熱休克蛋白70在膠質(zhì)細(xì)胞瘤中的表達(dá)以及與腫瘤病理分級的相關(guān)性

王曉東 陳善成 楊俊保

(暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科，廣東 廣州 510000)

熱休克蛋白70(HSP70)普遍存在于生物細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞的生長發(fā)育、分化以及基因轉(zhuǎn)錄等方面均起著核心作用〔1〕。實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)〔2〕，HSP70的主要生物學(xué)功能在于應(yīng)激狀態(tài)下保護(hù)細(xì)胞生命活動(dòng)必要的蛋白質(zhì)，維持細(xì)胞的生存。此外，HSP70臨床上還可以作為腫瘤標(biāo)志物，在腫瘤免疫中發(fā)揮重要的作用〔3〕。膠質(zhì)細(xì)胞瘤屬于中樞神經(jīng)系統(tǒng)較為多見的原發(fā)性腫瘤，由于其復(fù)發(fā)率較高，預(yù)后往往不佳。筆者通過檢測膠質(zhì)細(xì)胞瘤組織中HSP70的表達(dá)，試圖闡述HSP70與膠質(zhì)細(xì)胞瘤病理分級間的相關(guān)性，同時(shí)分析腫瘤復(fù)發(fā)對HSP70表達(dá)的影響。

1 材料與方法

1.1一般材料 納入膠質(zhì)細(xì)胞瘤組織樣本50例，均為2010年1月至2013年1月于我院進(jìn)行膠質(zhì)細(xì)胞瘤切除手術(shù)患者的存檔標(biāo)本。年齡62～84〔平均(66.2±11.2)〕歲，男33例，女17例。根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)2000年頒布的神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類和分級標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ級9例、Ⅱ級12例、Ⅲ級13例、Ⅳ級16例。局部復(fù)發(fā)患者21例，無復(fù)發(fā)患者29例。

1.2主要試劑 鼠抗人HSP70單抗，購于美國Santa Cruz公司；SP免疫組化試劑盒，購于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司；3%過氧化氫；DAB等。

1.3免疫組化檢測 采用免疫組化SP法進(jìn)行HSP70蛋白的測定，操作按試劑盒說明書進(jìn)行。免疫組化檢測分別設(shè)立陽性以及陰性對照組。以細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒作為陽性細(xì)胞，將陽性細(xì)胞比例與顯色強(qiáng)度相結(jié)合判斷，觀察每張切片，以高倍視野(40×)計(jì)數(shù)1 000個(gè)細(xì)胞。(-)：陽性細(xì)胞<5%；(+)：陽性細(xì)胞5%～50%；()陽性細(xì)胞>50%。

2 結(jié) 果

2.1HSP70在膠質(zhì)細(xì)胞瘤各病理分級中的陽性表達(dá)比較 Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級、Ⅳ級膠質(zhì)細(xì)胞瘤中HSP70陽性表達(dá)率分別為33.33%、66.67%、84.62%、100.00%。χ2檢驗(yàn)顯示各級膠質(zhì)瘤間HSP70陽性表達(dá)有顯著差異(χ2=8.699，P<0.05),見表1。

2.2HSP70在膠質(zhì)細(xì)胞瘤局部復(fù)發(fā)組與無復(fù)發(fā)組中的陽性表達(dá)比較 HSP70在膠質(zhì)細(xì)胞瘤局部復(fù)發(fā)組與無復(fù)發(fā)組中的陽性率分別為87.50%、55.56%，無差異(χ2=5.520，P>0.05)，見表2。

表1 HSP70在膠質(zhì)細(xì)胞瘤各病理分級中的陽性表達(dá)比較(n)

2.3HSP70對膠質(zhì)細(xì)胞瘤局部復(fù)發(fā)時(shí)間及1年死亡率的影響 結(jié)果表明，HSP70陽性患者復(fù)發(fā)時(shí)間〔(5.13±0.97)個(gè)月〕明顯早于HSP70陰性患者〔(8.34±1.04)個(gè)月〕(t=5.264，P<0.05)。1年死亡率方面，HSP70陽性患者為65.79%，HSP70陰性患者為16.67%，組間差異顯著(χ2=5.115，P<0.05)。

表2 HSP70在膠質(zhì)細(xì)胞瘤局部復(fù)發(fā)組與無復(fù)發(fā)組中的陽性表達(dá)比較(n)

3 討 論

膠質(zhì)細(xì)胞瘤是臨床常見的顱內(nèi)腫瘤類型，約占顱內(nèi)腫瘤的45%〔4〕。膠質(zhì)細(xì)胞瘤主要侵襲中樞神經(jīng)系統(tǒng)白質(zhì)與灰質(zhì)的膠質(zhì)細(xì)胞，嚴(yán)重危害人類生命〔5〕。目前的研究表明〔6，7〕，膠質(zhì)細(xì)胞瘤具有無限增殖與抗細(xì)胞凋亡兩個(gè)主要特點(diǎn)，因此在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中，腫瘤細(xì)胞密度逐漸上升，核分裂象增加，細(xì)胞異型性改變顯著。膠質(zhì)細(xì)胞瘤分子生物學(xué)改變涉及多種癌基因的異常激活、擴(kuò)增以及高表達(dá)等，抑癌基因的突變、失活以及細(xì)胞周期基因與凋亡相關(guān)基因的異常表達(dá)〔8，9〕。

HSP70蛋白家族屬于HSPs中最保守及最主要的一類蛋白，目前的實(shí)驗(yàn)表明〔10〕，HSP70擁有分子伴侶樣的作用。實(shí)驗(yàn)研究證明〔11〕，HSP70可以通過抑制多種凋亡通路起到抑制細(xì)胞凋亡的效果。因此，HSP70對于細(xì)胞的生長以及增殖起到顯著的保護(hù)作用。本研究發(fā)現(xiàn)隨著腫瘤分級的逐步提升，腫瘤惡性化程度的逐步越高，HSP70的陽性表達(dá)亦出現(xiàn)逐步升高的趨勢，說明HSP70與膠質(zhì)細(xì)胞瘤的分化程度存在較大的關(guān)系〔12〕。因此，檢測HSP70可以預(yù)測膠質(zhì)細(xì)胞瘤患者惡性化程度與預(yù)后。有研究表明，HSP70陽性表達(dá)，不但能夠介導(dǎo)錯(cuò)配蛋白的降解，協(xié)調(diào)腫瘤細(xì)胞蛋白的快速代謝平衡，還能介導(dǎo)癌基因及抑癌基因產(chǎn)物的構(gòu)像成熟、跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，通過影響細(xì)胞增殖過程參與細(xì)胞周期、細(xì)胞間信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，使腫瘤細(xì)胞得以無限增殖〔13〕。此外，膠質(zhì)細(xì)胞瘤的臨床復(fù)發(fā)率較高，本研究發(fā)現(xiàn)局部復(fù)發(fā)組HSP70陽性率較高，而且HSP70陽性組患者復(fù)發(fā)時(shí)間明顯早于HSP70陰性組。說明檢測HSP70可以作為早期預(yù)測腫瘤有無復(fù)發(fā)的一個(gè)重要指標(biāo)，而且HSP70蛋白對于患者的預(yù)后，特別是1年期死亡率，有著較高的價(jià)值。

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