Fascin在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中的表達及其意義

趙振亞 許 欣 薛延光

(邢臺市人民醫(yī)院病理科，河北 邢臺 054031)

大腸管狀腺瘤是一種具有癌變潛能的良性病變，發(fā)病率較高，而且是大腸癌主要的癌前病變〔1〕。本研究探討Fascin在大腸管狀腺瘤癌變過程中的表達及可能作用。

1 資料與方法

1.1資料 選取河北邢臺市人民醫(yī)院病理科2000年12月至2008年1月期間存檔蠟塊，除外家族性結(jié)腸多發(fā)息肉病、幼年性息肉和其他類型的大腸腺瘤。所有病例全部切片均由2位高年資病理醫(yī)師進行明確診斷復核，按照病史及病理資料選擇伴有不同程度(輕中、重度)異型增生的散發(fā)性大腸管狀腺瘤82例，大腸管狀腺瘤癌變病例76例作為研究對象，同時以40例大腸黏膜作為對照，均取自大腸癌標本距腫物10 cm以上的大腸黏膜。本組研究病例中，男112例，女86例；年齡60～85(平均68.5)歲。82例大腸腺瘤組中，輕中度異型增生38例，重度異型增生44例。76例大腸腺瘤癌變組中，浸潤深度未侵及漿膜32例，侵及漿膜44例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的34例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的42例，Dukes分期A+B期34例，C+D期42例，高-中分化46例，低分化30例。

1.2方法 采用免疫組織化學ElivisionTMplus兩步法進行免疫組化染色。選用鼠抗人Fascin單克隆抗體，購自上海滬峰生物科技有限公司。用已確定為陽性的轉(zhuǎn)移性乳腺癌作為陽性對照。Ki-67抗體購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司，用已確定為陽性的乳腺癌作為陽性對照。

1.3免疫組化結(jié)果判定標準 Fascin蛋白陽性表達主要定位于細胞質(zhì),表現(xiàn)為胞質(zhì)內(nèi)有棕黃色顆粒。在間質(zhì)中高表達,因此,在間質(zhì)中的表達可以作為內(nèi)對照。免疫組織化學染色結(jié)果采用以下判斷標準〔2〕。首先將染色程度評分：無色計0分、淡黃色計1分、棕黃色計2分和棕褐色計3分；再將陽性細胞所占的百分比評分：0分為陰性、陽性細胞數(shù)≤10%計1分、11%～50%計2分、51%～75%計3分、>75%計4分,然后計算兩者的乘積。乘積<3分為陰性，≥3分為陽性。Ki-67的評定標準：陽性表達位于細胞核，核內(nèi)有棕黃色顆粒，陽性率：陽性細胞數(shù)<5%為-，5%～25%為+，26%～50%為，>50%為。以-和+為低表達，和為過表達進行分析。

1.4統(tǒng)計學分析 應用SPSS13.0軟件進行χ2檢驗。

2 結(jié) 果

2.1Fascin蛋白在大腸管狀腺瘤癌變中的表達情況 在大腸黏膜、大腸管狀腺瘤伴上皮異型增生及大腸腺瘤癌變中Fascin蛋白陽性表達率分別為5.0%、30.5%、64.5%。其陽性表達率隨病變程度的加深而增高(P<0.05)(圖1)，且不同的組別之間存在顯著差異(P<0.05)(表1)；在大腸管狀腺瘤伴上皮異型增生中，F(xiàn)ascin蛋白陽性表達率分別為10.5%(輕中度)、47.7%(重度)，陽性表達率逐漸增高(P<0.05)。

表1 Fascin在大腸腺瘤癌變中表達與臨床病理參數(shù)的關(guān)系(n)

2.2Fascin在大腸腺瘤癌變中表達與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 Fascin蛋白的表達與患者的年齡、性別無關(guān)(P>0.05)，與腫瘤分級、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes分期密切相關(guān)(P<0.05)(表1)。

圖1 Fascin在大腸管狀腺瘤不同病變中的表達(DAB，×100)

3 討 論

大腸癌居全球惡性腫瘤發(fā)病率的第3位〔3〕。侵襲、轉(zhuǎn)移行為是惡性腫瘤的本質(zhì)特性和致死原因，癌轉(zhuǎn)移使局部病變擴散成全身多灶性分布的疾病。及早發(fā)現(xiàn)、診斷及治療癌前病變是降低大腸癌發(fā)生率的最好辦法，在大腸癌變之前(大腸腺瘤階段)，治療方法簡單，效果明顯，治愈率高。最近美國腫瘤研究所的Liatla 提出了腫瘤浸潤三步學說，即黏附、溶解和移動。癌細胞需經(jīng)歷從原發(fā)灶脫落、細胞黏附于基質(zhì)、蛋白水解酶降解基質(zhì)、腫瘤細胞移動等過程，向周圍組織侵襲或進入血液循環(huán)及淋巴系統(tǒng)而進一步向遠處轉(zhuǎn)移。Fascin蛋白與細胞的黏附、移動有關(guān)。

細胞形狀的改變?nèi)缒ね黄鹦纬伞⒓毎g的黏附性降低等是腫瘤早期發(fā)生浸潤轉(zhuǎn)移的重要原因之一，而這些改變與細胞周邊肌動蛋白微絲、細胞骨架的重排及肌動蛋白結(jié)合蛋白的聚集形成偽足密切相關(guān)。結(jié)直腸癌的進展和侵襲與癌細胞運動性增加及肌動蛋白細胞骨架結(jié)構(gòu)改變密不可分。三維的肌動蛋白微絲的結(jié)構(gòu)和功能是由眾多肌動蛋白捆綁蛋白調(diào)節(jié)和控制〔4〕。人類Fascin基因是定位于染色體7q22，編碼一種分子量為55 kD的細胞骨架蛋白，可與F-肌動蛋白結(jié)合，定位于細胞質(zhì)張力纖維和細胞膜皺褶邊緣的絲狀偽足、微棘的核心肌動蛋白束中，F(xiàn)ascin蛋白N端11～50之間的氨基酸殘基高度保守，其中第39位的絲氨酸為蛋白激酶C(PKC)的磷酸化位點，該位點的磷酸化可調(diào)節(jié)Fascin蛋白與F-actin的結(jié)合活性〔5〕以及細胞膜表面絲狀偽足和微棘的形成〔6〕。細胞的絲狀偽足和微棘與細胞的運動、癌細胞的轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系，這提示Fascin蛋白在細胞遷移，細胞黏附以及細胞間信息交流等過程中發(fā)揮作用〔6，7〕。近年來的研究發(fā)現(xiàn)Fascin蛋白在正常上皮細胞中不表達或低表達，但在一些上皮組織腫瘤如胃癌、乳腺癌，非小細胞肺癌，胰腺癌，卵巢癌，食管癌中常表達上調(diào)。在霍奇金淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、指突狀樹突細胞肉瘤、Sjogren綜合征、(HIV)相關(guān)的淋巴細胞增生疾病等高表達。Fascin表達與腫瘤的進展、高侵襲性、預后不良和生存率的降低呈正相關(guān)〔8,9〕。

有研究者認為在結(jié)直腸癌中Fascin表達可能受wnt途徑的調(diào)節(jié)〔10〕，導致Fascin蛋白的異常表達，提高了細胞運動能力和移動性，促使細胞產(chǎn)生各種惡性行為，從而引起大腸癌的發(fā)生發(fā)展。也有可能在細胞惡變后上調(diào)了Fascin基因的表達或增加轉(zhuǎn)錄，使其蛋白表達亦隨之上調(diào)。還有研究者認為：Fascin蛋白可能是c-erbB-2在細胞骨架上的一種效應蛋白，c-erbB-2在癌中的擴增激活Fascin的轉(zhuǎn)錄，由此看來，大腸癌中可能存在多條途徑調(diào)節(jié)Fascin蛋白的表達。

本研究提示隨著Fascin表達的增高，致使細胞膜表面突起增多，細胞增殖旺盛，肌動蛋白骨架重建，細胞運動和移動性增強，促使細胞產(chǎn)生各種惡性行為，在大腸從正常黏膜-腺瘤-癌變的發(fā)生發(fā)展過程中起到了一定作用，提示Fascin蛋白可能參與了大腸管狀腺瘤的形成及癌變。因此，阻斷Fascin蛋白表達或阻斷對其細胞運動裝置或黏連結(jié)構(gòu)的作用可能成為未來結(jié)腸癌治療的新措施〔11〕。在大腸管狀腺瘤癌變組中Fascin的表達與腫瘤的分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes分期有關(guān),與性別、年齡均無關(guān)。這與文獻報道相類似〔12〕，Ki-67是顯示腫瘤增殖活性和判斷預后的重要指標，F(xiàn)iscin與Ki-67的表達呈正相關(guān)，由此說明Fascin蛋白也可成為判斷腫瘤預后新的指標。

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