雌、孕激素受體和表皮生長因子受體在乳腺癌中的表達(dá)及其臨床意義

杜 璟 張曉麗 蔣麗娜

(河北北方學(xué)院，河北 張家口 075000)

乳腺癌可能是在性激素和生長因子的共同介導(dǎo)下導(dǎo)致局部微環(huán)境的變化而生成，其中以雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和表皮生長因子受體(EGFR)尤為重要〔1〕。雖然目前乳腺癌診斷研究進(jìn)展有很大的提高，但是對如何準(zhǔn)確評估乳腺癌的預(yù)后及為臨床治療方案提供可靠的依據(jù)仍不夠理想。因此，本實驗探討聯(lián)合檢測ER、PR和EGFR對乳腺癌診斷、治療和判斷預(yù)后的意義。

1 資料與方法

1.1臨床資料 收集河北北方學(xué)院第一附屬醫(yī)院自2009～2011年手術(shù)切除女性乳腺癌標(biāo)本120例，術(shù)前均未做放化療，病理診斷明確?；颊吣挲g27～74歲，中位年齡49歲。病理分型：非浸潤性癌10例，浸潤性小葉癌41例，浸潤性導(dǎo)管癌69例。發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的61例，其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)超過15個有29例，未超過15個有32例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的59例。

1.2標(biāo)本處理 術(shù)后立即取10 mm×10 mm×4 mm的新鮮標(biāo)本固定于10%中性甲醛內(nèi)(24 h)，常規(guī)石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片6張，2張常規(guī)HE染色確定組織學(xué)類型，其余用于免疫組化染色。

1.3免疫組化染色 用免疫組化SP法試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)公司)，經(jīng)脫蠟，高壓鍋熱修復(fù)，過氧化氫封閉后滴加一抗，4℃過夜，滴加二抗試劑，最后DAB顯色，封片，檢測ER、PR和EGFR在乳腺癌組織中的表達(dá)情況。染色程序嚴(yán)格按照試劑盒要求進(jìn)行，陽性對照用已知的ER、PR、EGFR陽性切片，陰性對照用PBS代替一抗。

1.4免疫組化結(jié)果判定 陽性物質(zhì)呈棕黃色。ER、PR陽性染色主要集中在細(xì)胞核，EGFR陽性染色在近胞膜處，將陽性部位出現(xiàn)了均勻一致的棕黃色顆粒定義為陽性細(xì)胞。連續(xù)閱讀20個高倍鏡視野，其中陽性細(xì)胞計數(shù)占腫瘤細(xì)胞總數(shù)的20%以上者為陽性病例，否則為陰性病例。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS14.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行χ2檢驗和Spearman等級相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1PR、ER和EGFR的表達(dá)與乳腺癌生物學(xué)特性的關(guān)系 鏡下可見PR、ER的陽性物主要分布在細(xì)胞核內(nèi)，EGFR的陽性物主要分布在近胞膜處。這三種基因表達(dá)與患者年齡和癌變部位無明顯相關(guān)性(P>0.05)。在非浸潤性乳腺癌內(nèi)PR、 ER陽性率明顯高于浸潤性乳腺癌(P<0.05)，而EGFR陽性率低于浸潤性乳腺癌(P<0.05)。見表1。

2.2淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)與EGFR在乳腺癌中表達(dá)關(guān)系 EGFR在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組表達(dá)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(59.01% vs 35.59%，P<0.05)，且在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)超過15個的患者中其表達(dá)率明顯高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移或未達(dá)15個的患者(75.86% vs 43.75%，P<0.001)。見表1。

表1 PR、 ER和EGFR的表達(dá)與乳腺癌生物學(xué)特性的關(guān)系〔n(%)〕

2.3PR、ER和EGFR在乳腺癌中表達(dá)的相關(guān)性 ER、PR均(+)者32例，ER(+)PR(-)者25例，ER(-)PR(+)者54例，ER、PR均(-)者41例。ER表達(dá)與PR表達(dá)無明顯相關(guān)性(P>0.05)。PR與ER之間表達(dá)存在正相關(guān)性(r=0.208,P<0.05)，PR與EGFR之間表達(dá)存在負(fù)相關(guān)性(r=-0.218,P<0.05)。

3 討 論

EGFR基因位于7p11.13，其產(chǎn)物是分子量為170 kD的糖蛋白，分布在胞膜上，由胞外區(qū)(受體部位)、跨膜區(qū)、胞內(nèi)區(qū)(激酶活性區(qū))組成，是有“受體酶”之稱的細(xì)胞表面?zhèn)鞲衅鳌?〕。研究表明，在正常乳腺細(xì)胞內(nèi)也合成適量的EGFR，當(dāng)與轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-α、EGFR等配體結(jié)合后引起構(gòu)象改變并磷酸化，同時產(chǎn)生多種信息將刺激信號傳遞至細(xì)胞核，促進(jìn)細(xì)胞增殖分化及遷移〔3〕。由于代謝因素或細(xì)胞周圍微環(huán)境的改變，使腫瘤組織合成的EGFR增加，增強(qiáng)受體對配體的親和力，結(jié)合后通過受體信號傳導(dǎo)途徑促進(jìn)DNA的合成，加快細(xì)胞的異常分裂、增殖，促進(jìn)腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。本實驗結(jié)果表明在非浸潤性乳腺癌內(nèi)EGFR陽性率明顯低于浸潤性乳腺癌，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者EGFR表達(dá)低于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，而與年齡、癌變部位之間無關(guān)。Piyathilake等〔4〕在研究中發(fā)現(xiàn)，正常組織、癌前病變組織和癌組織中EGFR的表達(dá)是逐級升高的，而本研究中發(fā)現(xiàn)EGFR在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)不超過15個患者和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)超過15個患者中表達(dá)率依次升高，說明EGFR過度表達(dá)的腫瘤細(xì)胞分化差，有更強(qiáng)的分裂增殖能力，易于發(fā)生轉(zhuǎn)移，這與國外有關(guān)報道〔5，6〕相符。另有文獻(xiàn)報道，EGFR的高表達(dá)能抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)腫瘤內(nèi)血管形成，因此，EGFR過表達(dá)是腫瘤患者預(yù)后不良的重要指標(biāo)之一，也是腫瘤導(dǎo)向診斷及治療的靶點〔7，8〕。

ER、PR是存在于正常乳腺上皮細(xì)胞胞核內(nèi)的甾體激素受體，調(diào)節(jié)乳腺細(xì)胞的增殖和分化，其分子上有激素結(jié)合區(qū)及DNA結(jié)合區(qū)〔9〕。乳腺細(xì)胞癌變后仍能保持其激素依賴性生長，臨床上激素依賴性乳腺癌約占全部乳腺癌的50%～60%〔10〕。隨著腫瘤細(xì)胞分化變差，受體表達(dá)降低，腫瘤對激素的依賴性生長隨之降低，導(dǎo)致激素對腫瘤生長的調(diào)控作用也降低。研究表明ER、PR陽性率高的患者，對各種治療有效尤其是對內(nèi)分泌治療敏感性高，可使腫塊縮小，癌細(xì)胞凋亡〔11〕。而汪波等〔12〕稱ER陰性患者內(nèi)分泌治療有效率僅為5%～8%。經(jīng)證實，ER、PR陽性表達(dá)的乳腺癌術(shù)后5年生存率明顯高于陰性者，且術(shù)后復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移較少〔13〕。檢測ER、PR表達(dá)程度對判斷預(yù)后，指導(dǎo)內(nèi)分泌治療具有一定的指導(dǎo)意義。

本實驗發(fā)現(xiàn)，ER、PR、EGFR對于判斷腫瘤分化、浸潤和轉(zhuǎn)移程度均有一定的指導(dǎo)意義。正常細(xì)胞中EGFR表達(dá)水平較低，對于ER(+)的患者，腫瘤的生長轉(zhuǎn)移多依賴于雌激素的作用，當(dāng)長期的內(nèi)分泌治療阻斷這個通路后，可通過一定機(jī)制激活EGFR基因的轉(zhuǎn)錄〔14〕，提高了EGFR介導(dǎo)的Ras-Raf-MEK-Erk/MAPK〔15〕和PI3K-PKC-IKK〔16〕信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活性。從而使細(xì)胞對內(nèi)分泌治療產(chǎn)生耐藥性〔17〕。此外，高表達(dá)的EGFR可以抵抗放、化療中對腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用〔18〕，使其對放、化療不敏感。因此可推測EGFR的信號通路活性提高，是乳腺癌內(nèi)分泌治療中產(chǎn)生耐藥的機(jī)制之一。正是耐藥的乳腺癌細(xì)胞對EGFR信號通路的依賴，因此在乳腺癌內(nèi)分泌治療過程中，加用EGFR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑，將更有利于控制腫瘤的生長，延緩耐藥的產(chǎn)生，達(dá)到更好的治療效果，預(yù)計不久將應(yīng)用于臨床〔19〕。

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