HPLC法測定甘麥寧心膠囊中梓醇的含量

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1.中國人民武裝警察部隊藥品儀器檢驗所，北京 102613； 2.中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院，北京 100053

HPLC法測定甘麥寧心膠囊中梓醇的含量

葛海生1姚紅偉1*王曉飛1于玲1柴江平2

1.中國人民武裝警察部隊藥品儀器檢驗所，北京 102613； 2.中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院，北京 100053

目的建立測定甘麥寧心膠囊中梓醇的含量測定方法。方法采用Aglilent 1200 SHISEIDO C18(4.6mm×250mm，5μm)，流動相為乙腈：0.1%磷酸水溶液(1:99)，檢測波長為210nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。結(jié)果梓醇在0.02～0.6μg/μl范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率為99.43%(RSD=1.21%)。結(jié)論本法簡便，精密度高，重復(fù)性好，選擇性佳，可用于甘麥寧心膠囊的質(zhì)量控制。

高效液相色譜法；甘麥寧心膠囊；梓醇；含量測定

甘麥寧心膠囊是由麥冬、桂枝、人參等多味中藥制成的膠囊；具有補(bǔ)脾和胃，益氣復(fù)脈之功效，臨床用于脾胃虛弱，倦怠乏力，心動悸脈結(jié)代。本實驗擬建立測定甘麥寧心膠囊中梓醇含量的方法，用于甘麥寧心膠囊的質(zhì)量控制。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Aglilent 1200高效液相色譜儀；XP205電子分析天平(梅特勒托利多)； 超聲清洗儀(昆山市超聲儀器有限公司)。

1.2 試藥 梓醇對照品(批號：110808-201210，中國食品藥品檢定研究院)；乙腈為色譜純，水為雙蒸水，其它試劑為分析純。甘麥寧心膠囊(自制，批號：20140426、20140428、20140430)；陰性對照根據(jù)處方及制法自制。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱SHISEIDO C18(4.6mm×250mm，5μm)；流動相：乙腈-0.1%磷酸水溶液(1∶99)；檢測波長：210nm；流速：1.0 ml/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量10μl。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱定梓醇對照品5mg，置于50ml容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml至10ml容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 供試品溶液的制備 精密稱取2.0g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)慮液2ml，濃縮至近干，殘渣用流動相溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，并用流動相稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，即得。

2.4 空白試驗 按處方中的比例，自制不含地黃的陰性對照品，按其工藝制成空白制劑，再按供試品溶液的制備方法制備并測定，結(jié)果表明空白對照溶液在梓醇出峰處無干擾，方法的選擇性符合要求(見圖1)。

2.5 線性關(guān)系的考察 取梓醇對照品溶液，分別進(jìn)樣1、5、10、15、20、25、30μl。將峰面積(Y)對質(zhì)量濃度(X)進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程為Y=5.0924X-0.3141(r=1)。表明梓醇在0.02～0.6μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.6 精密度試驗 取梓醇對照品溶液，每次進(jìn)樣10μl，重復(fù)進(jìn)樣7次，測定梓醇峰面積，結(jié)果梓醇的RSD為0.71%(見表1)。

2.7 重復(fù)性試驗 取同一批號供試品，按“2.3供試品溶液的制備”項下方法平行制備6分樣品后進(jìn)樣，梓醇RSD為1.01%。結(jié)果表明重復(fù)性良好(見表2)。

表1 精密度試驗結(jié)果

2.8 穩(wěn)定性試驗 取同一批供試品溶液，每隔2h進(jìn)樣一次，共進(jìn)樣8次，結(jié)果表明供試品溶液在16h穩(wěn)定，梓醇的RSD為1.48%(見表3)。

表2 重復(fù)性試驗結(jié)果

2.9 加樣回收率試驗 取已知含量的供試品6份(批號：20140428；含量：1.16mg/g)，精密稱定，分別精密加入已知含量的梓醇對照品溶液(1.868mg/ml)，按“2.3供試品溶液的制備”項下方法制備供試品溶液，再精密量取制備的供試品溶液5ml，置10ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，按“2.1色譜條件”測定梓醇的含量，計算回收率(見表4)。

2.10 含量測定 取3批甘麥寧心膠囊，按上述色譜條件及供試品溶液制備方法進(jìn)行含量測定，結(jié)果見(見表5)。

表3 穩(wěn)定性試驗結(jié)果

表4 加樣回收試驗結(jié)果

表5 含量測定試驗結(jié)果

3 討論

藥典及一些文獻(xiàn)中梓醇的提取采取加熱回流的方法[1、2]，本實驗曾采用加熱回流方法提取，但分離效果較差，干擾較多，出現(xiàn)肩峰?？紤]到梓醇的熱穩(wěn)定性不佳，故采用超聲方法處理[3、4]，試驗結(jié)果表明該方法簡單快速，峰型對稱，分離效果好，陰性對照無干擾，可作為該制劑的含量測定方法。

梓醇是甘麥寧心膠囊中的主要活性成分，方法學(xué)考察結(jié)果表明，所采用的HPLC方法精密度高，重復(fù)性好，穩(wěn)定性佳，可用于甘麥寧心膠囊的質(zhì)量控制。

[1]國家藥典委員會.中國人民共和國藥典(一部)[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2010:115.

[2]楊仕林，李小剛，謝云.RP-HPLC法測定天王補(bǔ)心丸中梓醇的含量[J].中國藥方，2012，23(24)：2289-2290.

[3]封宣伊，姜宇，左亞杰.高效液相色譜法測定一貫煎顆粒中梓醇的含量[J].湖南中醫(yī)雜志，2013，29(2)：132-133.

[4]白梓靜，齊廣才，劉珍葉，等.HPLC測定咽扁寧沖劑中梓醇和肉桂酸含量[J].中國實驗方劑學(xué)雜質(zhì)，2011，17(23)：71-73.

DeterminationofCatalpolinGanMainingxinCapsulebyHPLC

GE Hai-sheng1,YAO Hong-wei1*,WANG Xiao-fei1,YU Ling1,CHAI Jiang-ping2

1.Institute for Drug Control of People's Armed Police Forces,Beijing 102613,China;2.Guang’anmen Hospital,China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100053，China

ObjectiveTo establish the method for determination of Catalpol in GanMaining capsule.MethodCatalpol were determined by HPLC on C18-Column at 210 nm,with acetonitrile-0.1% phosphoric acid solution(1∶99)as mobile phase, the flow rate were 1.0 ml/min.ResultThe linear range of Catalpol was 0.02～0.6μg/μl.The average recovery was 99.43%,RSD was 1.21%.ConclusionThe method is simple,accurate and repeatable, which can be used for determination of Catalpol in GanMaining capsule.

HPLC；GanMaining capsule；Catalpol；Content determination

葛海生，副主任藥師，主要從事中藥制劑研究。

姚紅偉，主管藥師，主要從事藥物分析研究。E-mail：yaohw919@163.com

R284.2

A

1007-8517(2014)20-0010-02

2014.08.06)