重組人腦鈉肽對(duì)慢性心力衰竭大鼠血液流變學(xué)的影響及抗氧自由基的作用

李 慧 趙建榮

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院盧灣分院心內(nèi)科，上海 200002)

慢性心力衰竭(CHF)作為嚴(yán)重危害人類健康的臨床綜合征，其發(fā)病率及死亡率呈逐年增高趨勢(shì)，給患者家庭帶來(lái)沉重的疾病負(fù)擔(dān)。腦鈉肽(BNP)作為神經(jīng)內(nèi)分泌激活過(guò)程中重要的因素，有研究表明當(dāng)心室擴(kuò)大及心臟的后負(fù)荷不斷增加時(shí)就會(huì)促進(jìn)心室的BNP釋放，BNP具有利尿、排鈉以及抑制神經(jīng)內(nèi)分泌功能激活的作用〔1〕。研究顯示人工合成的重組人BNP(rhBNP)也能明顯改善心力衰竭患者的血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)，緩解患者病情〔2〕。本實(shí)驗(yàn)研究采用rhBNP治療CHF模型的SD大鼠，并以抗利尿激素治療的大鼠為常規(guī)對(duì)照，探討rhBNP對(duì)CHF大鼠血液流變學(xué)參數(shù)的影響及對(duì)抗氧自由基的作用。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1動(dòng)物 健康雄性SD大鼠76只，體重在220～300 g，平均(250±25.0)g。按照隨機(jī)數(shù)字表法抽取26只大鼠為正常對(duì)照組，其余50只用于建立CHF模型，待建模成功后按照隨機(jī)數(shù)字表法將其分均為BNP組和常規(guī)組。

1.1.2實(shí)驗(yàn)材料 ①南京建成科技有限公司提供的BNP檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：DGE20812)、T-SOD測(cè)試盒(規(guī)格：50T)及MDA試劑盒(規(guī)格：50T)；②成都諾康生物制藥有限公司提供的凍干粉針劑的rhBNP；③重慶大學(xué)維多生物工程研究所提供的全自動(dòng)血液流變快速測(cè)儀(型號(hào)：FASCO-3010)。

1.2方法

1.2.1建模方法 將76只大鼠飼養(yǎng)1 w適應(yīng)環(huán)境后進(jìn)行稱重，隨后將需建模的50只大鼠以180 mg/kg的劑量注射異丙基腎上腺素進(jìn)行建模，在大鼠下腹部的兩側(cè)分別注射，共注射2次，分2 d進(jìn)行以制備CHF的動(dòng)物模型。對(duì)照組的26只大鼠采用皮下注射生理鹽水的方式進(jìn)行，也分2 d共注射2次。

1.2.2給藥方法 BNP組采用rhBNP治療，皮下注射rhBNP，劑量為15 μg/kg，常規(guī)組給予抗利尿激素治療；對(duì)照組每天以同樣的方式給予生理鹽水。三組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均1次/d共持續(xù)4 w。

1.3檢測(cè)指標(biāo) 采用血液流變快速測(cè)儀檢測(cè)血液流變學(xué)的相關(guān)參數(shù)，包括血漿黏度、血細(xì)胞比容、紅細(xì)胞電泳時(shí)間、紅細(xì)胞剛性指數(shù)；利用試劑盒檢測(cè)抗氧化物的相關(guān)指標(biāo)：超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清丙二醛(MDA)含量。

2 結(jié) 果

2.1三組大鼠全血血液黏度比較 三組大鼠的全血血液黏度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，兩兩比較，BNP組、常規(guī)組高于對(duì)照組，常規(guī)組高于BNP組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 三組大鼠全血血液黏度的比較±s)

2.2三組的血液流變學(xué)參數(shù)比較 三組的血液流變學(xué)參數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，兩兩比較，常規(guī)組、BNP組的血漿黏度、血細(xì)胞比容、紅細(xì)胞電泳時(shí)間、紅細(xì)胞剛性指數(shù)高于對(duì)照組，常規(guī)組高于BNP組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 三組的血液流變學(xué)參數(shù)比較±s)

2.3三組SOD活性、MDA含量比較 三組的SOD活性、MDA含量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，BNP組、常規(guī)組的SOD活性低于對(duì)照組，BNP組低于常規(guī)組(P<0.01)，BNP組、常規(guī)組的MDA含量高于對(duì)照組，常規(guī)組高于BNP組(P<0.01)。見(jiàn)表3。

表3 三組SOD活性、MDA含量比較±s)

3 討 論

CHF作為多種心臟疾病的終末期，不但會(huì)降低心臟的功能，還具有促使心室肥大及改變電活動(dòng)的特點(diǎn)，嚴(yán)重危害患者的健康〔3〕。其發(fā)生機(jī)制為在靜脈回流的情況下，心臟收縮和(或)舒張功能發(fā)生障礙，導(dǎo)致心臟的排出量不能維持組織的代謝需要，最終導(dǎo)致組織的灌注減少以及肺循環(huán)及體循環(huán)產(chǎn)生不同程度的淤血〔4，5〕。研究表明CHF常伴有不同程度的血液流變學(xué)改變，如血漿黏膜度的增高及血漿纖維蛋白原的增多等，而這些改變會(huì)增加血流的阻力以及血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)，最終導(dǎo)致心力衰竭的加重〔6〕。目前關(guān)于CHF的治療原則是改善血液的流變性，降低血液的黏度。BNP作為神經(jīng)內(nèi)分泌激活過(guò)程中的一個(gè)因素，研究表明其濃度與心功能分級(jí)有正相關(guān)關(guān)系，心功能越差，心力衰竭越嚴(yán)重，BNP的水平會(huì)隨之增高，因此BNP在心力衰竭的鑒別診斷中具有重要的臨床意義〔7〕。rhBNP是通過(guò)基因重組技術(shù)人工合成的BNP，研究表明靜脈滴注rhBNP后對(duì)不同程度及不同原因引起的心力衰竭均有效果，對(duì)血流動(dòng)力學(xué)的相關(guān)指標(biāo)也具有明顯的改善作用〔8〕。

本研究結(jié)果與有關(guān)研究結(jié)果一致〔9,10〕。說(shuō)明CHF大鼠的血液黏度高于正常大鼠，但是rhBNP治療后大鼠的血液黏度低于抗利尿激素治療的大鼠，可能是因?yàn)閞hBNP可以調(diào)節(jié)心血管功能，降低血流阻力，從而導(dǎo)致血液黏度降低所致。結(jié)果還說(shuō)明外源性的rhBNP具有改善心肌重塑的作用，可以明顯改善CHF所引起的血液流變學(xué)的黏、濃、凝、集，這與有關(guān)研究結(jié)果一致〔11〕。三組的SOD活性、MDA含量與有關(guān)研究結(jié)果〔12〕一致，提示經(jīng)rhBNP治療后，大鼠的SOD活性升高并且血清的MDA含量降低，說(shuō)明rhBNP可以有效保護(hù)CHF大鼠的心肌，其具有有效降低心肌的氧化損傷，并提高心肌清除氧自由基的能力。

綜上，rhBNP對(duì)心力衰竭模型大鼠的血液黏度具有明顯的改善作用，并且能提高心肌的抗氧自由基的作用。

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