辛伐他汀對高同型半胱氨酸血癥模型大鼠急性心肌梗死再灌注后血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO水平的影響

劉新芳 姜雅秋

(吉林大學(xué)第一醫(yī)院心血管內(nèi)科，吉林 長春 130021)

有研究〔1～3〕證實(shí)內(nèi)皮素(ET)-1、血管緊張素(Ang)Ⅰ、AngⅡ、髓過氧化物酶(MPO)等血管活性因子在心肌缺血再灌注過程中參與了心肌細(xì)胞再灌注損傷(MIRI)。高同型半胱氨酸血癥(Hhcy)是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。已有研究證實(shí)〔4,5〕，Hhcy可導(dǎo)致急性心肌梗死(AMI)的發(fā)生，但其對心肌梗死后MIRI的影響目前少有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)探討Hhcy是否可影響MIRI后上述因子的產(chǎn)生與釋放，并評價(jià)辛伐他汀對Hhcy大鼠MIRI后心肌的保護(hù)作用并探討其可能的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料 8周齡(150～200 g體重)SD大鼠〔沈陽醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，許可證號：SCXK(遼)2010-0001，遼寧省科學(xué)技術(shù)廳簽發(fā)〕，L-半胱氨酸(Sigma公司產(chǎn)品)，辛伐他汀(片劑、天津施維雅制藥有限公司)，同型半胱氨酸(Hcy)、ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2方法 SD大鼠隨機(jī)分為空白對照組、正常對照組、Hhcy模型組和辛伐他汀干預(yù)組，每組12只?？瞻讓φ战M、正常對照組分別給予腹腔注射、灌胃生理鹽水5 ml·kg-1·d-1；模型組給予腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml·kg-1·d-1，灌胃生理鹽水5 ml·kg-1·d-1；干預(yù)組給予腹腔注射2% L-半胱氨酸5 ml·kg-1·d-1，灌胃辛伐他汀3.5 ml·kg-1·d-1，所有大鼠均飼以常規(guī)動物飼料(繁育鼠全價(jià)固體顆粒飼料，沈陽市于洪區(qū)前民動物飼料廠提供)和水。連續(xù)給藥12 w后3%戊巴比妥鈉腹腔注射40 mg/kg麻醉，結(jié)扎冠狀動脈左室降支90 min,再灌注90 min，全程采用RM6240多導(dǎo)生理信號采集系統(tǒng)Ⅱ?qū)?lián)持續(xù)心電監(jiān)測，觀察結(jié)扎前、缺血及缺血再灌注的心電圖改變，并采集各組大鼠靜脈血檢測血漿Hcy、ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO的水平，空白對照組只穿線不結(jié)扎。

2 結(jié) 果

2.1各組大鼠Hcy水平比較 12 w后,模型組〔(27.33±5.66)μmol/L〕、干預(yù)組〔(27.28±4.37)μmol/L〕大鼠血清Hcy水平高于空白對照組〔(3.56±1.12)μmol/L〕及正常對照組〔(3.40±1.28)μmol/L〕(P<0.01)。模型組、干預(yù)組大鼠血清Hcy水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但均明顯高于15.0 μmol/L(國際上規(guī)定的Hhcy水平)，說明Hhcy模型大鼠造模成功。

2.2心肌缺血再灌注心電圖的變化 各組大鼠結(jié)扎冠狀動脈左室降支90 min后及松開結(jié)扎線再灌注90 min后均表現(xiàn)為R波下降，ST段抬高并與T波融合為單項(xiàng)曲線，其中模型組PP間期延長；正常對照組、干預(yù)組PP間期無明顯變化。模型組與正常對照、干預(yù)組兩組間R波下降、PP間期延長存在明顯差異。模型組出現(xiàn)4例心律失常(PQ、QRS、QT間期延長的廣泛傳導(dǎo)阻滯，室性期前收縮，室性心動過速和心室顫動)。結(jié)果表明Hcy對大鼠心肌具有明顯的損傷作用，缺血再灌注后進(jìn)一步加重。結(jié)扎前干預(yù)組大鼠心電圖R波低下，缺血再灌注后進(jìn)一步降低。而辛伐他汀對Hhcy大鼠缺血再灌注后有明顯的保護(hù)作用，空白對照組心電圖無異常。

2.3心肌缺血再灌注后ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO水平變化 正常對照組血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO均明顯高于空白對照組(P<0.01)，模型組血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO均明顯高于正常對照組(P<0.01)，模型組血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO水平亦均明顯高于干預(yù)組(P<0.01)。見表1、表2。

表1 各組血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ水平比較

表2 各組血清CRP、MPO水平比較

3 討 論

心肌細(xì)胞缺血再灌注中常會有MIRI，MIRI導(dǎo)致心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)、功能、代謝及電生理進(jìn)一步損傷，臨床上可出現(xiàn)血壓驟降、心功能不全、心律失常甚至猝死，嚴(yán)重影響患者預(yù)后，ET-1、AngⅠ、AngⅡ、MPO等血管活性因子產(chǎn)生和釋放增加是其機(jī)制之一〔1～3〕。本研究證實(shí)SD大鼠缺血再灌注后上述因子明顯增加，Hhcy大鼠增加更明顯，辛伐他汀則能顯著降低Hhcy大鼠缺血再灌注后上述因子的水平，明顯降低MIRI。

AMI再灌注治療成功后，抬高ST段應(yīng)該逐漸回落到等電位線，然而如果存在微循環(huán)損傷，抬高的ST段則仍持續(xù)存在。本實(shí)驗(yàn)表明Hhcy+缺血再灌注組再灌注后微血管損傷較缺血再灌注組明顯，而辛伐他汀可顯著降低Hhcy介導(dǎo)的MIRI。

ET-1、AngⅠ、AngⅡ均為已知的強(qiáng)內(nèi)源性縮血管因子，在AMI缺血再灌注過程中，血管內(nèi)皮細(xì)胞受損、心肌局部RAAS的激活等引起上述因子短時間大量生成及釋放，促使冠脈痙攣、白細(xì)胞激活、局部兒茶酚胺過量、微血栓形成等，促進(jìn)心肌細(xì)胞MIRI。

CRP為炎性反應(yīng)、感染和組織損傷急性反應(yīng)的主要敏感標(biāo)志物之一，MPO為中性粒細(xì)胞活化標(biāo)志物。AMI時，心肌壞死誘發(fā)急性炎癥反應(yīng)，中性粒細(xì)胞浸潤并釋放MPO到胞外〔6〕，產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能受損，造成內(nèi)皮細(xì)胞源性NO產(chǎn)生障礙，影響血管平滑肌舒張功能，從而減少心肌局部組織血流供應(yīng)，導(dǎo)致心肌細(xì)胞壞死和凋亡增加，血清CRP、MPO水平明顯增高。

Hcy是心血管獨(dú)立的危險(xiǎn)因素，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)Hhcy可促進(jìn)ET-1、AngⅠ、AngⅡ、MPO等因子產(chǎn)生和釋放增加，促進(jìn)冠脈收縮和痙攣；同時，Hcy本身損傷血管內(nèi)皮，加重MIRI,炎性因子CRP早期即參與其中。

辛伐他汀為經(jīng)典的降血脂藥物，對穩(wěn)定斑塊、抗氧自由基、抑制炎癥反應(yīng)、抑制缺氧復(fù)氧心肌細(xì)胞凋亡方面發(fā)揮作用。兩項(xiàng)回顧性研究〔7,8〕表明，AMI患者在PCI術(shù)前長期應(yīng)用他汀類藥物可有效減少無復(fù)流現(xiàn)象的發(fā)生，極大改善AMI患者的預(yù)后。本研究證實(shí)辛伐他汀干預(yù)組雖不能降低Hcy水平，但可有效降低缺血再灌注后ET-1、AngⅠ、AngⅡ、MPO等因子產(chǎn)生和釋放，進(jìn)而減少缺血再灌注過程中微血管痙攣及白細(xì)胞浸潤，減輕MIRI。

4 參考文獻(xiàn)

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