不同真菌菌株對(duì)蠐螬的毒力測(cè)定

章駿

摘要：選擇幾種真菌的不同菌株及其混合物對(duì)蠐螬進(jìn)行毒力測(cè)定。結(jié)果表明，綠僵菌Ma1較其它菌株校正累積死亡率最高，致死速度最快，平均累計(jì)校正死亡率達(dá)62.50%，LT50為10.31d，在花生蠐螬的防治上具有較大的應(yīng)用價(jià)值。

關(guān)鍵詞：綠僵菌；蠐螬；防治；毒力測(cè)定

中圖分類(lèi)號(hào)S476.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1007-7731（2014）13-29-02

蠐螬（Anmala cuprea）是鞘翅目金龜甲幼蟲(chóng)的總稱(chēng)，是我國(guó)地下害蟲(chóng)分布最廣、為害最重的一類(lèi)害蟲(chóng)，主要為害花生、大豆、麥類(lèi)、高粱、玉米、甘蔗、棉花等多種大田作物，以及一些中藥材等，其中以為害花生較為嚴(yán)重，嚴(yán)重時(shí)造成作物顆粒無(wú)收［1］。長(zhǎng)期以來(lái)，主要依賴化學(xué)農(nóng)藥防治該害蟲(chóng)，易使其產(chǎn)生抗性，并且造成土壤中農(nóng)藥殘留，導(dǎo)致作物產(chǎn)品農(nóng)藥含量超標(biāo)，使花生有異味，影響到出口創(chuàng)匯及人體健康。為此，筆者選用幾種真菌的不同菌株及其混合物，分別對(duì)蠐螬進(jìn)行毒力測(cè)定，以期篩選出對(duì)蠐螬具有高毒力的菌株。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試蟲(chóng)源 蠐螬幼蟲(chóng)是5月上旬從安徽省廬江縣采集的越冬幼蟲(chóng)，室內(nèi)飼養(yǎng)數(shù)天，挑選大小均勻且健康的個(gè)體備用。

1.1.2 供試菌種 菌種為安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)植保學(xué)院生防研究室儲(chǔ)存菌種，編號(hào)分別為Ma1、Bbr84、Ma2、Ma3、Ma4。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 菌劑的制備 培養(yǎng)采用薩氏葡萄糖酵母浸膏培養(yǎng)基（SDAY）、蛋白胨馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PPDA）和察氏瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)（Czapek），置于光照培養(yǎng)箱內(nèi)26℃下恒溫培養(yǎng)15d后，放入冰箱低溫（4℃）保存?zhèn)溆谩Ｓ脽o(wú)菌的塑料藥匙將真菌的分生孢子粉刮到一個(gè)干凈的盛有10mL0.05%Tween-80潤(rùn)濕劑的三角瓶中，在渦旋振蕩器上充分振蕩（10min左右），然后按比例稀釋?zhuān)?jīng)血球計(jì)數(shù)板測(cè)定每mL孢子數(shù)，通過(guò)計(jì)算把各菌的孢子懸浮液濃度配成基本一致，即1.0×108孢子/mL，以測(cè)定致死中時(shí)（LT50），比較各菌種間的毒力［2］。

1.2.2 測(cè)定方法 用毛筆將蠐螬3齡幼蟲(chóng)挑起，在盛有孢子懸浮液的培養(yǎng)皿中浸蘸一下（約3～5s），而后迅速取出，置于潔凈濾紙上，任其爬行，片刻后，移入潔凈的小指型管（1cm×8cm）中單頭飼養(yǎng)。為了避免相互殘殺，每管放一小塊人工飼料。養(yǎng)蟲(chóng)器皿事先在1%甲醛液中浸泡片刻，取出后涼干備用。不同處理用不同毛筆，避免不同菌株之間相互干擾，影響試驗(yàn)結(jié)果。以0.05%吐溫水為對(duì)照，共設(shè)7個(gè)處理，重復(fù)3次，每處理試蟲(chóng)數(shù)30頭。試驗(yàn)每天定時(shí)觀察一次直至化蛹，每次記下死蟲(chóng)數(shù)，并及時(shí)將蟲(chóng)尸移出。蟲(chóng)尸在26℃保濕培養(yǎng)（相對(duì)濕度大于90%）觀察是否有僵蟲(chóng)出現(xiàn)，統(tǒng)計(jì)僵蟲(chóng)率。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理 計(jì)算公式如下：每mL孢子總量=平均每小格孢子數(shù)×4×106×稀釋倍數(shù)；累積死亡率（%）=（處理的總死蟲(chóng)數(shù)×100）/處理的總蟲(chóng)數(shù)；累積校正死亡率（%）=（處理組累積死亡率-對(duì)照組累積死亡率）/（1-對(duì)照組累積死亡率）；僵蟲(chóng)率（%）=僵蟲(chóng)數(shù)×100/總死亡蟲(chóng)數(shù)。

以LT50、校正死亡率及僵蟲(chóng)率作為分析毒力的指標(biāo)，將觀察時(shí)間分為間隔相等的時(shí)間區(qū)段，分別統(tǒng)計(jì)整理每個(gè)時(shí)間區(qū)段內(nèi)的累積死亡率，并校正，以時(shí)間（d）的對(duì)數(shù)值為X，死亡率的機(jī)率值為Y，采用機(jī)率值分析法（Doberski，J.W.1981）算出毒力回歸方程和致死中時(shí)（LT50）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同真菌菌株對(duì)蠐螬的致病效果 由表1可知，幾種真菌的不同菌株及其混合物對(duì)蠐螬均有不同程度的致病性，但致死率表現(xiàn)出明顯差異。Ma1、Bbr84、Bb84r+Ma4、Ma3、Ma2及Bbr84+Ma3校正累積死亡率分別為62.50%、50.00%、43.75%、43.75%、37.50%和24.98%，致死中時(shí)LT50分別為10.31d、15.06d、15.30d、15.65d、15.40d和27.56d。其中綠僵菌Ma1校正累積死亡率最高，達(dá)到了62.50%，而其它處理都≤50.00%，差異極顯著；同時(shí)綠僵菌Ma1致死中時(shí)LT50最小，為10.31d，而其它處理都＞15d，由此可見(jiàn)綠僵菌Ma1的致病力最強(qiáng)。 表1 不同真菌對(duì)蠐螬3齡幼蟲(chóng)的致病效果及僵蟲(chóng)率

[處理&累積死亡率（%）&校正累計(jì)

死亡率（%）&差異顯著性&回歸方程&相關(guān)系數(shù)

r& 致死中時(shí)

LT50（d）&僵蟲(chóng)率

（%）&0.05&0.01&Ma1&66.67&62.50&a&A&Y=7.912 35-2.874 40x&0.993 81&10.31&66.64&Bbr84&55.56&50.00&b&B&Y=8.167 74-2.689 32x&0.985 38&15.06&56.23&Bbr84+Ma4&50.00&43.75&c&BC&Y=8.078 05-2.591 80x&0.967 44&15.30&58.78&Ma3&50.00&43.75&c&BC&Y=7.737 21-2.291 35x&0.988 16&15.65&46.64&Ma2&44.44&37.50&d&C&Y=8.323 49-2.798 60x&0.927 23&15.40&52.12&Bbr84+Ma3&33.33&24.98&e&D&Y=7.538 93-1.762 76x&0.984 51&27.56&49.87&ck&11.11&&&&&&&&]

2.2 不同真菌的僵蟲(chóng)率 在濃度為1.0×108孢子/mL時(shí)，各處理死亡幼蟲(chóng)24h后均出現(xiàn)僵蟲(chóng)，Ma1、Bbr84、Bb84r+Ma4、Ma3、Ma2及Bbr84+Ma3僵蟲(chóng)率分別為66.64%、56.23%、58.78%、46.64%、52.12%和49.87%，其中Ma1僵蟲(chóng)率最高，達(dá)到66.64%，而其它處理的僵蟲(chóng)率均在60%以下（表1）。說(shuō)明各供試真菌菌株都能侵染致死蠐螬3齡幼蟲(chóng)，而Ma1表現(xiàn)出對(duì)蠐螬明顯的高毒力。

3 小結(jié)與討論

化學(xué)農(nóng)藥的長(zhǎng)期施用造成大面積土壤和農(nóng)作物污染，并對(duì)人畜產(chǎn)生危害，而生物防治以其獨(dú)特的優(yōu)越性，在世界范圍得以迅速應(yīng)用［3-4］。為了探索蠐螬的無(wú)公害防治措施，開(kāi)發(fā)利用昆蟲(chóng)病原真菌資源，本文選用幾種真菌的不同菌株及其混合物對(duì)蠐螬進(jìn)行毒力測(cè)定，篩選出對(duì)蠐螬高毒力綠僵菌Ma1菌株，其致死率和致死速度均明顯高于其它處理，在花生蠐螬的防治上具有較大的應(yīng)用價(jià)值。

本次篩選的菌株及其混合物的數(shù)量較少，建議擴(kuò)大菌株篩選范圍。同時(shí)毒力測(cè)定是在室內(nèi)人為控制的條件下進(jìn)行的，而田間防效則受到溫濕度等各種環(huán)境因子的影響，因此要運(yùn)用于實(shí)際生產(chǎn)中，仍需要進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

［1］魏鴻鈞，張子良.中國(guó)地下害蟲(chóng)［M］.上海：上?？萍汲霭嫔?，1989.

［2］浦蟄龍，李增智.昆蟲(chóng)真菌學(xué)［M］.合肥：安徽科技出版社，1996.

［3］張克勤.我國(guó)殺蟲(chóng)真菌的研究現(xiàn)狀與展望［J］.植物保護(hù)，1996，22（1）：43-46.

［4］謝明杰，宋玉媛，曹文偉，等.微生物殺蟲(chóng)劑應(yīng)用的研究進(jìn)展［J］.遼寧師范大學(xué)學(xué)報(bào)，1998，21（4）：226-229.（責(zé)編：張宏民）

endprint

摘要：選擇幾種真菌的不同菌株及其混合物對(duì)蠐螬進(jìn)行毒力測(cè)定。結(jié)果表明，綠僵菌Ma1較其它菌株校正累積死亡率最高，致死速度最快，平均累計(jì)校正死亡率達(dá)62.50%，LT50為10.31d，在花生蠐螬的防治上具有較大的應(yīng)用價(jià)值。

關(guān)鍵詞：綠僵菌；蠐螬；防治；毒力測(cè)定

中圖分類(lèi)號(hào)S476.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1007-7731（2014）13-29-02

蠐螬（Anmala cuprea）是鞘翅目金龜甲幼蟲(chóng)的總稱(chēng)，是我國(guó)地下害蟲(chóng)分布最廣、為害最重的一類(lèi)害蟲(chóng)，主要為害花生、大豆、麥類(lèi)、高粱、玉米、甘蔗、棉花等多種大田作物，以及一些中藥材等，其中以為害花生較為嚴(yán)重，嚴(yán)重時(shí)造成作物顆粒無(wú)收［1］。長(zhǎng)期以來(lái)，主要依賴化學(xué)農(nóng)藥防治該害蟲(chóng)，易使其產(chǎn)生抗性，并且造成土壤中農(nóng)藥殘留，導(dǎo)致作物產(chǎn)品農(nóng)藥含量超標(biāo)，使花生有異味，影響到出口創(chuàng)匯及人體健康。為此，筆者選用幾種真菌的不同菌株及其混合物，分別對(duì)蠐螬進(jìn)行毒力測(cè)定，以期篩選出對(duì)蠐螬具有高毒力的菌株。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試蟲(chóng)源 蠐螬幼蟲(chóng)是5月上旬從安徽省廬江縣采集的越冬幼蟲(chóng)，室內(nèi)飼養(yǎng)數(shù)天，挑選大小均勻且健康的個(gè)體備用。

1.1.2 供試菌種 菌種為安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)植保學(xué)院生防研究室儲(chǔ)存菌種，編號(hào)分別為Ma1、Bbr84、Ma2、Ma3、Ma4。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 菌劑的制備 培養(yǎng)采用薩氏葡萄糖酵母浸膏培養(yǎng)基（SDAY）、蛋白胨馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PPDA）和察氏瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)（Czapek），置于光照培養(yǎng)箱內(nèi)26℃下恒溫培養(yǎng)15d后，放入冰箱低溫（4℃）保存?zhèn)溆?。用無(wú)菌的塑料藥匙將真菌的分生孢子粉刮到一個(gè)干凈的盛有10mL0.05%Tween-80潤(rùn)濕劑的三角瓶中，在渦旋振蕩器上充分振蕩（10min左右），然后按比例稀釋?zhuān)?jīng)血球計(jì)數(shù)板測(cè)定每mL孢子數(shù)，通過(guò)計(jì)算把各菌的孢子懸浮液濃度配成基本一致，即1.0×108孢子/mL，以測(cè)定致死中時(shí)（LT50），比較各菌種間的毒力［2］。

1.2.2 測(cè)定方法 用毛筆將蠐螬3齡幼蟲(chóng)挑起，在盛有孢子懸浮液的培養(yǎng)皿中浸蘸一下（約3～5s），而后迅速取出，置于潔凈濾紙上，任其爬行，片刻后，移入潔凈的小指型管（1cm×8cm）中單頭飼養(yǎng)。為了避免相互殘殺，每管放一小塊人工飼料。養(yǎng)蟲(chóng)器皿事先在1%甲醛液中浸泡片刻，取出后涼干備用。不同處理用不同毛筆，避免不同菌株之間相互干擾，影響試驗(yàn)結(jié)果。以0.05%吐溫水為對(duì)照，共設(shè)7個(gè)處理，重復(fù)3次，每處理試蟲(chóng)數(shù)30頭。試驗(yàn)每天定時(shí)觀察一次直至化蛹，每次記下死蟲(chóng)數(shù)，并及時(shí)將蟲(chóng)尸移出。蟲(chóng)尸在26℃保濕培養(yǎng)（相對(duì)濕度大于90%）觀察是否有僵蟲(chóng)出現(xiàn)，統(tǒng)計(jì)僵蟲(chóng)率。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理 計(jì)算公式如下：每mL孢子總量=平均每小格孢子數(shù)×4×106×稀釋倍數(shù)；累積死亡率（%）=（處理的總死蟲(chóng)數(shù)×100）/處理的總蟲(chóng)數(shù)；累積校正死亡率（%）=（處理組累積死亡率-對(duì)照組累積死亡率）/（1-對(duì)照組累積死亡率）；僵蟲(chóng)率（%）=僵蟲(chóng)數(shù)×100/總死亡蟲(chóng)數(shù)。

以LT50、校正死亡率及僵蟲(chóng)率作為分析毒力的指標(biāo)，將觀察時(shí)間分為間隔相等的時(shí)間區(qū)段，分別統(tǒng)計(jì)整理每個(gè)時(shí)間區(qū)段內(nèi)的累積死亡率，并校正，以時(shí)間（d）的對(duì)數(shù)值為X，死亡率的機(jī)率值為Y，采用機(jī)率值分析法（Doberski，J.W.1981）算出毒力回歸方程和致死中時(shí)（LT50）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同真菌菌株對(duì)蠐螬的致病效果 由表1可知，幾種真菌的不同菌株及其混合物對(duì)蠐螬均有不同程度的致病性，但致死率表現(xiàn)出明顯差異。Ma1、Bbr84、Bb84r+Ma4、Ma3、Ma2及Bbr84+Ma3校正累積死亡率分別為62.50%、50.00%、43.75%、43.75%、37.50%和24.98%，致死中時(shí)LT50分別為10.31d、15.06d、15.30d、15.65d、15.40d和27.56d。其中綠僵菌Ma1校正累積死亡率最高，達(dá)到了62.50%，而其它處理都≤50.00%，差異極顯著；同時(shí)綠僵菌Ma1致死中時(shí)LT50最小，為10.31d，而其它處理都＞15d，由此可見(jiàn)綠僵菌Ma1的致病力最強(qiáng)。 表1 不同真菌對(duì)蠐螬3齡幼蟲(chóng)的致病效果及僵蟲(chóng)率

[處理&累積死亡率（%）&校正累計(jì)

死亡率（%）&差異顯著性&回歸方程&相關(guān)系數(shù)

r& 致死中時(shí)

LT50（d）&僵蟲(chóng)率

（%）&0.05&0.01&Ma1&66.67&62.50&a&A&Y=7.912 35-2.874 40x&0.993 81&10.31&66.64&Bbr84&55.56&50.00&b&B&Y=8.167 74-2.689 32x&0.985 38&15.06&56.23&Bbr84+Ma4&50.00&43.75&c&BC&Y=8.078 05-2.591 80x&0.967 44&15.30&58.78&Ma3&50.00&43.75&c&BC&Y=7.737 21-2.291 35x&0.988 16&15.65&46.64&Ma2&44.44&37.50&d&C&Y=8.323 49-2.798 60x&0.927 23&15.40&52.12&Bbr84+Ma3&33.33&24.98&e&D&Y=7.538 93-1.762 76x&0.984 51&27.56&49.87&ck&11.11&&&&&&&&]

2.2 不同真菌的僵蟲(chóng)率 在濃度為1.0×108孢子/mL時(shí)，各處理死亡幼蟲(chóng)24h后均出現(xiàn)僵蟲(chóng)，Ma1、Bbr84、Bb84r+Ma4、Ma3、Ma2及Bbr84+Ma3僵蟲(chóng)率分別為66.64%、56.23%、58.78%、46.64%、52.12%和49.87%，其中Ma1僵蟲(chóng)率最高，達(dá)到66.64%，而其它處理的僵蟲(chóng)率均在60%以下（表1）。說(shuō)明各供試真菌菌株都能侵染致死蠐螬3齡幼蟲(chóng)，而Ma1表現(xiàn)出對(duì)蠐螬明顯的高毒力。

3 小結(jié)與討論

化學(xué)農(nóng)藥的長(zhǎng)期施用造成大面積土壤和農(nóng)作物污染，并對(duì)人畜產(chǎn)生危害，而生物防治以其獨(dú)特的優(yōu)越性，在世界范圍得以迅速應(yīng)用［3-4］。為了探索蠐螬的無(wú)公害防治措施，開(kāi)發(fā)利用昆蟲(chóng)病原真菌資源，本文選用幾種真菌的不同菌株及其混合物對(duì)蠐螬進(jìn)行毒力測(cè)定，篩選出對(duì)蠐螬高毒力綠僵菌Ma1菌株，其致死率和致死速度均明顯高于其它處理，在花生蠐螬的防治上具有較大的應(yīng)用價(jià)值。

本次篩選的菌株及其混合物的數(shù)量較少，建議擴(kuò)大菌株篩選范圍。同時(shí)毒力測(cè)定是在室內(nèi)人為控制的條件下進(jìn)行的，而田間防效則受到溫濕度等各種環(huán)境因子的影響，因此要運(yùn)用于實(shí)際生產(chǎn)中，仍需要進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

［1］魏鴻鈞，張子良.中國(guó)地下害蟲(chóng)［M］.上海：上?？萍汲霭嫔纾?989.

［2］浦蟄龍，李增智.昆蟲(chóng)真菌學(xué)［M］.合肥：安徽科技出版社，1996.

［3］張克勤.我國(guó)殺蟲(chóng)真菌的研究現(xiàn)狀與展望［J］.植物保護(hù)，1996，22（1）：43-46.

［4］謝明杰，宋玉媛，曹文偉，等.微生物殺蟲(chóng)劑應(yīng)用的研究進(jìn)展［J］.遼寧師范大學(xué)學(xué)報(bào)，1998，21（4）：226-229.（責(zé)編：張宏民）

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摘要：選擇幾種真菌的不同菌株及其混合物對(duì)蠐螬進(jìn)行毒力測(cè)定。結(jié)果表明，綠僵菌Ma1較其它菌株校正累積死亡率最高，致死速度最快，平均累計(jì)校正死亡率達(dá)62.50%，LT50為10.31d，在花生蠐螬的防治上具有較大的應(yīng)用價(jià)值。

關(guān)鍵詞：綠僵菌；蠐螬；防治；毒力測(cè)定

中圖分類(lèi)號(hào)S476.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1007-7731（2014）13-29-02

蠐螬（Anmala cuprea）是鞘翅目金龜甲幼蟲(chóng)的總稱(chēng)，是我國(guó)地下害蟲(chóng)分布最廣、為害最重的一類(lèi)害蟲(chóng)，主要為害花生、大豆、麥類(lèi)、高粱、玉米、甘蔗、棉花等多種大田作物，以及一些中藥材等，其中以為害花生較為嚴(yán)重，嚴(yán)重時(shí)造成作物顆粒無(wú)收［1］。長(zhǎng)期以來(lái)，主要依賴化學(xué)農(nóng)藥防治該害蟲(chóng)，易使其產(chǎn)生抗性，并且造成土壤中農(nóng)藥殘留，導(dǎo)致作物產(chǎn)品農(nóng)藥含量超標(biāo)，使花生有異味，影響到出口創(chuàng)匯及人體健康。為此，筆者選用幾種真菌的不同菌株及其混合物，分別對(duì)蠐螬進(jìn)行毒力測(cè)定，以期篩選出對(duì)蠐螬具有高毒力的菌株。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試蟲(chóng)源 蠐螬幼蟲(chóng)是5月上旬從安徽省廬江縣采集的越冬幼蟲(chóng)，室內(nèi)飼養(yǎng)數(shù)天，挑選大小均勻且健康的個(gè)體備用。

1.1.2 供試菌種 菌種為安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)植保學(xué)院生防研究室儲(chǔ)存菌種，編號(hào)分別為Ma1、Bbr84、Ma2、Ma3、Ma4。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 菌劑的制備 培養(yǎng)采用薩氏葡萄糖酵母浸膏培養(yǎng)基（SDAY）、蛋白胨馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PPDA）和察氏瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)（Czapek），置于光照培養(yǎng)箱內(nèi)26℃下恒溫培養(yǎng)15d后，放入冰箱低溫（4℃）保存?zhèn)溆?。用無(wú)菌的塑料藥匙將真菌的分生孢子粉刮到一個(gè)干凈的盛有10mL0.05%Tween-80潤(rùn)濕劑的三角瓶中，在渦旋振蕩器上充分振蕩（10min左右），然后按比例稀釋?zhuān)?jīng)血球計(jì)數(shù)板測(cè)定每mL孢子數(shù)，通過(guò)計(jì)算把各菌的孢子懸浮液濃度配成基本一致，即1.0×108孢子/mL，以測(cè)定致死中時(shí)（LT50），比較各菌種間的毒力［2］。

1.2.2 測(cè)定方法 用毛筆將蠐螬3齡幼蟲(chóng)挑起，在盛有孢子懸浮液的培養(yǎng)皿中浸蘸一下（約3～5s），而后迅速取出，置于潔凈濾紙上，任其爬行，片刻后，移入潔凈的小指型管（1cm×8cm）中單頭飼養(yǎng)。為了避免相互殘殺，每管放一小塊人工飼料。養(yǎng)蟲(chóng)器皿事先在1%甲醛液中浸泡片刻，取出后涼干備用。不同處理用不同毛筆，避免不同菌株之間相互干擾，影響試驗(yàn)結(jié)果。以0.05%吐溫水為對(duì)照，共設(shè)7個(gè)處理，重復(fù)3次，每處理試蟲(chóng)數(shù)30頭。試驗(yàn)每天定時(shí)觀察一次直至化蛹，每次記下死蟲(chóng)數(shù)，并及時(shí)將蟲(chóng)尸移出。蟲(chóng)尸在26℃保濕培養(yǎng)（相對(duì)濕度大于90%）觀察是否有僵蟲(chóng)出現(xiàn)，統(tǒng)計(jì)僵蟲(chóng)率。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理 計(jì)算公式如下：每mL孢子總量=平均每小格孢子數(shù)×4×106×稀釋倍數(shù)；累積死亡率（%）=（處理的總死蟲(chóng)數(shù)×100）/處理的總蟲(chóng)數(shù)；累積校正死亡率（%）=（處理組累積死亡率-對(duì)照組累積死亡率）/（1-對(duì)照組累積死亡率）；僵蟲(chóng)率（%）=僵蟲(chóng)數(shù)×100/總死亡蟲(chóng)數(shù)。

以LT50、校正死亡率及僵蟲(chóng)率作為分析毒力的指標(biāo)，將觀察時(shí)間分為間隔相等的時(shí)間區(qū)段，分別統(tǒng)計(jì)整理每個(gè)時(shí)間區(qū)段內(nèi)的累積死亡率，并校正，以時(shí)間（d）的對(duì)數(shù)值為X，死亡率的機(jī)率值為Y，采用機(jī)率值分析法（Doberski，J.W.1981）算出毒力回歸方程和致死中時(shí)（LT50）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同真菌菌株對(duì)蠐螬的致病效果 由表1可知，幾種真菌的不同菌株及其混合物對(duì)蠐螬均有不同程度的致病性，但致死率表現(xiàn)出明顯差異。Ma1、Bbr84、Bb84r+Ma4、Ma3、Ma2及Bbr84+Ma3校正累積死亡率分別為62.50%、50.00%、43.75%、43.75%、37.50%和24.98%，致死中時(shí)LT50分別為10.31d、15.06d、15.30d、15.65d、15.40d和27.56d。其中綠僵菌Ma1校正累積死亡率最高，達(dá)到了62.50%，而其它處理都≤50.00%，差異極顯著；同時(shí)綠僵菌Ma1致死中時(shí)LT50最小，為10.31d，而其它處理都＞15d，由此可見(jiàn)綠僵菌Ma1的致病力最強(qiáng)。 表1 不同真菌對(duì)蠐螬3齡幼蟲(chóng)的致病效果及僵蟲(chóng)率

[處理&累積死亡率（%）&校正累計(jì)

死亡率（%）&差異顯著性&回歸方程&相關(guān)系數(shù)

r& 致死中時(shí)

LT50（d）&僵蟲(chóng)率

（%）&0.05&0.01&Ma1&66.67&62.50&a&A&Y=7.912 35-2.874 40x&0.993 81&10.31&66.64&Bbr84&55.56&50.00&b&B&Y=8.167 74-2.689 32x&0.985 38&15.06&56.23&Bbr84+Ma4&50.00&43.75&c&BC&Y=8.078 05-2.591 80x&0.967 44&15.30&58.78&Ma3&50.00&43.75&c&BC&Y=7.737 21-2.291 35x&0.988 16&15.65&46.64&Ma2&44.44&37.50&d&C&Y=8.323 49-2.798 60x&0.927 23&15.40&52.12&Bbr84+Ma3&33.33&24.98&e&D&Y=7.538 93-1.762 76x&0.984 51&27.56&49.87&ck&11.11&&&&&&&&]

2.2 不同真菌的僵蟲(chóng)率 在濃度為1.0×108孢子/mL時(shí)，各處理死亡幼蟲(chóng)24h后均出現(xiàn)僵蟲(chóng)，Ma1、Bbr84、Bb84r+Ma4、Ma3、Ma2及Bbr84+Ma3僵蟲(chóng)率分別為66.64%、56.23%、58.78%、46.64%、52.12%和49.87%，其中Ma1僵蟲(chóng)率最高，達(dá)到66.64%，而其它處理的僵蟲(chóng)率均在60%以下（表1）。說(shuō)明各供試真菌菌株都能侵染致死蠐螬3齡幼蟲(chóng)，而Ma1表現(xiàn)出對(duì)蠐螬明顯的高毒力。

3 小結(jié)與討論

化學(xué)農(nóng)藥的長(zhǎng)期施用造成大面積土壤和農(nóng)作物污染，并對(duì)人畜產(chǎn)生危害，而生物防治以其獨(dú)特的優(yōu)越性，在世界范圍得以迅速應(yīng)用［3-4］。為了探索蠐螬的無(wú)公害防治措施，開(kāi)發(fā)利用昆蟲(chóng)病原真菌資源，本文選用幾種真菌的不同菌株及其混合物對(duì)蠐螬進(jìn)行毒力測(cè)定，篩選出對(duì)蠐螬高毒力綠僵菌Ma1菌株，其致死率和致死速度均明顯高于其它處理，在花生蠐螬的防治上具有較大的應(yīng)用價(jià)值。

本次篩選的菌株及其混合物的數(shù)量較少，建議擴(kuò)大菌株篩選范圍。同時(shí)毒力測(cè)定是在室內(nèi)人為控制的條件下進(jìn)行的，而田間防效則受到溫濕度等各種環(huán)境因子的影響，因此要運(yùn)用于實(shí)際生產(chǎn)中，仍需要進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

［1］魏鴻鈞，張子良.中國(guó)地下害蟲(chóng)［M］.上海：上海科技出版社，1989.

［2］浦蟄龍，李增智.昆蟲(chóng)真菌學(xué)［M］.合肥：安徽科技出版社，1996.

［3］張克勤.我國(guó)殺蟲(chóng)真菌的研究現(xiàn)狀與展望［J］.植物保護(hù)，1996，22（1）：43-46.

［4］謝明杰，宋玉媛，曹文偉，等.微生物殺蟲(chóng)劑應(yīng)用的研究進(jìn)展［J］.遼寧師范大學(xué)學(xué)報(bào)，1998，21（4）：226-229.（責(zé)編：張宏民）

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