胰腺導(dǎo)管腺癌患者癌組織中切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1、Furin和10號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源物的表達(dá)及意義

段志英 朱秀芳 王 競 霍曉輝

(河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)消化內(nèi)科,河北 石家莊 050031)

胰腺導(dǎo)管腺癌常發(fā)生在50歲以上的中老年人；由于診治困難，常預(yù)后不良；其高危因素多，如苯接觸、吸煙等。近來更多研究認(rèn)為機(jī)體基因和蛋白的表達(dá)失常對腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展起重要作用〔1〕。切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因(ERCC)1是核苷酸切除修復(fù)過程中的關(guān)鍵因素，與多種腫瘤的惡變有關(guān)〔2〕。Furin蛋白(Furin)是蛋白前體加工酶家族中的重要成員，參與腫瘤惡變和轉(zhuǎn)化過程〔3〕。10號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源物(PTEN)是人類發(fā)現(xiàn)的第1個具有磷酸酯酶活性的抑癌基因，其能通過脫磷酸化作用調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)通路，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、發(fā)育及抑制腫瘤細(xì)胞增殖、黏附和轉(zhuǎn)移〔4〕。本文探討胰腺導(dǎo)管腺癌患者癌組織中ERCC1、Furin和PTEN的表達(dá)。

1 材料和方法

1.1臨床資料 近4年我院行胰腺導(dǎo)管腺癌切除的術(shù)后組織及臨床資料作為觀察組，共78例，年齡50～84歲，平均68.2歲。其中男40例，女38例。納入均經(jīng)病理醫(yī)師再次確診，并符合世界衛(wèi)生組織(WHO)的診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中高分化48例，中分化20例，低分化10例。同時選取同期在我院確診為胰腺上皮性良性腫瘤50例作為對照組，其中漿液性囊腺瘤25例，黏液性囊腺瘤25例，年齡51～82歲，平均67.4歲，其中男26例，女24例。兩組一般臨床資料無明顯差別，具有可比性。

1.2免疫組化檢測ERCC1、Furin和PTEN蛋白的表達(dá) ERCC1、Furin和PTEN蛋白的檢測均應(yīng)用免疫組化SP法。操作均由同一主管技師進(jìn)行，嚴(yán)格按實驗步驟，嚴(yán)格質(zhì)量控制。

1.3ERCC1、Furin和PTEN蛋白檢測結(jié)果的判定方法 ERCC1以細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞，F(xiàn)urin和PTEN均以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞。每張切片選擇5個400倍的高倍視野，取其平均值作為樣本最終的陽性表達(dá)率，以陽性細(xì)胞≥25%定為陽性，以陽性細(xì)胞<25%定為陰性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 采用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗、線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組中ERCC1、Furin和PTEN蛋白表達(dá)陽性率的比較 觀察組中ERCC1和PTEN表達(dá)的陽性率明顯低于對照組，F(xiàn)urin表達(dá)的陽性率明顯高于對照組(P均<0.000 1)。見表1。

表1 兩組中ERCC1、Furin和PTEN蛋白表達(dá)陽性率的比較〔n(%)〕

2.2ERCC1、Furin和PTEN在觀察組不同臨床特征中表達(dá)的比較 觀察組ERCC1、Furin和PTEN指數(shù)與腫瘤最大徑、分化程度、脈管浸潤和Ki67指數(shù)密切相關(guān)。見表2。

表2 ERCC1、Furin和PTEN在觀察組不同臨床特征中陽性表達(dá)的比較〔n(%)〕

2.3觀察組中ERCC1、Furin和PTEN相關(guān)性 觀察組中ERCC1和PTEN(r=0.44，P=0.034 2)的表達(dá)正相關(guān)，F(xiàn)urin和PTEN(r=-0.49，P=0.018 7)的表達(dá)負(fù)相關(guān)。

2.4觀察組中ERCC1、Furin和PTEN不同表達(dá)患者生存時間的比較 ERCC1、Furin高表達(dá)、PTEN低表達(dá)患者生存時間短。見表3。

表3 觀察組中ERCC1、Furin和PTEN不同表達(dá)患者生存時間的比較±s,個月)

3 討 論

ERCC1是DNA修復(fù)基因，定位在19號染色體上，編碼297個氨基酸，可以和DNA修復(fù)酶缺乏互補(bǔ)基因F(XPF)形成異源二聚體，在DNA單鏈?zhǔn)軗p處的5'端進(jìn)行剪切發(fā)揮生物學(xué)作用〔5,6〕。馮文等〔7〕的研究中認(rèn)為ERCC1能有效消除鉑類藥物誘發(fā)的DNA復(fù)合物，并認(rèn)為其高表達(dá)時可以抵制卵巢癌和肺癌中以鉑為基礎(chǔ)的化療藥的作用。Furin參與多種生物學(xué)過程，如多肽與蛋白質(zhì)激素的合成與分泌、膜受體的成熟過程及血漿蛋白前體的激活等〔8，9〕。近來學(xué)者認(rèn)為Furin可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化及過程，同時加速腫瘤細(xì)胞的侵襲和播散〔10，11〕。PTEN在正常機(jī)體中高表達(dá)，在抑制腫瘤的失控性增生時，可以對腫瘤分化有一定影響，還可以抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，減少轉(zhuǎn)移。當(dāng)其表達(dá)下調(diào)時，腫瘤的增殖活性升高，侵襲能力增加，轉(zhuǎn)移潛能升高〔12,13〕。也有研究認(rèn)為PTEN可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，即腫瘤細(xì)胞中PTEN基因發(fā)生突變，使PTEN蛋白的磷酸酶活性降低，引起細(xì)胞增殖，此時細(xì)胞凋亡活動失去控制，引起腫瘤的失控性增生〔14〕。

本研究提示E-RCC1、PTEN、Furin異常表達(dá)對上皮惡性病變有重要價值。3種蛋白異常表達(dá)時可以有效促進(jìn)腫瘤的生長及周圍鄰近組織的浸潤，使腫瘤對周圍器官和組織的破壞能力增強(qiáng)。3種蛋白正常表達(dá)時對腫瘤的分化具有正向調(diào)節(jié)作用，而當(dāng)其表達(dá)失調(diào)或失控后，使腫瘤的成熟過程發(fā)生明顯改變，腫瘤細(xì)胞呈低分化或未分化狀態(tài)，腫瘤生長加速，預(yù)后差。3種蛋白參與腫瘤的脈管浸潤過程，也參與腫瘤的播散過程中。腫瘤細(xì)胞進(jìn)入脈管后，腫瘤細(xì)胞遷移能力增強(qiáng)，在遠(yuǎn)隔部位易于種植形成轉(zhuǎn)移灶，此時腫瘤手術(shù)切除不易干凈，患者的預(yù)后差。3種蛋白異常表達(dá)時可以引起腫瘤細(xì)胞的繁殖，此時腫瘤生長活躍，生長快，更為明顯的是表現(xiàn)為以失控性增生為主的細(xì)胞增殖過程。三者可能在一定程度上具有協(xié)同作用。有研究顯示ERCC1、Furin和PTEN均與血管內(nèi)皮生長因子的作用有關(guān)，三者可能與細(xì)胞增殖相關(guān)〔15〕，因此三者的協(xié)同作用可能是通過血管生成作用及增殖作用聯(lián)系在一起的，但是其具體調(diào)節(jié)過程需要更多實驗證實。

4 參考文獻(xiàn)

1柴文剛,王廣義,謝淑麗,等.ERCC1與RRM1在胰腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.中國老年學(xué)雜志,2013；33(5): 1033-4.

2張 慧,范志松,劉 巍,等.食管鱗狀細(xì)胞癌患者外周血和腫瘤組織中ERCC1及ERCC2表達(dá)的相關(guān)性研究〔J〕.腫瘤,2010；30(1): 68-70.

3Day PM,Schiller JT.The role of furin in papillomavirus infection〔J〕.Future Microbiol,2009；4(10):1255-62.

4Kara O,Duman BB,Kara B,etal.Analysis of PTEN,VEGF,HER-2 and P53 Status in Determining colorectal cancer benefit form bevacizumab therapy〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev,2012；13(12): 6397-401.

5Mazzoni F,Cecere FL,Meoni G,etal.Phase Ⅱ trial of customized first line chemotherapy according to ERCC1 and RRM1 SNPs in patients with advanced non-small-cell lung cancer〔J〕.Lung Cancer,2013；82(2): 288-93.

6Patel MR,Zhao N,Ang MK,etal.ERCC1 protein expression is associated with differential survival in oropharyngeal head and neck squamous cell carcinoma〔J〕.Otolaryngol Head Neck Surg,2013；149(4): 587-95.

7馮 文,房 瑜,楊成喜.ERCC1及C-erbB2在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及其對中西醫(yī)結(jié)合療效的影響〔J〕.山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2013；51(10): 81-3.

8Huynh TT,Chan KS,Piva TJ.Effect of ultraviolet radiation on the expression of pp38MAPK and furin in human keratinocyte-derived cell lines〔J〕.Photodermatol Photoimmunol Photomed,2009；25(1): 20-9.

9Chen RN,Huang YH,Lin YC,etal.Thyroid hormone promotes cell invasion through activation of furin expression in human hepatoma cell lines〔J〕.Endocrinology,2008；149(8):3817-31.

10Chen RN,Huang YH,Lin YC,etal.Thyroid hormone promotes cell invasion through activation of furin expression in human hepatoma cell lines〔J〕.Endocrinology,2008；149(8): 3817-31.

11Lopez de Cicco R,Bassi DE,Zucker S,etal.Human carcinoma cell growth and invasiveness is impaired by the propeptide of the ubiquitous proprotein convertase furin〔J〕.Cancer Res,2005；65(10): 4162-71.

12陳 昊,李玉民,何明彥,等.胃不典型增生和癌組織中Ki67和PTEN蛋白的表達(dá)及意義〔J〕.中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2007；14(3): 304-6.

13Neto JC,Ikoma MM,Carvalho KC,etal.MGMT and PTEN as potential prognostic markers in breast cancer〔J〕.Exp Mol Pathol,2012；92(1): 20-6.

14Pallares J,Martinez-Guitarte JL,Dolcet X,etal.Survivin expression in endometrial carcinoma: a tissue microarray study with correlation with PTEN and STAT-3〔J〕.Int J Gynecol Pathol,2005；24(3):247-53.

15蔣 勝,李 力,李 瑋,等.ERCC1基因mRNA表達(dá)水平在卵巢上皮性癌組織中的意義〔J〕.實用婦產(chǎn)科雜志,2009；25(11): 661-2.

16Wu JF,Hsu HY,Ni YH,etal.Suppression of furin by interferon-γ and the impact on hepatitis B virus antigen biosynthesis in human hepatocytes〔J〕.Am J Pathol,2012；181(1): 19-25.

17Siegfried G,Basak A,Cromlish JA,etal.The secretory proprotein convertases furin,PC5,and PC7 activate VEGF-C to induce tumorigenesis〔J〕.J Clin Invest,2003；111(11): 1723-32.