狀況良好家豬,腹腔切除左右腎臟。腎動脈插管,利用6℃灌注溶液沖洗,沖洗壓力為1.0m至1.2m水柱高度。

    2.1.2 沖洗后取左腎置于6℃灌流液,灌注保存。灌流液均采用美國Organ Recovery Systems公司的UW液,灌注壓力值設為30mmHg,灌注保存24小時。

    2.1.3 作為對照實驗,單純冷藏的腎臟的摘除、沖洗的過程與灌注保存時操作方式一致,只是在沖洗之后不接入仿生脈動灌注保存系統(tǒng),而是以單純冷藏的方式保存在同樣溫度的灌流液環(huán)境中。

    2.1.4 統(tǒng)計灌注保存的腎臟在0h、1h、2h、4h、8h、12h、16h、20h、24h時間上的灌注的流量變化,每個時間節(jié)點重復8次。

    2.1.5 灌注后取腎皮質樣品,用10%甲醛固定,乙醇梯度脫水后,石蠟包埋HE(蘇木精伊紅)染色,利用Olympus CKX41型顯微鏡下觀察腎皮質組織結構變化。

    2.2 實驗結果與分析

    2.2.1 離體腎臟維持24h過程中灌注流量的動態(tài)變化

    灌注過程中,統(tǒng)計腎動脈灌注流入量,腎靜脈流出量和輸尿管的流量,流量單位均為用每克組織每分鐘的灌注量(ml/(min·g)),通過檢測流量的變化了解灌注過程腎功能動態(tài)變化的基本信息。結果進行方差分析處理,p<0.05,具有統(tǒng)計學意義。灌流流量和相對應的腎靜脈、輸尿管流量如表1所示。

    表1 灌流流量表

    圖4 流量折線圖

    腎臟的主要功能是過濾血液和排出尿液,因此腎臟動脈灌入流量,腎臟靜脈輸出流量和輸尿管輸出流量變化是反映腎臟功能的重要指標,隨著腎臟腎小球,腎小管結構的破壞,會造成灌注量下降。0到24h的灌注流量的結果顯示如圖4所示,在0到2小時,灌注量迅速下降;4小時到24小時,灌注量成緩慢下降趨勢,但總體上能夠保持平穩(wěn)。造成這種現象的主要原因是因為,灌注開始時腎臟處于低溫適應階段,灌注流量快速下降。待腎臟適應低溫情況后,灌注量保持穩(wěn)定,隨著灌注保存時間延長,細胞損傷逐漸累加,腎臟腎小球,腎小管結構逐漸破壞,造成灌注量成不斷下降的趨勢。

    2.2.2 灌注與冷藏的組織切片結果對比分析

    組織切片可以直觀反映腎臟腎小球和腎小管結構的改變。圖5、圖6分別為灌注保存24小時的腎皮質組織結構顯微圖和單純冷藏保存腎皮質組織結構顯微圖。圖中,其中深色小球為細胞核,淺色結構為細胞質,白色為組織的細胞間隙。血管壁上皮細胞呈扁平或橢圓形,排列緊密;腎小管上皮細胞核大,呈圓形,在管腔外排列成環(huán)。RT為腎小管,Lu為腎小管管腔,Ve是血管管腔,CV為毛細血管,Gl為腎小球,BC為腎小囊,Gap所指血管與腎小管外周間隙。

    圖5顯示腎小囊和腎小球結構保存良好,腎小管上皮細胞的刷狀緣結構完整,細胞排列整齊,間距小。

    圖6為冷凍保存24小時的腎組織結構圖。腎小管(RT)、腎小管管腔(Lu)受損嚴重,出現大量脫落的絨毛。管腔與周邊組織間隙增大。

    對比圖5、圖6可以看出仿生脈動式灌流保存的腎臟切片中腎小管細胞排列較為整齊,腎小管結構保存較為完好,而單純冷藏保存的腎臟切片顯示腎小管上皮細胞間隙之間的體積逐漸增大。故而認為仿生脈動保存系統(tǒng)對腎小管結構具有良好的保護效果。

    3 結束語

    器官灌流保存技術已有幾十年的發(fā)展歷史,傳統(tǒng)的灌流方式及氣動供能方式使得整個灌流系統(tǒng)體積龐大,操作復雜,運行不夠穩(wěn)定,這些局限性限制了其在臨床上的應用。本研究設計出一種腎臟仿生脈動灌流保存系統(tǒng),能夠更真實模擬主動脈壓力波形,從而最小程度的減少灌注損傷。我們在這套系統(tǒng)的平臺上對豬腎進行了仿生灌注保存實驗,驗證系統(tǒng)在對腎臟離體保存中具有良好的保存效果,并對腎臟功能的動態(tài)變化進行了初步的研究。

    2012年中國“鼓勵公民逝世后捐獻器官”等法律條例頒布,國家人體器官捐獻體系開始建立,全國范圍內的移植器官捐贈、配型、調配和移植的工作即將開展。器官保存系統(tǒng)是器官跨醫(yī)院、地區(qū)調配的技術基礎。希望由我們設計并開發(fā)的這套腎臟仿生脈動灌注保存系統(tǒng)能夠為國家的移植事業(yè)做出應有的貢獻,我們也希望越來越多的有志之士能夠參與到腎臟移植的相關研究上來。

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