胃癌中組織蛋白酶D和C-met的表達(dá)及對(duì)血管生成的作用

王春貴

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

CD105作為與血管內(nèi)皮細(xì)胞增生有關(guān)的抗原，是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β受體復(fù)合物之一，可以誘導(dǎo)缺氧的蛋白。CD105也能標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞，尤其是對(duì)腫瘤生長(zhǎng)時(shí)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記的特異性強(qiáng)。組織蛋白酶(Cath)-D是一種水解酶，可以催化底物。近年相關(guān)研究認(rèn)為其與腫瘤血管生成相關(guān)〔1，2〕。肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(C-met)可以介導(dǎo)肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)發(fā)生的細(xì)胞信號(hào)傳遞和相關(guān)的生物學(xué)作用，在組織形態(tài)的分化及腫瘤進(jìn)展中具有重要作用〔3〕。本文關(guān)注Cath-D和C-met在胃癌中的作用，研究二者的協(xié)同作用及對(duì)CD105陽性的血管生成的作用。

1 材料與方法

1.1一般資料 2011年6月至2013年5月通遼市科爾沁區(qū)第一人民醫(yī)院行胃癌根治手術(shù)的患者78例作為觀察組，其中男40例，女38例，年齡53～72(平均64.4)歲。納入均經(jīng)病理主治醫(yī)師確診，并符合WHO的診斷標(biāo)準(zhǔn)。收集切端經(jīng)病理證實(shí)為正常胃黏膜組織62例作為對(duì)照組，其中男32例，女30例，年齡53～70(平均65.1)歲。兩組一般臨床資料無明顯差別(P>0.05)，具有可比性。

1.2Cath-D、C-met和CD105蛋白檢測(cè) Cath-D、C-met和CD105蛋白均購自福州邁新生物工程公司。檢測(cè)應(yīng)用免疫組化SP法，DAB染色，均由實(shí)驗(yàn)室技師操作，嚴(yán)格質(zhì)控。

1.3結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) Cath-D、C-met陽性部位均定位于細(xì)胞質(zhì)中，以出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞，Cath-D、C-met計(jì)算陽性率，以陽性率≥25%為陽性，以陽性率<25%為陰性。CD105以細(xì)胞質(zhì)呈棕黃色顆粒為陽性反應(yīng)細(xì)胞，標(biāo)記CD105陽性的微血管密度(MVD)值，確定黃色的內(nèi)皮細(xì)胞或細(xì)胞叢為一個(gè)血管，只要結(jié)構(gòu)不相連，其分支結(jié)構(gòu)也作為一個(gè)血管計(jì)數(shù)。選取5個(gè)400倍視野內(nèi)的微血管數(shù)取其平均值，定為MVD。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)和線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1Cath-D、C-met和MVD在觀察組與對(duì)照組中表達(dá)陽性率的比較 Cath-D、C-met的陽性率和MVD在觀察組中明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，見表1。

表1 Cath-D、C-met和MVD在兩組中表達(dá)的比較〔n(%)〕

2.2觀察組中Cath-D、C-met和MVD在不同臨床病理特征中表達(dá)的比較 觀察組中Cath-D、C-met陽性率和MVD均與腫瘤的浸潤(rùn)深度、臨床分期相關(guān)，而Cath-D、C-met表達(dá)的陽性率與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度相關(guān)。Cath-D、C-met和MVD均與Ki67表達(dá)的增殖指數(shù)無關(guān)，見表2。

2.3觀察組中Cath-D、C-met和MVD表達(dá)的相關(guān)性分析 觀察組中Cath-D和C-met(r=0.45，P=0.025 4)、Cath-D和MVD(r=0.54，P=0.005 6)、C-met和MVD(r=0.52，P=0.008 0)之間具有正相關(guān)性。

表2 觀察組中Cath-D、C-met陽性表達(dá)和MVD在不同臨床病理特征中表達(dá)的比較〔n(%)〕

3 討 論

胃癌發(fā)展過程中生物學(xué)行為出現(xiàn)明顯的變化，在此過程中出現(xiàn)多種蛋白的表達(dá)異常。腫瘤血管生成是重要的生物學(xué)行為，尤其是腫瘤迅速生長(zhǎng)的時(shí)期，此時(shí)腫瘤常較小，血管生長(zhǎng)活躍。當(dāng)腫瘤增長(zhǎng)的速度超過其脈管系統(tǒng)的蔓延能力時(shí)，此時(shí)相關(guān)缺氧誘導(dǎo)因子調(diào)控的蛋白表達(dá)增強(qiáng)活力，使適應(yīng)缺氧環(huán)境的腫瘤細(xì)胞表型更容易存活并為了存活而更易獲得侵襲轉(zhuǎn)移的潛能。而Cath-D是具有肽鏈內(nèi)切酶活性的蛋白，也是在缺氧時(shí)誘導(dǎo)產(chǎn)生的蛋白之一，Cath-D高表達(dá)時(shí)不僅可以調(diào)節(jié)腫瘤的轉(zhuǎn)移，還可以調(diào)節(jié)腫瘤脈管生成。也有人認(rèn)為在腫瘤進(jìn)展過程中Cath-D活化，可以引起腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)和侵襲能力增強(qiáng)〔4,5〕。C-met是酪氨酸蛋白激酶家族成員，可以調(diào)控侵襲性生長(zhǎng)腫瘤的遺傳程序。C-met還可以激活蛋白激酶結(jié)構(gòu)域中的酪氨酸蛋白激酶(pTK)，導(dǎo)致絲裂原活化蛋白激酶發(fā)生磷酸化后有效地上調(diào)尿纖溶酶原激活物(u-PA)，引起一系列的生物反應(yīng)，并可以誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移〔6〕。C-met具有血管生成的作用，主要是通過自分泌和旁分泌的形式刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增生〔7〕。

本實(shí)驗(yàn)提示Cath-D、C-met均為促進(jìn)腫瘤發(fā)生的重要誘導(dǎo)因素。即兩種蛋白參與腫瘤的生長(zhǎng)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤發(fā)生過程中的分化過程。本實(shí)驗(yàn)提示Cath-D、C-met對(duì)CD105陽性的血管生成有明顯的促進(jìn)作用，即Cath-D、C-met可以介導(dǎo)腫瘤的血管生成。在腫瘤發(fā)生和進(jìn)展中，Cath-D不僅通過促進(jìn)癌基因來加速癌的進(jìn)展，還能間接促進(jìn)腫瘤內(nèi)部脈管生成，使癌組織的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)豐富，腫瘤的生長(zhǎng)加速。Cath-D、C-met可以引起腫瘤細(xì)胞分泌多種成血管信號(hào)時(shí)，腫瘤血管可以由周圍正常組織的固有血管向腫瘤組織向內(nèi)延伸而成，也可以通過內(nèi)皮細(xì)胞前體細(xì)胞分化后形成內(nèi)皮依賴性血管，此時(shí)血管生成加快，腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)加速，腫瘤體積增大〔8,9〕。

4 參考文獻(xiàn)

1劉愛東, 龐久玲, 劉士生. 胃癌中基質(zhì)金屬蛋白酶-9和CD105表達(dá)關(guān)系的研究〔J〕. 中國老年學(xué)雜志, 2009; 29(7): 886-7.

2劉 馳. 組織蛋白酶-D與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)〔J〕. 中國老年學(xué)雜志, 2012; 32(1): 59-60.

3Strohmeyer D, Strauss F, R?ssing C. Expression of bFGF, VEGF and c-met and their correlation with microvessel density and progression in prostate carcinoma〔J〕. Anticancer Res, 2004, 24(3a): 1797-804.

4張 凡, 常永霞. 小鼠黑色素移植瘤血管生成擬態(tài)CD31、CD34、組織蛋白酶D表達(dá)意義〔J〕. 中國老年學(xué)雜志, 2010; 30(15): 2189-91.

5唐建建, 姜 曙, 毛伯鏞. 組織蛋白酶B表達(dá)與膠質(zhì)瘤惡性程度和血管生成的關(guān)系〔J〕. 四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2006; 37(2): 212-4.

6Kim YJ, Go H, Wu HG,etal. Immunohistochemical study identifying prognostic biomolecular markers in nasopharyngeal carcinoma treated by radiotherapy〔J〕. Head Neck, 2011; 33(10): 1458-66.

7張 敏, 雷志敏, 閆國勝, 等. HGF/C-met、VEGF和uPA在口腔鱗癌組織中的表達(dá)及意義〔J〕. 臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志, 2010; 26(1): 8-10.

8Pizarro-Cerdá J, Jonquières R, Gouin E. Distinct protein patterns associated with Listeria monocytogenes InlA- or InlB-phagosomes〔J〕. Cell Microbiol, 2002; 4(2): 101-15.

9韓瑞珠, 李 鵬, 李曉丹, 等. E-鈣黏蛋白和組織蛋白酶D與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在喉鱗癌轉(zhuǎn)移中的作用〔J〕. 中國耳鼻咽喉頭頸外科, 2005; 12(2): 77-9.