淫羊藿次苷抗疲勞及抗氧化作用

李曉萍 薛海嬌 郭麗娜 劉忠英

(白城師范學(xué)院，吉林 白城 137000)

淫羊藿為小檗科淫羊藿屬植物〔1〕。有益精氣、堅(jiān)筋骨、補(bǔ)腰膝、強(qiáng)心力之功效?，F(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)研究表明，淫羊藿中主要活性物質(zhì)為黃酮類化合物，具有抗骨質(zhì)疏松活性、促進(jìn)造血功能、增加心腦血管血流量、免疫功能、抗衰老、抗腫瘤等多種功效〔2〕。目前，相關(guān)研究結(jié)果表明，人類的許多疾病與氧化應(yīng)激有關(guān)〔3〕。由自由基介導(dǎo)的氧化損傷在許多疾病的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中起到極其重要的作用。由活性氧(ROS)、活性氮 (RNS)引起的蛋白質(zhì)氧化損傷與衰老、阿爾茨海默病(AD)、帕金森病(PD)等老年性疾病的發(fā)生有密切關(guān)系〔4〕。關(guān)于淫羊藿次苷抗疲勞、抗氧化活性的研究未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用運(yùn)動(dòng)性實(shí)驗(yàn)與生化指標(biāo)檢測(cè)相結(jié)合的方法，研究淫羊藿次苷抗氧化、抗疲勞作用。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康SD大鼠40只，體重(200±20)g，購(gòu)自吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.2試劑和儀器 淫羊藿次苷，淡黃綠色粉末，純度為75%，由實(shí)驗(yàn)室制備。香菇多糖：北京康蒂尼藥業(yè)有限公司。血乳酸試劑盒、尿素氮(BUN)試劑盒、肝糖原測(cè)定試劑盒、丙二醛(MDA)試劑盒、過(guò)氧化物歧化酶(SOD)試劑盒均購(gòu)于南京建成生物工程研究所。Spectra FLOUR plus酶標(biāo)儀(瑞士TECAN公司)，恒溫游泳池，水浴鍋。

1.3實(shí)驗(yàn)方法 大鼠購(gòu)進(jìn)后，飼養(yǎng)1 w，適應(yīng)環(huán)境。隨機(jī)分為空白對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、低、中、高劑量組，每組8只。其中低、中、高劑量組經(jīng)大鼠灌胃給予淫羊藿次苷(含量為75%)7.5 mg/kg、15 mg/kg及22.5 mg/kg，空白對(duì)照組給予蒸餾水的劑量為20 ml/kg，陽(yáng)性對(duì)照組給香菇多糖(北京康蒂尼藥業(yè)有限公司)420 mg/kg。每組均連續(xù)給藥28 d后，于末次給藥1 h后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，在大鼠尾部負(fù)重5%的鉛皮，投入恒溫游泳箱中，溫度(27±0.5)℃，水深40 cm。以頭部沉入水中不能游出水面為體力耗竭，記錄體力耗竭的游泳時(shí)間。大鼠游泳后取出，斷頭取血，以轉(zhuǎn)速4 000 r/min，溫度4℃ 離心10 min，取血清分裝，并取肝臟，放好凍存。測(cè)定指標(biāo)：負(fù)重游泳時(shí)間、血乳酸(LD)、BUN、肝糖原、肝臟MDA、SOD。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 計(jì)量資料組間比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1淫羊藿次苷抗大鼠運(yùn)動(dòng)性疲勞作用 與空白組相比較，淫羊藿次苷中、高劑量組能顯著延長(zhǎng)大鼠的負(fù)重游泳時(shí)間，其中高劑量組作用強(qiáng)于陽(yáng)性藥組，低劑量組作用不顯著；與空白組相比較，淫羊藿次苷的高劑量組能顯著降低大鼠血清中BUN；中劑量組和高劑量組均能顯著降低LD量，低劑量組作用不顯著；淫羊藿次苷的高、中、低劑量組能顯著提高大鼠肝臟中肝糖原含量，其中高劑量組比陽(yáng)性藥組作用更強(qiáng)。見(jiàn)表1。

2.2淫羊藿次苷抗氧化作用 與空白組相比較，淫羊藿次苷的中劑量組和高劑量組能極顯著提高大鼠血清中SOD的活力(P<0.01)，低劑量組作用不顯著；淫羊藿次苷三個(gè)劑量組能顯著降低血清中MDA的含量，且抗氧化作用隨著淫羊藿次苷的劑量增加而增強(qiáng)。見(jiàn)表2。

表1 淫羊藿次苷對(duì)大鼠運(yùn)動(dòng)性指標(biāo)及生化指標(biāo)的影響±s,n=8)

表2 淫羊藿次苷對(duì)大鼠抗氧化作用的影響±s,n=8)

3 討 論

疲勞是機(jī)體失去其完成原來(lái)所從事的正?；顒?dòng)或者工作能力，身體功能暫時(shí)降低的現(xiàn)象。運(yùn)動(dòng)性疲勞會(huì)導(dǎo)致機(jī)體抗過(guò)氧化能力下降、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疲勞、免疫功能下降、神經(jīng)內(nèi)分泌功能抑制、造血系統(tǒng)功能抑制等〔5〕。抑制氧化損傷是防治疾病一個(gè)重要的途徑。中藥抗氧化作用的機(jī)制主要包括清除活性氧自由基，增強(qiáng)抗氧化酶的活性，抗脂質(zhì)過(guò)氧化，減少DNA損傷及對(duì)氧化酶系活力的影響〔6〕。

從朝鮮淫羊藿根部提取出的淫羊藿次苷可使轉(zhuǎn)錄信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子與激活子相關(guān)信號(hào)失活，從而使急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞株U937發(fā)生凋亡〔7〕，還可以通過(guò)激活雌激素信號(hào)通路來(lái)促進(jìn)大鼠體外培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨性分化過(guò)程〔8〕。SOD是生物體內(nèi)清除自由基的一種重要酶，能使機(jī)體有效抵御自由基的毒性〔9〕；MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化最重要的產(chǎn)物之一，其含量高低可反映出抗氧化能力強(qiáng)弱〔10〕。淫羊藿次苷能提高大鼠血清中SOD活力，加快MDA的清除速率，具有顯著的抗氧化活性。

大鼠負(fù)重游泳時(shí)間的長(zhǎng)短可有效反映出抗疲勞能力〔11〕。BUN為蛋白質(zhì)的代謝產(chǎn)物，強(qiáng)運(yùn)動(dòng)時(shí)，蛋白質(zhì)的代謝加快，BUN的清除速率可反映出機(jī)體抗疲勞的能力；糖原是運(yùn)動(dòng)過(guò)程中的主要能源物質(zhì)，肝糖原含量越高，抗疲勞活性越強(qiáng)；在強(qiáng)運(yùn)動(dòng)過(guò)程中，機(jī)體主要通過(guò)無(wú)氧氧化供能，其代謝產(chǎn)物L(fēng)D是引起疲勞的原因之一，LD的清除有利于疲勞的恢復(fù)〔12〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，淫羊藿次苷可延長(zhǎng)大鼠負(fù)重游泳時(shí)間，降低BUN含量，提高肝糖原含量，減少LD堆積，表現(xiàn)出顯著的抗疲勞活性。

綜上所述，淫羊藿次苷具有顯著的抗運(yùn)動(dòng)性疲勞及抗氧化活性。其抗氧化、抗疲勞活性與給藥劑量成正比。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果可為抗氧化保健品的研制奠定基礎(chǔ)。

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